Dieses Protokoll ist eines der einfachsten Lungentransplantationsprotokolle für Großtiermodelle und bietet die meisten Details in Bezug auf das chirurgische Management. Die Hauptvorteile dieser Technik sind die Beschreibung der Operation, die Beurteilung der isolierten Funktion der linken Lunge nach der Transplantation und die Stabilisierung des Schweins während der Operation. Die Methode ist in der Ex-situ-Lungenprofusionsforschung von Vorteil, um Ex-situ-Befunde mit einem In-vivo-Reperfusionstransplantationsmodell zu validieren.
Das In-vivo-Reperfusionsmodell der Lungentransplantation ist vorteilhaft für die Prüfung von Ex-situ-Lungenprofusionsbefunden und könnte auch bei Tests künstlicher Organe wie biotechnologisch hergestellten oder mechanischen Lungen eingesetzt werden. Beginnen Sie mit der Positionierung des Schweins in einer rechten lateralen Dekubitusposition für die linke anteriore laterale Thorakotomie. Identifizieren Sie dann die Spitze des linken Schulterblatts im Processus xiphoideus, unterhalb des Brustbeins, durch Palpation, und verbinden Sie die beiden identifizierten Stellen, um die 20 Zentimeter lange Thorakotomie-Inzisionsstelle zu markieren.
Nachdem Sie die Anästhesie eingeleitet haben, machen Sie mit einem Skalpell einen Schnitt in die Haut und verwenden Sie dann Elektrokauter, um die subkutanen Schichten und Muskelschichten des Tieres zu sezieren. Der Latissimus dorsi muss geteilt werden. Nachdem Sie die Rippe unmittelbar unter dem Einschnitt identifiziert haben, kauterisieren Sie auf der Oberseite der Rippe, um die Zwischenrippenmuskeln freizulegen und gleichzeitig das neurovaskuläre Zwischenrippenbündel zu vermeiden.
Verwenden Sie ein Moskito-Hämostat, um die Zwischenrippenmuskeln direkt über der Rippe zu punktieren, und tasten Sie dann mit einem Finger in der Brust nach Verwachsungen. Während der obere Rand der Rippe verödet wird, schieben Sie die Lunge mit einer Yankauer-Absaugung weg, um die Thorakotomie nach vorne bis einen Zentimeter vom Brustbein und nach hinten zu den paraspinalen Muskeln zu verlängern. Durch das Einsetzen eines Cooley-Sternum-Retraktors wird die Thorakotomie 10 Zentimeter breit geöffnet, um die Lunge zurückzuziehen und die linke Hemiazygotenvene freizulegen.
Verwenden Sie eine Metzenbaum-Schere und eine feine Unterserie, um die linke Hemiazygosvene umlaufend zu präparieren. Indem Sie das Gefäß mit Seidenbändern umkreisen, ligieren und durchtrennen Sie die Vene. Sezieren Sie die linke Lungenarterie (PA) und die linken Lungenvenen (PV), bevor Sie die Venen mit den Seidenbändern umschließen.
Nach fünfminütiger Heparingabe klemmen Sie die PA mit einer DeBakey-Kreuzklemme, die linke vordere PV mit einer Satinsky-Klemme und die linken Bronchus mit einer Spoon Pots-Klemme. Durchtrennen Sie die PA, den linken unteren PV und den linken Bronchus, wobei mindestens 0,5 Zentimeter Gewebemanschette übrig bleiben. Nach der Durchtrennung des linken unteren Lungenbandes wird der linke Lungenflügel entfernt.
Für die Transplantation wird die Spenderlunge in die Brust des Empfängers eingeführt, beginnend mit dem unteren Lappen, ohne die Lunge in die Stelle zu zwingen. Dann führen Sie die Bronchialanastomose mit einer 4.0 Prolene-Naht auf einer TF-Nadel durch. Um die Bronchialanastomose in Saugsekreten zu beurteilen, führen Sie eine Bronchoskopie der linken und rechten Lunge durch, indem Sie ein Bronchoskop mit einer Adapterverbindung in den Endotrachealtubus einführen, und schließen Sie dann das Endoskop an die Absaugung an, bevor Sie das Bronchoskop in den linken Bronchus einführen.
