JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Для реального времени обнаружения врожденной иммунной реакции на кожный ранения и инфекции стафилококк мышей описан подход. Путем сравнения LysM-EGFP мышей (которые обладают флуоресцентные нейтрофилов) с LysM-EGFP гибридных иммунодефицитных мыши штамм, мы заранее нашего понимания инфекции и разработки подходов к борьбе с инфекцией.

Аннотация

Золотистый стафилококк Инфекции (S. aureus), в том числе метициллин резистентный пятна, являются огромным бременем на систему здравоохранения. С показатели заболеваемости S. aureus инфекции восхождение ежегодно есть спрос на дополнительные исследования в его патогенности. Животные модели инфекционных заболеваний углублению нашего понимания ответа хост возбудителя и привести к развитию эффективной терапии. Нейтрофилы играть главную роль в врожденный иммунный ответ, который управляет инфекции S. aureus , формируя абсцесс стены от инфекции и содействия бактериальных разминирования; количество нейтрофилов, которые проникнуть инфекция кожи S. aureus часто коррелирует с исход заболевания. LysM-EGFP мышей, которые обладают расширенной Зеленый флуоресцентный белок (EGFP) вставлен в регионе промоутер лизоцима М (LysM) (выражается главным образом нейтрофилами), когда используется в сочетании с целом животных в естественных условиях флуоресценции изображений (FLI) обеспечивают средства количественного нейтрофилов эмиграция неинвазивно и продольно в раненых кожи. При сочетании с биолюминесцентных S. aureus штамм и последовательным в естественных условиях весь животных биолюминесцентных изображений (BLI), это возможность продольно контролировать как динамика нейтрофилов найма, так и в естественных условиях бактериальной нагрузки на сайте инфекции в наркотизированных мышей от начала инфекции резолюции или смерти. Мышей более устойчивы к воздействию ряда факторов вирулентности производимые S. aureus , способствующих эффективному колонизации и инфекции в организме человека. Иммунодефицитных мышей предоставляют более чувствительных животных модель для изучения стойких S. aureus инфекций и терапии способность повысить innate иммунных реакций. Здесь мы характеризуют ответы в LysM-EGFP мышей, которые были выведены в MyD88-недостаточным мышей (LysM-EGFP × MyD88- / - мышей) наряду с одичал тип LysM-EGFP мышей расследовать S. aureus кожа раневой инфекции. Многоспектральный одновременного обнаружения включено исследование динамики нейтрофилов набора с помощью в естественных условиях FLI, бактериальной нагрузки с помощью BLI в естественных условиях и ранозаживляющие продольно и неинвазивно со временем.

Введение

Золотистый стафилококк (S. aureus) приходится большинство инфекции кожи и мягких тканей (ИКМТ) в Соединенных Штатах1. Распространенность метициллин резистентный S. aureus (MRSA) за последние два десятилетия2, мотивации изучения механизмов сохранения и открытия новых стратегий лечения инфекций неуклонно растет. Стандарт медицинской помощи для MRSA инфекций является системной антибактериальной терапии, но MRSA становится все более устойчивыми к антибиотикам за время3 и эти препараты могут уменьшить пользу микрофлора хозяина, вызывая негативных последствий для здоровья, особенно в 4детей. Доклинические исследования изучили альтернативные стратегии для лечения MRSA инфекции5, но перевод этих подходов к клинике оказался сложным из-за появления факторов вирулентности, которые сорвать хост иммунных ответов6. Анализировать динамику хост возбудитель диска S. aureus ИКМТ, мы сочетаем неинвазивной и продольных индикация числа нейтрофилов набранных на раны кровать с кинетической мер бактериальной изобилия и ранение области.

Нейтрофилы являются наиболее распространенными циркулирующих лейкоцитов в организме человека и первый responders бактериальной инфекции7. Нейтрофилы являются необходимым компонентом для эффективного пребывания ответ против инфекции S. aureus вследствие их бактерицидные механизмов, включая производство реактивнооксигенных видов, протеаз, антимикробных пептидов и функциональных реакций включая фагоцитоза и нейтрофилов внеклеточного ловушку производства8,9. Человека пациентов с генетическими дефектами в нейтрофильные функции, такие как хроническая гранулематозная болезнь и Синдром Чедиака-Хигаси, показывают, повышенной восприимчивости к инфекции S. aureus . Кроме того, пациенты с генетическими (например врожденные нейтропении) и приобретенные (например, нейтропения, видели в химиотерапии больных) дефекты в нейтрофильные чисел также очень восприимчивы к инфекции S. aureus 10. Учитывая важность нейтрофилов в очистке инфекции S. aureus , укрепления их иммунной или настройки их число в пределах S. aureus поражения может оказаться эффективной стратегии в решении инфекции.

