Questo protocollo è uno dei protocolli di trapianto di polmone più semplici per modelli animali di grandi dimensioni e fornisce il maggior numero di dettagli in termini di gestione chirurgica. I principali vantaggi di questa tecnica sono la descrizione dell'intervento chirurgico, la valutazione della funzione polmonare sinistra isolata dopo il trapianto e la stabilizzazione del suino durante l'intervento chirurgico. Il metodo è utile nella ricerca sulla profusione polmonare ex-situ per convalidare i risultati ex-situ con un modello di trapianto di riperfusione in vivo.
Il modello di riperfusione in vivo del trapianto di polmone è utile per testare i risultati della profusione polmonare ex-situ e potrebbe anche essere utilizzato nei test di organi artificiali, come i polmoni bioingegnerizzati o meccanici. Iniziare posizionando il suino in una posizione di decubito laterale destro per la toracotomia laterale anteriore sinistra. Quindi identificare la punta della scapola sinistra nel processo xifoideo, inferiore allo sterno con palpazione, e collegare i due punti identificati per segnare il sito di incisione della toracotomia lungo 20 centimetri.
Dopo aver indotto l'anestesia, utilizzare un bisturi per praticare un'incisione sulla pelle e quindi utilizzare l'elettrocauterizzazione per sezionare gli strati sottocutanei e gli strati muscolari dell'animale. Il gran dorsale deve essere diviso. Dopo aver identificato la costola immediatamente sotto l'incisione, cauterizzare sopra la costola per esporre i muscoli intercostali evitando il fascio neurovascolare intercostale.
Usa un emostatico di zanzara per perforare i muscoli intercostali immediatamente sopra la costola e poi senti all'interno del torace per le aderenze con un dito. Mentre il bordo superiore della costola viene cauterizzato, spingere via il polmone utilizzando un'aspirazione di Yankauer per estendere la toracotomia anteriormente fino a un pollice di distanza dallo sterno e posteriormente ai muscoli paraspinali. Inserendo un divaricatore sternale di Cooley, aprire la toracotomia larga 10 centimetri per ritrarre il polmone ed esporre la vena emiazigote sinistra.
Usa le forbici Metzenbaum e un fondo inferiore per sezionare circonferenzialmente la vena emiazygos sinistra. Girando intorno al vaso con fascette di seta, legare e transettare la vena. Sezionare l'arteria polmonare sinistra, o PA, e le vene polmonari sinistre, o PV, prima di circondare le vene nelle cravatte di seta.
Dopo cinque minuti di somministrazione di eparina, bloccare il PA con una pinza a croce DeBakey, il PV anteriore sinistro con una pinza Satinsky e il bronco sinistro con una pinza Spoon Pots. Trascinare il PA, il PV inferiore sinistro e il bronco sinistro lasciando almeno 0,5 centimetri di cuffia di tessuto. Dopo aver diviso il legamento polmonare inferiore sinistro, rimuovere il polmone sinistro.
Per il trapianto, inserire il polmone del donatore nel torace del ricevente, iniziando dal lobo inferiore senza forzare il polmone in quella sede. Quindi eseguire l'anastomosi bronchiale utilizzando una sutura 4.0 Prolene su un ago TF. Per valutare l'anastomosi bronchiale nelle secrezioni di aspirazione, eseguire la broncoscopia polmonare sinistra e destra inserendo un broncoscopio nel tubo endotracheale utilizzando un collegamento adattatore, quindi collegare l'endoscopio all'aspirazione prima di far avanzare il broncoscopio nel bronco sinistro.
Osservare la respirazione polmonare e ispezionare i parametri vitali nell'anastomosi bronchiale. Ripeti il processo sul lato destro. Successivamente, utilizzare una sutura 6.0 Prolene sugli aghi BV-1 per eseguire l'anastomosi end-to-end dell'atrio sinistro o dell'LA seguita dal taglio del tessuto in eccesso.
Dopo aver incorporato le SVP del donatore nell'anastomosi PV e LA inferiore, completare l'anastomosi PA con una sutura di Prolene 6.0 su aghi BV-1 utilizzando un'anastomosi end-to-end in esecuzione. Successivamente, confermare l'eparinizzazione e somministrare un cambio di potassio all'animale. Quindi aprire parzialmente il morsetto PA per disarieggiare e lasciare che il sangue fluisca attraverso la linea di sutura.
Quindi, rilascia il morsetto LA e lascia che la linea di sutura torni a sanguinare per rilasciare ulteriormente l'aria intrappolata. Legare il LA e quindi rimuovere completamente il morsetto PA. Una volta fatto, rimuovere la pinza bronchiale e aumentare i volumi correnti fino a raggiungere i 10 millilitri per chilogrammo.
Dopo aver inserito un tubo toracico malleabile 20 francese, chiudere la toracotomia in tre strati. Usando le forbici Metzenbaum, apri la pleura sinistra per prelevare campioni di sangue dal lobo inferiore sinistro. Aprire la pleura destra per sezionare l'arteria polmonare destra.
Quindi posizionare una pinza per fermare la perfusione polmonare destra. Dirigere un ago calibro 21 verso le vene polmonari sinistre e lontano dall'atrio sinistro comune per prelevare un campione di sangue dall'anastomosi LA per valutare la funzione polmonare sinistra. Dopo il clampaggio, prelevare i campioni di sangue dall'anastomosi PV sinistra con un ago calibro 21 diretto verso il polmone sinistro.
L'analisi rappresentativa indica le variazioni tipiche del rapporto PF e la formazione di edema durante il protocollo di trapianto di polmone. Alla riperfusione, i rapporti PF sono diminuiti di circa 100 millimetri di mercurio poiché il polmone sinistro non era immediatamente efficace all'ossigenazione. Nella valutazione del polmone sinistro isolato a quattro ore, il rapporto PF è risultato stabile.
In un trapianto riuscito, il polmone sinistro potrebbe subire un aumento di peso di circa il 20-50% a causa del sangue residuo in circolo. Dopo 12 ore dal trapianto di polmone sinistro, è stata eseguita l'emogasanalisi. È stato osservato che il livello di potassio è aumentato durante 60-120 minuti di riperfusione.
Sono stati necessari da due a quattro turni durante la riperfusione di quattro ore per mantenere il potassio inferiore a cinque millimoli per litro. Invece di legare la sutura alle vene polmonari superiori del ricevente, i morsetti laterali possono essere utilizzati per il controllo vascolare e i vasi possono essere facilmente cuciti.
