Этот протокол является одним из самых простых протоколов трансплантации легких для моделей крупных животных и обеспечивает наиболее подробную информацию с точки зрения хирургического лечения. Основными преимуществами этого метода являются описание операции, оценка изолированной функции левого легкого после трансплантации и стабилизация свиньи во время операции. Этот метод полезен в исследованиях профузии легких ex-situ для подтверждения результатов ex-situ с помощью модели реперфузионной трансплантации in vivo.
Реперфузионная модель трансплантации легких in vivo полезна для проверки результатов профузии легких ex-situ, а также может быть использована при тестировании искусственных органов, таких как биоинженерные или механические легкие. Начните с того, что расположите свинью в правостороннем положении пролежня для левосторонней латеральной торакотомии. Затем при пальпации определите кончик левой лопатки в мечевидном отростке, ниже грудины, и соедините две выявленные точки, чтобы отметить место разреза торакотомии длиной 20 сантиметров.
После введения анестезии скальпелем сделайте надрез на коже, а затем с помощью электрокоагуляции рассеките подкожные слои и мышечные слои животного. Широчайшая мышца спины должна быть разделена. После определения ребра непосредственно под разрезом прижгите его сверху, чтобы обнажить межреберные мышцы, избегая межреберного сосудисто-нервного пучка.
Используйте комарный гемостат, чтобы проколоть межреберные мышцы непосредственно над ребром, а затем нащупайте пальцем внутри грудной клетки спайки. Пока прижигается верхний край ребра, отодвиньте легкое с помощью отсоса Янкауэра, чтобы продлить торакотомию кпереди до одного дюйма от грудины и сзади к параспинальным мышцам. Вставив стернальный ретрактор Кули, откройте торакотомию шириной 10 сантиметров, чтобы втянуть легкое и обнажить левую гемиазигозную вену.
Ножницами Метценбаума и тонким нижним рассекают левую гемиазигозную вену по окружности. Обведя сосуд шелковыми завязками, перевязайте и пересеките вену. Рассеките левую легочную артерию, или ПА, и левую легочную вену, или ВП, прежде чем окружить вены шелковыми связками.
Через пять минут введения гепарина зажмите ПА перекрестным зажимом Дебейки, левый передний ПВ зажимом Сатинского и левый бронх зажимом Spoon Pots. Пересеките ПА, левый нижний ВП и левый бронх, оставив не менее 0,5 сантиметра тканевой манжеты. После разделения левой нижней легочной связки удаляют левое легкое.
Для трансплантации донорское легкое вводят в грудную клетку реципиента, начиная с нижней доли, не вдавливая легкое в это место. Затем выполняют бронхиальный анастомоз с помощью нити 4,0 Prolene на игле TF. Для оценки бронхиального анастомоза в отсасывающем секрете выполняют бронхоскопию левого и правого легкого, вводя бронхоскоп в эндотрахеальную трубку с помощью переходного соединения, затем подключают эндоскоп к отсасыванию перед продвижением бронхоскопа в левый бронх.
Наблюдайте за дыханием легких и осматривайте жизненно важные органы при бронхиальном анастомозе. Повторите процесс с правой стороны. Затем используйте шовный материал 6.0 Prolene на иглах BV-1 для выполнения анастомоз левого предсердия или LA «конец в конец» с последующим удалением лишней ткани.
После включения донорских SVP в нижний анастомоз PV и LA завершите ПА-анастомоз шовным швом 6,0 Prolene на иглах BV-1 с использованием проходного анастомоза «конец в конец». Позже подтвердите гепаринизацию и введите животному сдвиг калия. Затем частично откройте зажим PA, чтобы удалить воздух, и дайте крови течь по линии шва.
Затем отпустите зажим LA и дайте шовной линии снова прокачаться, чтобы еще больше выпустить захваченный воздух. Завяжите LA, а затем полностью снимите зажим PA. После этого снимите бронхиальный зажим и увеличьте дыхательный объем до 10 миллилитров на килограмм.
После введения 20 французских податливых плевральных дренажных трубок закройте торакотомию в три слоя. Ножницами Метценбаума вскройте левую плевру, чтобы взять образцы крови из левой нижней доли. Вскрыть правую плевру для рассечения правой легочной артерии.
Затем наложите зажим, чтобы остановить перфузию правого легкого. Направьте иглу 21 калибра к левым легочным венам и в сторону от общего левого предсердия, чтобы взять образец крови из анастомоза LA для оценки функции левого легкого. После пережатия берут образцы крови из левого ВВ-анастомоза иглой 21 калибра, направленной в сторону левого легкого.
Репрезентативный анализ указывает на типичные изменения соотношения ПФ и образование отека во время протокола трансплантации легких. При реперфузии соотношение PF снизилось примерно на 100 миллиметров ртутного столба, так как левое легкое не сразу было эффективно при оксигенации. При изолированной оценке левого легкого через четыре часа соотношение ПФ было стабильным.
При успешной трансплантации левое легкое может испытывать увеличение веса примерно на 20-50% из-за остаточной крови в кровообращении. Через 12 часов после пересадки левого легкого был проведен анализ газов крови. Было замечено, что уровень калия повышался в течение 60-120 минут реперфузии.
В течение четырехчасовой реперфузии требовалось от двух до четырех смен, чтобы поддерживать уровень калия ниже пяти миллимолей на литр. Вместо того, чтобы накладывать швы на верхние легочные вены реципиента, для контроля сосудов можно использовать боковые зажимы, а сосуды можно легко перешить.
