JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Двухступенчатый кожный канцерогенез индуцируется двумя местно прикладными химическими веществами. Мутаген 7,12-диметилбенцзазазазас) вызывает мутации в эпидермальных клетках и непрерывное применение стимулятора общего роста 12-O-Tetradecanoyl phorbol-13-ацетат ускоряет формирование папилломы кожи.

Аннотация

Рак является одним из самых разрушительных заболеваний человека. Экспериментальные модели рака важны для получения информации о сложном интерплене различных типов клеток и генов в продвижении прогрессирования опухоли и предоставить платформу для тестирования эффективности различных терапевтических подходов. Одной из наиболее часто используемых экспериментальных моделей воспалительного рака является двухступенчатая модель канцерогенеза DMBA-TPA. Формирование опухоли индуцируется в этой модели путем местного применения двух различных химических веществ, 7,12-диметилбенза (DMBA) и 12-O-Tetradecanoyl форбол-13-ацетат (TPA), которые вместе вызывают образование папилломы в коже. В качестве основного результата является формирование папилломы в коже, модель является идеальным, надежным и воспроизводимым способом решения как инициации опухоли (без опухолевого выживания) и прогрессирования опухоли (количество и размер видимых опухолей). Эффекты лечения DMBA-TPA передаются через воспалительный механизм, что делает эту модель особенно подходящей для изучения роли иммунной системы в формировании опухоли. Тем не менее, эта модель ограничивается кожи и других поверхностей, где химические вещества могут быть применены на. Подробный протокол предоставляется в этой статье, чтобы успешно использовать модель.

Введение

Рак является одной из ведущих причин смерти в мире. Поэтому существует спрос на разработку надежных экспериментальных моделей заболеваний, чтобы лучше понять болезнь, а также изучить потенциальные терапевтические подходы. Один из наиболее часто используемых экспериментальных моделей in vivo для изучения развития рака кожи является химически индуцированной двухступенчатой модели канцерогенеза кожи1,2. Модель предоставляет инструмент для изучения инициации опухоли, поощрения и прогрессирования в дополнение к конкретным событиям, таким как инфильтрация иммунных клеток и ангиогенез.

Для использования двухступенчатой модели канцерогенеза кожи, задняя кожа мышей лечится двумя различными химическими веществами, которые вместе вызывают образование опухоли. Модель инициируется с низкой дозой мутагена, DMBA, а затем длительное воздействие опухолевого промотора, TPA3 (Рисунок 1). DMBA устраняет ДНК случайнымобразом,образуя ковалентные аддукты с ДНК эпидермальных клеток и первичных кератиноцитов стволовых клеток4,5,6,7. Некоторые из этих случайных мутаций происходят в протоонкогене, таких как Hras1 (мутации в Красе и Нрасе также обнаружены) и преобразование протоонкогенов в онкогены приводит к образованию опухоли при надлежащих стимулах. TPA, в свою очередь, является наиболее часто используемым средством роста опухоли. Его молекулярная цель - протеина киназа C (PKC)8. TPA также активирует Wnt / катенин сигнализации, что имеет решающее значение для формирования опухоли в модели9. Повторное и длительное воздействие рекламирующего агента приводит к усилению клеточной сигнализации, увеличению выработки факторов роста и локальной воспалительной реакции, которые проявляются из-за повышенного синтеза ДНК и проникновения воспалительных клеток в обработанную кожу.

Ключевые воспалительные посредники в модели DMBA-TPA были определены10. Интерлейкин-17А (IL-17A), как известно, особенно опухолевых в модели DMBA-TPA11,12. Он работает в синергии с интерлейкином 6 (IL-6) и участвует в макрофаге и нейтрофилов вербовки13,14. Кроме того, было показано, что CD4и Т-клетки и нейтрофилы опухолевые в модели DMBA-TPA. Наконец, макрофаги могут также способствовать опухолевому в модели15,16,17.

