Для начала перенесите зараженные вирусом растения картофеля в камеру роста, где поддерживается температура 22 градуса Цельсия. Выберите растение для наблюдения, и с помощью клейкой ленты полностью обездвижьте второй привитый лист. Далее подключите цифровой микроскоп к компьютеру и запустите программное обеспечение для захвата изображений.
Поместите лист под микроскоп. Затем с помощью диска сфокусируйтесь на поверхности листа. Чтобы изменить настройки камеры, нажмите кнопку «Настройки».
Теперь установите яркость на 64, контрастность на 14, а оттенок на ноль. Далее отрегулируйте баланс белого. Затем установите Насыщенность на 47, Резкость на ноль, а Гамму на пять.
Нажмите на значок захвата изображения и выберите опцию «Покадровое видео». Затем установите захват изображения каждые 15 минут в течение 24 часов. Нажмите кнопку «Пуск», чтобы начать захват изображения.
Чтобы сохранить захваченные изображения, выберите все изображения и нажмите значок Сохранить. Теперь выберите параметры экспорта. Затем установите количество точек на дюйм на максимум.
После сохранения удалите все изображения из программы. Чтобы отредактировать изображения, запустите программное обеспечение для редактирования, например ImageJ. Нажмите «Файл», затем выберите «Импорт» и выберите «Последовательность изображений», чтобы импортировать временные последовательности изображений из одного поля зрения.
Вставьте путь к каталогу сохраненных изображений и нажмите Ok. Как только конвертация будет завершена, ImageJ автоматически запустит внутренний видеоплеер, отображающий готовое видео. Нажмите «Файл», затем «Сохранить как» и выберите формат AVI для экспорта видеофайла.
Когда откроется небольшое окно, установите частоту кадров на 0,3 кадра в секунду, затем нажмите Okay, чтобы сохранить видео в виде файла AVI. Для цифрового микроскопического анализа были использованы инокулированные растения картофеля возрастом от трех до четырех недель с не менее чем тремя-четырьмя полностью развитыми листьями. Одна и та же область на привитом листе наблюдалась с 15-минутными интервалами для определения возникновения поражения и его расширения с течением времени.
Через 14 часов наблюдения поражения не было видно. Примерно через 90 минут было зафиксировано видимое поражение. Поражение начало расширяться через два часа и продолжало расширяться в течение следующих восьми с половиной часов.