За последнее десятилетие трансгенных мышей с флуоресцентным нейтрофилов журналистами были разработаны для изучения их людьми11,12. Сочетая нейтрофилов репортер мышей с целом животных методы визуализации позволяет пространственно-временных анализ нейтрофилов в органах и тканях. При сочетании с биолюминесцентных штаммов S. aureus, это позволяет отслеживать накопление нейтрофилов в ответ на S. aureus изобилия и упорство в контексте бактериальной вирулентности факторов, которые прямо и косвенно возмущают нейтрофилов чисел в пораженной ткани13,14,,1516.

Мышей менее подвержены механизмов уклонения вирулентности и иммунной S. aureus , чем люди. Таким образом, мышах одичал типа не может быть идеальной моделью животных для изучения эффективности с учетом терапевтического лечения хронических S. aureus инфекции. MyD88-недостаточным мышей (т.е., MyD88- / - мышей), ослабленным мыши штамм, который не хватает функциональной интерлейкина-1 рецепторов (IL-1R) и Толл подобный рецептор (TLR) сигнализации, шоу подверженности заражению S. aureus , по сравнению с мышах одичал тип17 и ухудшение оборота нейтрофилов к сайту S. aureus инфекции кожи18. Разработка мыши штамм, который обладает репортером флуоресцентный нейтрофилов в MyD88- / - мышей предоставляет альтернативную модель для исследования эффективности терапии для лечения инфекции S. aureus , по сравнению с текущей нейтрофилов Репортер мышей.

В этом протоколе мы характеризуют инфекции Стафилококк золотистый в ослабленным мышей- / - × MyD88 LysM-EGFP и сравнить время курс и резолюции инфекции с LysM-EGFP мышей. LysM-EGFP × MyD88 мышей- / - развитие хронической инфекции, которые не удалось решить, и 75% поддаваться инфекции после 8 дней. Значительный дефект в первоначальном наборе нейтрофилов происходит более 72 ч воспалительной стадии инфекции, и 50% меньшее количество нейтрофилов набирать на последней стадии инфекции. Повышенная восприимчивость × LysM-EGFP, MyD88- / - мышей делает это особое напряжение строгий доклинических модель для оценки эффективности новых терапевтических методов таргетинга инфекции S. aureus , по сравнению с текущей модели Используйте мышь одичал типа, особенно техники, стремясь повысить врожденный иммунный ответ против инфекции.

протокол

Все мыши исследования были рассмотрены и одобрены институциональный уход животных и использования Комитетом на UC Дэвис и были выполнены в соответствии с руководящими принципами закона расширение исследований здоровья и Закон о благосостоянии животных. Убедитесь в том использовать стерильные перчатки при работе с животными.

1. мышь источник и жилищного строительства

  1. Производные LysM-eGFP мышей на фоне генетических C57BL/6J как описано ранее12. Производные LysM-EGFP × MyD88- / - мышей путем скрещивания LysM-EGFP мышей с MyD88- / - мышей на фоне C57BL/6J.
  2. Дом мышей в виварий. Для этих исследований животные были размещены в университете Калифорнии, Дэвис в группах до одного размещены следующие хирургии и хирургии. Используйте мышь в возрасте 10-16 недель.

