ESLPのブタ幼体モデルにおける左肺同所性移植

このプロトコルは、大動物モデルのための最も簡単な肺移植プロトコルの1つであり、外科的管理に関して最も詳細を提供します。この技術の主な利点は、手術の説明、移植後の孤立した左肺機能の評価、および手術中の豚の安定化です。この方法は、in vivo再灌流移植モデルでex-situ所見を検証するために、ex-situ肺増殖研究において有益です。

肺移植のin vivo再灌流モデルは、上皮外肺の増殖所見の検査に有益であり、バイオエンジニアリング肺や機械的肺などの人工臓器検査にも使用できます。まず、左前外側開胸術のためにブタを右外側褥瘡の位置に配置します。次に、触診で胸骨より下にある剣状突起の左肩甲骨の先端を特定し、識別された2つのスポットを接続して、長さ20センチメートルの開胸切開部位をマークします。

麻酔を誘発した後、メスを使用して皮膚を切開し、電気焼灼を使用して動物の皮下層と筋肉層を解剖します。広背筋は分割する必要があります。切開部のすぐ下の肋骨を特定した後、肋骨の上部を焼灼して、肋間神経血管束を避けながら肋間筋を露出させます。

蚊の止血剤を使用して、肋骨のすぐ上の肋間筋に穴を開け、指で胸の内側を触って癒着します。肋骨の上端が焼灼されている間に、ヤンカウアー吸引を使用して肺を押しのけ、胸骨から1インチ離れるまで開胸術を前方に伸ばし、後方に傍脊髄筋まで伸ばします。クーリー胸骨リトラクターを挿入して、開胸術を幅10センチ開いて肺を引っ込め、左半接合静脈を露出させます。

メッツェンバウムのはさみと細かい下部を使用して、左半接合静脈を円周方向に解剖します。絹のタイで容器を一周することにより、静脈を結紮して切断します。シルクタイで静脈を囲む前に、左肺動脈(PA)と左肺静脈(PV)を解剖します。

ヘパリン投与の5分後、PAをDeBakeyクロスクランプでクランプし、左前部PVをSatinskyクランプでクランプし、左気管支をスプーンポットクランプでクランプします。PA、左下PV、左気管支を切除し、少なくとも0.5センチメートルの組織カフを残します。左下肺靭帯を分割した後、左肺を切除します。

移植の場合、ドナーの肺をレシピエントの胸に挿入し、肺をその場所に押し込まずに下葉から始めます。次に、TF針に4.0プロレン縫合糸を使用して気管支吻合を行います。吸引分泌物中の気管支吻合を評価するには、アダプター接続を使用して気管支鏡を気管内チューブに挿入して左右の肺気管支鏡検査を行い、スコープを吸引に接続してから気管支鏡を左気管支に進めます。

肺呼吸を観察し、気管支吻合のバイタルを検査します。右側でこのプロセスを繰り返します。次に、BV-1 ニードルに 6.0 プロレン縫合糸を使用して、左心房または LA 吻合をエンドツーエンドで行い、その後、余分な組織をトリミングします。

ドナーSVPを下PVおよびLA吻合に組み込んだ後、エンドツーエンド吻合を使用して、BV-1針に6.0プロレン縫合でPA吻合を完了します。その後、ヘパリン化を確認し、動物にカリウムシフトを投与します。次に、PAクランプを部分的に開いて空気を抜き、縫合線に血を流します。

次に、LAクランプを解放し、縫合糸を逆出血させて、閉じ込められた空気をさらに放出します。LAを結び、PAクランプを完全に取り外します。完了したら、気管支クランプを取り外し、一回換気量を増やして10ミリリットル/キログラムを目標にします。

20フレンチ可鍛性胸腔チューブを挿入した後、開胸術を3層に閉じます。メッツェンバウムはさみを使用して、左胸膜を開き、左下葉から血液サンプルを採取します。右胸膜を開いて、右肺動脈を解剖します。

次に、クランプを配置して右肺灌流を停止します。21ゲージの針を左肺静脈に向け、総左心房から離してLA吻合から血液サンプルを採取し、左肺機能を評価します。クランプ後、左肺に向けられた21ゲージの針で左PV吻合から血液サンプルを採取します。

代表的な分析は、肺移植プロトコル中の典型的なPF比の変化と浮腫の形成を示しています。再灌流では、左肺がすぐに酸素化に効果がなかったため、PF比が約100水銀柱で低下しました。4時間後の孤立した左肺評価では、PF比は安定していました。.

移植が成功すると、左肺は循環中の血液の残留により、約20%から50%の体重増加を経験する可能性があります。左肺移植から12時間後、血液ガス分析を行った。カリウムレベルは、60〜120分の再灌流中に上昇したことが観察されました。.

カリウムを1リットルあたり5ミリモル未満に保つために、4時間の再灌流中に約2〜4シフトが必要でした。.レシピエントの上肺静脈を結紮する縫合糸の代わりに、サイドバイトクランプを血管制御に使用でき、血管を簡単に縫い合わせることができます。