Во время этапа продвижения, пролиферация клеток мутировавших клеток усиливается и устойчивая гиперплазия эпидермиса поддерживается1. Это приводит к развитию папилломы в коже через 10-20 недель, после чего папилломы начинают преобразовываться в злокачественные опухоли, плоскоклеточные карциномы (СКК)2. Однако, менее 10% папиллом прогрессирует до злокачественных новообразований, хотя этот процент также зависит от генетического фона мышей2,18. На протяжении десятилетий не было известно, какой тип клеток были первоначально мутировали в опухолях, ведущих к злокачественности, хотя некоторые исследования сообщили четко различные особенности в злокачественных опухолей по сравнению с доброкачественными папилломы19,20. Тем не менее, недавние исследования значительно увеличили наше понимание клонального происхождения образования опухоли в модели DMBA-TPA21. 22. 23. Было продемонстрировано, что как костного мозга полученных эпителиальных клеток и волосяного фолликула стволовых клеток способствуют образованию опухоли22. Этап конкретных линий отслеживания исследований обнародовал, что доброкачественные папилломы моноклонального происхождения, но они вербуют новые эпителиальные популяции клеток21,23. Однако, только один из клонов клетки действует как водитель для канцерогенеза; он содержит мутацию Hras23. Прогрессирование к образованию карциномы связано с клональной развертки23.

Канцероген DMBA инициирует формирование папилломы и TPA способствует росту опухоли. Таким образом, инициация опухоли может быть изучена отдельно от продвижения, прервав эксперимент до периода лечения TPA. По мере того как прогрессирование тумора изучено еженедельно оно предлагает большую возможность для детального анализа роста тумора в течении изучения. Поскольку опухоли генерируются внешними химическими веществами, онкогенная мутация в зародышевой линии не нужна. Таким образом, изучение влияния генетического фона (например, нокаут/трансген против дикого типа) на опухолевый генез является простым2. В целом, модель рака кожи DMBA/TPA является особенно полезным подходом для изучения роли иммунной системы в прогрессировании опухоли, а также для оценки инициирования опухоли и продвижения шагов независимо или взаимозависимо.

figure-introduction-5565
Рисунок 1: DMBA-TPA-индуцированной кожи канцерогенез модели контура. Канцероген DMBA местно применяется для индуцирования мутаций ДНК в фазе инициации модели. Стимулирующий рост агент TPA вводится 2 раз в неделю для повышения пролиферации клеток на этапе продвижения, что приводит к развитию папиллом в коже. Звери приносятся в жертву после того, как папиллома ответ достигает плато, как правило, в течение нескольких недель 15-20, в зависимости от генетического фона мышей. Небольшая часть папиллом может далее развиваться в SCCs в течение 20-50 недель. Для изучения ранних событий на этапе посвящения и раннего продвижения могут быть собраны образцы (например, вскоре после второго применения TPA). Представленная фотография и гематоксилин и эозин окрашенных сечение папилломы на c57BL/6 мыши кожи после 19 недель лечения показаны. Шкала бар 0,1 мм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.

протокол

Описанный здесь протокол был одобрен Национальным комитетом по этике животных Финляндии (протокольный номер ESAVI/23659/2018).

1. Экспериментальные животные, реагенты и оборудование

  1. Используйте возраст и половые мышки. Начните исследование в возрасте 7-9 недель, потому что кожа у большинства мышей находится в telogen (покойная фаза) вокруг этого возраста2.
  2. Наблюдайте за поведением животных во время исследования и если они борются, что часто случается с самцами, размещайте их отдельно. Драки могут вызвать порезы кожи, которые способствуют образованию опухоли. Самки мышей предпочитают из-за их менее агрессивного поведения. Типичный размер экспериментальной группы варьируется от 8-20 животных в группе24,25,26,27.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Расчеты мощности, основанные на биологической дисперсии, наблюдаемой в более ранних исследованиях, помогают выбрать достаточно большой размер группы. Штаммы, используемые в качестве примеров в этой статье включают Balb/c и C57BL/6. Тем не менее, многие другие штаммы мыши, такие как SENCAR и FVB были использованы с DMBA-TPA-модель, а также Wistar и Sprague-Dawley крыс2,28,29. До начала исследования необходима лицензия национального или местного комитета по работе с животными. В дополнение к общим соображениям благосостояния, модель конкретных конечных точек, как правило, плоскоклеточный рак (SCC) и инфекции кожи. Царапины в коже из-за зуда после применения опухолевых химических веществ в ацетоне является типичным, но в противном случае животные не должны показывать никаких признаков дискомфорта. Регулярное взвешивание (например, 2 раз в месяц) помогает оценить благосостояние животных.
  3. Используйте DMBA и TPA, оба разбавленных ацетоном. Рабочая концентрация ДМБА составляет 250 г/л. Доза для одного животного составляет 50 мкг ДМБА в 200 л ацетона. Концентрация tPA составляет 125 г/л, а концентрация лечения 25 г/л. Доза TPA для одного животного составляет 5 мкг в 200 зла ацетона.
    ВНИМАНИЕ: DMBA вредно при проглатывании и может вызвать рак. Ацетон быстро испаряется и легковоспламеняется. Это может вызвать головокружение и раздражать глаза. Используйте дыхательную маску и/или работайте под вакуумным потоком. Изменение перчатки после обработки любого из этих химических веществ. Индивидуально вентилируемые клетки предотвращают распространение химических веществ во время корпуса мышей. После нанесения соберите пипетки, используемые для обработки ДМБА, и утилизировать как опасные отходы.
    ПРИМЕЧАНИЕ: DMBA должна быть защищена от света. Разбавленный TPA хранится в -20 градусов по Цельсию, предпочтительно защищен от света.
  4. Закупите следующее оборудование: весло, обычная бритва для меха, пипетки и кончики соответствующего размера, обычная линейка, цифровая камера, блокнот и ручка или компьютер или компьютер для записи папиллом, ингаляционная система анестезии или удерживающее мышь с отверстием на задней вершине, и системы наркода углекислого газа для жертвоприношения мышей.

