急性腎障害研究のための両側性腎虚血再灌流マウスモデルの技術的改良

急性腎障害は、循環回復後の心停止患者の死亡率の高さに関連する主要な危険因子です。この手順は、急性腎障害を誘発するために実行できます。このプロトコルは、腎虚血の再灌流を正確、安全、かつ一貫して誘導することです。

手順を実演するのは、私の研究室の助手であるHuang Cheng-Weiです。まず、麻酔をかけた8週齢のC57BL/6雄マウスを、電気毛布を敷いた手術台にうつ伏せの姿勢で置き、体温を維持します。次に、背中に触れ、腰椎を見つけ、最後の肋骨の両側の下の肋骨角を探します。

脱毛ローションを塗って剃り、肋骨角領域の両側付近の髪をこすります。ベタジン溶液を使用して手術領域を消毒し、綿球を使用して75%アルコールを消毒します。細い先端鉗子を使用して、皮膚を左肋骨角より下にそっと持ち上げます。

次に、はさみを使用して、左脇腹の腰椎正中線から皮膚の緊張線に沿って1センチの斜め背外側切開を作成します。次に、左脇腹の筋壁を切除して、左腎臓を視覚化します。鉗子で左腎臓を周囲の組織から慎重に押して分離します。

次に、腎椎弓根を特定します。左腎椎弓根を微小血管クリップで固定します。腎臓の色がピンクから濃い赤に目に見える変化で虚血を確認します。

クランプ中の乾燥を避けるために、滅菌生理食塩水で湿った綿球で腎臓を覆います。25分後、左微小血管クリップを開いて左腎臓の再灌流を開始します。腎臓を腹腔に戻します。

腹腔を6/0の吸収性縫合糸材料で閉じます。マウスが自由に動き始め、餌を与え始めるまで観察します。腎椎弓根クランプ後の腎虚血がここに示されています。

腎臓の色がピンクから濃い赤に変わると、腎臓の灌流が不十分になっていることがわかります。対照群と比較して、腎再灌流の2日後に血中尿素窒素およびクレアチニンの血清濃度が上昇した。この技術は、研究者が急性腎障害に対する新しい治療アプローチを探求するための道を開きます。