Определение передаваемые через почву гельминтами статус-инфекции и физической подготовленности детей школьного возраста

Резюме

Хроническая инфекция, передаваемыми через почву гельминтами (STHs) вызывает нарушение всасывания, задержка роста, и тратить на растущего ребенка. Таким образом, вполне вероятно, что эти инфекции также уменьшить физической подготовленности детей. Здесь мы представляем два метода для диагностики STHs и 20-метровый челночный бег тестов для оценки физического детей.

Аннотация

Soil-transmitted helminth (STH) infections are common. Indeed, more than 1 billion people are affected, mainly in the developing world where poverty prevails and hygiene behavior, water supply, and sanitation are often deficient^1,2. Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, and the two hookworm species, Ancylostoma duodenale and Necator americanus, are the most prevalent STHs³. The estimated global burden due to hookworm disease, ascariasis, and trichuriasis is 22.1, 10.5, and 6.4 million disability-adjusted life years (DALYs), respectively⁴. Furthermore, an estimated 30-100 million people are infected with Strongyloides stercoralis, the most neglected STH species of global significance which arguably also causes a considerable public health impact^5,6. Multiple-species infections (i.e., different STHs harbored in a single individual) are common, and infections have been linked to lowered productivity and thus economic outlook of developing countries^1,3.

For the diagnosis of common STHs, the World Health Organization (WHO) recommends the Kato-Katz technique^7,8, which is a relatively straightforward method for determining the prevalence and intensity of such infections. It facilitates the detection of parasite eggs that infected subjects pass in their feces.

With regard to the diagnosis of S.stercoralis, there is currently no simple and accurate tool available. The Baermann technique is the most widely employed method for its diagnosis. The principle behind the Baermann technique is that active S.stercoralis larvae migrate out of an illuminated fresh fecal sample as the larvae are phototactic⁹. It requires less sophisticated laboratory materials and is less time consuming than culture and immunological methods⁵.

Morbidities associated with STH infections range from acute but common symptoms, such as abdominal pain, diarrhea, and pruritus, to chronic symptoms, such as anemia, under- and malnutrition, and cognitive impairment¹⁰. Since the symptoms are generally unspecific and subtle, they often go unnoticed, are considered a normal condition by affected individuals, or are treated as symptoms of other diseases that might be more common in a given setting. Hence, it is conceivable that the true burden of STH infections is underestimated by assessment tools relying on self-declared signs and symptoms as is usually the case in population-based surveys.

In the late 1980s and early 1990s, Stephenson and colleagues highlighted the possibility of STH infections lowering the physical fitness of boys aged 6-12 years^11,12. This line of scientific inquiry gained new momentum recently^13,14,15. The 20-meter (m) shuttle run test was developed and validated by Léger et al.¹⁶ and is used worldwide to measure the aerobic fitness of children¹⁷. The test is easy to standardize and can be performed wherever a 20-m long and flat running course and an audio source are available, making its use attractive in resource-constrained settings¹³. To facilitate and standardize attempts at assessing whether STH infections have an effect on the physical fitness of school-aged children, we present methodologies that diagnose STH infections or measure physical fitness that are simple to execute and yet, provide accurate and reproducible outcomes. This will help to generate new evidence regarding the health impact of STH infections.

протокол

1. Като-Кац техника

1. Место стандартных Като-Кац шаблон с отверстием для проведения 41,7 миллиграммов (мг) кала на предметное стекло микроскопа.
2. Совок 2-3 грамм (г) свежего фекального образца на кусок газеты или алюминиевую фольгу, а затем нажмите кусок проволоки или пластиковой сетки на вершине, чтобы она сито.
3. С помощью небольшой пластиковой лопаточкой, очистить просеянный материал с сеткой и полностью заполняет отверстие в Като-Кац шаблона с ним. Для удаления избытка фекального материала, уровня содержания отверстия с лопаточкой.
4. Вертикально удалить шаблон, не нарушая фекалии теперь придерживаясь стекле микроскопа. Шаблонов и шпателя можно мыть в воде с моющим средством, и использовать повторно.
5. Поместите кусок целлофана, предварительно пропитанного глицерином-малахитовый зеленый раствор, по крайней мере, 24 часов (ч), в течение фекальных образцов на предметном стекле микроскопа.
6. Для распространения фекалий в толстой капли, слегка нажмите чистый микро-рамки слайда к образцу слайдов, равномерно распределяя материал в круге диаметром чуть меньше, чем ширина стекле микроскопа.
7. Разрешить слайд, чтобы очистить в течение 30-60 минут (мин), в течение которого слайды должны храниться вдали от прямых солнечных лучей. Тогда, систематически изучить толстой капли под световым микроскопом (40-100-кратном увеличении). Подсчитайте количество STH яйца и стратификации их видов (например, A.lumbricoides, T.trichiura, и нематоды). Следует отметить, что другие яйца гельминтов (например, Schistosoma mansoni) также могут быть обнаружены с помощью этого метода и должны быть подсчитаны и записаны отдельно.
8. Чтобы получить стандартизированную оценку интенсивности заражения, обычно выражается как количество яиц на грамм стула (EPG), умножьте количество яйцо по 24 (24 х 41,7 мг ≈ 1 г).

