JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

В этом протоколе сравнивали чрескожные и транс-забрюшинные пункции в модели дегенерации межпозвоночных дисков кролика (IVDD). Оба метода индуцировали IVDD; Тем не менее, транс-ретроперитонеальный подход привел к более обширным изменениям и снижению смертности.

Аннотация

В этом исследовании сравнивается эффективность двух методов индуцирования дегенерации межпозвоночных дисков (IVDD) у кроликов: чрескожной и транс-ретроперитонеальной пункции фиброзного кольца. Пятнадцать здоровых самцов новозеландских белых кроликов были случайным образом распределены по трем группам: фиктивная, чрескожная пункция и транс-забрюшинная пункция. Для обеспечения точного и подробного сравнения двух методов была проведена комплексная оценка, включающая показатели смертности, морфологическую и гистологическую оценку, рентгенологическую визуализацию и анализ биомаркеров. Результаты демонстрируют, что оба метода пункции успешно индуцировали IVDD на модели кролика. Тем не менее, транс-ретроперитонеальный доступ приводил к более выраженным дегенеративным изменениям в межпозвоночных дисках при сохранении значительно более низкой смертности по сравнению с чрескожным методом. Эти результаты подчеркивают преимущества транс-ретроперитонеального подхода в моделировании IVDD. Это исследование дает ценную информацию о создании моделей IVDD и закладывает основу для будущих исследований эффективных стратегий лечения боли в пояснице, что в конечном итоге улучшает результаты лечения пациентов.

Введение

За последние несколько десятилетий боль в пояснице (LBP) стала наиболее значительным заболеванием опорно-двигательного аппарата, влияющим на качество жизни1. LBP становится все более важной проблемой общественного здравоохранения, налагая существенное экономическое бремя на общество из-за потери рабочей силы и дополнительных медицинских расходов 2,3. Только в Соединенных Штатах прямые и косвенные расходы, связанные с LBP, превышают 100 миллиардов долларов в год, включая медицинские расходы, потери доходов и потери рабочейсилы. LBP часто вызывается дегенерацией межпозвоночных дисков (IVDD)5,6,7,8. Учитывая высокую распространенность и экономическое влияние LBP, точное моделирование IVDD имеет решающее значение для изучения стратегий лечения.

Для понимания патофизиологии IVDD и оценки стратегий лечения были разработаны и использованы различные доклинические модели in vivo на животных9. В этих моделях было использовано несколько методов индуцирования дегенерации диска, включая хирургическую или химическую травму диска, неинвазивное механическое воздействие, генетическую модификацию и естественное возникновение. Среди этих методов хирургическая травма составляет до 64,9% индукции IVDD, при этом первичным хирургическим методом является пункция иглой11. Модель прокола иглой отличается простотой установления и минимальным ущербом для подопытных животных. Распространенные подходы с помощью игольчатой пункции включают открытый забрюшинный доступ к межпозвоночному пространству поясничного отдела и чрескожную заднелатеральную пункцию. Глубина введения может быть определена с помощью рентгенологического контроля или длины иглы. Примечательно, что чрескожный доступ может уменьшить ятрогенное повреждение тканей по сравнению с открытыми хирургическими методами, в то время как забрюшинный доступ обеспечивает преимущество прямой визуализации, которая количественно не сравнивалась в предыдущей литературе. В то время как в исследованиях изучалось влияние использования игл разного диаметра12 и пункции различных дисков10 на индукцию IVDD, сравнительные исследования, сосредоточенные на различных подходах к пункции игл, остаются ограниченными. Выбранная модель кролика особенно полезна для исследователей, которым требуются экономически эффективные лонгитюдные исследования с частыми визуальными оценками, учитывая ее анатомическое сходство с человеческими дисками и ее преимущества перед моделями грызунов с точки зрения размераи структуры.

