This research was supported by the Israel Science Foundation (grant No. 738/11), by the National Institute for Psychobiology in Israel (NIPI-7-2011-12), and by the Open University Foundation

NOTA: Todos os protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê Internacional para Cuidados e Uso de Animais em Israel. Foram feitos todos os esforços para minimizar o número de animais utilizados e seu sofrimento. 1. Preparação para o teste de natação forçada <ol><li> Use duas salas adjacentes. Usar um quarto como uma &quot;sala de espera&quot; para manter os animais antes do teste comportamental, e o outro para a realização do procedimento. </li><li> Preparar os recipientes de vidro cilíndrico transparente (o única restrição que o número de recipientes é o espaço disponível) medindo 50 cm de altura e um diâmetro de 20 cm. Nota: É possível executar vários animais ao mesmo tempo na mesma sala. Se assim for, separe os recipientes de um outro usando uma tela escura para que os animais não vão ver uns aos outros durante o procedimento. </li><li> Prepare a câmara (s) de vídeo na frente dos recipientes, de modo que cada câmara percebe um ou mais recipientes de uma maneira que wmal permitem a observação clara do comportamento dos animais, mais tarde, durante a exibição do filme. </li><li> Prepare gaiolas secagem limpas, lâmpadas de calor e almofadas de calor para os animais que tenham concluído o procedimento para evitar a hipotermia. Verifique se o fundo da gaiola tem papel mata-borrão e alterá-lo quando estiver molhada. Não coloque as gaiolas na sala de testes. NOTA: Certifique-se de não misturar animais de gaiolas diferentes, enquanto eles estão ficando nas gaiolas de secagem transitórios. </li></ol> 2. manejo dos animais antes do teste <ol><li> Animais da casa em um quarto com ciclo claro / escuro de 12 horas de luz. </li><li> Durante os dias do procedimento experimental dar os animais o livre acesso a comida e água, excepto durante o tempo específico de permanência no centro do procedimento. </li><li> Quando usando ratos, manipulação dos animais durante cerca de 2 min diariamente, 5 dias antes do início do procedimento experimental. </li></ol> 3. Processo de Formação Oprocedimento é realizado de forma diferente para ratos e ratinhos. NOTA: Para ambos os camundongos e ratos, observar os animais enquanto eles estão na água em todos os momentos. No caso de um animal aparece em perigo grave (por exemplo, muito cansado, não pode ficar até float) remover o animal da água e excluí-la do experimento. <ol><li> Para camundongos - Há uma sessão 6 min longo, dividido em pré-teste (o 2 primeiro min) e teste (o último 4 min). <ol><li> Para os ratinhos a obter aclimatados ao ambiente de teste, o transporte dos animais nas suas gaiolas pelo menos 30 minutos antes do teste comportamental da sala de espera. </li><li> Encher os cilindros com água da torneira a 25 ° C e ajustar a profundidade da água de acordo com o tamanho do rato &quot;, de modo que não se pode tocar no fundo do recipiente com as suas pernas traseiras. </li><li> Marcar o cilindro com o número de animais, para efeitos de identificação do animal, mais tarde, durante a visualização da metragem. </li><li>Ligue a câmera de vídeo / s e, em seguida, colocar cada rato no recipiente cilindro cheio de água durante 6 min. </li><li> Após 6 min ter decorrido, desligue a câmera / s, retire o mouse a partir do recipiente e colocá-lo na gaiola secagem transitória com a lâmpada de calor acima dela ea almofada de calor sob ele. Os ratos devem ser cuidadosamente monitorizados continuamente, e enquanto se recuperava nesta jaula. Para este efeito, é possível colocar um termómetro ao nível dos ratinhos para garantir que a temperatura no recinto não exceda 37 ° C. Além disso, colocar a gaiola de modo a que nem toda ela cai sob a lâmpada ou sobre a almofada; isso permite que o mouse para mover-se para uma área mais fria, se desejar. </li><li> Troque a água depois de cada sessão, para evitar qualquer influência sobre a próxima mouse. </li></ol></li><li> Para