Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Method Article
* Эти авторы внесли равный вклад
Здесь мы представляем Протокол описания техника Вено венозная экстракорпоральной мембранной оксигенации (Эмо) в не интубированных, спонтанно дыхание мыши. Мышиных модель Эмо может быть эффективно реализован в экспериментальных исследований острого и терминальной стадии заболевания легких.
Использования экстракорпоральной мембранной оксигенации (Эмо) существенно возросла в последние годы. Эмо стал надежной и эффективной терапии для острой и терминальной стадии заболевания легких. С увеличением клинической спроса и длительном использовании Эмо процедурные оптимизации и предотвращения повреждения нескольких органов имеют важнейшее значение. Целью настоящего Протокола является представить подробную методику Вено венозная Эмо в не интубированных, спонтанно дыхание мыши. Этот протокол демонстрирует технический дизайн Эмо и хирургические шаги. Эта модель мышиных Эмо облегчит изучения патофизиологии, связанных с Эмо (например, воспаление, кровоточивость и тромбоэмболических событий). Благодаря обилию генетически измененных мышей молекулярные механизмы, участвующие в осложнений, связанных с Эмо также может быть расчлененный.
Экстракорпоральной мембранной оксигенации (Эмо) является системой поддержки временной жизни, которая берет на себя функции легких и сердца разрешить обмен адекватный газообмен и перфузии. Хилл и др1 описал первый использования Эмо больных в 1972 году; Однако он только стал широко используется после ее успешного применения в ходе H1N1 пандемии гриппа в 20092. Сегодня Эмо обычно используется как спасательные процедуры в терминальной стадии сердца и легких заболеваний3. Вено венозная Эмо все чаще используется как альтернатива инвазивной механической вентиляции в awake, не интубированных, спонтанно дыхание пациентов с огнеупорной дыхательной недостаточности4.
Несмотря на широкое принятие разнообразных осложнений были зарегистрированы для Эмо5,6,7. Осложнения, которые могут быть испытаны больных на Эмо включают кровотечение, тромбоз, сепсис, тромбоцитопения, сбоев, связанных с устройством и эмболии. Кроме того синдрома системного воспалительного ответа (SIRS), что приводит к повреждению мульти органа хорошо описано, как клинически, так и в экспериментальных исследованиях8,9. Неврологических осложнений, таких как инфаркт мозга также часто поступают в пациентов, подвергающихся длительной терапии Эмо. Чтобы запутать дело, часто бывает трудно отличить ли осложнений, вызванных Эмо, сам или возникают из базовых расстройств, сопровождающих острый и терминальной стадии заболевания.
Конкретно изучить последствия Эмо для здорового организма, необходимо создать модель надежных экспериментальных животных. Есть очень мало сообщений о производительности Эмо на мелких животных и все ограничиваются крыс. На сегодняшний день, нет мыши модель Эмо был описан в литературе. Из-за наличия большого числа штаммов генетически модифицированные мыши создание эмо модель мыши позволит дальнейшее изучение молекулярных механизмов участвующих в осложнений, связанных с Эмо10,11.
Основываясь на наших ранее описанных мышиных модели искусственного кровообращения (КПБ)12, мы разработали метод стабильной Вено венозная Эмо в не интубированных, спонтанно дыхание мышей. Эмо цепи (рис. 1), содержащий отток и приток канюли, Перистальтический насос, Оксигенатор и воздух треппинга водохранилище, похож на нашей ранее описанные модели мышиных КПБ12 , за исключением имеющих меньший грунтовки объем (0,5 мл). Этот протокол показывает подробные методики, физиологических мониторинг и анализ газа крови участвующих в успешной процедуры Эмо.
Эксперименты были проведены на самцов мышей C57BL/6, в возрасте 12 недель. Это исследование было проведено в соответствии с требованиями немецкого животного закона под протокол TSA 16/2250.
1. материалы, подготовка
Примечание: Все шаги выполняются в чистой, не стерильных условиях. Стерильные условия потребуются, если животное не выжил после операции.
2. анестезия
3. хирургия
4. Вено венозная экстракорпоральной мембранной оксигенации и анализ газа крови
Примечание: Схема замкнутой цепи Эмо, см. Рисунок 1.
Этот протокол описывает метод Вено венозная Эмо в мыши. Эта модель является надежных и воспроизводимых и по сравнению с нашей ранее описанные модели КПБ с дыхательной и кровеносной ареста12,13, это менее технически требует установить.
Ранее мы описали успешной моделью КПБ в мыши12,13. Для реализации такой модели для острой или терминальной стадии заболевания легких, мы разработали схемы Вено венозная Эмо easy-to-use для мышей. Различные модели КПБ, Вено венозная Эмо не требует сложных хирурги...
Авторы не имеют ничего сообщать.
Этот проект был поддержан KFO 311 грант от Deutsche Forschungsgemeinschaft.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | in 1:1 with Tetraspan |
Tetraspan 6% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | in 1:1 with Sterofundin |
Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2,5 IU per ml of priming |
NaHCO3 8,4% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% in priming solution |
Carprofen | Zoetis Inc., USA | PZN:00289615 | 5mg/kg/BW |
1 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C10PU-MCA1301 | carotide artery |
2 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C20PU-MJV1302 | jugular vein |
8-0 Silk suture braided | Ashaway Line & Twine Co., USA | 75290 | ligature |
Isoflurane | Piramal Critical Care GmbH | PZN:9714675 | narcosis |
Spring Scissors - 6mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | instruments |
Spring Scissors - 2mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15000-03 | instruments |
Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | instruments |
Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | instruments |
Castroviejo Micro Needle Holder - 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | instruments |
Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | instruments |
Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instruments |
Isoflurane Vaporizer Drager 19.1 | Drägerwerk AG & Co. KGaA | anesthesia 1,3 -2,5% | |
Multichannel Data Aquisition Device with ISOHEART Software | Hugo Sachs Elektronik GmbH, Germany | invasive pressure, ECG, t °C | |
i-STAT portable device | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA | blood gas analysis | |
i-STAT CG4+ and CG8+ cartridges | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA | blood gas analysis | |
C57Bl/6 mice, male, 30 g, 14 weeks old | Charles River Laboratories | housed 1 week before |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены