Questo studio è supportato dalla National Natural Science Foundation of China (NO.82105042, 82205302); Programma di eccellenza post-dottorato di Shanghai (NO.2020371); Fondazione cinese per la scienza post-dottorato (NO.2021M692156); Programma di vela di Shanghai (NO.20YF1450900); Fondazione scientifica dell'ospedale Yueyang di medicina tradizionale cinese e occidentale integrata (NO.2021yygq03). I finanziatori non hanno avuto alcun ruolo nella progettazione, nell'esecuzione o nella scrittura dello studio.

Tutti gli esperimenti sono stati approvati e supervisionati dal Comitato per la cura e l'uso degli animali dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Shanghai (numero di approvazione: SYXK2018-0040), che è conforme alle disposizioni della Dichiarazione di Helsinki dell'Associazione Medica Mondiale.
1. Preparazione dell'animale
<ol><li>Ospita 32 ratti maschi Sprague Dawley (SD) di età compresa tra 8 settimane e un peso di 180-220 g in uno specifico apparato di stabulazione privo di agenti patogeni con cicli di luce di 12 ore/12 ore di buio a 24 ± 2 °C e 60% di umidità con una dieta standard a base di pellet per roditori. Tutte le operazioni sperimentali sugli animali sono conformi all'etica del benessere degli animali da esperimento e alle norme di sicurezza sugli animali sperimentali.</li>
	<li>Randomizzare e mettere in gabbia i ratti in quattro gruppi di otto animali ciascuno dopo 1 settimana di alimentazione adattativa: antiPD-L1+Tuina (gruppo A), modello (gruppo B), Tuina (gruppo C) e chirurgia fittizia (gruppo D).</li>
</ol>2. Iniezione intra-articolare di iodoacetato monosodico (MIA) nel ginocchio
NOTA: Ad eccezione del gruppo D, il modello di ratto KOA sarà preparato mediante l'iniezione di MIA nella cavità dell'articolazione del ginocchio in tutti i gruppi. Per il gruppo D, iniettare 25 μL di soluzione fisiologica sterile nella cavità articolare del ginocchio destro.
<ol><li>Anestetizzare il ratto mettendolo in una gabbia per anestesia e quindi introducendo isoflurano al 2,5% fino a quando non è completamente anestetizzato. Verificare che l'animale sia completamente anestetizzato aspettando il momento in cui il giovane ratto è sdraiato sulla schiena, i suoi arti smettono di muoversi e non c'è risposta nel pizzicamento delle dita dei piedi (riflesso del pedale), nel riflesso palpebrale e nel rilassamento muscolare.</li>
	<li>Aggiungi unguento per gli occhi e colliri agli anestetizzati, giovani ratti per prevenire la secchezza oculare.</li>
	<li>Radere l'arto posteriore destro dei ratti e disinfettare l'articolazione del ginocchio con tre cicli alternati di iodoforo ed etanolo al 75%.</li>
	<li>Per mantenere una condizione sperimentale standardizzata, fissare con cura la flessione del ginocchio con un angolo preciso di 90°, assicurandosi che il legamento rotuleo sia orientato verso l'alto. Successivamente, iniettare 25 μL di soluzione di MIA, costituita da 4 mg di MIA diluiti in 25 μL di soluzione salina sterile, nella cavità articolare del ginocchio destro dei ratti. NOTA: Questa iniezione è stata effettuata con un microiniettore specializzato, garantendo precisione e coerenza nella procedura21,22,23. Rimetti i ratti nelle gabbie finché non si svegliano. L'animale che ha subito un intervento chirurgico non viene restituito alla compagnia di altri animali fino a quando non si è completamente ripreso.</li>
	<li>Alla fine dello studio, sopprimere i ratti iniettando pentobarbital sodico all'1% alla dose di 100 mg/kg.</li>
</ol>3. Attuazione di Tuina
NOTA: L'implementazione di Tuina sarà guidata dalla teoria che "per i pazienti con squilibrio tendineo e osseo, i tendini devono essere trattati prima". Entrambi i gruppi A e B hanno iniziato l'intervento il primo giorno dopo la valutazione positiva del modello, ed entrambi i gruppi sono stati operati una volta al giorno per 14 giorni. I restanti due gruppi sono stati osservati solo per 14 giorni senza alcun intervento. Gli operatori della manipolazione devono essere rigorosamente addestrati prima dell'esperimento per garantire la coerenza della forza, della frequenza e del ritmo.