В этом исследовании кроличьи модели поясничного IVDD были установлены с использованием двух методов: открытого забрюшинного доступа для пункции межпозвоночного пространства поясничного отдела и чрескожной заднелатеральной пункции. Был проанализирован полный набор критериев оценки исходов, включая морфологические, гистологические и радиологические изменения.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

протокол

Экспериментальные процедуры на животных строго соответствовали Руководству по уходу за лабораторными животными и их использованию, выпущенному Национальными институтами здравоохранения, и были одобрены Комитетом по этике экспериментальных животных Университета традиционной китайской медицины Чэнду (номер утверждения этики: 2021-23). Было использовано пятнадцать здоровых 4-месячных кроликов породы новозеландской белой породы (2,25 кг ± 0,25 кг), в том числе семь самцов и восемь самок. Животные содержались в условиях комнатной температуры от 23 °C ± 3 °C и влажности около 60% ± 10% в течение одной недели адаптации, со свободным доступом к воде и пище. Перед началом эксперимента 15 кроликов были случайным образом распределены в одну из трех групп: фиктивная группа (группа А), группа чрескожной фиброзной пункции в кольце (группа В) и группа транс-ретроперитонеального пространства фиброзной пункции (группа С), по пять кроликов в каждой группе. Подробная информация о реагентах и оборудовании, использованных в этом исследовании, приведена в Таблице материалов.

1. Установление модели IVDD кролика через чрескожную фиброзную пункцию в кольце

ПРИМЕЧАНИЕ: Модель IVDD у кроликов устанавливали методом чрескожной фиброзной пункции через кольцо. Процедура проводилась по методу моделирования пункции, описанному Luo TD et al.14 , и выполнялась под рентгеновским контролем (рис. 1).

  1. Подготавливаем кролика.
    1. Голодайте кроликов в течение 24 часов перед операцией, обеспечив доступ к воде.
    2. Введение анестезии путем внутривенной инъекции 3% пентобарбитала натрия (1,3 мл/кг) в ушную вену (в соответствии с утвержденными в учреждении протоколами).
    3. Подтвердите успешность анестезии, проверив неподвижность, расслабленность мышц, отсутствие роговичного рефлекса и отсутствие реакции на боль.
  2. Расположите и отметьте кролика.
    1. Зафиксируйте кролика в положении лежа на фиксирующей доске.
    2. Побрейте и подготовьте операционную зону, затем пальпируйте костные ориентиры.
    3. Пропальпируйте костные ориентиры на поясничной части спины кролика. Найдите самое нижнее ребро на кролике, которое обычно соответствует позвонку чуть выше остистого отростка L1.
    4. Определите остистый отросток непосредственно под этим позвонком, чтобы определить остистый отросток L1.
    5. Найдите самые высокие точки гребней подвздошной кости, примерно на уровне позвонка L6.
    6. Проследите вниз от остистого отростка L1, чтобы последовательно идентифицировать каждый остистый отросток до L7.
    7. С помощью маркера четко отметьте остистый отросток L1 на спине кролика.
    8. Перейдите к следующему остистому отростку и отметьте его как L2.
    9. Продолжайте отмечать каждый последующий остистый отросток как L3, L4, L5, L6 и L7. Убедитесь, что каждая метка отличается друг от друга и расположена в последовательном порядке для четкой идентификации.
  3. Найдите и отметьте место прокола.
    1. Пальпируйте поперечные отростки и найдите середину между дистальными концами L5 и L6.
    2. Отметьте эту точку и приготовьтесь ввести иглу для прокола примерно на 1 см выше нее.
  4. Введите прокол иглой.
    1. Держите иглу для прокола горизонтально и вставьте ее к земле, разрывая кожу.
    2. Переместите иглу вперед, чтобы добраться до тела позвонка L4, и проверьте правильное положение под рентгеновским контролем.
    3. Слегка наклоните иглу на головку под углом примерно 20° в сторону межпозвоночного диска L4-5. Прокол диска и подтверждение точности прокола под рентгенологическим исследованием.
  5. Выполнять проколы диска.
    1. Точно проколите фиброзное кольцо, при необходимости используя рентгеновский контроль.
    2. Повторите процесс прокола для межпозвоночных дисков L2-3 и L3-4, проколов каждый по одному разу.
    3. Поддерживайте глубину прокола около 5 мм с временем выдержки 5 с для каждого диска.
  6. Уход после процедуры
    1. Продезинфицируйте и наложите повязку на место прокола.
    2. Вводите пенициллин внутримышечно в большую ягодичную мышцу в дозировке 40 000 ЕД на кролика ежедневно в течение 3 дней.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Скорректируйте подход, если игла задевает твердые ткани. Используйте рентгеновский контроль для точного прокола. Следите за выздоровлением кролика и обеспечивайте соответствующий уход.

