Для начала инкубируйте два миллилитра культивируемых клеток MCF-7 в шестилуночном планшете до 90% конфлюенции. В монослое выращенной клетки создайте линейную царапину, намотанную по центру, с помощью стерильного наконечника пипетки. Затем сделайте снимки с помощью оптического микроскопа через разные промежутки времени.
Для трансвелл-анализа суспензируют клетки MCF-7 в среде, не содержащей сыворотки. Затем посмотрите на ячейки в верхней трансвелл-камере, предварительно закодированные или не закодированные с помощью Матригеля. Добавьте полную среду DMEM на дно трансвелл-камеры, чтобы она действовала как химический индуктор.
Через 24 часа удалите клетки в верхней камере и зафиксируйте оставшиеся инвазивные и мигрирующие клетки с помощью метанола. Окрашивайте клетки MCF-7 с помощью кристаллического фиолетового раствора. Затем сфотографируйте окрашенные клетки с помощью оптического микроскопа.
Наблюдалось дозозависимое ингибиторное действие салидрозида на пролиферацию клеток с 50%-ным снижением жизнеспособности клеток при 40 микромолярах. Кроме того, салидрозид может ингибировать жизнеспособность клеток MCF-7 с течением времени, при этом жизнеспособность клеток MCF-7 снижается на 50% после 24 часов совместной инкубации. Анализ на царапины раны показал ингибирующий эффект лечения салидрозидом клеток MCF-7.
Кроме того, лечение салидрозидом значительно снижало нежелательную миграцию и инвазию клеток MCF-7.