<ol><li>Individuare con precisione il punto di agopuntura del ratto, inclusi EX-LE4, ST35, SP10, ST34, SP9 e GB34 (Figura 1 e Tabella 1), dove verranno eseguiti metodi di impastamento con le dita utilizzando l'agopuntura sperimentale24.</li>
	<li>Fissare il ratto in posizione prona sull'attrezzatura per la fissazione dei ratti.</li>
	<li>Dopo che si è calmato e gli arti inferiori sono stati rilassati, impastare l'EX-LE4 e l'ST35 dell'arto interessato con il pollice e l'indice contemporaneamente per 4 minuti a 120-140 volte/min.</li>
	<li>Impastare i muscoli anteriori e medio-laterali dell'arto interessato con il pollice e l'indice per 3 minuti a 120-140 volte/min, concentrandosi su SP10, ST34 e sui muscoli vicino all'articolazione del ginocchio. Enfatizza la manipolazione di quei muscoli rigidi con un'intensità in modo che il topo non si sforzi.</li>
	<li>Impastare i muscoli posteriori del polpaccio dell'arto interessato dall'alto verso il basso per 3 minuti a 120-140 volte/min utilizzando il pollice, l'indice e il medio. Per esporre completamente l'area da trattare, utilizzare l'anulare e il mignolo per tenere l'articolazione della caviglia dell'arto interessato e tirare delicatamente l'arto interessato. Concentrati su SP9, GB34 e sui muscoli vicino all'articolazione del ginocchio con enfasi sui muscoli rigidi e sull'intensità in modo che il ratto non faccia fatica.</li>
</ol>4. Misurazione dell'indice comportamentale
<ol><li>Misurazione della soglia del dolore meccanico plantare NOTA: Misurare le soglie del dolore meccanico plantare 1 giorno prima dell'iniezione di MIA e 2, 9 e 16 giorni dopo l'iniezione.<ol><li>Portare i ratti in una sala di prova plantare con un fondo a griglia in acciaio inossidabile e un corpo a gabbia di plastica in un ambiente tranquillo a temperatura ambiente (22 ± 2) °C per 30 minuti di adattamento.</li>
		<li>Utilizzare un antidolorifico meccanico elettronico con un ago di plastica di 0,8 mm di diametro per stimolare verticalmente l'area centrale del retropiede destro dei ratti. Aumentare uniformemente e gradualmente l'intensità della stimolazione fino a quando i ratti mostrano reazioni di retrazione ed evitamento delle zampe.</li>
		<li>Registrare la lettura dello schermo elettronico come soglia del dolore meccanico del piede plantare destro del ratto.</li>
		<li>Misura ogni ratto 5 volte a intervalli di 5 minuti.</li>
		<li>Rimuovere i valori massimo e minimo dai cinque valori. Prendiamo come risultato il valore medio dei tre valori centrali attraverso il metodo della media tagliata (Tabella 2).</li>
	</ol></li>
	<li>Misurazione della soglia di ritiro meccanico della zampa NOTA: Misurare la soglia di ritiro meccanico della zampa 1 giorno prima dell'iniezione di MIA, 2, 9 e 16 giorni dopo l'iniezione.<ol><li>Portare i ratti in una sala di prova plantare riscaldata con un fondo di vetro a 30 °C e un corpo a gabbia di plastica in un ambiente tranquillo a temperatura ambiente (22 ± 2) °C per 30 minuti di adattamento.</li>
		<li>Stimolare l'area centrale plantare posteriore destra con un dispositivo di riscaldamento della sorgente luminosa a una temperatura di stimolazione di 65 °C fino a quando il ratto non mostra una retrazione della zampa e una risposta di evitamento.</li>
		<li>Registrare la lettura del tempo dello schermo elettronico come la giusta soglia del dolore termico plantare del ratto.</li>
		<li>Misurare ogni ratto 5 volte continuamente a intervalli di 5 minuti.</li>
		<li>Rimuovere i valori massimo e minimo dai cinque valori. Prendiamo come risultato il valore medio dei tre valori centrali attraverso il metodo della media tagliata (Tabella 3).</li>
	</ol></li>
</ol>5. Misurazione del gonfiore dell'articolazione del ginocchio destro
NOTA: Misurare il gonfiore dell'articolazione del ginocchio destro dei ratti 1 giorno prima dell'iniezione di MIA, 2, 9 e 16 giorni dopo l'iniezione.
<ol><li>Anestetizzare il ratto mettendolo in una gabbia anestetica ed esponendolo al 2,5% di isoflurano fino a quando non è completamente anestetizzato.</li>
	<li>Posizionare il ratto in posizione orizzontale sul tavolo operatorio.</li>
	<li>Misurare la larghezza dell'articolazione del ginocchio destro con calibri a corsoio (Figura 2 e Tabella 4).</li>
</ol>6. Misurazione del punteggio Lequesne MG
