Este estudo é apoiado pela Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (NO.82105042, 82205302); Programa de Excelência de Pós-doutorado de Xangai (NO.2020371); Fundação de Ciência Pós-Doutoral da China (NO.2021M692156); Programa de Vela de Xangai (NO.20YF1450900); Fundação Científica do Hospital Yueyang de Medicina Tradicional Chinesa e Ocidental Integrada (NO.2021yygq03). Os financiadores não tiveram nenhum papel na concepção, execução ou redação do estudo.

Todos os experimentos foram aprovados e supervisionados pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Xangai (número de aprovação: SYXK2018-0040), que está em conformidade com as estipulações na Declaração de Helsinque da Associação Médica Mundial.
1. Preparo dos animais
<ol><li>Casa 32 Ratos machos Sprague Dawley (SD) com 8 semanas de idade e pesando 180-220 g em um aparelho de alojamento específico livre de patógenos sob ciclos de 12 h claro/12 h escuro a 24 ± 2 °C e 60% de umidade com uma dieta padrão de pellets de roedores. Todas as operações experimentais em animais cumprem a ética do bem-estar dos animais de experimentação e os regulamentos de segurança da experimentação animal.</li>
	<li>Randomizar e agrupar ratos em quatro grupos de oito animais cada após 1 semana de alimentação adaptativa: antiPD-L1+Tuina (grupo A), modelo (grupo B), Tuina (grupo C) e cirurgia simulada (grupo D).</li>
</ol>2. Injeção intra-articular de iodoacetato monossódico (MIA) no joelho
OBS: Com exceção do grupo D, o modelo de KOA em ratos será preparado pela injeção de MIA na cavidade articular do joelho em todos os grupos. Para o grupo D, injetar 25 μL de solução fisiológica estéril na cavidade articular do joelho direito.
<ol><li>Anestesiar o rato colocando-o em gaiola anestésica e, em seguida, introduzindo isoflurano a 2,5% até que esteja totalmente anestesiado. Confirme se o animal está totalmente anestesiado aguardando o ponto em que o rato jovem está deitado de costas, seus membros param de se mover e não há resposta na pinça dos dedos dos pés (reflexo pedal), reflexo palpebral e relaxamento muscular.</li>
	<li>Adicione pomada para os olhos e colírios aos ratos jovens anestesiados para evitar o ressecamento dos olhos.</li>
	<li>Raspar o membro posterior direito dos ratos e desinfetar a articulação do joelho com três rodadas alternadas de iodóforo e etanol 75%.</li>
	<li>Para manter uma condição experimental padronizada, fixe cuidadosamente a flexão do joelho em um ângulo preciso de 90°, garantindo que o ligamento patelar esteja orientado para cima. Em seguida, injetar 25 μL de solução de MIA, consistindo de 4 mg de MIA diluídos em 25 μL de solução salina estéril na cavidade articular do joelho direito dos ratos. OBS: Esta injeção foi realizada com microinjetor especializado, garantindo precisão e consistência no procedimento21,22,23. Coloque os ratos de volta nas gaiolas até que eles acordem. O animal que passou por cirurgia não é devolvido à companhia de outros animais até que esteja totalmente recuperado.</li>
	<li>No final do estudo, eutanasiar os ratos injetando 1% de pentobarbital sódico como uma dose de 100 mg/kg.</li>
</ol>3. Implementação de Tuina
NOTA: A implementação de Tuina será guiada pela teoria de que "para pacientes com desequilíbrio tendíneo e ósseo, os tendões precisam ser tratados primeiro". Ambos os grupos A e B iniciaram a intervenção no primeiro dia após a avaliação bem-sucedida do modelo, e ambos os grupos foram operados uma vez ao dia durante 14 dias. Os dois grupos restantes foram observados apenas por 14 dias sem qualquer intervenção. Os operadores da manipulação devem ser rigorosamente treinados antes do experimento para garantir a consistência da força, frequência e ritmo.
<ol><li>Localizar com precisão o ponto de acupuntura do rato, incluindo EX-LE4, ST35, SP10, ST34, SP9 e GB34 (Figura 1 e Tabela 1), onde serão realizados métodos de amassamento dos dedos utilizando a Acupuntura Experimental24.</li>
	<li>Fixe o rato em decúbito ventral no equipamento de fixação do rato.</li>
	<li>Após o silêncio e relaxamento dos membros inferiores, amassar o EX-LE4 e o ST35 do membro afetado com o polegar e o indicador simultaneamente por 4 min a 120-140 vezes/min.</li>
	<li>Amassar os músculos anterior e médio-lateral do membro afetado com o polegar e o indicador por 3 min a 120-140 vezes/min, focando o SP10, ST34 e os músculos próximos à articulação do joelho. Enfatize a manipulação desses músculos rígidos com uma intensidade para que o rato não lute.</li>
	<li>Amasse os músculos da panturrilha posterior do membro afetado de cima para baixo por 3 min a 120-140 vezes/min usando o polegar, o indicador e o dedo médio. Para expor totalmente a área de tratamento, use o dedo anelar e o dedo mínimo para segurar a articulação do tornozelo do membro afetado e puxe suavemente o membro afetado. Concentre-se no SP9, GB34 e nos músculos próximos à articulação do joelho com ênfase nos músculos rígidos e na intensidade para que o rato não tenha dificuldades.</li>
</ol>4. Mensuração do índice comportamental
<ol><li>Mensuração do limiar mecânico plantar de dor NOTA: Medir os limiares de dor mecânica plantar 1 dia antes da injeção de MIA, bem como 2, 9 e 16 dias após a injeção.<ol><li>Levar os ratos para uma sala de teste plantar com um fundo de grade de aço inoxidável e um corpo de gaiola de plástico em um ambiente silencioso à temperatura ambiente (22 ± 2) °C por 30 min de adaptação.</li>
		<li>Utilizar um analgésico mecânico eletrônico com uma agulha plástica de 0,8 mm de diâmetro para estimular verticalmente a área central do retropé direito dos ratos. Aumentar uniforme e gradualmente a intensidade da estimulação até que os ratos apresentem reações de retração e evitação da pata.</li>
		<li>Registrar a leitura da tela eletrônica como limiar mecânico de dor do pé plantar direito do rato.</li>
		<li>Meça cada rato 5x em intervalos de 5 min.</li>
		<li>Remova os valores máximo e mínimo dos cinco valores. Tome-se como resultado o valor médio dos três valores médios pelo método da média aparada (Tabela 2).</li>
	</ol></li>
	<li>Mensuração do limiar de retirada mecânica da pata NOTA: Medir o limiar de retirada mecânica da pata 1 dia antes da injeção de MIA, 2, 9 e 16 dias após a injeção.<ol><li>Levar os ratos para uma sala de ensaio plantar aquecida com um fundo de vidro a 30 °C e um corpo de gaiola de plástico num ambiente silencioso à temperatura ambiente (22 ± 2) °C durante 30 minutos de adaptação.</li>
		<li>Estimular a área central plantar posterior direita com um dispositivo de aquecimento da fonte de luz a uma temperatura de estimulação de 65 °C até que o rato mostre uma resposta de retração e evitação da pata.</li>
		<li>Registrar o tempo de leitura da tela eletrônica como limiar de dor térmica plantar direito do rato.</li>
		<li>Meça cada rato 5x continuamente em intervalos de 5 min.</li>
		<li>Remova os valores máximo e mínimo dos cinco valores. Tome-se como resultado o valor médio dos três valores médios pelo método da média aparada (Tabela 3).</li>
	</ol></li>
</ol>5. Medição do inchaço da articulação do joelho direito
NOTA: Medir o inchaço da articulação do joelho direito de ratos 1 dia antes da injeção de MIA, 2, 9 e 16 dias após a injeção.
<ol><li>Anestesiar o rato colocando-o em gaiola anestésica e expondo-o ao isoflurano a 2,5% até que esteja totalmente anestesiado.</li>
	<li>Coloque o rato em uma posição plana na mesa de operação.</li>
	<li>Medir a largura da articulação do joelho direito com paquímetro vernier (Figura 2 e Tabela 4).</li>
</ol>6. Mensuração do escore de Lequesne MG
NOTA: Medir o escore de Lequesne MG em ratos aos 2, 9 e 16 dias após a injeção de MIA. Lequesne et al desenvolveram um índice de gravidade para osteoartrite do quadril (ISH), que pode ser usado para avaliar a efetividade de intervenções terapêuticas. Consideramos quatro parâmetros: estimulação da dor, alteração da marcha, mobilidade articular e edema articular.
<ol><li>Levar os ratos para uma plataforma de manipulação num ambiente silencioso à temperatura ambiente (22 ± 2) °C.</li>
	<li>Peça a dois operadores, cegos um para o outro, que meçam a resposta local ao estímulo da dor, a mudança da marcha, o movimento articular e o inchaço articular.<ol><li>Estimular a face lateral da articulação do joelho direito com uma agulha plástica de teste e pontuar em uma escala de 0 a 3 de acordo com a resposta. 0 sem resposta; 3 uma boa resposta; 1 contração do membro afetado; 2 contração e espasmo do membro afetado, acompanhados de reações generalizadas leves, como tremores, lambeduras e sucção.</li>
		<li>Coloque o rato sobre a mesa de operação e observe a marcha de seus membros posteriores direitos. Escore em uma escala de 0 a 3 de acordo com a resposta. 0 ausência de perturbação no movimento do membro afetado, corrida normal e trabalho forte dos pés; 3 o membro afetado não pode participar da marcha, tocar o solo ou pisar no chão; 1 caminhada leve durante a corrida com pisadas fortes; 2 O membro afetado participa da marcha, mas o distúrbio no movimento dos ratos (trekking) é evidente.</li>
		<li>Flexionar e estender a articulação do joelho direito do rato com a mão e observar a mobilidade articular. Escore em uma escala de 0 a 3 de acordo com a resposta. 0 ângulo de mobilidade articular superior a 90°; 3 ângulo de mobilidade articular inferior a 15°; 1 ângulo de mobilidade articular ou 45°-90°; 2 ângulo de mobilidade articular de 15°-45°.</li>
		<li>Toque a articulação do joelho direito do rato e compare a resposta com a de um rato normal. Pontuação em uma escala de 0 a 2 de acordo com a resposta. 0 sem inchaço óbvio e marcas ósseas visíveis; 2 edema acentuado e sem marcas ósseas; 1 inchaço leve e marcas ósseas superficiais.</li>
		<li>Adicione esses escores para produzir o escore de Lequesne MG para cada rato e calcular o valor médio através do método trimmed (Tabela 5).</li>
	</ol></li>
</ol>7. Medição da temperatura cutânea
NOTA: Medir a temperatura da pele 1 dia antes da injeção de MIA e 9 e 16 dias após a injeção.
<ol><li>Anestesiar o rato colocando-o em uma gaiola anestésica e, em seguida, introduzindo isoflurano até que esteja totalmente anestesiado.</li>
	<li>Colocar o rato numa posição lateral na mesa de operações, à temperatura ambiente (22 ± 2) °C.</li>
	<li>Endireitar a articulação do joelho direito segurando suavemente o pé com a mão. Fotografe para determinar a temperatura da pele usando uma câmera infravermelha Filr.</li>
	<li>Leia a temperatura da pele da articulação do joelho e ao redor da articulação do joelho do rato usando um software de edição de apoio. Defina pontos de controle na articulação do tornozelo e na articulação do joelho, onde a temperatura diminui gradualmente.</li>
</ol>8. Análise estatística
<ol><li>Utilizar software estatístico para expressar os dados experimentais em quartis.</li>
	<li>Use o método trim mean para lidar com os outliers. Os resultados dos testes comportamentais são anotados como a média ± o erro padrão da média.</li>
	<li>Realizar teste t para amostras independentes para comparação entre os grupos. Analisar os dados comportamentais por meio de uma análise de variância (ANOVA) bidirecional para medidas repetidas, seguida do teste de comparações múltiplas de Bonferroni. Quando os dados não apresentarem normalidade ou homocedasticidade, realizar um teste não paramétrico (amostras k de Kruskal-Wallis). NOTA: P < 0,05 indica que as diferenças são estatisticamente significativas. Todos os dados atendem aos pressupostos dos testes estatísticos aplicados.</li>
</ol>

Potencial terapêutico da massagem Tuina para osteoartrite do joelho

<ol>
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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+in+situ+hybridization+assessment+of+chromosome+8+copy+number+in+stage+I+and+stage+II+infiltrating+ductal+carcinoma+of+the+breast.">Fluorescence in situ hybridization assessment of chromosome 8 copy number in stage I and stage II infiltrating ductal carcinoma of the breast.</a> Cancer Genet Cytogenet. 97 (2), 101-105 (1997).</li><li>Kirby, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+influences+on+skeletal+muscle+vascular+tone+in+humans:+insight+into+contraction-induced+rapid+vasodilatation.">Mechanical influences on skeletal muscle vascular tone in humans: insight into contraction-induced rapid vasodilatation.</a> J Physiol. 583, 861-874 (2007).</li><li>Sefton, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+massage+of+the+neck+and+shoulders+produces+changes+in+peripheral+blood+flow+when+assessed+with+dynamic+infrared+thermography.">Therapeutic massage of the neck and shoulders produces changes in peripheral blood flow when assessed with dynamic infrared thermography.</a> J Altern Complement Med. 16 (7), 723-732 (2010).</li><li>Chen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aerobic+exercise+combined+with+glucosamine+hydrochloride+capsules+inhibited+the+apoptosis+of+chondrocytes+in+rabbit+knee+osteoarthritis+by+affecting+TRPV5+expression.">Aerobic exercise combined with glucosamine hydrochloride capsules inhibited the apoptosis of chondrocytes in rabbit knee osteoarthritis by affecting TRPV5 expression.</a> Gene. 830, 146465 (2022).</li><li>Fang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+of+aerobic+exercise+combined+with+glucosamine+therapy+and+circUNK+in+improving+knee+osteoarthritis+in+rabbits.">The mechanism of aerobic exercise combined with glucosamine therapy and circUNK in improving knee osteoarthritis in rabbits.</a> Life Sci. 275, 119375 (2021).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Casticin+suppresses+monoiodoacetic+acid-induced+knee+osteoarthritis+through+inhibiting+HIF-1alpha/NLRP3+inflammasome+signaling.">Casticin suppresses monoiodoacetic acid-induced knee osteoarthritis through inhibiting HIF-1alpha/NLRP3 inflammasome signaling.</a> Int Immunopharmacol. 86, 106745 (2020).</li><li>Ma, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vanillic+acid+reduces+pain-related+behavior+in+knee+osteoarthritis+rats+Through+the+inhibition+of+NLRP3+inflammasome-related+synovitis.">Vanillic acid reduces pain-related behavior in knee osteoarthritis rats Through the inhibition of NLRP3 inflammasome-related synovitis.</a> Front Pharmacol. 11, 599022 (2020).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroacupuncture+ameliorates+knee+osteoarthritis+in+rats+via+inhibiting+NLRP3+inflammasome+and+reducing+pyroptosis.">Electroacupuncture ameliorates knee osteoarthritis in rats via inhibiting NLRP3 inflammasome and reducing pyroptosis.</a> Mol Pain. 19, 17448069221147792 (2023).</li></ol>

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Este estudo tem como objetivo avaliar a melhora da NOA após a intervenção de Tuina utilizando indicadores comportamentais padronizados e investigar os mecanismos de Tuina para OA e a associação entre músculo esquelético e OA. Ao contrário das terapias farmacológicas e cirúrgicas, Tuina tem um efeito regulatório positivo sobre os sistemas motor, imunológico e endócrino. Tuina pode aliviar a inflamação e dor produzida pela doença, agindo em diferentes alvos. Por exemplo, ao regular a via TLR4 e o miRNA, pod...

A osteoartrite do joelho (OA) é uma osteoartrite degenerativa comum, caracterizada por dor crônica e incapacidade, e a OA relativamente grave levará a danos estruturais irreversíveis na articulação1. A alta prevalência global de OA de joelho tornou-se um grande desafio de saúde pública mundial 2,3, o que prejudica seriamente a qualidade de vida dos pacientes 4,5. Estudos mostram que a OA afeta mais de 260 milhões de pessoas em todo o mundo6. Com o envelhecimento da população, a taxa de prevalência total de OA na China chega a 17,0% acima dos 40 anos, o que sobrecarrega as famílias das pessoas afetadas 7,8.
De acordo com a medicina chinesa, a OA pertence à categoria de "paralisia"9, e o Clássico de Medicina Interna do Imperador Amarelo associa tendões, ossos e carne à paralisia. Assim, precisamos prestar atenção à conexão entre a cartilagem, músculo, sinóvia, bem como outros tecidos ao redor da articulação do joelho na OA. Na medicina moderna, tanto a inflamação muscular quanto a óssea, que são os principais componentes da homeostase imunológica da artrite, impulsionam a progressão da dor por KOA. No entanto, a maioria dos estudos se concentra na inflamação da cartilagem e na inflamação sinovial nas articulações ósseas, e há uma escassez de artigos examinando fenômenos inflamatórios na musculatura esquelética. Portanto, mais pesquisas sobre o papel do músculo esquelético na inflamação são necessárias para obter uma compreensão mais abrangente da OA e fornecer ideias para modalidades de tratamento mais eficazes. Em uma revisão da literatura, observamos que a inibição do fator imuno-relacionado ao ligante de morte programada 1 (PD-L1) exacerbou a progressão da OA10,11 e que houve expressão diferencial de IL-15 e FOXO1 no músculo esquelético de pacientes com OA 12, bem como inflamação muscular esquelética significativa em pacientes com OA terminal o que também esteve associado a alterações na marcha. Tem sido demonstrado que o músculo esquelético também pode secretar fatores intimamente relacionados à imunidade inflamatória, como a IL-6, e que o TNF-α também está intimamente relacionado à via PD-L1 e à OA13,14,15.
Atualmente, os tratamentos disponíveis para OA incluem controle de peso, exercícios, medicação e cirurgia, que geralmente incluem injeções intra-articulares, medicação analgésica, cirurgia artroscópica e osteotomia periprotética do joelho16. Atualmente, a progressão da doença de OA não pode ser completamente interrompida ou revertida e, sem uma compreensão clara dos complexos mecanismos subjacentes à dor em OQ, os pacientes com OA estão em risco de uso excessivo de medicamentos analgésicos e alta incidência de efeitos colaterais8. A maioria das estratégias de tratamento é eficaz apenas por curtos períodos e se concentra apenas no alívio temporário dos sintomas e não na patogênese da doença. Portanto, a dor em OA permanece uma prioridade e um desafio para o tratamento, representando um sério desafio clínico. No entanto, Tuina pode estimular diretamente os músculos esqueléticos ao redor da articulação afetada no tratamento com KOA e pode fornecer alguns benefícios. Combinado com a descrição anterior, é a terapia ideal para estudar o papel do tecido muscular esquelético na OA de joelhos, e esclarecer o papel do tecido muscular esquelético na inflamação também pode fornecer melhor suporte teórico para Tuina de OA.
Estudos têm demonstrado que a massoterapia, a terapia manipulativa osteopática e a manipulação da coluna vertebral podem ajudar a aliviar a dor e restaurar a função corporal17,18. Essas manipulações podem atuar na inflamação local e aliviar espasmos e analgesia por meio de ação mecânica externa. Podem aliviar a dor após artroplastia total do joelho, reduzir o uso de analgésicos, promover a recuperação pós-operatória e melhorar o equilíbrio biomecânico19. A massagem sueca é viável no tratamento da osteoartrite e pode reduzir o estresse e melhorar a qualidade de vida20. O efeito terapêutico de Tuina sobre a OA foi precedido por alguns estudos.
Neste experimento, nossa equipe explorará se a expressão de PD-L1 e fatores inflamatórios relacionados no músculo esquelético podem induzir KOA e promover seu desenvolvimento com base no modelo de KOA induzido por MIA em ratos. Tuina também será implementado para ver se pode aliviar os sintomas de KOA causados pelo aumento da expressão do fator inflamatório. Tuina será combinada com inibição de PD-L1 para demonstrar a associação entre a via PD-1 mediada por Tuina na inflamação do músculo esquelético que afeta o desenvolvimento de OA e dor, lançando as bases para estudos multiníveis adicionais sobre os mecanismos terapêuticos da intervenção de Tuina em OA.
Em resumo, este artigo descreve a investigação e elaboração dos mecanismos de inflamação do músculo esquelético no desenvolvimento de OA e sua dor, bem como os efeitos terapêuticos de Tuina sobre OA, sob a perspectiva da expressão de fatores imune-inflamatórios, combinados com indicadores comportamentais, para fornecer evidências modernas de pesquisa para a teoria do "desequilíbrio de tendão e osso" na medicina tradicional chinesa.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-PD-L1</td>
			<td>Abcam, Cambridge, MA, USA</td>
			<td>ab80276</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electric von Frey esthesiometer&#160;</td>
			<td>IITC/Life Science, Woodland Hills, CA, USA</td>
			<td>ALMEMO 2450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 9.0</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td></td>
			<td>Software for stastistical analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>monosodium iodoacetate</td>
			<td>Sigma-Aldrich Inc</td>
			<td>I9148</td>
			<td>Resolved into normal saline for injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pentasorbital sodium</td>
			<td>Sigma-Aldrich Inc</td>
			<td>P3761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague Dawley (SD) male rats</td>
			<td>Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd</td>
			<td>No. SCXK (Hu) 2017-0012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>thermal analgesia tester</td>
			<td>IITC/Life Science</td>
			<td>Model 390</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tuina intervention in sodium monoiodoacetate injection-induced rat model of knee osteoarthritis

A osteoartrite do joelho (OA), uma doença articular degenerativa comum, é caracterizada por dor crônica e incapacidade, que podem evoluir para danos estruturais irreparáveis da articulação. Investigações sobre a ligação entre cartilagem articular, músculos, sinóvia e outros tecidos ao redor da articulação do joelho na OA são de grande importância. Atualmente, o manejo da OA inclui modificações no estilo de vida, exercícios, medicamentos e intervenções cirúrgicas; no entanto, a elucidação dos intrincados mecanismos subjacentes à dor relacionada à OA ainda é escassa. Consequentemente, a dor em OA de joelho continua sendo um desafio clínico fundamental e uma prioridade terapêutica. Tuina foi encontrado para ter um efeito regulador sobre os sistemas motor, imunológico, e endócrino, levando a exploração de se Tuina poderia aliviar os sintomas de KOA, causados pela upregulation de fatores inflamatórios, e ainda, se os fatores inflamatórios no músculo esquelético podem aumentar a progressão de KOA.
Foram randomizados 32 ratos machos Sprague Dawley (SD) (180-220 g) em quatro grupos de oito animais cada: antiPD-L1+Tuina (grupo A), modelo (grupo B), Tuina (grupo C) e cirurgia simulada (grupo D). Para os grupos A, B e C, injetamos 25 μL de solução de monoiodoacetato de sódio (MIA) (4 mg de MIA diluídos em 25 μL de solução salina estéril) na cavidade articular do joelho direito e, para o grupo D, a mesma quantidade de soro fisiológico estéril foi injetada. Todos os grupos foram avaliados por meio de testes de menor a maior estresse (limiar mecânico de retirada da pata, latência térmica de retirada da pata, edema da articulação do joelho direito, escore de Lequesne MG, temperatura cutânea) antes da injeção e 2, 9 e 16 dias após a injeção.

Knee osteoarthritis (KOA) is a common degenerative osteoarthritis, characterized by chronic pain and disability, and relatively severe KOA will lead to irreversible structural damage to the joint1. The high global prevalence of KOA has become a major global public health challenge2,3, which seriously impairs the quality of life of patients4,5. Studies have shown that KOA affects more than 260 million people worldwide6. With the aging of the population, the total prevalence rate of KOA in China is as high as 17.0% over the age of 40, which puts a heavy burden on the families of those affected7,8.
According to Chinese medicine, KOA belongs to the category of &#34;paralysis&#34;9, and the Yellow Emperor&#39;s Classic of Internal Medicine associates tendons, bones, and flesh with paralysis. Hence, we need to pay attention to the connection between the cartilage, muscle, synovium, as well as other tissues around the knee joint in KOA. In modern medicine, both muscle and bone inflammation, which are major components of the immune homeostasis of arthritis, drive the progression of KOA pain. However, most studies focus on cartilage inflammation and synovial inflammation in bone joints, and there is a paucity of articles examining inflammatory phenomena in skeletal muscles. Therefore, more research on the role of skeletal muscle in inflammation is needed to gain a more comprehensive understanding of KOA and provide ideas for more effective treatment modalities. In a review of the literature, we found that inhibition of the immune-related factor programmed death ligand 1 (PD-L1) exacerbated the progression of KOA10,11 and that there was differential expression of IL-15 and FOXO1 in the skeletal muscle of patients with KOA12, as well as significant skeletal muscle inflammation in patients with end-stage KOA, which was also associated with changes in gait. It has been shown that the skeletal muscle can also secrete factors closely related to inflammatory immunity such as IL-6, and that TNF-&#945; is also closely related to the PD-L1 pathway and KOA13,14,15.
Currently, available treatments for KOA include weight control, exercise, medication, and surgery, which usually include intra-articular injections, analgesic medication, arthroscopic surgery, and periprosthetic osteotomy of the knee16. Currently, KOA disease progression cannot be completely stopped or reversed, and without a clear understanding of the complex mechanisms underlying KOA pain, KOA patients are at risk for overuse of analgesic medications and a high incidence of side effects8. Most treatment strategies are effective only for short periods and focus only on the temporary relief of symptoms rather than on the pathogenesis of the disease. Therefore, KOA pain remains a priority and a challenge for treatment, posing a serious clinical challenge. However, Tuina can directly stimulate the skeletal muscles around the affected joint in KOA treatment and can provide some benefits. Combined with the previous description, it is the ideal therapy to study the role of skeletal muscle tissue in KOA, and clarifying the role of skeletal muscle tissue in inflammation can also provide better theoretical support for Tuina of KOA.
Studies have shown that massage therapy, osteopathic manipulative therapy, and spinal manipulation can help relieve pain and restore body function17,18. These manipulations can act on local inflammation and relieve spasms and analgesia through external mechanical action. They can relieve pain after total knee arthroplasty, reduce the use of analgesic drugs, promote postoperative recovery, and improve biomechanical balance19. Swedish massage is feasible in the treatment of osteoarthritis and can reduce stress and improve quality of life20. The therapeutic effect of Tuina on KOA has been preceded by certain studies.
In this experiment, our team will explore whether the expression of PD-L1 and related inflammatory factors in skeletal muscle can induce KOA and promote its development based on the MIA-induced KOA model in rats. Tuina will also be implemented to see whether it can alleviate KOA symptoms caused by increased inflammatory factor expression. Tuina will be combined with PD-L1 inhibition to demonstrate the association between Tuina-mediated PD-1 pathway in skeletal muscle inflammation affecting KOA development and pain, laying the foundation for further multi-level studies on the therapeutic mechanisms of Tuina intervention in KOA.
In summary, this paper describes the investigation and elaboration of the mechanisms of skeletal muscle inflammation in the development of KOA and its pain, as well as the therapeutic effects of Tuina on KOA, from the perspective of immune-inflammatory factor expression, combined with behavioral related indicators, to provide modern research evidence for the &#34;imbalance of tendon and bone&#34; theory in traditional Chinese medicine.

Autor em destaque: Tratamento da osteoartrite do joelho com Tuina - uma nova perspectiva 

Intervenção Tuina em Modelo de Osteoartrite de Joelho Induzida por Injeção de Monoiodoacetato de Sódio em Rato

We are trying to broaden the views on the research of knee osteoarthritis by introducing the perspective of refocusing on muscle inflammation during the pathological process of the KOA. There is a recent trend in non-pharmacological therapy treating the knee osteoarthritis. Therapy measures of traditional Chinese medicine, such as TNA and acupuncture, are receiving more and more recognition.There is a calling for detailed mechanism in the treatment. Our experiments indicates the possibility of chronic muscle inflammation in the process of knee osteoarthritis. It also points out the possibility of non-pharmacological therapy such as TNA to treat and control it.

O protocolo descrito foi implementado em um ambiente clínico no Yueyang Hospital de Medicina Tradicional Integrada Chinesa e Ocidental. A Figura 1 mostra a localização exata dos acupontos empurrados em ratos, e a Tabela 1 ilustra os benefícios comuns da estimulação desses pontos. A Tabela 2 e a Tabela 3 oferecem evidências convincentes de alívio notável da dor obtido com a terapia com Tuina, mesmo na ausência de inibição da via P...

Watch this Scientific Journal Video about Treating Knee Osteoarthritis with Tuina - A New Perspective at JoVE.com

Este protocolo descreve os métodos de intervenção de Tuina em modelo de osteoartrite de joelho (KOA) induzido por injeção de monoiodoacetato de sódio em ratos, que fornece uma referência para a aplicação de Tuina em modelos animais de OA. Este protocolo também estuda o mecanismo efetivo de Tuina para KOA, e os resultados ajudarão a promover sua aplicação.

Knee osteoarthritis (KOA), a common degenerative joint disorder, is characterized by chronic pain and disability, which can progress to irreparable ...

Estamos tentando ampliar os pontos de vista sobre a pesquisa da osteoartrite do joelho, introduzindo a perspectiva de refocalizar a inflamação muscular durante o processo patológico da OA. Existe uma tendência recente na terapia não farmacológica no tratamento da osteoartrite do joelho. Medidas terapêuticas da medicina tradicional chinesa, como TNA e acupuntura, estão recebendo cada vez mais reconhecimento.Há um apelo para o mecanismo detalhado no tratamento. Nossos experimentos indicam a possibilidade de inflamação muscular crônica no processo de osteoartrite do joelho. Aponta também a possibilidade de terapia não farmacológica, como a TNA, para tratá-la e controlá-la.

tuina-intervention-sodium-monoiodoacetate-injection-induced-rat-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Tuina Intervention in Sodium Monoiodoacetate Injection-Induced Rat Model of Knee Osteoarthritis

1.2K visualizações.  Shanghai University of Traditional Chinese Medicine. Estamos tentando ampliar os pontos de vista sobre a pesquisa da osteoartrite do joelho, introduzindo a perspectiva de refocalizar a inflamação muscular durante o processo patológico da OA. Existe uma tendência recente na terapia não farmacológica no tratamento da osteoartrite do joelho. Medidas terapêuticas da medicina tradicional chinesa, como TNA e acupuntura, estão recebendo cada vez mais reconhecimento.Há um apelo para o mecanismo detalhado no tratamento. Nossos experiment...

Vídeo: Autor em destaque: Tratamento da osteoartrite do joelho com Tuina - uma nova perspectiva 

Knee osteoarthritis (KOA), a common degenerative joint disorder, is characterized by chronic pain and disability, which can progress to irreparable structural damage of the joint. Investigations into the link between articular cartilage, muscles, synovium, and other tissues surrounding the knee joint in KOA are of great importance. Currently, managing KOA includes lifestyle modifications, exercise, medication, and surgical interventions; however, the elucidation of the intricate mechanisms underlying KOA-related pain is still lacking. Consequently, KOA pain remains a key clinical challenge and a therapeutic priority. Tuina has been found to have a regulatory effect on the motor, immune, and endocrine systems, prompting the exploration of whether Tuina could alleviate KOA symptoms, caused by the upregulation of inflammatory factors, and further, if the inflammatory factors in skeletal muscle can augment the progression of KOA.
We randomized 32 male Sprague Dawley (SD) rats (180-220 g) into four groups of eight animals each: antiPD-L1+Tuina (group A), model (group B), Tuina (group C), and sham surgery (group D). For groups A, B, and C, we injected 25 &#181;L of sodium monoiodoacetate (MIA) solution (4 mg MIA diluted in 25 &#181;L of sterile saline solution) into the right knee joint cavity, and for group D, the same amount of sterile physiological saline was injected. All the groups were evaluated using the least to most stressful tests (paw mechanical withdrawal threshold, paw withdrawal thermal latency, swelling of the right knee joint, Lequesne MG score, skin temperature) before injection and 2, 9, and 16 days after injection.

This protocol describes the methods of Tuina intervention in sodium monoiodoacetate injection-induced rat model of knee osteoarthritis (KOA), which provides a reference for the application of Tuina in KOA animal models. This protocol also studies the effective mechanism of Tuina for KOA, and the results will help promote its application.