2. Установление модели IVDD кролика через транс-забрюшинное пространство кольцевидной фиброзной пункции

ПРИМЕЧАНИЕ: Модель IVDD кролика была создана с использованием метода транс-ретроперитонеальной фиброзной пункции в кольце12 (рис. 2).

  1. Голодайте кроликов в течение 24 часов перед операцией, обеспечивая доступ к воде.
  2. Обезболите кролика путем внутривенного введения 3% пентобарбитала натрия (1,3 мл/кг) в ушную вену (в соответствии с утвержденными в учреждении протоколами).
  3. Убедитесь, что кролик неподвижен, с расслабленными мышцами, без роговичного рефлекса и без болевой реакции на давление, чтобы подтвердить успешную анестезию.
  4. Зафиксируйте кролика в положении лежа на фиксирующей доске.
  5. Побрейте и подготовьте операционную область.
  6. Пальпируйте костные ориентиры, отмечая маркером поясничные остистые отростки L1-L7 на поясничной части спины кролика.
  7. Повторно пальпируйте поперечные отростки кролика, чтобы определить место хирургического разреза.
  8. Поместите стерильную простыню и продезинфицируйте местную кожу, чтобы обеспечить асептические условия.
  9. Используйте задний забрюшинный доступ, чтобы рассечь фасцию и мышцы слой за слоем, обнажая латеральную сторону поясничного межпозвоночного диска.
  10. Проколите фиброзное кольцо пункционной иглой на глубину примерно 5 мм и время выдержки 5 с.
  11. Последовательно проколите межпозвоночные диски L3-4, L4-5 и L5-6, следя за тем, чтобы каждый диск был проколот только один раз.
  12. Сшивайте ткани слой за слоем с помощью шовной нити диаметром 0,25 мм.
  13. Продезинфицируйте и наложите повязку на место прокола после моделирования.
  14. Вводите пенициллин внутримышечно в большую ягодичную мышцу кролика ежедневно в дозировке 40 000 ЕД на кролика в течение трех дней подряд.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте пенициллин со спецификацией 800 000 единиц / флакон и номером одобрения ветеринарного препарата 140051251.

