Este protocolo é um dos mais simples protocolos de transplante pulmonar para modelos de animais de grande porte e fornece o maior detalhe em termos de manejo cirúrgico. As principais vantagens dessa técnica são descrever a cirurgia, avaliar a função pulmonar esquerda isolada pós-transplante e estabilizar o porco durante a cirurgia. O método é benéfico na pesquisa de profusão pulmonar ex-situ para validar achados ex-situ com um modelo de transplante de reperfusão in vivo.
O modelo de reperfusão in vivo de transplante pulmonar é benéfico para testar achados de profusão pulmonar ex-situ e também pode ser usado em testes de órgãos artificiais, como pulmões bioprojetados ou mecânicos. Iniciar posicionando o porco em decúbito lateral direito para toracotomia ântero-lateral esquerda. Em seguida, identificar a ponta da escápula esquerda no processo xifoide, inferior ao esterno à palpação, e conectar os dois pontos identificados para marcar o local da incisão da toracotomia com 20 centímetros de comprimento.
Após a indução anestésica, utilizar bisturi para incisão sobre a pele e, em seguida, utilizar eletrocautério para dissecar as camadas subcutâneas e musculares do animal. O grande dorsal deve ser dividido. Após identificar a costela imediatamente abaixo da incisão, cauterizar em cima da costela para expor os músculos intercostais, evitando o feixe neurovascular intercostal.
Use um hemostático de mosquito para puncionar os músculos intercostais imediatamente acima da costela e, em seguida, sinta dentro do peito para aderências com um dedo. Enquanto a borda superior da costela está sendo cauterizada, empurre o pulmão para longe usando uma sucção de Yankauer para estender a toracotomia anteriormente até um centímetro de distância do esterno e posteriormente aos músculos paraespinhais. Com a inserção de um afastador esternal de Cooley, abra a toracotomia com 10 centímetros de largura para retrair o pulmão e expor a veia hemiázigos esquerda.
Use tesoura de Metzenbaum e uma fina parte inferior para dissecar circunferencialmente a veia hemiázigos esquerda. Circulando o vaso com laços de seda, ligue e transeccione a veia. Dissecar a artéria pulmonar esquerda, ou AP, e as veias pulmonares esquerdas, ou PV, antes de circundar as veias nos laços de seda.
Após cinco minutos da administração da heparina, pinçar o PA com pinça cruzada de DeBakey, o PV anterior esquerdo com pinça Satinsky e o brônquio esquerdo com pinça Spoon Pots. Transeccionar o AP, o PV inferior esquerdo e o brônquio esquerdo deixando pelo menos 0,5 centímetros de manguito tecidual. Após a divisão do ligamento pulmonar inferior esquerdo, remova o pulmão esquerdo.
Para o transplante, insira o pulmão do doador no tórax do receptor, começando com o lobo inferior sem forçar o pulmão para o local. Em seguida, realizar a anastomose brônquica com sutura de Prolene 4.0 em agulha de TF. Para avaliar a anastomose brônquica nas secreções de sucção, realizar broncoscopia pulmonar direita e esquerda inserindo um broncoscópio no tubo endotraqueal usando uma conexão adaptadora e, em seguida, conectar o aparelho à sucção antes de avançar o broncoscópio para o brônquio esquerdo.
Observe a respiração pulmonar e inspecione os sinais vitais nas anastomoses brônquicas. Repita o processo do lado direito. Em seguida, utilizar sutura de Prolene 6.0 em agulhas BV-1 para realizar anastomose término-terminal do átrio esquerdo ou AE seguida de corte do excesso de tecido.
Após a incorporação das SVPs do doador na anastomose inferior do PV e AE, completar a anastomose AP com sutura de Prolene 6.0 em agulhas BV-1 usando uma anastomose término-terminal em execução. Posteriormente, confirmar a heparinização e administrar um desvio de potássio no animal. Em seguida, abra parcialmente a pinça PA para retirar o ar e deixe o sangue fluir através da linha de sutura.
Em seguida, solte a pinça do LA e deixe a linha de sutura sangrar para liberar ainda mais o ar aprisionado. Amarre o LA e, em seguida, remova a braçadeira PA completamente. Uma vez feito, remova a pinça brônquica e aumente os volumes correntes para atingir 10 mililitros por quilograma.
Após a inserção de um dreno torácico maleável de 20 French, fechar a toracotomia em três camadas. Usando a tesoura de Metzenbaum, abra a pleura esquerda para coletar amostras de sangue do lobo inferior esquerdo. Abra a pleura direita para dissecar a artéria pulmonar direita.
Em seguida, coloque uma pinça para interromper a perfusão do pulmão direito. Direcione uma agulha de calibre 21 em direção às veias pulmonares esquerdas e para longe do átrio esquerdo comum para colher uma amostra de sangue da anastomose do AE para avaliar a função pulmonar esquerda. Após o clampeamento, colher as amostras de sangue da anastomose das VVPP esquerdas com uma agulha calibre 21 direcionada para o pulmão esquerdo.
A análise representativa indica alterações típicas da razão FP e formação de edema durante o protocolo de transplante pulmonar. Na reperfusão, as relações de FP caíram em aproximadamente 100 milímetros de mercúrio, pois o pulmão esquerdo não foi imediatamente efetivo na oxigenação. Na avaliação isolada do pulmão esquerdo em quatro horas, a relação FP foi estável.
Em um transplante bem-sucedido, o pulmão esquerdo poderia experimentar aproximadamente 20% a 50% de ganho de peso devido ao sangue residual na circulação. Após 12 horas do transplante de pulmão esquerdo, foi realizada gasometria. Observou-se que o nível de potássio estava aumentado durante 60 a 120 minutos de reperfusão.
Aproximadamente dois a quatro turnos foram necessários durante quatro horas de reperfusão para manter o potássio abaixo de cinco milimoles por litro. Em vez de suturar as veias pulmonares superiores do receptor, as pinças de mordida lateral podem ser usadas para controle vascular e os vasos podem ser facilmente sobrecosturados.
