A lesão de isquemia renal é a principal causa de insuficiência renal aguda. Este modelo é muito útil para entender as alterações fisiopatológicas que ocorrem no rim após um insulto isquêmico. Este modelo é tempo e custo-benefício e fornece dados altamente reprodutíveis.
Além disso, este Modelo unilateral de Isquemia Renal permite que o pesquisador trabalhe com tempos isquêmicos mais longos, mantendo uma alta taxa de sobrevivência. Para começar, coloque o mouse anestesiado na mesa de operação. Após esterilizar a área cirúrgica, use uma lâmina de bisturi para fazer uma incisão cirúrgica lateral lateral de aproximadamente um centímetro no flanco direito atrás da costela e continue aconchegante aproximadamente um centímetro paralelo à linha média lombar.
Transecte a musculatura abdominal usando uma tesoura para visualizar o espaço retroperitoneal. Use um cotonete estéril para remover as pequenas quantidades de sangue produzidas durante a secção dos músculos. Em seguida, empurre o rim direito para fora da cavidade abdominal.
Devagar e cuidadosamente expor o rim com fórceps cinzentos e identificar o pedículo renal. Em seguida, remova cuidadosamente o tecido adiposo ao redor do pedículo. Use um Hemostat de mosquito halsted para manipular o grampo vascular.
Para induzir a isquemia, coloque o grampo vascular sobre a artéria renal e a veia presentes no pedículo renal evitando a fixação do ureter adjacente. Cubra o rim preso com gaze estéril encharcada em soro fisiológico para evitar a dessacação. Deixe os rins na gaze por 30 minutos e monitore a profundidade e umidade da gaze periodicamente.
Pouco antes do fim do período de isquemia, descubra o rim e segure o Hemostat do Mosquito Halsted, pronto para a remoção do grampo. Ao final do período de isquemia, abra o grampo vascular com o hemostato e remova o grampo para permitir a perfusão do rim. Para animais de controle falso, realize a cirurgia demonstrada sem fixação do pedículo renal.
Após verificar a mudança de cor renal, devolva o rim à cavidade abdominal. Feche os músculos abdominais em um padrão cruzado com sutura absorvível 5-0. Feche a pele em um padrão de colchão horizontal com sutura absorvível 5-0.
Limpe a ferida com solução povidone-iodo. Após a lesão por perfusão da isquemia, a redução do peso corporal foi observada em alguns camundongos com menos de 10% do peso corporal inicial. No entanto, a maioria dos camundongos recuperou seu peso corporal inicial entre os dias 4 e 7 pós-cirurgia.
Os camundongos de controle não apresentaram alterações de peso corporal após a cirurgia. Várias alterações na morfologia renal pós-cirurgia foram identificadas usando hematoxilina-eosina, ácido periódico-Schiff, e coloração tricromática de Masson. A presença de gesso proteináceo no lúmen tubular foi observada após quatro horas.
A dilatação tubular foi detectada às oito horas e o gesso tubular, bem como a necrose celular nos segmentos medulares, foram notados às 16 horas após a cirurgia do IRI. Após 24 horas de cirurgia, observou-se dilatação tubular. Infiltração de linfócitos e macrófagos e núcleos celulares ampliados foram detectados após 48 horas.
Até o dia 4, foram observadas células tubulares mitóticas e, no 7º dia, foi detectada a fibrose focal. O córtex renal dos camundongos durante a reperfusão precoce foi monitorado usando coloração PAS e atenuação progressiva da borda da escova foi visível. As áreas de fibrose intersticial no 7º dia pós-cirurgia foram visualizadas usando a coloração trichome de Masson.
Um sistema de pontuação de lesão tubular foi desenvolvido para categorizar o dano ao longo do tempo. Os maiores escores de lesão tubular foram obtidos entre 8 horas e 24 horas após o Renal IRI. Alguns dos passos mais críticos são a colocação correta do grampo vascular no pedículo renal e a manutenção de uma temperatura corporal constante durante a cirurgia.