3. Выбор моделей IVDD и оценка результатов

  1. Оценка смертности и общего состояния кроликов
    1. Наблюдайте за кроликами еженедельно, чтобы определить выживаемость и записать общее состояние, включая психическое состояние, режим активности, потребление пищи и воды, а также каловые и мочевые выделения.
    2. Точно записывайте наблюдения и отмечайте любые изменения в состоянии.
  2. Контроль веса кроликов
    1. Регистрируйте массу тела кроликов до и после создания модели, а также до забора тканей.
    2. Обеспечьте точную запись веса и отметьте любые существенные изменения.
  3. Радиологическая оценка
    1. Получите сагиттальную 1,5Т2-взвешенную магнитно-резонансную томографию всей последовательности экспланта поясничного отдела позвоночника каждого белого кролика до и через 4 недели после создания модели.
    2. Наблюдайте за степенью дегенерации межпозвоночных дисков.
    3. Провести количественную оценку дегенерации межпозвоночных дисков с использованием модифицированной системы классификации Пфиррмана, предложенной Griffith et al.15. Попросите трех независимых слепых радиологов оценить Т2-взвешенные последовательности МРТ в соответствии с установленными критериями: высота диска, интенсивность сигнала пульпозного ядра и целостность фиброзного кольца.
    4. Определяйте итоговые оценки на основе консенсуса, если расхождения превышают один уровень оценки. Проводите все оценки с помощью стандартизированного программного обеспечения для просмотра DICOM с откалиброванными настройками дисплея.
  4. Гистопатологическая оценка и оценка
    1. Усыпьте кроликов через 4 недели после моделирования с использованием внутривенной передозировки пентобарбитала натрия (в соответствии с утвержденными в учреждении протоколами), затем быстро изберите межпозвоночные диски L2-L3, L3-L4 и L4-L5 на льду15.
    2. Зафиксируйте диски L2-L3 в 4% параформальдегиде и храните оставшиеся образцы при температуре -80 °C.
    3. Погрузите неподвижные диски в раствор для удаления накипи, например, 10% ЭДТА, чтобы обеспечить полное погружение. Меняйте раствор для удаления накипи каждые 2-3 дня для поддержания эффективности.
    4. Регулярно контролируйте процесс декальцинации до тех пор, пока не будет достигнута полная декальцинация, которая может занять от нескольких дней до недели, в зависимости от размера и толщины диска.
    5. Тщательно промойте декальцинированные диски проточной водой, чтобы удалить любые следы декальцинирующего раствора.
    6. Обезвоживайте диски, погружая их в серию растворов этанола, начиная с 70% этанола и постепенно увеличивая до 100% этанола. Проводите каждый этап обезвоживания в течение 1-2 часов на сорт.
    7. Инфильтрируйте обезвоженные диски парафином (температура плавления 56-58 °C) в течение минимум 2 часов, обеспечивая полную инфильтрацию.
    8. Вставьте инфильтрированные диски в восковой блок, расположив их для секционирования. Дайте восковому блоку остыть и полностью застыть.
    9. Разделите встроенные диски на тонкие, однородные ломтики (5-10 мкм) с помощью микротома. Закрепите срезы на предметных стеклах для дальнейшего анализа, такого как гистологическое окрашивание или иммуногистохимия12,13.
    10. Проведите окрашивание гематоксилином и эозином (ПЭ), сделайте снимки под оптическим микроскопом и присвойте баллы по окрашиванию ПЭ по гистопатологической шкале оценки ИВД12.
  5. Проба TUNEL
    1. Депарафинизация и регидратация участков ткани межпозвоночного диска, затем выполнение забора антигена и мембранной пермеабилизации.
    2. Добавьте смесь реактива 1 (TdT) и реагента 2 (dUTP) в соотношении 1:9 и инкубируйте во увлажненной камере.
    3. Вымойте секции буфером PBS, нанесите морилку DAPI и выдерживайте в темноте при комнатной температуре в течение 10 минут.
    4. Захватывайте изображения с помощью полностью автоматизированного панорамного сканера и программного обеспечения для обработки.
  6. Обнаружение цитокинов
    1. Усыпьте подопытных кроликов (шаг 3.4.1) и соберите образцы крови из брюшной аорты.
    2. Центрифугируйте образцы крови кролика при температуре 2000 × г в течение 10 мин при 25 °C для отделения сыворотки от клеток крови. Тщательно соберите надосадочную жидкость (сыворотку), следя за тем, чтобы в ней не было клеточного мусора.
    3. Следуйте инструкциям, приведенным в наборе для ИФА, чтобы определить экспрессию TGF-β в образцах сыворотки.
    4. Подготовьте реагенты и стандарты в соответствии с инструкциями в наборе для ИФА.
    5. Добавьте образцы сыворотки в соответствующие лунки в планшете ИФА.
    6. Инкубируйте планшет при рекомендуемой температуре и продолжительности в соответствии с инструкциями набора.
    7. Вымойте пластину в соответствии с инструкциями, чтобы удалить несвязанные реагенты.
    8. Добавьте антитела для обнаружения и другие необходимые реагенты, следуя протоколу набора.
    9. Снова инкубируйте тарелку в течение указанного времени и температуры.
    10. Тщательно вымойте пластину, чтобы удалить излишки реагентов.
    11. Добавьте раствор субстрата в лунки и инкубируйте в течение рекомендуемого периода, чтобы дать возможность проявиться цвету.
    12. Измерьте оптическую плотность (OD) с помощью спектрофотометра на длине волны, указанной в инструкции к набору.
    13. Рассчитайте концентрации образцов путем подстановки значений наружного диаметра в предоставленное уравнение или с помощью стандартной кривой, созданной на основе известных концентраций стандартов.