2. Индукция и продвижение папилломы кожи

  1. Побрить заднюю кожу и взвесить животное. Позже, брить кожу, когда это необходимо, но не во время химического воздействия.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Будьте осторожны при бритье вокруг папилломы и избежать каких-либо сокращений на коже. Взвешивание каждого животного каждые 2 недели, чтобы заметить любую потенциальную потерю веса.
  2. Нанесите 50 мкг DMBA в 200 мл ацетона местно на бритую область с помощью пипетки 48 ч после бритья меха. При необходимости срежь животное с помощью легкой ингаляционной анестезии или удерживаемого мыши.
  3. После 7 дней, дать первую дозу TPA. Применить 5 мкг TPA в 200 зЛ ацетона местно с пипеткой 2x в неделю, предпочтительно понедельник и четверг или вторник и пятницу.
  4. Считайте, записывайте и фотографируйте папилломы каждую неделю. Ощутимая масса, превышающая 1 мм в диаметре, считается папилломой, если она остается дольше 1 недели. Отметьте каждую индивидуальную папиллому на карте и перечислите ее размер каждую неделю. Храните цифровые фотографии.

3. Пожертвование животных и коллекция образцов

  1. Продолжайте лечение до тех пор, пока реакция опухоли не достигнет плато. Как правило, бремя папилломы, как ожидается, увеличится через 10-20 недель после начала, в зависимости от используемого штамма мыши. Плато ожидается через 15-20 недель. Небольшая доля папиллом (до 3%) может развиться в SCCs в течение 20-50 недель2.
  2. Пожертвуйте животными 24 ч после последнего применения TPA. Используйте углекислый газ наркоз с вывихом шейки матки или другим подходящим методом.
  3. В зависимости от вопроса исследования, собрать соответствующий образец материала из животных30,31.
    1. Например, взять образцы крови перед жертвоприношением и отделить плазму.
    2. Вырезать кусочки кожи для иммуногистохимии (IHC) окрашивания (например, гематоксилин и эозин, размножающиеся или воспалительные клетки).
    3. Используйте биопсию ударов для сбора кусочков кожи с папилломы ткани или не папиллома (обработанные) кожи для экспрессии генов (например, qPCR) и / или анализы белка (например, Западная поника или ELISA).
    4. Соберите кусок селезенки и кожи дренирующих лимфатических узлов для анализа цитометрии потока, если более подробный анализ популяций иммунных клеток желательно. Вы также можете отделить эпидермальные и кожные слои для дальнейшего анализа.

4. Статистика

  1. Нарисуйте кривую выживания Каплан-Мейер в свободное от папилломы время и используйте тест мантел-Кокс для выживания. Нарисуйте линейную кривую количества папиллом в неделю. Поскольку это данные подсчета, используйте нелинейную модель регрессии. При необходимости проконсультируйтесь со статистиком.

Результаты

Основным результатом является выживание (т.е. папиллома бесплатно) время между лечением или генотипгруппы. Вторичным результатом является количество папиллом в неделю в каждой группе(рисунок 2). Ожидаемые результаты являются статистически значимой разницей в свободно?...

Обсуждение

DMBA-TPA-индуцированных рака кожи является одним из наиболее часто используемых моделей рака, поскольку он является высоко воспроизводимым и предоставляет информацию о прогрессии опухоли от начала до злокачественности. Ключевой показатель исхода, образование папилломы, легко и надежно ?...