2. бактериальные подготовка и количественная оценка

  1. Удаление биолюминесцентных штамма S. aureus интереса от-80 ° C для хранения таять на льду. Полоска на плите говядины крови агар 5%. Инкубируйте прожилками пластины в увлажненные инкубатора при 37 ° C ночь (16 ч).
    Примечание: В настоящем Протоколе, был использован штамм ALC2906 SH1000. Этот штамм содержит плазмиду pSK236 Трансфер с промоутером пенициллин связывая протеин 2, сливается с кассеты репортер luxABCDE от Photohabdus luminescens18.
  2. Подготовка tryptic соевый бульон (TSB) путем смешивания 0,03 г порошка TSB мл чистой воды и автоклав TSB стерилизовать. Когда остынет, добавьте любые необходимые антибиотики, используя стерильную методику. В этом протоколе добавьте 10 мкг/мл хлорамфеникол18 TSB выбрать для выражения плазмида pSK236 трансфер, который содержит кассеты luxABCDE биолюминесценции.
  3. Выберите 3-4 отдельными колониями от S. aureus пластины в БСЭ с 10 мкг/мл хлорамфеникол начать ночь культуры. Инкубируйте бактерий на инкубирования шейкер при 37 ° C ночь (16 ч).
  4. Начало новой бактериальной культуры от ночи культуры путем разбавления образца 1:50 в БСЭ с хлорамфеникола 10 мкг/мл. Культура в инкубирования шейкер на 200 об/мин и 37 ° C.
  5. Два часа после разделения S. aureus, контроля оптической плотности на 600 Нм (OD600) на спектрофотометре. Наблюдать за ОД600 против время найти середине логарифмической фазы роста. Для ALC2906 SH1000 штамма ОД600 0.5 середине логарифмических и соответствует концентрации 1 x 108 кое/мл (рис. 1).
  6. Когда ОД600 0,5, промойте бактерий 1:1 с ледяной DPBS. Центрифуга для бактерий для 10 мин на 3000 x g и 4 ° C. Тщательно сцеживаться супернатант и добавить дополнительные охлажденной DPBS и вихревой тщательно. Центрифуга еще раз за 10 мин на 3000 x g и 4 ° C.
  7. Осторожно декантируют супернатант. Ресуспензируйте бактериальных Пелле в нужной концентрации. Для этих исследований сбор 3 мл ALC2906 SH1000 и Ресуспензируйте в 1,5 мл PBS, соотнося к концентрации бактерий около 2 x 108 кое/мл. Держите бактерии на льду до использования.
  8. Чтобы проверить концентрация бактерий, разбавляют 100 мкл мэм бактериальных образца и картирование в PBS. Тарелка 20 мкл аликвоты на плите агар. Инкубировать при 37 ° C в увлажненные инкубатор для 16 h. количество CFUs валовой экзамен и рассчитать бактериальных концентратов следующий день.

3. эксцизионная кожи Wounding и прививка с S. aureus

  1. Управлять 100 мкл бупренорфина гидрохлорида 0,03 мг/мл (~0.2 мг/кг) для каждой мыши через внутрибрюшинной инъекции.
  2. Двадцать минут после инъекции, место 2-4 мышей в камере с 2-3 л кислорода с 2-4% изофлюрановая. Как только мышей полностью наркоз, передача мышей, один момент для носовой конус подключены к 2-3 л кислорода с 2-4% изофлюрановая. Убедитесь, что мышь полностью под наркозом, твердо щипать каждый задние лапы между большим и указательным пальцами. Если животное не реагирует на крайнем случае перейдите к следующему шагу.
  3. Бритье 1 дюйм секцией 2 дюйма на задней части мыши с Электрические ножницы и очистить область меха вырезки с помощью чистых протрите или марлей. Избегайте использования депиляционный крем, потому что это может вызвать избыточное воспаление.
  4. Очистите от задней части мыши сначала с 10% повидон йод смоченную марлю и затем с 70% этанол смоченной марлей. Чистота области в спирали, перемещение наружу от центра области хирургического. Подождите примерно 1 мин для хирургического области высохнуть до операции.
  5. Держите бритая сзади мыши свободно между двумя пальцами и твердо нажмите биопсии удар стерильным 6 мм в центре области подготовленных хирургического. Не тяните кожу подтянутой.
    1. Твист удар биопсии для создания круговой контур на коже, полностью проходит через кожу в по крайней мере один раздел набросков. Будьте осторожны, чтобы не нарезать базовой фасции или ткани.
    2. Используйте стерильные ножницы, щипцы для прорезать эпидермиса и дермы круговой схеме, запечатленный удар биопсии.

4. S. стафилококк прививка

  1. Заполните 28 G инсулина шприц с желаемой биолюминесцентных бактериальных отливках. В этом исследовании, применять в концентрации 1 x 108 кое/мл (50 мкл). Не управлять более чем 100 мкл тома.
  2. Придать 50 мкл отливках между фасции и ткани в центре раны на задней части мыши. Убедитесь, что модификатор образует пузырь в центре раны с минимальной утечки или рассеяния.
    1. Вытяните дермы в сторону, возьмите шприц почти параллельно в ткани и медленно толкать шприц в ткани, пока не почувствовал резкое снижение сопротивления, который указывает пирсинг фасции. Тщательно вести шприц в центре раны и обойтись отливках медленно. Медленно снимите шприц из животного.
  3. Придать такой же объем стерильных PBS в раны неинфицированных животных, как описано выше.
  4. Вернуть животное к своей клетке. Поместить клетку под тепла лампы или поверх грелку и контролировать животное до выздоровления от анестезии.

5. в Vivo BLI и FLI

  1. Инициализируйте весь животных томографа через инструмент программного обеспечения. Анестезировать мышей в камере получать 2-3 л кислорода с 2-4% изофлюрановая. Доставить анестезии nosecones внутри томографа.
  2. Поместите мышь раненых и инфицированных в томографа. Поместите указатель мыши таким образом, что раны как плоский как можно скорее. Используйте следующие настройки последовательности изображений мышей.
    1. Выберите режим визуализации люминесценции и сфотографировать . Выдержка — 1 мин на небольших биннинга и F/stop 1 (люминесценции) и F/стоп 8 (фотография). Фильтр выбросов является открытым. Нажмите кнопку получить для записи образа.
    2. Выберите режим визуализации флуоресценции и сфотографировать . Время экспозиции-1 s на небольших биннинга и F/stop 1 (флуоресценции) и F/стоп 8 (фотография) Длина волны возбуждения 465/30 Нм и длиной волны 520/20 Нм выбросов с Лампа высокая интенсивность. Нажмите кнопку получить для записи образа.
  3. Вернуть животное его клетке и монитор до выздоровления от анестезии.
  4. Изображения мышей ежедневно, как описано выше.

6. анализ

  1. Открытые изображения поддаются количественной оценке.
  2. Место большой круговой области интереса (ROI) над районом всю рану, включая окружающие кожи для каждой мыши на изображении. Нейтрофилов в естественных условиях FLI EGFP сигналов и сигналов в естественных условиях BLI S. aureus выходят за пределы края раны после нескольких дней и были включены в эти исследования (рис. 2A и 2B). Нажмите кнопку Мера ROI и записи значения для средней потока для каждой мыши. Участок средний поток времени против каждого сигнала (p/s).
  3. Если абсолютное число нейтрофилов или Стафилококк золотистый в рану, выполните следующие эксперименты.
    1. Соотнести нейтрофилов чисел в естественных условиях сигналы FLI EGFP, ранение мышей C57BL/6J как описано выше и передавать широкий спектр костного мозга, полученных нейтрофилов (5 x 105 до 1 x 10-7) LysM-EGFP или LysM-EGFPxMyD88- / - доноров непосредственно на вершине различные раны. Изображение как описано выше и соотносятся в естественных условиях EGFP FLI сигналов на известное количество нейтрофилов.
    2. Чтобы сопоставить S. aureus кое в естественных условиях BLI сигналы, раны и заразить мышей, как описано выше. На 1 день после инфекции записи в естественных условиях BLI сигналы от мышей и немедленно усыпить и холод туши. Акцизный рану, гомогенизировать ткани и тарелка бактериальных разведений на агар для ночи инкубации. На следующий день, количество колоний для определения кое на рану.
  4. Для измерения раны исцеления подходят круговой ROI над краем раны и мера области раны (2см) и сюжет дробных переход от базовых против времени (рис. 2 c).

7. Статистика

Примечание: Все данные представлены как средние ±SEM. считались статистически значимыми p < 0,05

  1. Определить различия между двумя группами на один день с использованием метода Holm-Sidak, альфа = 0,05 и анализировать каждый момент индивидуально, не предполагая последовательно SD.
  2. Сравните различия между несколькими группами в тот же день, односторонний дисперсионный анализ с нескольких сравнений posttest Тьюки. Выживание между экспериментальной группами была проанализирована методом Mantel-Кокс.

Результаты

LysM-EGFP × MyD88- / - мышей более восприимчивы к инфекции S. aureus , чем LysM-EGFP мышей

Штамма S. aureus , используемые в данном исследовании, ALC290618, был построен с плазмида, содержащий люкс конструкцию, которая производ...

Обсуждение

S. aureus инфекции модели, которые используют биолюминесцентных S. aureus инфекции в флуоресцентные нейтрофилов репортер мыши в сочетании с передовыми методами всего животных в естественных условиях оптических изображений выдвинули наши знания о врожденной иммунного ответа на инф...

Раскрытие информации

Ллойд S. Миллер получил грантовую поддержку от визуальной, Pfizer, Regeneron, Чан Сун-Шионг Nanthealth фонд и консалтинговые услуги от применения инновационных технологий биотерапевтических Noveome и Чан Сун-Шионг Nanthealth фонд, которые не имеют отношения к работе в этой статье. Другие авторы имеют ничего не разглашать.

Благодарности

Эта работа была поддержана национальными институтами из здравоохранения грантов R01 AI129302 (чтобы S.I.S.) и программу обучения в области фармакологии: от скамьи в постели на UC Дэвис (низ T32 GM099608 до L.S.A). Молекулярная и геномных Imaging (CMGI) на университета Калифорнии Дэвис условии превосходно технологическую поддержку.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
14 mL Polypropylene Round-Bottom TubeFalcon352059
6 mm Disposable Biopsy PunchIntegra Miltex33-36
Bioluminescent S. aureusLloyd Miller, Johns Hopkins ALC 2906 SH1000
Bovine Blood Agar, 5%, Hardy DiagnosticsVWR10118-938
Buprenoprhine hydrochloride injectableWestern Medical Supply72920.3 mg/mL
C57BL/6J MiceJackson Labratory000664
Chloramphenicol (crystalline powder)Fisher BioReagentsBP904-100
DPBS (1x)Gibco 14190-144
Insulin SyringesBecton, Dickson and Company3294610.35 mm (28 G) x 12.7 mm (1/2'')
IVIS Spectrum In Vivo Imaging SystemPerkin Elmer124262
Living Image Software – IVIS Spectrum SeriesPerkin Elmer128113
LysM-eGFP MiceThomas Graff Albert Einstein College of New York NA
Microvolume SpectrophotometerThermoFisher ScientificND-2000
MyD88 KO MiceJackson Labratory009088
Non-woven spongesAMD- Ritmed IncA2101-CH5 cm x 5 cm
Povidone Iodine 10% SolutionAplicare697731
Prism 7.0GraphPad SoftwareLicense 
Tryptic Soy BrothBecton, Dickson and Company211825