Beobachten Sie die Lungenatmung und inspizieren Sie die Vitalfunktionen in der Bronchialanastomose. Wiederholen Sie den Vorgang auf der rechten Seite. Verwenden Sie als Nächstes eine 6.0 Prolene-Naht auf BV-1-Nadeln, um eine End-to-End-Anastomose des linken Vorhofs oder einer LA-Anastomose durchzuführen, gefolgt von der Entfernung von überschüssigem Gewebe.
Nach dem Einbau der Spender-SVPs in die inferiore PV- und LA-Anastomose wird die PA-Anastomose mit einer 6,0-Prolene-Naht auf BV-1-Nadeln unter Verwendung einer laufenden End-to-End-Anastomose vervollständigt. Bestätigen Sie später die Heparinisierung und verabreichen Sie dem Tier eine Kaliumverschiebung. Öffnen Sie dann die PA-Klemme teilweise, um sie zu entlüften und das Blut durch die Nahtleitung fließen zu lassen.
Lösen Sie als Nächstes die LA-Klemme und lassen Sie die Nahtlinie wieder entlüften, um die eingeschlossene Luft weiter freizusetzen. Binden Sie die LA zu und entfernen Sie dann die PA-Klemme vollständig. Wenn Sie fertig sind, entfernen Sie die Bronchialklemme und erhöhen Sie das Atemzugvolumen auf 10 Milliliter pro Kilogramm.
Nach dem Einsetzen eines 20 französischen formbaren Thoraxschlauchs wird die Thorakotomie in drei Schichten verschlossen. Öffnen Sie mit einer Metzenbaum-Schere das linke Brustfell, um Blutproben aus dem linken Unterlappen zu entnehmen. Öffnen Sie das rechte Rippenfell, um die rechte Lungenarterie zu präparieren.
Platzieren Sie dann eine Klemme, um die Durchblutung der rechten Lunge zu stoppen. Richten Sie eine 21-Gauge-Nadel auf die linken Lungenvenen und weg vom linken Vorhof, um eine Blutprobe aus der LA-Anastomose zu entnehmen, um die Funktion der linken Lunge zu beurteilen. Nach dem Abklemmen werden die Blutproben aus der linken PV-Anastomose mit einer 21-Gauge-Nadel entnommen, die auf die linke Lunge gerichtet ist.
Die repräsentative Analyse zeigt typische Veränderungen des PF-Verhältnisses und die Bildung von Ödemen während des Lungentransplantationsprotokolls. Bei der Reperfusion sanken die PF-Verhältnisse um etwa 100 Millimeter Quecksilbersäule, da die linke Lunge nicht sofort mit Sauerstoff versorgt werden konnte. Bei der Beurteilung der isolierten linken Lunge nach vier Stunden war das PF-Verhältnis stabil.
Bei einer erfolgreichen Transplantation kann die linke Lunge aufgrund von Restblut im Kreislauf eine Gewichtszunahme von etwa 20 % bis 50 % erfahren. Nach 12 Stunden nach der Transplantation der linken Lunge wurde die Blutgasanalyse durchgeführt. Es wurde beobachtet, dass der Kaliumspiegel während 60 bis 120 Minuten Reperfusion erhöht war.
Während der vierstündigen Reperfusion waren etwa zwei bis vier Schichten erforderlich, um den Kaliumgehalt unter fünf Millimol pro Liter zu halten. Anstatt die oberen Lungenvenen des Empfängers zu vernähen, können die seitlichen Beißklemmen zur Gefäßkontrolle verwendet werden und die Gefäße können leicht übernäht werden.
