우리의 프로토콜은 쥐의 전염성 하품에 어떤 감각이 관여 할 수 있는지 쉽게 조사 할 수있는 방법을 제공하기 때문에 중요합니다. 비침습적 절차의 사용과 전염성 하품 측정계산 속도를 높이는 응용 프로그램 소프트웨어의 가용성은 이 기술의 주요 장점입니다. 이 기술을 수행 한 적이없는 개인은 구현에 큰 어려움에 직면해서는 안됩니다, 그들은 체계적으로 각 단계를 따르고 관찰 사례를 구성 할 때 전문적인 조언을 추구제공.
이 방법의 시각적 데모는 실험 중에 관찰 케이지의 공간 배열을 이해하는 데 도움이 됩니다. 치료의 지정에 오류를 방지하는 데 도움. 그 절차를 시연하는 것은 에블린 베리스테인 카스티요, 내 실험실에서 포스트 독이 될 것입니다.
테스트 세션을 설정하려면 4마리의 쥐를 개별 케이지의 관측실로 옮기습니다. 동물이 적응하는 동안, 방을 충분히 조명 천장 램프 아래에 큰 직사각형 테이블에 반전 된 T 자형 테이블을 배치합니다. 각 관찰 케이지의 하단에 필터 용지를 놓고 케이지를 반전된 T자 형 테이블의 양쪽에 쌍으로 놓습니다.
각 케이지 쌍 사이에 칸막이를 배치하고 전략적으로 두 개의 디지털 캠코더를 배치하여 각 쥐 쌍의 하품 동작을 기록합니다. 캠코더가 삼각대에 단단히 고정되고 관찰 케이지에 올바르게 지향되는지 확인한 후 캠코더를 데스크톱 컴퓨터에 연결하여 쥐의 동작을 동시에 모니터링합니다. 동물이 15분 동안 적응했을 때, 이전에 결정된 할당에 따라 관찰 케이지에 배치하고, 각 캠코더에 자동 초점을 설정합니다.
비디오 녹화와 스톱워치를 동시에 시작하여 60분 의 관찰 기간이 끝날 때 비디오 녹화를 중지합니다. 관찰이 끝나면 쥐를 음식과 물에 접근할 수 있는 동물 시설의 집 케이지로 되돌려 놓습니다. 그런 다음 하루 동안 후속 시험 세션을 수행하기 위해 실험 세트를 준비하기 전에 무독성 세제로 관찰 케이지를 철저히 청소하십시오.
마지막 세션 이후에는 관찰자를 위한 표준 재생 시스템을 사용하여 컴퓨터 화면에서 각 비디오를 재생합니다. 관찰자가 먼저 각 비디오를 보고 하품 동작을 정상 속도로 한 번 데이터 시트에 기록하고, 더 느린 속도로 추가 보기를 통해 하품을 쉽게 관찰하고 측정할 수 있습니다. 하품 점수를 매기려면 수직 선을 사용하여 수퍼스크립트로 작성된 분으로 하품의 발생을 나타냅니다.
모든 하품이 득점되면 각 쥐의 하품 시퀀스를 스프레드시트에 기록합니다. 하품이 가장 가까운 분으로 기록된 경우, 각 관련 분에 하품 수를 입력하고 0을 사용하여 지정된 분에 하품이 발생하지 않은 경우 세포를 채웁니다. 그런 다음 워크시트를 텍스트 파일로 저장합니다.
하품이 1분의 가장 가까운 소수점까지 기록된 경우 시퀀스 하향식을 입력합니다. NA를 사용하여 행의 하품 수가 열보다 낮은 쥐 열의 빈 공간을 채웁니다. 쥐에 대해 기록된 하품행의 최대 수와 함께.
그런 다음 워크시트를 텍스트 파일로 저장합니다. 모든 데이터가 입력되면 텍스트 파일을 확장 코드 R로 프로그램 코드를 R.Save로 가져오고 하품이 정수 또는 소수 번호로 기록되었는지 여부에 따라 특정 프로그램 코드를 다운로드합니다. 그런 다음 각 쥐 쌍과 원하는 시간 프레임 수에 대한 프로그램을 실행합니다.
실행이 끝나면 각 쥐의 하품 수를 임의로 분배하여 프로그램을 다시 실행합니다. 하품 전염 곡선을 만들려면 스프레드시트에 이전에 저장된 데이터를 사용하여 각 쥐 쌍, 시간 창 및 테스트 상황에 대한 전염률에서 비전도 속도를 빼서 관찰된 데이터 및 인공 데이터의 분석을 분리합니다. 이 대표적인 실험에서, 익숙하지 않은 수컷 쥐 사이의 하품 전염은 1분에서 10분까지 다양한 시간 창의 범위에서 측정되었다.
이 하품 전염 곡선은 천공 불투명 한 분배기를 가진 케이지에 있는 쥐 사이 만 후각 통신 하품 전염을 나타낸다는 것을 표시합니다. 평균의 신뢰 간격이 60 분 동안 무작위로 할당 된 하품 수의 신뢰 간격과 겹치지 않기 때문에 시간 창 4 이후에서 분명하다. 밴드는 예상대로 관찰 기간 동안 각 쥐의 하품 수를 임의로 할당하여 명백한 패턴을 보여주지 않고 약 0으로 진동하는 하품 속도를 생성했다고 지적했다.
친숙한 수컷 쥐를 대상으로 한 대표적인 실험에서는, 자신감 간격이 무작위로 생성된 신뢰 간격 대역과 겹치기 때문에 4가지 시험 상황 중 어느 것도 하품 전염을 자극하지 않았다. 또한, 10시간 동안 하품 전염의 전반적인 증가가 0 경사와 는 다르지만 네 가지 테스트 상황 사이에는 차이가 없었다. 결과의 정확한 해석을 위해 쥐의 친숙하고 익숙하지 않은 정체성을 추적하고 실험 사이의 관찰 케이지를 청소하는 것을 기억하십시오.
약리학적 절차는 청각 통신을 차단하고, 전염성 하품에 대한 청력 효과를 다른 감각으로부터의 영향으로부터 완전히 분리하는 데 사용될 수 있다. 이 기술은 관련된 감각의 관점에서 종 전체에 걸쳐 전염성 하품을 비교하는 길을 열어, 그리고 전염성 하품 곡선을 비교하여 응답의 강도. 그들은 실수로 휴식과 부상을 일으킬 수 있기 때문에 주의 깊게 관찰 케이지를 처리하는 것을 기억하십시오.
