Imagem de microscopia de folha de luz e estratégias de montagem para embriões iniciais de peixe-zebra

Apesar das assimetrias internas ao longo do eixo esquerda-direita, na maioria dos organismos superiores, estruturas externas como esqueleto e músculo se desenvolvem de maneira simétrica. Usando embriões de peixe-zebra, combinamos imagens ao vivo de alta resolução, análise quantitativa e modelagem teórica para investigar os princípios do estabelecimento de simetria. O campo depende fortemente de várias técnicas de microscopia para imagens de embriões em desenvolvimento com alta resolução espaço-temporal, seguidas de análise quantitativa das imagens adquiridas.

Diferentes formas de microscopia oferecem vantagens únicas. No entanto, ultimamente, a microscopia de super-resolução em folha de luz e ao vivo avançou significativamente nossa visão dos processos dinâmicos no desenvolvimento embrionário. A microscopia confocal e multifotônica tradicional geralmente leva ao fotobranqueamento e fototoxicidade, além de um campo de visão limitado ao obter imagens de embriões vivos.

Um microscópio de folha de luz multiview aborda esses problemas, permitindo tempos de observação mais longos e rotação de amostras. No entanto, os desafios permanecem na preparação e montagem de amostras para imagens usando essa técnica. Uma das principais limitações de uma sessão de imagem bem-sucedida é montar e orientar a amostra adequadamente.

Aqui descrevemos estratégias para montar embriões de peixe-zebra precoces para imagens em um microscópio de folha de luz multiview e o procedimento geral para adquirir e reconstruir imagens multiview.