Наш протокол имеет важное значение, поскольку он обеспечивает простой способ исследовать, какие чувства могут быть вовлечены в заразные зевая у крыс. Основными преимуществами этого метода являются использование неинвазивной процедуры и наличие программного обеспечения приложения, которое ускоряет расчет для измерения заразного зевая. Лица, которые никогда не выполняли этот метод не должны сталкиваться с серьезными трудностями в реализации, при условии, что они методично следовать каждому шагу и обратиться за профессиональной консультацией при построении случае наблюдения.
Визуальная демонстрация этого метода помогает понять пространственное расположение клеток наблюдения во время эксперимента. Помогает избежать ошибок в назначении процедур. Демонстрацией этой процедуры будет Эвелин Беристейн-Кастильо, постдок из моей лаборатории.
Чтобы настроить тестовую сессию, перенесите четырех крыс в комнату наблюдения в отдельных клетках. Пока животные акклиматизируются, поместите перевернутый Т-образный стол на больший прямоугольный стол под потолочной лампой, которая достаточно освещает помещение. Поместите фильтровальную бумагу на дно каждой клетки наблюдения и поместите клетки в пары с каждой стороны перевернутого Т-образного стола.
Позиция делится между каждой парой клеток, и стратегически место двух цифровых видеокамер, так что каждый записывает зевая поведение каждой пары крыс. Подтвердив, что видеокамеры надежно закреплены на штативах и правильно ориентированы на наблюдательные клетки, подключите видеокамеры к настольному компьютеру, чтобы одновременно следить за поведением крыс. Когда животные акклиматизировались в течение 15 минут, поместите их в клетки наблюдения в соответствии с ранее определены распределения, и установить автоматическое внимание к выключению на каждом видеокамеру.
Запустите видеозапись и секундомер в то же время, остановив видеозапись в конце 60-минутного периода наблюдения. Когда наблюдение закончено, вернуть крыс в свои домашние клетки в животном объекте с доступом к пище и воде. Затем тщательно очистить клетки наблюдения с нетоксичным моющим средством, прежде чем подготовить экспериментальный набор для выполнения последующих тестовых сессий в течение дня.
После последней сессии воспроизведение каждого видео на экране компьютера с использованием любой стандартной системы воспроизведения для наблюдателя. У наблюдателя сначала просмотреть каждое видео, чтобы наблюдать и записывать зевая поведение на листах данных один раз на нормальной скорости, а затем дополнительный просмотр на более низких скоростях, чтобы сделать его легче наблюдать и измерять зевая. Чтобы забить зевая, используйте вертикальные линии, чтобы представить возникновение зевоты с минутой, написанной в качестве суперскрипта.
Когда все зевотости были забиты, транскрибировать временной последовательности зевок в каждой крысы в таблицу. Если зевая была записана до ближайшей минуты, введите количество зевот в каждую соответствующую минуту и использовать ноль, чтобы заполнить клетки, когда не зевать произошло в данной минуте. Затем сохраните лист в качестве текстового файла.
Если зевота была записана до ближайшей десятичной минуты, введи последовательность сверху вниз. Используйте NA, чтобы заполнить пустые пространства столбцов крыс, в которых количество зевот в рядах ниже, чем у столбца. При максимальном количестве рядов зевок записывается крыса.
Затем сохраните лист в качестве текстового файла. Когда все данные были введены, импортировать текстовый файл в R.Save программных кодов с расширением кода R и скачать конкретный код программы в зависимости от того, зевок были записаны в качестве интеграторов или дробных чисел. Затем запустите программу для каждой пары крыс и нужное количество временных рамок.
В конце запуска запустите программу снова, используя случайное распределение количества зевок от каждой крысы. Для создания кривых заразы зевоты используйте данные, ранее сохраненные в таблице, чтобы вычесть ставки неразгления из показателей заражения для каждой пары крыс, тайм-окна и тестовой ситуации, отделяя анализ наблюдаемых данных и искусственных данных. В этом репрезентативном эксперименте, зевать зараза между незнакомыми крысами мужского пола была измерена в течение целого ряда тайм-окну, которые варьировались от одной до 10 минут.
Эти кривые заразы зевоты указывают на то, что только обонятельная связь между крысами в клетках с перфорированным непрозрачным разделительным выставленным заразой зевоты. Что видно из окна времени четыре и далее, так как интервал доверия средних не пересекается с интервалом доверия случайно выделенного числа зевот в течение 60-минутного периода. Группа указала, как и ожидалось, что случайное распределение числа зевок в каждой крысе в период наблюдения, производится зевота ставки, которые колебались примерно на нуле, не демонстрируя каких-либо видимых моделей.
В этом репрезентативном эксперименте со знакомыми крысами-мужчинами ни одна из четырех тестовых ситуаций не стимулировала заразу зевоты, потому что их интервалы доверия пересекались с случайно сгенерированной полосой интервала доверия. Кроме того, не было никаких различий между четырьмя тестовыми ситуациями, даже несмотря на то, что общее увеличение заразы зевоты в течение 10 окон времени отличается от нулевого склона. Не забудьте отслеживать знакомые и незнакомые личности крыс для правильной интерпретации результатов, а также очистить клетки наблюдения между экспериментами.
Фармакологическая процедура может быть использована для блокирования слуховой связи, и полностью отделить слуховое воздействие на заразные зевая от воздействия со стороны других чувств. Этот метод проложил путь для сравнения заразных зевая по всем видам как с точки зрения чувств участие, и сила ответа, сравнивая заразные зевая кривых. Помните, чтобы тщательно обрабатывать клетки наблюдения, потому что они могут случайно сломать и привести к травмам.