4. Статистический анализ

  1. Выполняйте статистический анализ с помощью коммерчески доступного программного обеспечения.
  2. Выражайте непрерывные переменные в виде среднего ± стандартного отклонения.
  3. Используйте однофакторный ANOVA для проверки различий между группами.
  4. Применяйте тесты ЛСД для парных сравнений.
  5. Используйте ANOVA повторных измерений для анализа данных повторных измерений.
  6. Выполните корреляционный анализ Спирмена для оценки корреляции между переменными.
  7. Установите уровень значимости на α = 0,05 и примите значения P меньше 0,05 как статистически значимые.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Результаты

Хирургические вмешательства прошли без осложнений. Один кролик из группы В (группа чрескожной пункции) умер после процедуры. Все остальные животные вернулись к нормальному питанию и активности после операции и выжили в течение всего экспериментального периода. Длит?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Обсуждение

Результаты этого исследования указывают на то, что как чрескожный, так и транс-забрюшинный пункционный подходы эффективны в индуцировании дегенерации межпозвоночных дисков (IVDD) на моделях кроликов. Примечательно, что на основе комплексной оценки общего состояния, см...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Раскрытие информации

Никакой.

Благодарности

Этот проект был поддержан Национальным фондом естественных наук Китая (No 82004497), Китайским фондом постдокторантуры (No 2021M693788), Национальным фондом естественных наук Китая (No 82105043) и Фондом естественных наук провинции Сычуань (No 2023NSFSC1814).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
0.3 T Veterinary Maenetic Resonance lmaging(MRI)NINGBO CHUANSHANJIACSJ-MR
Alcohol medicalLIRCON20230107
Benzylpenicillin potassiumJiangxi Keda Animal Pharmaceutical140051251
Haemostatic forcepsSHINVA20211239
Injection syringeCONPUVON20153151307
Knife bladesHons Medincal20210615
Medical absorbent cotton ball  Cofoe20210006
Medical suture needleShanghai Xiaoyi Medical Devices 20192020430
Medullo-puncture needleYangzhou Jiangzhou Medical Devices20190902Used to puncture lumbar disc
Physiological salineNeilMed C1210504D2
Povidone iodine solutionSichuan IJIS Medical Technology 20221209
Quasi-microbalanceExplorer
Rabbit dissection operating table Zhenhua BiomedicalZH-BXT-3Z
ShaverAUX
Statistical analysis softeareIBMSPSS
Sterile gauzeCofoe20202140675
Surgical glovesDR.LERSH20172140028
Surgical knife Hons Medinca20210019
Surgical tweezersSHINVA20210233
USB-C data transmission lineKINI
White light photography microscope Nikon Eclipse Ci-L

