Dissecção da estria vascular de camundongos adultos para sequenciamento de núcleo único ou imunomarcação

A estria vascular tem a função de gerar o potencial endococlear e regular a homeostase iônica na cóclea. O programa de desenvolvimento e restauração auditiva busca compreender os mecanismos subjacentes que ligam a homeostase iônica disfuncional com os distúrbios da audição e estabilidade, que são doenças em que ocorre flutuação ou perda auditiva súbita. O trabalho em meu laboratório estabeleceu a paisagem transcricional da estria vascular e contribuiu para a compreensão de sua importância na audição.

Usamos esses dados para traçar paralelos com distúrbios auditivos e de estabilidade mal compreendidos, incluindo a doença de Ménière. Este protocolo permite a dissecção e o isolamento da estria vascular de toda a montaria para estudos moleculares posteriores, incluindo imunohistoquímica. Dado que os tipos celulares da estria vascular estão intrinsecamente entrelaçados entre si, o uso de isolamento nuclear e sequenciamento de RNA de núcleo único facilitou nossa compreensão da distinta maquinaria transcricional envolvida.