Perfectionnement technique d’un modèle murin bilatéral d’ischémie rénale-reperfusion pour la recherche sur les lésions rénales aiguës

L’insuffisance rénale aiguë est un facteur de risque majeur associé à une mortalité élevée chez les patients ayant subi un arrêt cardiaque après le retour de la circulation. Cette procédure peut être effectuée pour induire une lésion rénale aiguë. Ce protocole consiste à induire une reperfusion d’ischémie rénale de manière précise, sûre et cohérente.

Huang Cheng-Wei, un assistant de mon laboratoire, fera la démonstration de la procédure. Pour commencer, placez une souris mâle C57BL/6 anesthésiée de huit semaines en position couchée sur une plate-forme chirurgicale avec une couverture chauffante pour maintenir la température corporelle. Ensuite, touchez le dos, trouvez la colonne lombaire et recherchez les angles costo-vertébraux sous les deux côtés de la dernière côte.

Appliquez une lotion dépilatoire pour raser et frotter les poils près des deux côtés de la région de l’angle costo-vertébral. Désinfectez la zone chirurgicale à l’aide d’une solution de bétadine et d’alcool à 75% à l’aide de boules de coton. Utilisez une pince à pointe fine pour soulever doucement la peau sous l’angle costo-vertébral gauche.

Ensuite, à l’aide de ciseaux, créez une incision dorsolatérale oblique d’un centimètre le long des lignes de tension cutanée à partir de la ligne médiane lombaire sur le flanc gauche. Ensuite, transectez la paroi musculaire du flanc gauche pour visualiser le rein gauche. Poussez et séparez soigneusement le rein gauche des tissus environnants à l’aide d’une pince.

Ensuite, identifiez le pédicule rénal. Clampez le pédicule rénal gauche à l’aide d’une pince microvasculaire. Confirmez l’ischémie par un changement visible de la couleur des reins du rose au rouge foncé.

Pour éviter la dessiccation pendant le serrage, couvrez le rein avec des boules de coton stériles humides avec du sérum physiologique. Après 25 minutes, ouvrez le clip microvasculaire gauche pour commencer la reperfusion du rein gauche. Remettez le rein dans la cavité abdominale.

Fermez la cavité abdominale avec des matériaux de suture résorbables 6/0. Observez la souris jusqu’à ce qu’elle commence à se déplacer librement et à se nourrir. L’ischémie rénale après clampage du pédicule rénal est illustrée ici.

Un changement de couleur des reins du rose au rouge foncé révèle que la perfusion rénale est devenue inadéquate. Par rapport aux témoins, les taux sériques d’azote uréique sanguin et de créatinine ont augmenté deux jours après la reperfusion rénale. Cette technique ouvre la voie aux chercheurs pour explorer de nouvelles approches thérapeutiques contre les lésions rénales aiguës.