Минимально инвазивный, быстрый метод латеральной гемисекции спинного мозга для моделирования открытых повреждений спинного мозга у крыс

Этот протокол важен, потому что травмы спинного мозга по-прежнему распространены сегодня, и необходимы исследования для дальнейшего понимания этих травм и разработки возможных методов лечения. Эта методика более точна и воспроизводима, чем компрессионные и ушибные травмы, и менее инвазивна, чем травмы при полной ламинэктомии. Таким образом, это может быть лучшим вариантом для моделирования травмы спинного мозга, чем ранее описанные процедуры.

Для начала используйте лезвие скальпеля 20, чтобы открыть операционную область, сделав разрез длиной от двух до 2,5 сантиметров через все слои кожи вдоль позвоночника. Расположите этот разрез параллельно позвоночному столбу, используя позвонок L1 в качестве средней точки, удлинив его примерно на один сантиметр как в направлении черепа, так и в направлении няни вдоль позвоночного столба. Мобилизуйте боковые стороны раны, разрезая соединительную ткань, окружающую мышцы.

Затем делают два параллельных разреза вдоль позвоночника, проникая в надкостницу. Сделайте разрезы рядом с отростками позвоночника с обеих сторон, охватывая расстояние между грудными позвонками 13 и L1. Рассекайте мышцы, прикрепленные к позвонкам, с помощью восьмерки респиратора до тех пор, пока не будут видны все спинномозговые связки.

Установите втягивающее устройство. Затем удаляют спинномозговые отростки 13-го грудного позвонка и первого поясничного позвонка с помощью зубных костных щипцов для визуализации всей операционной области. При необходимости используйте стерильную марлю для остановки кровотечения на протяжении всей процедуры.

Осторожно приподнимите оставшиеся отростки L1 позвоночника, приподняв дугу позвонка L1. Удалите желтую связку, чтобы получить доступ к спинному мозгу. Поднимите спинномозговые отростки дальше, открывая доступ к разорванной твердой мозговой оболочке позвоночника.

Наклоните спинномозговые отростки в краниальном направлении, чтобы визуализировать pia mater. Посмотрите через pia mater на наличие задней срединной вены, демонстрирующей среднюю линию позвоночника. Используя вену в качестве направленной биссектрисы, сделайте разрез с помощью микрохирургического скальпеля, сохраняя при этом вену.

Сделайте разрез под веной в поперечной плоскости через передний задний диаметр спинного мозга. Выполняйте гемисекцию, перемещая лезвие в сторону от центральной линии. Сделайте разрез так, чтобы не перерезать переднюю спинномозговую артерию.

Следите за тем, чтобы при перерезании спинного мозга на тело позвонка не оказывалось избыточного давления, чтобы сохранить переднюю спинномозговую артерию на вентральной стороне спинного мозга. Не закрывайте твердую мозговую оболочку непосредственно во время закрытия раны. Плотно сшивают мышцы и спинномозговые отростки, косвенно закрывая небольшую ранку на твердой мозговой оболочке.

Закройте дорсальный соединительнотканный слой швами. Этот новый минимально инвазивный метод травмы спинного мозга выполняется намного быстрее, чем традиционный хирургический подход с использованием ламинэктомии, и не требует дополнительных специализированных инструментов. Для визуализации места повреждения использовали окрашивание гематоксилином и эозином.

Другие участки могут выполняться вдоль спинного мозга, имитируя специфические нейронные повреждения. Регенерация также может быть изучена, поскольку с помощью этого метода можно установить электроды или стволовые клетки. Большинство методов, использующих модели повреждения спинного мозга с открытой раной, осуществляющие либо гемисекцию, либо операцию, могут быть упрощены и ускорены с помощью этой техники.