NOTA: Misurare il punteggio di Lequesne MG nei ratti a 2, 9 e 16 giorni dopo l'iniezione di MIA. Lequesne et al. hanno sviluppato un indice di gravità per l'osteoartrite dell'anca (ISH), che può essere utilizzato per valutare l'efficacia degli interventi terapeutici. Consideriamo quattro parametri: stimolazione del dolore, cambiamento dell'andatura, mobilità articolare e gonfiore articolare.
<ol><li>Portare i ratti su una piattaforma di manipolazione in un ambiente tranquillo a temperatura ambiente (22 ± 2) °C.</li>
	<li>Chiedi a due operatori, ciechi l'uno rispetto all'altro, di misurare la risposta alla stimolazione del dolore locale, il cambiamento dell'andatura, il movimento articolare e il gonfiore articolare.<ol><li>Stimola il lato laterale dell'articolazione del ginocchio destro con un ago di plastica e assegna un punteggio su una scala da 0 a 3 in base alla risposta. 0 nessuna risposta; 3 una buona risposta; 1 contrazione dell'arto interessato; 2 contrazione e spasmo dell'arto colpito, accompagnati da lievi reazioni generalizzate, come tremore, leccamento e suzione.</li>
		<li>Posizionare il ratto sul tavolo operatorio e osservare l'andatura degli arti posteriori destri. Assegna un punteggio su una scala da 0 a 3 in base alla risposta. 0 nessun disturbo nel movimento dell'arto colpito, corsa normale e forte gioco di gambe; 3 l'arto colpito non può camminare, toccare il suolo o calpestare il suolo; 1 trekking leggero durante la corsa con forti calpesti; 2 L'arto colpito partecipa alla deambulazione, ma il disturbo nel movimento dei ratti (trekking) è evidente.</li>
		<li>Flettere ed estendere l'articolazione del ginocchio destro del ratto con la mano e osservare la mobilità articolare. Assegna un punteggio su una scala da 0 a 3 in base alla risposta. 0 angolo di mobilità articolare superiore a 90°; 3 angolo di mobilità articolare inferiore a 15°; 1 angolo di mobilità articolare o 45°-90°; 2 angolo di mobilità articolare di 15°-45°.</li>
		<li>Tocca l'articolazione del ginocchio destro del ratto e confronta la risposta con quella di un ratto normale. Assegna un punteggio su una scala da 0 a 2 in base alla risposta. 0 nessun gonfiore evidente e segni ossei visibili; 2 gonfiore marcato e nessun segno osseo; 1 lieve gonfiore e macchie ossee superficiali.</li>
		<li>Sommare questi punteggi per produrre il punteggio Lequesne MG per ciascun ratto e calcolare il valore medio attraverso il metodo tagliato (Tabella 5).</li>
	</ol></li>
</ol>7. Misurazione della temperatura cutanea
NOTA: Misurare la temperatura cutanea 1 giorno prima dell'iniezione di MIA e 9 e 16 giorni dopo l'iniezione.
<ol><li>Anestetizzare il ratto mettendolo in una gabbia per anestesia e quindi introducendo isoflurano fino a quando non è completamente anestetizzato.</li>
	<li>Posizionare il ratto in posizione laterale sul tavolo operatorio, a temperatura ambiente (22 ± 2) °C.</li>
	<li>Raddrizzare l'articolazione del ginocchio destro afferrando delicatamente il piede con la mano. Fotografare per determinare la temperatura della pelle utilizzando una telecamera a infrarossi Filr.</li>
	<li>Leggi la temperatura della pelle dell'articolazione del ginocchio e intorno all'articolazione del ginocchio del ratto utilizzando un software di editing di supporto. Impostare i punti di controllo sull'articolazione della caviglia e sull'articolazione del ginocchio in cui la temperatura diminuisce gradualmente.</li>
</ol>8. Analisi statistica
<ol><li>Utilizzare un software statistico per esprimere i dati sperimentali in quartili.</li>
	<li>Utilizzare il metodo trim mean per gestire i valori anomali. I risultati dei test comportamentali sono indicati come media ± errore standard della media.</li>
	<li>Eseguire il test t dei campioni indipendenti per il confronto tra i gruppi. Analizza i dati comportamentali utilizzando un'analisi della varianza a misure ripetute a due vie (ANOVA), seguita da test di confronto multipli di Bonferroni. Se i dati non mostrano normalità o omoschedasticità, eseguire un test non parametrico (campioni di Kruskal-Wallis k). NOTA: P < 0,05 indica che le differenze sono statisticamente significative. Tutti i dati soddisfano i presupposti dei test statistici che vengono applicati.</li>
</ol>

Potenziale terapeutico del massaggio Tuina per l'artrosi del ginocchio

<ol>
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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+in+situ+hybridization+assessment+of+chromosome+8+copy+number+in+stage+I+and+stage+II+infiltrating+ductal+carcinoma+of+the+breast.">Fluorescence in situ hybridization assessment of chromosome 8 copy number in stage I and stage II infiltrating ductal carcinoma of the breast.</a> Cancer Genet Cytogenet. 97 (2), 101-105 (1997).</li><li>Kirby, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+influences+on+skeletal+muscle+vascular+tone+in+humans:+insight+into+contraction-induced+rapid+vasodilatation.">Mechanical influences on skeletal muscle vascular tone in humans: insight into contraction-induced rapid vasodilatation.</a> J Physiol. 583, 861-874 (2007).</li><li>Sefton, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+massage+of+the+neck+and+shoulders+produces+changes+in+peripheral+blood+flow+when+assessed+with+dynamic+infrared+thermography.">Therapeutic massage of the neck and shoulders produces changes in peripheral blood flow when assessed with dynamic infrared thermography.</a> J Altern Complement Med. 16 (7), 723-732 (2010).</li><li>Chen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aerobic+exercise+combined+with+glucosamine+hydrochloride+capsules+inhibited+the+apoptosis+of+chondrocytes+in+rabbit+knee+osteoarthritis+by+affecting+TRPV5+expression.">Aerobic exercise combined with glucosamine hydrochloride capsules inhibited the apoptosis of chondrocytes in rabbit knee osteoarthritis by affecting TRPV5 expression.</a> Gene. 830, 146465 (2022).</li><li>Fang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+of+aerobic+exercise+combined+with+glucosamine+therapy+and+circUNK+in+improving+knee+osteoarthritis+in+rabbits.">The mechanism of aerobic exercise combined with glucosamine therapy and circUNK in improving knee osteoarthritis in rabbits.</a> Life Sci. 275, 119375 (2021).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Casticin+suppresses+monoiodoacetic+acid-induced+knee+osteoarthritis+through+inhibiting+HIF-1alpha/NLRP3+inflammasome+signaling.">Casticin suppresses monoiodoacetic acid-induced knee osteoarthritis through inhibiting HIF-1alpha/NLRP3 inflammasome signaling.</a> Int Immunopharmacol. 86, 106745 (2020).</li><li>Ma, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vanillic+acid+reduces+pain-related+behavior+in+knee+osteoarthritis+rats+Through+the+inhibition+of+NLRP3+inflammasome-related+synovitis.">Vanillic acid reduces pain-related behavior in knee osteoarthritis rats Through the inhibition of NLRP3 inflammasome-related synovitis.</a> Front Pharmacol. 11, 599022 (2020).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroacupuncture+ameliorates+knee+osteoarthritis+in+rats+via+inhibiting+NLRP3+inflammasome+and+reducing+pyroptosis.">Electroacupuncture ameliorates knee osteoarthritis in rats via inhibiting NLRP3 inflammasome and reducing pyroptosis.</a> Mol Pain. 19, 17448069221147792 (2023).</li></ol>

Gli autori dichiarano che non sussistono conflitti di interesse.

Questo studio ha lo scopo di valutare il miglioramento del KOA dopo l'intervento di Tuina utilizzando indicatori comportamentali standardizzati e di indagare i meccanismi di Tuina per il KOA e l'associazione tra muscolo scheletrico e KOA. A differenza delle terapie farmacologiche e chirurgiche, Tuina ha un effetto regolatore positivo sul sistema motorio, immunitario ed endocrino. Tuina può alleviare l'infiammazione e il dolore prodotti dalla malattia agendo su diversi obiettivi. Ad esempio, regolando la via TLR4 e il mi...

L'artrosi del ginocchio (KOA) è un'artrosi degenerativa comune, caratterizzata da dolore cronico e disabilità, e la KOA relativamente grave porterà a danni strutturali irreversibili all'articolazione1. L'elevata prevalenza globale di KOA è diventata una delle principali sfide per la salute pubblica globale 2,3, che compromette seriamente la qualità della vita dei pazienti 4,5. Gli studi hanno dimostrato che la KOA colpisce più di 260 milioni di persone in tutto il mondo6. Con l'invecchiamento della popolazione, il tasso di prevalenza totale di KOA in Cina raggiunge il 17,0% oltre i 40 anni, il che rappresenta un pesante onere per le famiglie dellepersone colpite.
Secondo la medicina cinese, il KOA appartiene alla categoria della "paralisi"9 e il Classico di Medicina Interna dell'Imperatore Giallo associa tendini, ossa e carne alla paralisi. Quindi, dobbiamo prestare attenzione alla connessione tra la cartilagine, il muscolo, la sinovia e altri tessuti intorno all'articolazione del ginocchio in KOA. Nella medicina moderna, sia l'infiammazione muscolare che quella ossea, che sono componenti principali dell'omeostasi immunitaria dell'artrite, guidano la progressione del dolore da KOA. Tuttavia, la maggior parte degli studi si concentra sull'infiammazione della cartilagine e sull'infiammazione sinoviale nelle articolazioni ossee e c'è una scarsità di articoli che esaminano i fenomeni infiammatori nei muscoli scheletrici. Pertanto, sono necessarie ulteriori ricerche sul ruolo del muscolo scheletrico nell'infiammazione per ottenere una comprensione più completa del KOA e fornire idee per modalità di trattamento più efficaci. In una revisione della letteratura, abbiamo scoperto che l'inibizione del ligando di morte programmata del fattore immuno-correlato 1 (PD-L1) ha esacerbato la progressione di KOA10,11 e che c'era un'espressione differenziale di IL-15 e FOXO1 nel muscolo scheletrico dei pazienti con KOA 12, così come una significativa infiammazione del muscolo scheletrico nei pazienti con KOA allo stadio terminale. che era anche associato a cambiamenti nell'andatura. È stato dimostrato che il muscolo scheletrico può anche secernere fattori strettamente correlati all'immunità infiammatoria come IL-6 e che il TNF-α è anche strettamente correlato alla via PD-L1 e KOA13,14,15.
Attualmente, i trattamenti disponibili per KOA includono il controllo del peso, l'esercizio fisico, i farmaci e la chirurgia, che di solito includono iniezioni intra-articolari, farmaci analgesici, chirurgia artroscopica e osteotomia periprotesica del ginocchio16. Attualmente, la progressione della malattia da KOA non può essere completamente arrestata o invertita e, senza una chiara comprensione dei complessi meccanismi alla base del dolore da KOA, i pazienti con KOA sono a rischio di uso eccessivo di farmaci analgesici e di un'elevata incidenza di effetti collaterali8. La maggior parte delle strategie terapeutiche sono efficaci solo per brevi periodi e si concentrano solo sul sollievo temporaneo dei sintomi piuttosto che sulla patogenesi della malattia. Pertanto, il dolore da KOA rimane una priorità e una sfida per il trattamento, ponendo una seria sfida clinica. Tuttavia, Tuina può stimolare direttamente i muscoli scheletrici intorno all'articolazione interessata nel trattamento KOA e può fornire alcuni benefici. In combinazione con la descrizione precedente, è la terapia ideale per studiare il ruolo del tessuto muscolare scheletrico nel KOA e chiarire il ruolo del tessuto muscolare scheletrico nell'infiammazione può anche fornire un migliore supporto teorico per Tuina di KOA.
Gli studi hanno dimostrato che la massoterapia, la terapia manipolativa osteopatica e la manipolazione spinale possono aiutare ad alleviare il dolore e ripristinare la funzione corporea17,18. Queste manipolazioni possono agire sull'infiammazione locale e alleviare gli spasmi e l'analgesia attraverso un'azione meccanica esterna. Possono alleviare il dolore dopo l'artroplastica totale del ginocchio, ridurre l'uso di farmaci analgesici, promuovere il recupero postoperatorio e migliorare l'equilibrio biomeccanico19. Il massaggio svedese è fattibile nel trattamento dell'osteoartrite e può ridurre lo stress e migliorare la qualità della vita20. L'effetto terapeutico di Tuina su KOA è stato preceduto da alcuni studi.
In questo esperimento, il nostro team esplorerà se l'espressione di PD-L1 e dei relativi fattori infiammatori nel muscolo scheletrico può indurre KOA e promuoverne lo sviluppo sulla base del modello KOA indotto da MIA nei ratti. Tuina sarà anche implementato per vedere se può alleviare i sintomi di KOA causati dall'aumento dell'espressione del fattore infiammatorio. Tuina sarà combinato con l'inibizione di PD-L1 per dimostrare l'associazione tra la via PD-1 mediata da Tuina nell'infiammazione del muscolo scheletrico che influenza lo sviluppo di KOA e il dolore, gettando le basi per ulteriori studi multilivello sui meccanismi terapeutici dell'intervento di Tuina in KOA.
In sintesi, questo articolo descrive lo studio e l'elaborazione dei meccanismi dell'infiammazione del muscolo scheletrico nello sviluppo del KOA e del suo dolore, nonché gli effetti terapeutici del Tuina sul KOA, dal punto di vista dell'espressione del fattore immuno-infiammatorio, combinato con indicatori comportamentali correlati, per fornire prove di ricerca moderna per la teoria dello "squilibrio di tendini e ossa" nella medicina tradizionale cinese.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-PD-L1</td>
			<td>Abcam, Cambridge, MA, USA</td>
			<td>ab80276</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electric von Frey esthesiometer&#160;</td>
			<td>IITC/Life Science, Woodland Hills, CA, USA</td>
			<td>ALMEMO 2450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 9.0</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td></td>
			<td>Software for stastistical analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>monosodium iodoacetate</td>
			<td>Sigma-Aldrich Inc</td>
			<td>I9148</td>
			<td>Resolved into normal saline for injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pentasorbital sodium</td>
			<td>Sigma-Aldrich Inc</td>
			<td>P3761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague Dawley (SD) male rats</td>
			<td>Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd</td>
			<td>No. SCXK (Hu) 2017-0012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>thermal analgesia tester</td>
			<td>IITC/Life Science</td>
			<td>Model 390</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tuina intervention in sodium monoiodoacetate injection-induced rat model of knee osteoarthritis

L'artrosi del ginocchio (KOA), una comune malattia degenerativa delle articolazioni, è caratterizzata da dolore cronico e disabilità, che possono progredire fino a danni strutturali irreparabili dell'articolazione. Le indagini sul legame tra cartilagine articolare, muscoli, sinovia e altri tessuti che circondano l'articolazione del ginocchio in KOA sono di grande importanza. Attualmente, la gestione del KOA include modifiche dello stile di vita, esercizio fisico, farmaci e interventi chirurgici; tuttavia, manca ancora la delucidazione degli intricati meccanismi alla base del dolore correlato al KOA. Di conseguenza, il dolore da KOA rimane una sfida clinica chiave e una priorità terapeutica. È stato scoperto che Tuina ha un effetto regolatore sul sistema motorio, immunitario ed endocrino, spingendo l'esplorazione della possibilità che Tuina possa alleviare i sintomi del KOA, causati dalla sovraregolazione dei fattori infiammatori, e ulteriormente, se i fattori infiammatori nel muscolo scheletrico possono aumentare la progressione del KOA.
Sono stati randomizzati 32 ratti maschi di Sprague Dawley (SD) (180-220 g) in quattro gruppi di otto animali ciascuno: antiPD-L1 + Tuina (gruppo A), modello (gruppo B), Tuina (gruppo C) e chirurgia fittizia (gruppo D). Per i gruppi A, B e C, abbiamo iniettato 25 μL di soluzione di monoiodoacetato di sodio (MIA) (4 mg di MIA diluiti in 25 μL di soluzione salina sterile) nella cavità dell'articolazione del ginocchio destro e per il gruppo D, è stata iniettata la stessa quantità di soluzione fisiologica sterile. Tutti i gruppi sono stati valutati utilizzando i test meno stressanti (soglia di ritiro meccanico della zampa, latenza termica di ritiro della zampa, gonfiore dell'articolazione del ginocchio destro, punteggio Lequesne MG, temperatura cutanea) prima dell'iniezione e 2, 9 e 16 giorni dopo l'iniezione.

Knee osteoarthritis (KOA) is a common degenerative osteoarthritis, characterized by chronic pain and disability, and relatively severe KOA will lead to irreversible structural damage to the joint1. The high global prevalence of KOA has become a major global public health challenge2,3, which seriously impairs the quality of life of patients4,5. Studies have shown that KOA affects more than 260 million people worldwide6. With the aging of the population, the total prevalence rate of KOA in China is as high as 17.0% over the age of 40, which puts a heavy burden on the families of those affected7,8.
According to Chinese medicine, KOA belongs to the category of &#34;paralysis&#34;9, and the Yellow Emperor&#39;s Classic of Internal Medicine associates tendons, bones, and flesh with paralysis. Hence, we need to pay attention to the connection between the cartilage, muscle, synovium, as well as other tissues around the knee joint in KOA. In modern medicine, both muscle and bone inflammation, which are major components of the immune homeostasis of arthritis, drive the progression of KOA pain. However, most studies focus on cartilage inflammation and synovial inflammation in bone joints, and there is a paucity of articles examining inflammatory phenomena in skeletal muscles. Therefore, more research on the role of skeletal muscle in inflammation is needed to gain a more comprehensive understanding of KOA and provide ideas for more effective treatment modalities. In a review of the literature, we found that inhibition of the immune-related factor programmed death ligand 1 (PD-L1) exacerbated the progression of KOA10,11 and that there was differential expression of IL-15 and FOXO1 in the skeletal muscle of patients with KOA12, as well as significant skeletal muscle inflammation in patients with end-stage KOA, which was also associated with changes in gait. It has been shown that the skeletal muscle can also secrete factors closely related to inflammatory immunity such as IL-6, and that TNF-&#945; is also closely related to the PD-L1 pathway and KOA13,14,15.
Currently, available treatments for KOA include weight control, exercise, medication, and surgery, which usually include intra-articular injections, analgesic medication, arthroscopic surgery, and periprosthetic osteotomy of the knee16. Currently, KOA disease progression cannot be completely stopped or reversed, and without a clear understanding of the complex mechanisms underlying KOA pain, KOA patients are at risk for overuse of analgesic medications and a high incidence of side effects8. Most treatment strategies are effective only for short periods and focus only on the temporary relief of symptoms rather than on the pathogenesis of the disease. Therefore, KOA pain remains a priority and a challenge for treatment, posing a serious clinical challenge. However, Tuina can directly stimulate the skeletal muscles around the affected joint in KOA treatment and can provide some benefits. Combined with the previous description, it is the ideal therapy to study the role of skeletal muscle tissue in KOA, and clarifying the role of skeletal muscle tissue in inflammation can also provide better theoretical support for Tuina of KOA.
Studies have shown that massage therapy, osteopathic manipulative therapy, and spinal manipulation can help relieve pain and restore body function17,18. These manipulations can act on local inflammation and relieve spasms and analgesia through external mechanical action. They can relieve pain after total knee arthroplasty, reduce the use of analgesic drugs, promote postoperative recovery, and improve biomechanical balance19. Swedish massage is feasible in the treatment of osteoarthritis and can reduce stress and improve quality of life20. The therapeutic effect of Tuina on KOA has been preceded by certain studies.
In this experiment, our team will explore whether the expression of PD-L1 and related inflammatory factors in skeletal muscle can induce KOA and promote its development based on the MIA-induced KOA model in rats. Tuina will also be implemented to see whether it can alleviate KOA symptoms caused by increased inflammatory factor expression. Tuina will be combined with PD-L1 inhibition to demonstrate the association between Tuina-mediated PD-1 pathway in skeletal muscle inflammation affecting KOA development and pain, laying the foundation for further multi-level studies on the therapeutic mechanisms of Tuina intervention in KOA.
In summary, this paper describes the investigation and elaboration of the mechanisms of skeletal muscle inflammation in the development of KOA and its pain, as well as the therapeutic effects of Tuina on KOA, from the perspective of immune-inflammatory factor expression, combined with behavioral related indicators, to provide modern research evidence for the &#34;imbalance of tendon and bone&#34; theory in traditional Chinese medicine.

Autore in primo piano: Trattamento dell'artrosi del ginocchio con Tuina - Una nuova prospettiva 

Intervento di Tuina nel modello di ratto indotto dall'iniezione di monoiodoacetato di sodio di osteoartrite del ginocchio

We are trying to broaden the views on the research of knee osteoarthritis by introducing the perspective of refocusing on muscle inflammation during the pathological process of the KOA. There is a recent trend in non-pharmacological therapy treating the knee osteoarthritis. Therapy measures of traditional Chinese medicine, such as TNA and acupuncture, are receiving more and more recognition.There is a calling for detailed mechanism in the treatment. Our experiments indicates the possibility of chronic muscle inflammation in the process of knee osteoarthritis. It also points out the possibility of non-pharmacological therapy such as TNA to treat and control it.

Il protocollo descritto è stato implementato in un contesto clinico presso l'Ospedale Yueyang di Medicina Tradizionale Tradizionale Cinese e Occidentale Integrata. La Figura 1 mostra l'esatta posizione dei punti di agopuntura spinti nei ratti e la Tabella 1 illustra i benefici comuni della stimolazione di questi punti. La Tabella 2 e la Tabella 3 offrono prove convincenti di un notevole sollievo dal dolore ottenuto attraverso la terapia con...

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Questo protocollo descrive i metodi di intervento di Tuina nel modello di ratto di osteoartrite del ginocchio (KOA) indotto dall'iniezione di monoiodoacetato di sodio, che fornisce un riferimento per l'applicazione di Tuina in modelli animali di KOA. Questo protocollo studia anche il meccanismo efficace di Tuina per KOA e i risultati contribuiranno a promuoverne l'applicazione.

Knee osteoarthritis (KOA), a common degenerative joint disorder, is characterized by chronic pain and disability, which can progress to irreparable ...

Stiamo cercando di allargare le vedute sulla ricerca dell'artrosi del ginocchio introducendo la prospettiva di rifocalizzarsi sull'infiammazione muscolare durante il processo patologico del KOA. C'è una tendenza recente nella terapia non farmacologica per il trattamento dell'artrosi del ginocchio. Le misure terapeutiche della medicina tradizionale cinese, come il TNA e l'agopuntura, stanno ricevendo sempre più riconoscimenti.C'è una richiesta di un meccanismo dettagliato nel trattamento. I nostri esperimenti indicano la possibilità di infiammazione muscolare cronica nel processo di artrosi del ginocchio. Indica inoltre la possibilità di una terapia non farmacologica come la TNA per trattarla e controllarla.

tuina-intervention-sodium-monoiodoacetate-injection-induced-rat-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Tuina Intervention in Sodium Monoiodoacetate Injection-Induced Rat Model of Knee Osteoarthritis

1.1K Views.  Shanghai University of Traditional Chinese Medicine. Stiamo cercando di allargare le vedute sulla ricerca dell'artrosi del ginocchio introducendo la prospettiva di rifocalizzarsi sull'infiammazione muscolare durante il processo patologico del KOA. C'è una tendenza recente nella terapia non farmacologica per il trattamento dell'artrosi del ginocchio. Le misure terapeutiche della medicina tradizionale cinese, come il TNA e l'agopuntura, stanno ricevendo sempre più riconoscimenti.C'è una richiesta di un meccanismo dettagliato nel trattam...