os ratos - Há 2 sessões, 24 horas de intervalo. A primeira sessão é a fase de pré-teste (15 min) e a segunda sessão é a fase de teste (5 min). <ol><li> A fim de que os ratos para se adapte às condições detestando ambiente, transportar os animais em suas gaiolas, pelo menos, 30 min antes do teste comportamental para a sala de espera. </li><li> Encher os cilindros com água da torneira a 23 ± 1 ° C e ajustar a profundidade da água de acordo com o tamanho do rato, de modo a que ele não pode tocar no fundo do recipiente com as suas pernas traseiras. </li><li> Marcar o cilindro com o número de animais, para efeitos de identificação do animal, mais tarde, durante a visualização da metragem. </li><li> Coloque cada rato no recipiente cilindro cheio de água durante 15 min. </li><li> Após 15 min de terem decorrido remover o rato a partir do recipiente e coloca-se na gaiola de secagem transiente com a lâmpada de calor acima dela e a almofada de calor sob ele. O rato deve ser de perto e continuamente monitorados enquanto se recuperava nesta jaula. Para este efeito, é possível colocar um termómetro ao nível do rato para se certificar de que a temperatura no recinto não exceda 37 ° C. Além disso, colocar a gaiola de modo a que nem toda ela falls sob a lâmpada ou sobre a almofada; isso permite que o rato para mover-se para uma área mais fria, se desejar. </li><li> Troque a água depois de cada sessão, para evitar qualquer influência sobre o próximo rato. NOTA: Este é o fim da fase de pré-teste. </li><li> Vinte e quatro horas mais tarde, a fim de que os ratos para obter aclimatados ao ambiente de teste, o transporte dos animais nas suas gaiolas pelo menos 30 minutos antes do teste comportamental da sala de espera. </li><li> Encher os cilindros com água da torneira a 23 ± 1 ° C e ajustar a profundidade da água de acordo com o tamanho do rato, de modo a que ele não pode tocar no fundo do recipiente com as suas pernas traseiras. </li><li> Marcar o cilindro com o número de animais, para efeitos de identificação do animal, mais tarde, durante a visualização da metragem. </li><li> Ligue a câmera de vídeo / s e, em seguida, coloque o rato no recipiente cilindro cheio de água durante 5 minutos. Certifique-se de que cada rato é testado no mesmo recipiente e posição na sala como no dia anterior. </li&gt; <li> Após 5 min ter decorrido ligar a câmera / s, retire o rato a partir do recipiente e colocá-lo na gaiola secagem transitória com a lâmpada de calor acima dela ea almofada de calor sob ele. O rato deve ser de perto e continuamente monitorados enquanto se recuperava nesta jaula. Para este efeito, é possível colocar um termómetro ao nível do rato para se certificar de que a temperatura no recinto não exceda 37 ° C. Além disso, colocar a gaiola de modo a que nem toda ela cai sob a lâmpada ou sobre a almofada; isso permite que o rato para mover-se para uma área mais fria, se desejar. </li><li> Troque a água depois de cada sessão, para evitar qualquer influência sobre o próximo rato. NOTA: Este é o fim da fase de testes. </li></ol></li></ol> 4. A Codificação Comportamental Para ratos, codificar o último 4 min definida como a fase de teste. Para os ratos, codificar a 5 min da etapa de teste. <ol><li> Código da duração do tempo gasto como &quot;Immobile&quot; se o mouse está flutuandocom a ausência de qualquer movimento excepto as necessárias para manter o nariz acima da água. </li><li> Código da duração do tempo gasto como &quot;Lutando / escalada&quot; se movimentos rápidos dos membros anteriores são observados de modo que as patas dianteiras quebrar a superfície da água. </li><li> Código da duração do tempo gasto como &quot;Piscina&quot; Se o movimento dos membros anteriores ou pélvicos em uma forma de remo é observado. NOTA: É possível utilizar uma forma alternativa de codificar estes comportamentos, este inclui um método de amostragem de tempo. Classifique o natação, lutando ou imobilidade, como a freqüência dos episódios em 5 seg intervalos durante a sessão de teste. </li></ol>

The authors have nothing to disclose.

O FST é usado para monitorar o comportamento depressivo-like e baseia-se no pressuposto de que a imobilidade reflecte uma medida de desespero comportamental 3. As principais vantagens deste processo residem na sua operação relativamente fácil e resultados rápidos. Além disso, sua sensibilidade para uma ampla gama de medicamentos antidepressivos que faz com que seja um teste de rastreio adequado é uma das características mais importantes que levam à sua alta validade preditiva 29. Important...

A depressão é um transtorno psiquiátrico que ameaçam a vida e uma grande preocupação de saúde pública mundial, com uma incidência de 5% e uma prevalência de 15-20%. Além disso, estima-se que até 2020 a depressão será nos três maiores contribuintes para o peso da doença 1,2. A depressão está associada com deficiência, diminuição da qualidade de vida, aumento dos custos relacionados com a saúde e é considerado um fator de risco principal para muitas doenças, incluindo doenças cardiovasculares, metabólicas e distúrbios neuropsiquiátricos 3,4 .Current tratamentos fármaco-terapêutica têm limitado a eficácia e estão associados com muitos efeitos colaterais deletérios 5,6. Por isso, uma melhor compreensão da fisiopatologia desta doença junto com o desenvolvimento de tratamentos inovadores e melhoradas continua a ser crucial. Assim, os modelos animais são essenciais para o avanço da investigação neste domínio. Existem diversos modelos utilizados para o estudo desta desordem (&lt;em&gt; por exemplo, teste de preferência sacarose, teste de suspensão pela cauda) com o teste de natação forçada (FST, também conhecido como teste de Porsolt após o desenvolvedor deste modelo 7,8), sendo um dos ensaios mais comumente utilizados 7,9-12. Durante a FST um animal é colocado num recipiente cheio com água do qual não pode escapar. O animal vai primeiro tentar escapar, mas, eventualmente, vai expor a imobilidade (ou seja, flutuando com a ausência de qualquer movimento, exceto se forem necessários para manter o nariz fora da água). O FST é um modelo muito popular em investigação animal para uma série de razões. Primeiro, ela envolve a exposição dos animais ao stress, que se mostrou ter um papel na tendência para a depressão maior 12-14. Além disso depressão é muitas vezes visto como uma falta de habilidade para lidar com o estresse 15-17. Em segundo lugar, o tratamento farmacológico com antidepressivos antes do teste foi mostrado para reduzir a imobilidade no TNF &lt;sup&gt; 18-23. Por conseguinte, é muitas vezes utilizado como um ensaio de rastreio de novos compostos com propriedades antidepressivas potenciais 15-17,24. Além disso, o FST foi mostrado para compartilhar alguns dos fatores que são influenciados ou alterados por depressão em seres humanos, tais como mudanças no consumo de alimentos, alterações do sono e anedonia 15-17,24 droga retirada induzida. Esta é também a razão pela qual este teste é por vezes utilizado para avaliar o comportamento depressivo-como em camundongos mutantes, com aumento ou diminuição da imobilidade basal (em comparação com &#39;do tipo selvagem&#39; ratos) 25,26.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:80px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:387px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Computer</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>intel(r) core(tm) i3-2120 cpu @ 3.30ghz, 4GB ram</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Camera</td>
			<td>VIDO</td>
			<td>AU-CB422</td>
			<td>B/W CCD CAMERA&#160; 
			http://www.vido-europe.com/products_detail.asp?id=33&#38;pcategory=2</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Coding software</td>
			<td>Biobserve</td>
			<td></td>
			<td>FST Analysis 
			http://www.biobserve.com/products/fst/index.html</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Heating lamp</td>
			<td>Ikea</td>
			<td>AA-19025-3</td>
			<td>ESPRESSIVIO 400.504.46&#160;- 20W G4 Bulb&#160; 
			http://www.ikea.com/ms/en_US/customer_service/assembly/E/E00050467.pdf</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Heating&#160;pillow</td>
			<td>Sachs</td>
			<td>EF-188B</td>
			<td>38*38cm Heating&#160;pillow 
			http://www.sachs.co.il/eng/lego_tree.php?instance_id=21&#38;actions=show&#38;id= 
			604</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the forced swim test as a model of depressive-like behavior

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like behavior in rodents. The FST is based on the assumption that when placing an animal in a container filled with water, it will first make efforts to escape but eventually will exhibit immobility that may be considered to reflect a measure of behavioral despair. This test has been extensively used because it involves the exposure of the animals to stress, which was shown to have a role in the tendency for major depression. Additionally, the FST has been shown to share some of the factors that are influenced or altered by depression in humans, including changes in food consumption, sleep abnormalities and drug-withdrawal-induced anhedonia. The main advantages of this procedure are that it is relatively easy to perform and that its results are easily and quickly analyzed. Moreover, its sensitivity to a broad range of antidepressant drugs that makes it a suitable screening test is one of the most important features leading to its high predictive validity. Despite its appeal, this model has a number of disadvantages. First, the issue of chronic augmentation is problematic in this test because in real life patients need to be treated for at least several weeks before they experience any relief from their symptoms. Last, due to the aversiveness of the FST, it is important to take into account possible influences it might have on brain structure/function if brain analyses are to be carried out following this procedure.

Os seguintes resultados são baseados em dados não publicados do nosso laboratório. Neste experimento, os ratos do sexo feminino adulto ICR foram testados após 3 semanas de tratamento com o inibidor da recaptação da serotonina (ISRS) escitalopram ou novo tratamento anti-depressivo e anti-ansiedade herbal (NHT) (para mais informações sobre o tratamento à base de plantas, ver 12 , 27,28). One-way ANOVA revelou que o tratamento reduziu comportamento depressivo-like no FST [F (2,58) = 4,88, p &lt;0,05]. A...

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The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior

This protocol describes the forced swim test, which is used for the study of depressive-like behavior in rodents. This procedure involves placing an animal in a container filled with water that eventually will lead to the exhibition of immobility behavior, which is considered to reflect behavioral despair.

O Teste de Natação Forçada como um modelo de Depressive-like Comportamento

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

36.3K visualizações.  Tel-Aviv University. This protocol describes the forced swim test, which is used for the study of depressive-like behavior in rodents. This procedure involves placing an animal in a container filled with water that eventually will lead to the exhibition of immobility behavior, which is considered to reflect behavioral despair.