Ссылки

  1. Vos, T., et al. Years lived with disability (YLDS) for 1160 sequelae of 289 diseases and injuries 1990-2010: A systematic analysis for the global burden of disease study 2010. Lancet. 380 (9859), 2163-2196 (2012).
  2. Daly, C., Ghosh, P., Jenkin, G., Oehme, D., Goldschlager, T. A review of animal models of intervertebral disc degeneration: Pathophysiology, regeneration, and translation to the clinic. Biomed Res Int. 2016, 5952165(2016).
  3. Risbud, M. V., Shapiro, I. M. Role of cytokines in intervertebral disc degeneration: Pain and disc content. Nat Rev Rheumatol. 10 (1), 44-56 (2014).
  4. Katz, J. N. Lumbar disc disorders and low-back pain: Socioeconomic factors and consequences. J Bone Joint Surg Am. 88 (Suppl 2), 21-24 (2006).
  5. Cheung, K. M. The relationship between disc degeneration, low back pain, and human pain genetics. Spine J. 10 (11), 958-960 (2010).
  6. Knezevic, N. N., Candido, K. D., Vlaeyen, J. W. S., Van Zundert, J., Cohen, S. P. Low back pain. Lancet. 398 (10294), 78-92 (2021).
  7. Livshits, G., et al. Lumbar disc degeneration and genetic factors are the main risk factors for low back pain in women: The UK twin spine study. Ann Rheum Dis. 70 (10), 1740-1745 (2011).
  8. Takatalo, J., et al. Does lumbar disc degeneration on magnetic resonance imaging associate with low back symptom severity in young finnish adults. Spine (Phila Pa 1976). 36 (25), 2180-2189 (2011).
  9. Singh, K., Masuda, K., An, H. S. Animal models for human disc degeneration. Spine J. 5 (6 Suppl), 267s-279s (2005).
  10. Liang, T., et al. Constructing intervertebral disc degeneration animal model: A review of current models. Front Surg. 9, 1089244(2022).
  11. Poletto, D. L., Crowley, J. D., Tanglay, O., Walsh, W. R., Pelletier, M. H. Preclinical in vivo animal models of intervertebral disc degeneration. Part 1: A systematic review. JOR Spine. 6 (1), e1234(2023).
  12. Masuda, K., et al. A novel rabbit model of mild, reproducible disc degeneration by an anulus needle puncture: Correlation between the degree of disc injury and radiological and histological appearances of disc degeneration. Spine (Phila Pa 1976). 30 (1), 5-14 (2005).
  13. Kroeber, M. W., et al. New in vivo animal model to create intervertebral disc degeneration and to investigate the effects of therapeutic strategies to stimulate disc regeneration. Spine (Phila Pa 1976). 27 (23), 2684-2690 (2002).
  14. Luo, T. D., et al. A percutaneous, minimally invasive annulus fibrosus needle puncture model of intervertebral disc degeneration in rabbits. J Orthop Surg (Hong Kong). 26 (3), 2309499018792715(2018).
  15. Griffith, J. F., et al. Modified Pfirrmann grading system for lumbar intervertebral disc degeneration. Spine (Phila Pa 1976). 32 (24), E708-E712 (2007).
  16. Lipson, S. J., Muir, H. Experimental intervertebral disc degeneration: Morphologic and proteoglycan changes over time. Arthritis Rheum. 24 (1), 12-21 (1981).
  17. Wang, Y., Wu, Y., Deng, M., Kong, Q. Establishment of a rabbit intervertebral disc degeneration model by percutaneous posterolateral puncturing of lumbar discs under local anesthesia. World Neurosurg. 154, e830-e837 (2021).
  18. Gruber, H. E., et al. A new small animal model for the study of spine fusion in the sand rat: Pilot studies. Lab Anim. 43 (3), 272-277 (2009).
  19. Alini, M., et al. Are animal models useful for studying human disc disorders/degeneration. Eur Spine J. 17 (1), 2-19 (2008).
  20. Gandhi, S. D., et al. Intradiscal delivery of anabolic growth factors and a metalloproteinase inhibitor in a rabbit acute lumbar disc injury model. Int J Spine Surg. 14 (4), 585-593 (2020).