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа финансировалась Академией Финляндии (гранты 25013080481 и 25013142041 (I.J.), 286377 и 295814 (M.P.), 287907 (T.J.)), P'ivikki и Sakari Sohlberg Foundation (M.P., T.J.), Финский медицинский фонд (T.P.), Конкурентное государственное исследование Финансирование экспертной зоны ответственности университетской больницы Тампере (грант 9V049 и 9X044 (M.P.), 9X011 и 9V010 (T.J.)), Конкурентное государственное научно-исследовательское финансирование экспертной зоны ответственности лабораторий Fimlab (грант X51409 (I.J.)), Tays Фонд поддержки (I.J., M.P., T.J.), Фонд туберкулеза Тампере (I.J., M.P., T.J.), Финский культурный фонд (M.V.), Фонд Пауло (T.P.), Онкологическое общество Финляндии (M.P.) и Фонд Эмиля Аалтонена (T.P.).

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
1000 ul RPT XL Graduated Filter Tip (Sterile), RefillStarlabS1182-1730-C
300 ul RTP Graduated Filter Tip (sterile), RefillStarlabS1180-9710-C
7,12-Dimethylbenz[a]anthracene (DMBA)SigmaD3254-100MGHarmful if swallowed and may cause cancer. Store protected from light.
AcetoneSigma1000141011Evaporates rapidly and is inflammable.
Attane vet 1000 mg/gPiramal Critical Care LimitedLiquid isoflurane for inhalation
Battery-Operated Clipper IsisAlbert Kerlb GmbHGT421For shaving the fur
CONTRAfluran-RestgasfilterZeoSys GmbHFor anesthesia
Linex Nature N1030 Ruler 30 cmStaples Business Advantage60383For measuring papillomas
Medium CO2 Chamber 300 x 200 x 200mm - RedVetTech Solutions LtdAN045ARFor sacrifice
MekasoftMekalasi23008Table cover
Mice (Balb/c JRj)Janvier labsOther strains also possible
Mice (C57BL/6JRj)Janvier labsOther strains also possible
Panasonic Lumix DMC-FS5 Digital CameraPanasonic
ParaformaldehydeMerck30525-89-4For histology samples
Phorbol 12-myristate 13-acetate aka 12-Otetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)EnzoBML-PE160-0001
Precision balance PLJ-C/PLJ-GKERN & SOHN GmbHPLJ 600-3CM
Pre-Set CO2 System-2 Chamber-S/S HousingVetTech Solutions LtdAN044BXFor sacrifice
RNAlaterQiagen76104For nucleic acid samples
Tacta pipette 100-1000 ulSartoriusLH-729070
Tacta pipette 20-200 ulSartoriusLH-729060
UNO Anaesthetic Key FillerScintica instrumentation inc.For anesthesia
UNO Face Mask for MouseScintica instrumentation inc.For anesthesia
UNO FM2200 FlowmeterScintica instrumentation inc.For anesthesia
UNO Gas Exhaust UnitScintica instrumentation inc.For anesthesia
UNO Induction BoxScintica instrumentation inc.For anesthesia
UNO200VAP VaporizerScintica instrumentation inc.For anesthesia

Ссылки

  1. DiGiovanni, J. Multistage carcinogenesis in mouse skin. Pharmacology & Therapeutics. 54 (1), 63-128 (1992).
  2. Abel, E. L., Angel, J. M., Kiguchi, K., DiGiovanni, J. Multi-stage chemical carcinogenesis in mouse skin: fundamentals and applications. Nature Protocols. 4 (9), 1350-1362 (2009).
  3. Perez-Losada, J., Balmain, A. Stem-cell hierarchy in skin cancer. Nature Reviews. Cancer. 3 (6), 434-443 (2003).
  4. Bonham, K., et al. Activation of the cellular Harvey ras gene in mouse skin tumors initiated with urethane. Molecular Carcinogenesis. 2 (1), 34-39 (1989).
  5. Quintanilla, M., Brown, K., Ramsden, M., Balmain, A. Carcinogen-specific mutation and amplification of Ha-ras during mouse skin carcinogenesis. Nature. 322 (6074), 78-80 (1986).
  6. Nelson, M. A., Futscher, B. W., Kinsella, T., Wymer, J., Bowden, G. T. Detection of mutant Ha-ras genes in chemically initiated mouse skin epidermis before the development of benign tumors. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 89 (14), 6398-6402 (1992).
  7. Morris, R. J. A perspective on keratinocyte stem cells as targets for skin carcinogenesis. Differentiation. 72 (8), 381-386 (2004).
  8. Chung, Y. W., Kim, H. K., Kim, I. Y., Yim, M. B., Chock, P. B. Dual function of protein kinase C (PKC) in 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)-inducec manganese superoxide dismutase (MnSOD) expression: activation of CREB and FOXO3a by PKC-alpha phosphorylation and by PKC-mediated inactivation of Akt, respectively. The Journal of Biological Chemistry. 286 (34), 29681-29690 (2011).
  9. Su, Z., et al. Tumor promoter TPA activates Wnt/β-catenin signaling in a casein kinase 1-dependent manner. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115 (32), 7522-7531 (2018).
  10. Swann, J. B., et al. Demonstration of inflammation-induced cancer and cancer immunoediting during primary tumorigenesis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (2), 652-656 (2008).
  11. Wang, L., Yi, T., Zhang, W., Pardoll, D. M., Yu, H. IL-17 enhances tumor development in carcinogen-induced skin cancer. Cancer Research. 70 (24), 10112-10120 (2010).
  12. He, D., et al. IL-17 mediated inflammation promotes tumor growth and progression in the skin. PLoS One. 7 (2), 32126 (2012).
  13. Roussel, L., et al. IL-17 promotes p38 MAPDK-dependent endothelial activation enhancing neutrophil recruitment to sites of inflammation. Journal of Immunology. 184 (8), 4531-4537 (2010).
  14. Wanqiu, H., Young-Hee, J., Hyun, S. K., Byung, S. K. Interleukin-6 (IL-6) and IL-17 synergistically promote viral persistence by inhibition cellular apoptosis and cytotoxic T cell function. Journal of Virology. 88 (15), 8479-8489 (2014).
  15. Yusuf, N., et al. Antagonistic roles of CD4+ and CD8+ T-cells in 7,12-dimethylbenz(a)anthracene cutaneous carcinogenesis. Cancer Research. 68 (10), 3924-3930 (2008).
  16. Gong, L., et al. Promoting effect of neutrophils on lung tumorigenesis is mediated by CXCR2 and neutrophil elastase. Molecular Cancer. 12 (1), 154 (2013).
  17. Vestweber, D., Wessel, F., Nottebaum, A. F. Similarities and differences in the regulation of leukocyte extravasation and vascular permeability. Seminars in Immunopathology. 36 (2), 177-192 (2014).
  18. Woodworth, C. D., et al. Strain-dependent differences in malignant conversion of mouse skin tumors is an inherent property of the epidermal keratinocyte. Carcinogenesis. 25 (9), 1771-1778 (2004).
  19. Tennenbaum, T., et al. The suprabasal expression of alpha 6 beta 4 integrin is associated with a high risk for malignant progression in mouse skin carcinogenesis. Cancer Research. 53 (20), 4803-4810 (1993).
  20. Hennings, H., Shores, R., Mitchell, P., Spangler, E. F., Yuspa, S. H. Induction of papillomas with a high probability of conversion to malignancy. Carcinogenesis. 6 (11), 1607-1610 (1985).
  21. Auto, Y., et al. Time-Series Analysis of Tumorigenesis in a Murine Skin Carcinogenesis Model. Scientific Reports. 8 (1), 12994 (2018).
  22. Park, H., et al. Bone marrow-derived epithelial cells and hair follicle stem cells contribute to development of chronic cutaneous neoplasms. Nature Communications. 9 (1), 5293 (2018).
  23. Reeves, M. Q., Kandyba, E., Harris, S., Del Rosario, R., Balmain, A. Multicolour lineage tracing reveals clonal dynamics of squamous carcinoma evolution from initiation to metastasis. Nature Cell Biology. 20 (6), 699-709 (2018).
  24. Dao, V., et al. Prevention of carcinogen and inflammation-induced dermal cancer by oral rapamycin includes reducing genetic damage. Cancer Prevention Research. 5, 400-409 (2015).
