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Neuroscience

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Técnica Minimamente Invasiva e Rápida de Hemisecção Lateral da Medula Espinhal para Modelagem de Lesões Medulares Abertas em Ratos

Transcrição

Esse protocolo é significativo, pois as lesões medulares ainda são prevalentes nos dias de hoje, e pesquisas são necessárias para aprofundar o entendimento dessas lesões e desenvolver possíveis terapias. Esta técnica é mais precisa e reprodutível do que as lesões por compressão e contusão e menos invasiva do que as lesões com laminectomia completa. Portanto, pode ser uma melhor opção para uma simulação de lesão medular do que os procedimentos descritos anteriormente.

Para começar, use uma lâmina de bisturi 20 para abrir a área cirúrgica, colocando uma incisão de dois a 2,5 centímetros de comprimento através de todas as camadas da pele ao longo da coluna vertebral. Posicione esta incisão paralelamente à coluna vertebral usando a vértebra L1 como ponto médio, estendendo-a aproximadamente um centímetro no sentido cranial e coddle ao longo da coluna vertebral. Mobilize os lados da ferida cortando o tecido conjuntivo ao redor dos músculos.

Em seguida, coloque duas incisões paralelas ao longo da coluna vertebral, penetrando no periósteo. Coloque as incisões bem ao lado dos processos espinhais em ambos os lados, abrangendo a distância entre as vértebras torácicas 13 e L1. Disseque os músculos ligados às vértebras com os oito de um respirador até que todos os ligamentos espinhais estejam visíveis.

Coloque um afastador. Em seguida, remova os processos espinhais da 13ª vértebra torácica e da primeira vértebra lombar Usando pinça óssea dentária para visualizar toda a área cirúrgica. Use gaze estéril para controlar o sangramento durante todo o procedimento, quando necessário.

Levante cuidadosamente o restante dos processos espinhais de L1, elevando o arco vertebral de L1. Remova o ligamento amarelo para acessar a medula espinhal. Eleve ainda mais os processos espinhais da criança, permitindo o acesso à dura-máter espinhal cortada.

Incline os processos espinhais da criança na direção craniana para visualizar a pia-máter. Olhe através da pia-máter para a veia mediana posterior, mostrando a linha média da coluna vertebral. Usando a veia como bissetriz direcional, coloque uma incisão usando um bisturi microcirúrgico enquanto poupa a veia.

Coloque a incisão sob a veia no plano transversal através do diâmetro anterior posterior da medula espinhal. Realizar a hemissecção afastando a lâmina lateralmente da linha central. Coloque a incisão para evitar o corte da artéria espinhal anterior.

Certifique-se de que o excesso de pressão não seja aplicado no corpo vertebral ao cortar a medula espinhal para poupar a artéria espinhal anterior no lado ventral da medula espinhal. Não feche a dura-máter diretamente durante o fechamento da ferida. Sutura firmemente os músculos e processos espinhais, fechando indiretamente a pequena ferida na dura-máter.

Fechar a camada de tecido conjuntivo dorsal com suturas. Este novo método minimamente invasivo de lesão medular é realizado muito mais rápido do que a abordagem cirúrgica tradicional usando laminectomia e não requer instrumentação especializada adicional. Hematoxilina e eosina foram utilizadas para visualização do local da lesão.

Outros cortes podem ser realizados ao longo da medula espinhal mimetizando lesões neurais específicas. A regeneração também pode ser estudada, uma vez que eletrodos ou células-tronco podem ser colocados usando este método. A maioria das técnicas que utilizam modelos de feridas abertas de lesão medular implementando hemissecção ou transação pode ser simplificada e acelerada com o uso desta técnica.

Aqui, descrevemos uma nova e rápida técnica de modelagem da lesão medular aberta em ratos que elimina a laminectomia. A hemissecção lateral é realizada durante a visualização através de um microscópio. A técnica é versátil e também pode ser utilizada nas regiões cervical, torácica e lombar da medula espinhal de outros animais.

Capítulos neste vídeo

0:04

Introduction

0:40

Surgery

3:48

Results: Modeling Open Spinal Cord Injury in Rats

4:09

Conclusion

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