Техническое уточнение двусторонней мышиной модели почечной ишемии-реперфузии для исследования острого повреждения почек

Острое повреждение почек является основным фактором риска, связанным с высокой смертностью у пациентов с остановкой сердца после восстановления кровообращения. Эта процедура может быть выполнена для того, чтобы вызвать острое повреждение почек. Этот протокол заключается в том, чтобы вызвать реперфузию ишемии почки точно, безопасно и последовательно.

Демонстрировать процедуру будет Хуан Ченг-Вэй, ассистент из моей лаборатории. Для начала поместите восьминедельного самца мыши C57BL/6 под наркозом в положение лежа на операционной платформе с электрическим одеялом для поддержания температуры тела. Затем коснитесь спины, найдите поясничный отдел позвоночника и найдите реберно-вертебральные углы под обеими сторонами последнего ребра.

Нанесите лосьон для удаления волос для бритья и потрите волосы по обеим сторонам реберно-тебрального угла. Продезинфицируйте операционную область с помощью раствора Бетадина и 75%-ного спирта с помощью ватных шариков. Используйте щипцы с тонким кончиком, чтобы осторожно приподнять кожу ниже левого реберно-вертебрального угла.

Затем ножницами сделайте сантиметровый косой дорсолатеральный разрез по линиям натяжения кожи от поясничной срединной линии на левом боку. Затем разрежьте мышечную стенку левого бока, чтобы визуализировать левую почку. Осторожно надавите и отделите левую почку от окружающих тканей щипцами.

Затем определите ножку почки. Зажмите левую почечную ножку микрососудистым зажимом. Подтвердить ишемию можно видимым изменением цвета почек от розового до темно-красного.

Чтобы избежать пересыхания во время пережатия, накройте почку стерильными ватными шариками, смоченными солевым раствором. Через 25 минут откройте левый микрососудистый зажим, чтобы начать реперфузию левой почки. Верните почку в брюшную полость.

Закройте брюшную полость рассасывающимся шовным материалом 6/0. Наблюдайте за мышью до тех пор, пока она не начнет свободно двигаться и питаться. Здесь показана ишемия почки после пережатия ножки почки.

Изменение цвета почек с розового на темно-красный свидетельствует о том, что перфузия почек стала недостаточной. По сравнению с контрольной группой, сывороточные уровни азота мочевины и креатинина в крови повышались через два дня после почечной реперфузии. Этот метод прокладывает исследователям путь к изучению новых терапевтических подходов против острого повреждения почек.