  25. Yeong, L. T., Abdul Hamid, R., Saiful Yazan, L., Khaza’ai, H., Mohtarrudin, N. Low dose triterpene-quinone fraction from Ardisia crispa root precludes chemical-induced mouse skin tumor promotion. BMC Complementary and Alternative Medicine. 15 (1), 431 (2015).
  26. Kong, Y. H., Xu, S. P. Salidroside prevents skin carcinogenesis induced by DMBA/TPA in a mouse model through suppression of inflammation and promotion of apoptosis. Oncology Reports. 39 (6), 2513-2526 (2018).
  27. Jung, M., Bu, S. Y., Tak, K. H., Park, J. E., Kim, E. Anticarcinogenic effect of quercetin by inhibition of insulin-like growth factor (IGF)-1 signaling in mouse skin cancer. Nutrition Research and Practice. 7 (6), 439-445 (2013).
  28. Hu, Y. Q., Wang, J., Wu, J. H. Administration of resveratrol enhances cell-cycle arrest followed by apoptosis in DMBA-induced skin carcinogenesis in male Wistar rats. European review for medical and pharmacological sciences. 13, 2935-2946 (2016).
  29. Schweizer, J., Loehrke, H., Hesse, B., Goerttler, K. 7,12-Dimethylbenz[a]anthracene/12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate-mediated skin tumor initiation and promotion in male Sprague-Dawley rats. Carcinogenesis. 3 (7), 785-789 (1982).
  30. Vähätupa, M., et al. T-cell-expressed proprotein convertase FURIN inhibits DMBA/TPA-induced skin cancer development. Oncoimmunology. 5 (12), 1245266 (2016).
  31. May, U., et al. Resistance of R-Ras knockout mice to skin tumour induction. Scientific Reports. 5, 11663 (2015).
  32. Krajewska, M., et al. Image analysis algorithms for immunohistochemical assessment of cell death events and fibrosis in tissue sections. The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 57 (7), 649-663 (2009).
  33. Järvinen, T. A., Ruoslahti, E. Target-seeking antifibrotic compound enhances wound healing and suppresses scar formation in mice. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (50), 21671-21676 (2010).
  34. Schwarz, M., Münzel, P. A., Braeuning, A. Non-melanoma skin cancer in mouse and man. Archives of Toxicology. 87 (5), 783-798 (2013).
  35. Slaga, T. J. SENCAR mouse skin tumorigenesis model versus other strains and stocks of mice. Environmental Health Perspectives. 68, 27-32 (1986).
  36. Goerttler, K., Loehrke, H., Schweizer, J., Hesse, B. Systemic two-stage carcinogenesis in the epithelium of the forestomach of mice using 7,12-dimethylbenz(a)anthracene as initiator and the phorbol ester 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate as promoter. Cancer Research. 39 (4), 1293-1297 (1979).
  37. Topping, D. C., Nettesheim, P. Promotion-like enhancement of tracheal carcinogenesis in rats by 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate. Cancer Research. 40, 4352-4355 (1980).
  38. Wille, J. J. Circadian rhythm of tumor promotion in the two-stage model of mouse tumorigenesis. Cancer Letters. 190 (2), 143-149 (2003).
  39. Lee, Y. S., et al. Inhibition of skin carcinogenesis by suppression of NF-κB dependent ITGAV and TIMP-1 expression in IL32γ overexpressed condition. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. 37 (1), 293 (2018).
  40. Kiss, A., et al. Cell type-specific p38δ targeting reveals a context-, stage-, and sex-dependent regulation of skin carcinogenesis. International Journal of Molecular Sciences. 20 (7), 1532 (2019).
  41. Tomo-o, I., et al. Positron emission tomography imaging of DMBA/TPA mouse skin multi-step tumorigenesis. Molecular Oncology. 4 (2), 119-125 (2010).
  42. Mantovani, A., Allavena, P., Sica, A., Balkwill, F. Cancer-related inflammation. Nature. 454 (7203), 436-444 (2008).
  43. Crusz, S. M., Balkwill, F. R. Inflammation and cancer: advances and new agents. Nature Reviews. Clinical Oncology. 12 (10), 584-596 (2015).
  44. Hennings, L., et al. Malignant conversion and metastasis of mouse skin tumors: a comparison of SENCAR and CD-1 mice. Environmental Health Perspectives. 68, 69-74 (1986).
  45. Gómez-Cuadrado, L., Tracey, N., Ma, R., Qian, B., Brunton, V. G. Mouse models of metastasis: progress and prospects. Disease Models & Mechanisms. 10 (9), 1061-1074 (2017).
  46. Ouhtit, A., Ananthaswamy, H. N. A model for UV-induction of skin cancer. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 1 (1), 5-6 (2001).
  47. Day, C. -. P., Marchalik, R., Merlino, G., Michael, H. T. Mouse models of UV-induced melanoma: genetics, pathology, and clinical relevance. Laboratory Investigation. 97 (6), 698-705 (2017).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

154DMBA TPA

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены