Os sinais nervosos fisiológicos estão no nível de microvolts, o que é muito pequeno para ser registrado com eletrodos atualmente disponíveis de forma confiável. O MC-RPC pode interagir com nervos periféricos intactos, amplificando os pequenos sinais mais de cem vezes para facilitar a detecção confiável e precisa da intenção motora. A principal vantagem desta técnica é a sua natureza biológica.
Pode interagir com nervos periféricos intactos a longo prazo sem causar um efeito prejudicial sobre o próprio nervo ou alvos musculares inervados distalmente. Dispositivos de exoesqueleto alimentados capazes de restaurar a função para aqueles com fraqueza nas extremidades raramente são utilizados em todo o seu potencial devido à incapacidade de detectar a intenção do motor de forma confiável e precisa. Devido às suas capacidades biológicas de amplificação do sinal nervoso, o manguito muscular RPNI é a resposta para essas deficiências.
Faça uma incisão longitudinal ao longo da face anterior do membro posterior do doador desejado, estendendo-se logo acima do tornozelo até logo abaixo do joelho com um bisturi número 15. Dissecar o tecido subcutâneo subjacente com uma tesoura afiada da íris para expor a musculatura subjacente e os tendões distais apenas proximais à articulação do tornozelo. Isole o músculo EDL e seu tendão distal da musculatura circundante.
Garantir o isolamento do tendão correto inserindo ambos os dentes de uma pinça ou tesoura da íris sob o tendão distal apenas proximal à articulação do tornozelo. Abra a pinça ou tesoura para exercer pressão ascendente sobre o tendão. Realizar uma tenotomia distal do músculo EDL ao nível do tornozelo com tesoura de íris afiada e dissecar o músculo livre dos tecidos circundantes que trabalham proximalmente em direção à sua origem tendínea.
Uma vez visualizado o tendão proximal, realize uma tenotomia proximal com tesoura de íris afiada para liberar o enxerto, corte ambas as extremidades tendíneas do enxerto muscular e corte até o comprimento desejado com tesoura de íris afiada. Faça uma incisão longitudinal ao longo de todo o comprimento aparado em um lado do enxerto muscular para facilitar a colocação do nervo dentro do enxerto muscular e fornecer contato do nervo com o endomísio. Coloque o enxerto muscular preparado em uma gaze umedecida com solução salina para evitar a dessecação do tecido.
Marque a incisão cirúrgica, estendendo-se de uma linha de aproximadamente 5 milímetros do entalhe ciático até a articulação inferior do joelho. Incise através da pele e dos tecidos subcutâneos ao longo da linha de incisão marcada com uma lâmina número 15. Incise cuidadosamente através da fáscia femoral do bíceps subjacente, tomando cuidado para não se estender por toda a profundidade do músculo, pois o nervo ciático fica logo abaixo.
Em seguida, disseque cuidadosamente através do músculo femoral do bíceps com uma pequena tesoura de ponta romba ou um hemostático. Identifique o nervo perineal ou CP comum e isole-o cuidadosamente dos nervos circundantes com um par de micro pinça e micro tesoura. Remova qualquer tecido conjuntivo circundante do meio 2 centímetros do nervo, tomando cuidado para não esmagar o nervo.
Segure o epineúrio proximal com micropinça sobre a porção central do nervo PC liberado e corte imediatamente no epineúrio com uma tesoura de microdissecção. Em seguida, viaje distalmente ao longo do nervo para fazer uma janela epineurial correspondente ao comprimento do enxerto muscular e remover cerca de 25% do epineurium. Tome cuidado para remover este segmento em uma única peça.
Remova o enxerto muscular da gaze umedecida com solução salina e coloque-o sob a porção central do nervo CP, onde a janela epineurial foi criada. Gire o nervo 180 graus para que a seção da janela epineurial toque o músculo intacto e não subjaz à eventual linha de sutura. Sutura do epineúrio do nervo CP com um 8-O sutura de nylon proximal e distalmente ao enxerto muscular dentro do sulco com suturas simples interrompidas para fixar o epineúrio ao endomísio.
Circunferencial envolver as bordas no enxerto muscular em torno do nervo agora fixado e sutura no lugar com 8-O interrompido pontos de nylon. Uma vez que a hemostasia é alcançada, feche a fáscia femoral do bíceps sobre o construto com sutura crômica 5-O de forma corrida. Feche a pele sobrejacente com uma sutura crômica 4-O de forma corrida.
A coloração H&E de uma seção transversal MC-RPNI mostra o músculo e o nervo. A secção transversal do músculo EDL distensionalmente inervado ipsilateral num rato com MC-RPNI demonstrou tecido nervoso e muscular viável sem qualquer fibrose ou cicatrização significativa em comparação com a secção transversal num rato de controlo sem MC-RPNI. A imuno-histoquímica de uma seção longitudinal de uma amostra de MC-RPNI mostra núcleos corados de azul com DAPI e tecido nervoso corado de verde.
Um close-up de outro MC-RPNI bem-sucedido mostra múltiplas junções neuromusculares inervadas coradas com alfa-bungarotoxina em vermelho para receptores de acetilcolina. Testes eletrofisiológicos realizados nos construtos MC-RPNI mostraram que os potenciais de ação muscular compostos gerados ou formas de onda CMAPs são semelhantes em aparência ao músculo nativo, apoiando ainda mais que eles se tornaram reinervados por seu nervo contido. Os CMAPs gerados pelo músculo EDL fisiológico após a estimulação proximal do nervo CP geralmente variam de 20 a 30 milivolts.
Os CMAPs EDL em ratos com MC-RPNIs implantados não são significativamente diferentes, com média de 24,27 milivolts mais ou menos 1,34 milivolts. É crucial praticar a criação de uma janela epineurial antes de usá-la em um estudo. O epineúrio é uma cobertura muito fina e frágil no nervo, e danificar as fibras nervosas subjacentes pode alterar os resultados de maneiras altamente imprevisíveis.
Essas construções são consideradas maduras em ratos após 3 meses e suas capacidades de personalização são infinitas. Após a maturação, o MC-RPNI pode ser utilizado em avaliações fisiológicas, análises eletrofisiológicas e testes de força muscular, para citar alguns. A neurorrafia de ponta a ponta é um conceito relativamente novo dentro da cirurgia, onde um nervo transectado é coapto a um nervo periférico intacto induzindo a brotação colateral do nervo intacto para o segmento enxertado.
Descobrimos que esse fenômeno também ocorre em músculos enxertados diretamente no nervo intacto e as possibilidades de mais pesquisas são fascinantes.