2. Baermann техника

1. Установить стенд, который может содержать стеклянную воронку и прикрепить резиновую трубку, закрыл остроумиега клипа, на дно воронки.
2. Поместите сито или кусок проволоки экрана форму конуса, в воронке и слой его с куском марли медицинской.
3. Заполнить воронку с водопроводной водой и убедиться, что все настройки не течет.
4. Совок 20-30 г свежего стула на середину медицинской марли и убедитесь, что он полностью погружен в воду. Добавьте больше воды, если необходимо. Сложите марлю медицинскую по образцу.
5. Снизу, блеск искусственного света на воронку в течение 2 часов.
6. Слейте 50 миллилитров (мл) в нижней части воды в воронке в центрифуге трубки, осторожно выпуская клип на резиновой трубке.
7. Центрифуга собранной воды при 600 мкг (относительная центробежная сила) в течение 5 мин и осторожно вылейте супернатант, не нарушая осадка. Сохранил за последние несколько капель в трубке.
8. Повторное приостановить осадка и пипеткой 2 капли раствора на предметном стекле микроскопа и рассмотреть слайдпод световым микроскопом (40x увеличением для обнаружения и 100-400х увеличение для вида подтверждения). Первая стадия личинки (L1) С. stercoralis живы и активно двигаться под микроскопом.

3. 20-м челночный бег тест

1. Измерьте 20-м плоский и прямой бега и пометить его с шишками.
2. Помощь теста участник носить монитор сердечного ритма на запястье и соответствующий передатчик вокруг груди ^18. Это оборудование позволяет сердечного ритма участника должны быть измерены до и после теста и таким образом контролирует ли участник прилагает максимальное усилие.
3. Попросите участников бежать вперед и назад на курс, следуя темпам предварительно записанных звуковых сигналов разграничении 20-м кругов. Начиная с скоростью движения 8,5 км в час (км / ч), частоты сигналов, указывающих на 20-м интервалов увеличивается на эквивалент 0,5 км / ч каждые мин.
4. Убедитесь йна участника начинается новый 20-м интервале каждый раз, когда сигнал прозвучал и завершает его до следующего сигнал поступает.
5. Остановить участника, если он / она не в состоянии следить за темпом в течение двух последовательных 20-м интервалом.
6. Запишите самые высокие скорости движения указаны для последнего интервала которой участник завершены в полном объеме, а также пол и возраст участника.
7. Убедитесь, что частота сердечных сокращений достигнута в конце теста максимальная частота сердечных сокращений ребенка ^19. Если эта частота сердечных сокращений не будет достигнуто, ребенок может не оказали максимальное усилие, и, следовательно, тест следует повторить.
8. Оцените максимальной аэробной способности (VO ₂ макс) участника, используя уравнение выдвинутые Леже и сотрудников: VO ₂ макс = 31,025 + 3,238 * скорость (км / ч) - 3,248 * возраст (в годах) + 0,1536 * скорость (км / ч) * возраст (в годах).

4. Представитель Результаты

В пересчете наSTH диагноз с Като-Кац технику, уникальные характеристики различных яйца гельминтов позволяют выявлять большинства видов ^20. Яйца A.lumbricoides (примерно 45-75 микрометров (мкм) в длину и 35-50 мкм, шириной, рисунок 1) иметь толстые стены корпуса, чем яйца T.trichiura (рис. 2) и нематоды (рис. 3). Оплодотворенные яйца A.lumbricoides (рис. 1) имеет внешнюю белковую пальто, которое он выглядит золотисто-коричневого цвета, в то время как не-оплодотворенной яйцеклетке не хватает этого внешний слой и немного удлиненный и более общие. Яйца T.trichiura (около 50 мкм и 22 мкм шириной, рис 2), удлиненные и имеют различные полярные пробки. Нематоды яйца (примерно 64-76 мкм и 36-40 мкм, шириной, рисунок 3), с другой стороны, имеют очень тонкие стенки, а затем четко кольцо вокруг плотного скопления клетокВ центре яйца.

S.stercoralis L ₁ личинки (рис. 4) примерно 180-380 мкм в длину и имеют очень короткий ротовой полости. Различные полового зачатка (выделено с синей стрелкой на рисунке 4) можно наблюдать и в хвост личинки (выделено красной стрелкой на рисунке 4) имеет острый конец.

Как истинное влияние STH инфекций на физической подготовленности детей все еще ​​обсуждается ^13,14,15, нет ни одного представителя результате их воздействия в этой точке. Интерпретация 20-м трансфера результатов выполнения теста может быть выполнено различными способами. Физической подготовленности детей могут быть сопоставлены между инфицированных и неинфицированных предметов, которые похожи по возрасту и полу, другие потенциально значимые состояния здоровья, социально-экономический статус и культурные привычки. Это может быть сделано в кросс-секционное исследование ^13,14,15, гдеSTH-инфекции и состояния физической подготовленности инфицированных и неинфицированных детей оценивается в конкретный момент времени. Сила доказательств будет выше, когда после рандомизированное контролируемое испытание конструкции, где физической подготовленности детей школьного возраста оценивается до и после противоглистным / плацебо, учитывая как краткосрочные, так и долгосрочные оценки. Можно дальнейшем попытаться определить возможную зависимость доза-реакция между интенсивностью STH инфекций и физической подготовки и сравнить различные уровни multiparasitism ¹ с физической подготовке. В работе, представленной на Yap и сотрудников ^15, физическая подготовка, как изображено VO ₂ max, было обнаружено, что значительно уменьшена в детей, инфицированных T.trichiura по сравнению с детьми, которые не были инфицированы T.trichiura (рис. 5) .

FIGU . Re 1 Микроскопические изображения A.lumbricoides яиц: оплодотворенные (А) и неоплодотворенных (B) при увеличении 500x. Шкала бар = 50 мкм.

Рисунок 2. Микроскопическое изображение яйца T.trichiura под 500x увеличением. Шкала бар = 50 мкм.

Рисунок 3. Микроскопическое изображение яйца нематоды при 500х увеличение. Шкала бар = 50 мкм.

Рисунок 4. Микроскопическое изображение S.stercoralis L ₁ личинкой под 250х увеличение. Стрелки указывают хвост (красный) и полового зачатка (синий). Шкала бар = 100 мкм.

d/3966/3966fig5.jpg "/>
Рисунок 5. График, показывающий уровень физической подготовки детей, инфицированных T.trichiura по сравнению с уровнем физической подготовленности детей, не инфицированных T. trichiura.

Обсуждение

Три протоколы, описанные в этой статье, были проверены и выполнены в юго-западной части провинции Юньнань, Народной Республики Китай между членами Bulang этнических меньшинств ²¹ и в различных частях Африки ^6,13,14.

Есть несколько шаблонов, доступных для Kato-Кац техн...

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Название реагента	Компания	Номер в каталоге	Комментарии
Като-Кац комплект [400 пластиковых шаблонов с дыркой от 6 миллиметров (мм) (диаметр) в 1,5 мм толщиной шаблонов, 400 пластиковым шпателем; 20-м роли нейлон экран размером 80 меш; 20-м роли гидрофильного целлофана, 34 мкм.]	Vestergaard Франдсен		Обратите внимание, что глицерин-малахитовый зеленый решение не входит в этот комплект, но можно купить у любого химического поставщика.
Стеклянные воронки [около 8 сантиметров (см) в ширину и 6 см в глубину]			Стеклянную воронку для техники Baermann должны быть в состоянии удерживать около 60 мл воды. Thэлектронной размер резинового шланга и марли зависит от типа стекла воронки используется.
Биологический микроскоп	Олимп	CX21LED/CX21
Центрифугировать	Shanghai Medical Instruments группы	80 - 2T
Предварительно записанные сигналы	Bitworks Design	Команда Bleep Test Version 1.3.1	iPhone приложение
Монитор сердечного ритма	POLAR	FT1	Смотреть и передатчиком