Ссылки

  1. Moran, G. J., et al. Methicillin-Resistant S. aureus Infections among Patients in the Emergency Department. New England Journal of Medicine. 355 (7), 666-674 (2009).
  2. Suaya, J. A., et al. Incidence and cost of hospitalizations associated with Staphylococcus aureus skin and soft tissue infections in the United States from 2001 through 2009. BMC Infectious Diseases. 14 (1), 296 (2014).
  3. Ventola, C. L. The antibiotic resistance crisis: part 1: causes and threats. P & T : a Peer-Reviewed Journal for Formulary Management. 40 (4), 277-283 (2015).
  4. Blaser, M. J. Antibiotic use and its consequences for the normal microbiome. Science. 352 (6285), 544-545 (2016).
  5. Hilliard, J. J., et al. Anti-Alpha-Toxin Monoclonal Antibody and Antibiotic Combination Therapy Improves Disease Outcome and Accelerates Healing in a Staphylococcus aureus Dermonecrosis Model. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 59 (1), 299-309 (2015).
  6. Proctor, R. A. Recent developments for Staphylococcus aureus vaccines: clinical and basic science challenges. European Cells & Materials. 30, 315-326 (2015).
  7. Mölne, L., Verdrengh, M., Tarkowski, A. Role of Neutrophil Leukocytes in Cutaneous Infection Caused by Staphylococcus aureus. Infection and Immunity. 68 (11), 6162-6167 (2000).
  8. Kolaczkowska, E., Kubes, P. Neutrophil recruitment and function in health and inflammation. Nature Reviews Immunology. 13 (3), 159-175 (2013).
  9. Borregaard, N. Neutrophils, from Marrow to Microbes. Immunity. 33 (5), 657-670 (2010).
  10. Miller, L. S., Cho, J. S. Immunity against Staphylococcus aureus cutaneous infections. Nature Reviews Immunology. 11 (8), 505-518 (2011).
  11. Hasenberg, A., et al. Catchup: a mouse model for imaging-based tracking and modulation of neutrophil granulocytes. Nature Methods. 12 (5), 445-452 (2015).
  12. Faust, N., Varas, F., Kelly, L. M., Heck, S., Graf, T. Insertion of enhanced green fluorescent protein into the lysozyme gene creates mice with green fluorescent granulocytes and macrophages. Blood. 96 (2), 719-726 (2000).
  13. Falahee, P. C., et al. α-Toxin Regulates Local Granulocyte Expansion from Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Staphylococcus aureus-Infected Wounds. Journal of immunology. 199 (5), 1772-1782 (2017).
  14. Kim, M. -. H., et al. Dynamics of Neutrophil Infiltration during Cutaneous Wound Healing and Infection Using Fluorescence Imaging. Journal of Investigative Dermatology. 128 (7), 1812-1820 (2008).
  15. Liese, J., Rooijakkers, S. H. M., Strijp, J. A. G., Novick, R. P., Dustin, M. L. Intravital two-photon microscopy of host-pathogen interactions in a mouse model of Staphylococcus aureus skin abscess formation. Cellular Microbiology. 15 (6), 891-909 (2013).
  16. Bogoslowski, A., Butcher, E. C., Kubes, P. Neutrophils recruited through high endothelial venules of the lymph nodes via PNAd intercept disseminating Staphylococcus aureus. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115 (10), 2449-2454 (2018).
  17. Takeuchi, O., Hoshino, K., Akira, S. Cutting Edge: TLR2-Deficient and MyD88-Deficient Mice Are Highly Susceptible to Staphylococcus aureus Infection. The Journal of Immunology. 165 (10), 5392-5396 (2000).
  18. Miller, L. S., et al. MyD88 Mediates Neutrophil Recruitment Initiated by IL-1R but Not TLR2 Activation in Immunity against Staphylococcus aureus. Immunity. 24 (1), 79-91 (2006).
  19. Macedo, L., et al. Wound healing is impaired in MyD88-deficient mice: a role for MyD88 in the regulation of wound healing by adenosine A2A receptors. The American Journal of Pathology. 171 (6), 1774-1788 (2007).
  20. Cho, J. S., et al. Neutrophil-derived IL-1β Is Sufficient for Abscess Formation in Immunity against Staphylococcus aureus in Mice. PLoS Pathogens. 8 (11), e1003047 (2012).
  21. Granick, J. L., et al. Staphylococcus aureus recognition by hematopoietic stem and progenitor cells via TLR2/MyD88/PGE2 stimulates granulopoiesis in wounds. Blood. 122 (10), 1770-1778 (2013).
  22. Kim, M. H., et al. Neutrophil survival and c-kit+-progenitor proliferation in Staphylococcus aureus-infected skin wounds promote resolution. Blood. 117 (12), 3343-3352 (2011).
  23. Foster, T. J. Immune evasion by staphylococci. Nature Reviews Microbiology. 3 (12), 948-958 (2005).
  24. Gordon, R. J., Lowy, F. D. Pathogenesis of Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Infection. Clinical Infectious Diseases. 46 (Supplement_5), S350-S359 (2008).
  25. Cho, J. S., et al. Neutrophil-derived IL-1β Is Sufficient for Abscess Formation in Immunity against Staphylococcus aureus in Mice. PLoS Pathogens. 8 (11), e1003047-e1003020 (2012).
  26. Bernthal, N. M., et al. A mouse model of post-arthroplasty Staphylococcus aureus joint infection to evaluate in vivo the efficacy of antimicrobial implant coatings. PLoS ONE. 5 (9), e12580 (2010).
  27. Plaut, R. D., Mocca, C. P., Prabhakara, R., Merkel, T. J., Stibitz, S. Stably Luminescent Staphylococcus aureus Clinical Strains for Use in Bioluminescent Imaging. PLoS ONE. 8 (3), e59232 (2013).
  28. Dillen, C. A., et al. Clonally expanded γδ T cells protect against Staphylococcus aureus skin reinfection. The Journal of Clinical Investigation. 128 (3), 1026-1042 (2018).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

144

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены