O teste mínimo de dose de eritema, ou teste de MED, é uma técnica com longa história em configurações de fototerapia dermatológica e clínica. E é usado principalmente para determinar a menor quantidade de radiação necessária para produzir eritema, ou vermelhidão visível na superfície da pele. Neste estudo em particular, o que fizemos foi desenvolver várias novas técnicas e procedimentos que permitem que os testes de MED sejam adaptados para um propósito um tanto diferente, que é quantificar precisamente a variação na ativação inflamatória humana.
A principal vantagem da dosagem e medição de precisão nos testes de MED diz respeito à reprodutibilidade dos resultados, o que abre novas possibilidades para examinar sistematicamente outros fatores que possam estar relacionados à inflamação. Demonstrando o procedimento serão dois doutorandos do meu laboratório, Holly Sullivan-Toole e Corinne Carlton. Comece escoltando o participante até a sala de testes.
Explique o procedimento de teste de MED ao participante e confirme a compreensão. Coloque um punho no antebraço não dominante. Remova apenas o papel de cera protetora que respalda da lateral, não central, partes da braçadeira.
Depois de situar o manguito um no local de exposição pretendido, coloque pontos turísticos usando um marcador permanente para garantir que o punho dois esteja situado precisamente no mesmo local. Em seguida, marque a pele em quatro pontos fora dos vincos de cada um dos retalhos laterais da braçadeira um, os pontos superior direito, superior esquerdo, inferior direito e inferior esquerdo. Certifique-se de que as marcas são escuras o suficiente para durar 24 horas, para que possam ser usadas para colocar o punho três precisamente no mesmo local na consulta de acompanhamento.
Em seguida, use um espectótmetro calibrado para gravar leituras em cada uma das seis aberturas abertas em sequência. Certifique-se de que o espectrômetro seja colocado no centro das aberturas da braçadeira, evitando mols, cicatrizes ou outras manchas na medida do possível. Finalmente, registo permanentemente todos os valores SCI.
Para garantir leituras consistentes com o mesmo ponto de calibração, mantenha o espectrômetro na posição durante a duração do procedimento de MED e não desligue até que as leituras pós-exposição tenham sido concluídas. Após a remoção da braçadeira um, sitiar dois manguitos no mesmo local usando os pontos de referência desenhados na pele para um punho. Coloque os equipamentos de segurança necessários, incluindo óculos à prova de UV, mangas e luvas, e certifique-se de que o participante faça o mesmo.
Antes de ativar a lâmpada, organize o braço do participante de tal forma que os raios UV da lâmpada serão perpendiculares ao ângulo da braçadeira dois no braço do participante. Ative brevemente a lâmpada para ajustar a distância para manguito dois até que o sensor de radiômetro leia 270 microwatts por centímetro quadrado. Em seguida, coloque o sensor de radiômetro voltado para a lâmpada UV, paralela à superfície da pele, e o mais próximo possível da localização do punho dois.
Em seguida, remova a primeira cobertura de abertura antes de ativar a fonte UV. Remova cada janela no patch de teste de dose de acordo com o cronograma aqui exibido, que ilustra os horários de dosagem separados dependendo do Tipo de Pele Fitzpatrick do participante. Ative a fonte UV e o cronômetro simultaneamente, e remova cada abertura cobrindo o punho dois de acordo com o cronograma correto de dosagem, que é baseado no Tipo de Pele Fitzpatrick.
Em seguida, desligue a lâmpada no momento exato especificado pelo cronograma de dosagem. Não desative o cronômetro, pois uma série adicional de leituras espectrofotômetros deve ser coletada exatamente sete minutos após a desativação da lâmpada, conforme descrito abaixo. Por fim, após exatamente sete minutos se passaram desde a desativação da lâmpada, registre as leituras finais do espectrofotômetro de cada abertura na braçadeira dois.
Comece calibrando o espectrômetro em preparação para a consulta de acompanhamento, 24 horas depois. Prepare o punho três removendo todas as coberturas de abertura e deixando o papel de cera branco apoiando na parte central do patch. Ao colocar o punho três no braço do participante, remova o papel de cera branca que respalda dos dois retalhos laterais do patch.
Use os pontos de referência no antebraço do participante para colocar o punho três no mesmo local que os dois patches anteriores. Finalmente, faça uma leitura em cada uma das seis aberturas abertas em sequência. Esses resultados mostram uma resposta precisa da pele aos testes de MED.
Aqui estão os dados completos para um único sujeito representativo, discriminado por período de avaliação. Pré-exposição, sete minutos após exposição e 24 horas de acompanhamento. Cada abertura, de dois a seis, recebe 25% mais energia do que a anterior.
Além disso, todos os 72 sujeitos são mostrados, indicando a variação que provavelmente será encontrada, em diferentes FSTs. Talvez os aspectos mais importantes dos testes de MED de precisão relacionem-se com a adesão ao cronograma adequado de dosagem para o tipo de pele Fitzpatrick identificado e também mantendo consistentemente a distância correta entre a superfície da pele e a fonte de luz UV. Parte de nossa motivação no desenvolvimento dessas técnicas é facilitar pesquisas futuras examinando como as respostas inflamatórias podem se relacionar com qualquer número de variáveis potencialmente interessantes, como fatores psicológicos, farmacológicos ou relacionados à saúde.