  21. Omlor, G. W., et al. A new porcine in vivo animal model of disc degeneration: Response of anulus fibrosus cells, chondrocyte-like nucleus pulposus cells, and notochordal nucleus pulposus cells to partial nucleotomy. Spine (Phila Pa 1976). 34 (25), 2730-2739 (2009).
  22. Serigano, K., et al. Effect of cell number on mesenchymal stem cell transplantation in a canine disc degeneration model. J Orthop Res. 28 (10), 1267-1275 (2010).
  23. Daly, C. D., et al. A comparison of two ovine lumbar intervertebral disc injury models for the evaluation and development of novel regenerative therapies. Global Spine J. 8 (8), 847-859 (2018).
  24. Kim, J. S., et al. The rat intervertebral disk degeneration pain model: Relationships between biological and structural alterations and pain. Arthritis Res Ther. 13 (5), R165(2011).
  25. Lim, K. Z., et al. Ovine lumbar intervertebral disc degeneration model utilizing a lateral retroperitoneal drill bit injury. J Vis Exp. (123), e55753(2017).
  26. Zhang, Y., et al. Histological features of the degenerating intervertebral disc in a goat disc-injury model. Spine (Phila Pa 1976). 36 (19), 1519-1527 (2011).
  27. Freemont, A. J. The cellular pathobiology of the degenerate intervertebral disc and discogenic back pain. Rheumatology (Oxford). 48 (1), 5-10 (2009).
  28. Vergroesen, P. P., et al. Mechanics and biology in intervertebral disc degeneration: A vicious circle. Osteoarthritis Cartilage. 23 (7), 1057-1070 (2015).
  29. Natarajan, R. N., Andersson, G. B., Patwardhan, A. G., Verma, S. Effect of annular incision type on the change in biomechanical properties in a herniated lumbar intervertebral disc. J Biomech Eng. 124 (2), 229-236 (2002).
  30. Hoogendoorn, R. J., Wuisman, P. I., Smit, T. H., Everts, V. E., Helder, M. N. Experimental intervertebral disc degeneration induced by chondroitinase ABC in the goat. Spine (Phila Pa 1976). 32 (17), 1816-1825 (2007).
  31. Melrose, J., Roberts, S., Smith, S., Menage, J., Ghosh, P. Increased nerve and blood vessel ingrowth associated with proteoglycan depletion in an ovine annular lesion model of experimental disc degeneration. Spine (Phila Pa 1976). 27 (12), 1278-1285 (2002).
  32. Elmounedi, N., et al. Impact of needle size on the onset and the progression of disc degeneration in rats. Pain Physician. 25 (6), 509-517 (2022).
  33. Tellegen, A. R., et al. Intradiscal delivery of celecoxib-loaded microspheres restores intervertebral disc integrity in a preclinical canine model. J Control Release. 286, 439-450 (2018).
  34. Vadalà, G., et al. The transpedicular approach as an alternative route for intervertebral disc regeneration. Spine. 38 (6), E319-E324 (2013).
  35. Yang, J. J., Li, F., Hung, K. C., Hsu, S. H., Wang, J. L. Intervertebral disc needle puncture injury can be repaired using a gelatin-poly (γ-glutamic acid) hydrogel: An in vitro bovine biomechanical validation. Eur Spine J. 27 (10), 2631-2638 (2018).
  36. Xi, Y., et al. Minimally invasive induction of an early lumbar disc degeneration model in rhesus monkeys. Spine (Phila Pa 1976). 38 (10), E579-E586 (2013).
  37. Elliott, D. M., Sarver, J. J. Young investigator award winner: Validation of the mouse and rat disc as mechanical models of the human lumbar disc. Spine (Phila Pa 1976). 29 (7), 713-722 (2004).
  38. Smit, T. H. The use of a quadruped as an in vivo model for the study of the spine - biomechanical considerations. Eur Spine J. 11 (2), 137-144 (2002).
  39. Romaniyanto, F. N. U., et al. Effectivity of puncture method for intervertebral disc degeneration animal models: Review article. Annals Med Surg. 85 (7), 3501-3505 (2023).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

IVDD

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены