Nossa pesquisa se concentra em imagens de ultrassom ultrarrápidas não invasivas do fígado usando uma plataforma de ultrassom disponível comercialmente. Tem como objetivo agilizar os processos de imagem e análise, fornecer referências anatômicas e aprimorar a avaliação quantitativa e qualitativa da vasculatura hepática. Desenvolvimentos recentes em nosso campo incluem ultrassom ultrarrápido, que detecta pequeno fluxo sanguíneo em pequenos vasos, aumenta a sensibilidade com o agente de contraste e melhora a resolução espacial.
Isso é obtido por meio de transmissões de ondas planas, aumentando a taxa de quadros e fornecendo estimativas detalhadas do volume sanguíneo em cada pixel. As tecnologias atuais encontradas em pesquisas em nosso campo são imagens de ultrassom ultrarrápidas e micro-CT 3D. Essas ferramentas, combinadas com a compreensão avançada da anatomia do fígado, melhoraram a precisão e a reprodutibilidade da imagem de ultrassom em modelos murinos.
Estabelecemos um protocolo de imagem de ultrassom ultrarrápido e não invasivo para vasculatura hepática de camundongo, permitindo medições precisas do volume sanguíneo sem agentes de contraste. Nossos achados incluem um procedimento padronizado para análise de dados, parametrificação vascular robusta e visualização clara das estruturas anatômicas, garantindo avaliações precisas e reprodutíveis da microcirculação. Nosso protocolo oferece imagens hepáticas não invasivas e de alta sensibilidade sem a necessidade de agentes de contraste, capturando fluxo sanguíneo lento e pequenos vasos sanguíneos.
Ele melhora a precisão removendo artefatos de movimento, quantificação padronizada e uma visão geral anatômica clara e mostra medições precisas e reprodutíveis. Para começar, posicione o mouse anestesiado preparado na almofada de aquecimento. Apare suavemente a barriga do animal com um aparador veterinário sem aplicar compressão no tórax ou abdômen. Então.
Aplique o creme depilatório por no máximo dois minutos. Retire o creme depilatório e limpe suavemente com água morna. Em seguida, posicione o animal dorsalmente em uma almofada de aquecimento e prenda suavemente as patas com fita adesiva.
Hidrate a pele com uma pequena quantidade de água morna. Usando uma seringa de 20 mililitros, aplique o gel de transmissão de ultrassom centrifugado diretamente na pele raspada. Em seguida, coloque o tanque de água impresso em 3D acima do animal.
Verifique se há ar entre o gel de transmissão de ultrassom e o termoplástico de polimetilpenteno do tanque de água e, em seguida, adicione água ao tanque. Depois de preparar o mouse para ultrassom Doppler ultrarrápido, inicie o software, crie uma sessão experimental no sistema e inicie o software de digitalização. Clique em sim na janela pop-up para centralizar os motores.
Para criar uma nova sessão experimental, selecione sessão no menu. No painel da sessão, preencha as informações necessárias, incluindo projeto, assunto, sessão, nome de usuário, comentário e tag. Clique em validar.
Em seguida, carregue uma sequência de ultrassom ultrassensível Doppler de 10 milissegundos com o botão de sequência de carga. Defina a profundidade de imagem entre um e 50 milímetros, com uma profundidade máxima de imagem de 50 milímetros. Para selecionar os parâmetros de visualização, escolha Doppler para obter imagens da vasculatura.
Escolha o método de compactação de imagem, logarítmico, raiz quadrada ou linear. Como alternativa, ajuste a faixa de contraste automaticamente ou manualmente usando controles deslizantes para opções de alto e baixo contraste. Para selecionar a escala do mapa de cores de preto para branco, marque a opção cinza ou, de preto avermelhado para amarelo, marque quente.
Selecione o plano de imagem com base em pontos de referência anatômicos. Alterne entre a visualização do Doppler e o modo B para se familiarizar com a anatomia dos lobos e da vasculatura do fígado. Clique no ícone de parada para interromper a visualização ao vivo.
Agora, navegue até o menu mover sonda para ajustar a sonda e selecione um plano. Para começar, prepare o animal para a imagem e posicione a sonda no tanque de água. Execute a operação da sonda e a seleção do plano e, em seguida, inicie uma aquisição Doppler com uma taxa de quadros de 10 milissegundos.
Vá para o menu fUS 2D para obter imagens das variações hemodinâmicas ao longo do tempo em uma posição específica. Na guia predefinida, defina o tempo entre as imagens para zero segundos para escolher um modo contínuo sem pausa entre as imagens e, em seguida, defina a duração total da gravação em segundos. Em seguida, pressione o botão de gravação para iniciar a aquisição 2D.
Quando a gravação terminar, pressione o botão Parar. Forneça um nome para a gravação adquirida para salvar o arquivo em um formato de digitalização na pasta da sessão. Uma janela pop-up aparecerá no final de cada gravação para salvar os dados automaticamente.
Abra o script de análise gui_analysis.m. Selecione a varredura e defina 10 regiões de interesse com um tamanho de voxel de dois por dois. Escolha 40 milissegundos para cada quadro para realizar a integração Doppler.
Em seguida, desenhe a periferia vascular do órgão de forma que as 10 ROIs sejam automaticamente pré-posicionadas entre as artérias claramente visíveis e possam ser ajustadas manualmente, se necessário. Para quantificar o volume médio de sangue hepático em unidades arbitrárias do total de 10 ROIs, estime automaticamente a média e o desvio padrão dos valores do quadro silencioso dentro da gravação de 30 segundos.
