Perfeccionamiento técnico de un modelo murino bilateral de isquemia renal-reperfusión para la investigación de lesiones renales agudas

La lesión renal aguda es un factor de riesgo importante asociado con una alta mortalidad en pacientes con paro cardíaco después del retorno de la circulación. Este procedimiento se puede realizar para inducir una lesión renal aguda. Este protocolo es para inducir la reperfusión por isquemia renal de forma precisa, segura y consistente.

Huang Cheng-Wei, un asistente de mi laboratorio, demostrará el procedimiento. Para comenzar, coloque un ratón macho C57BL/6 anestesiado de ocho semanas de edad en posición prona sobre una plataforma quirúrgica con una manta eléctrica para mantener la temperatura corporal. A continuación, toca la espalda, encuentra la columna lumbar y busca los ángulos costovertebrales debajo de ambos lados de la última costilla.

Aplique loción depilatoria para afeitar y frotar el vello cerca de ambos lados de la región del ángulo costovertebral. Desinfecte el área quirúrgica con una solución de Betadine y alcohol al 75% con bolas de algodón. Use pinzas de punta fina para levantar suavemente la piel por debajo del ángulo costovertebral izquierdo.

Luego, con unas tijeras, cree una incisión dorsolateral oblicua de un centímetro a lo largo de las líneas de tensión de la piel desde la línea media lumbar en el flanco izquierdo. A continuación, transecta la pared muscular del flanco izquierdo para visualizar el riñón izquierdo. Empuje y separe cuidadosamente el riñón izquierdo del tejido circundante con fórceps.

Luego, identifique el pedículo renal. Pinzar el pedículo renal izquierdo con una pinza microvascular. Confirme la isquemia por un cambio visible en el color del riñón de rosa a rojo oscuro.

Para evitar la desecación durante el pinzamiento, cubra el riñón con bolas de algodón estériles húmedas con solución salina. Después de 25 minutos, abra el clip microvascular izquierdo para iniciar la reperfusión del riñón izquierdo. Regrese el riñón a la cavidad abdominal.

Cierre la cavidad abdominal con materiales de sutura absorbibles 6/0. Observa al ratón hasta que empiece a moverse libremente y a alimentarse. Aquí se muestra la isquemia renal después del pinzamiento del pedículo renal.

Un cambio de color del riñón de rosa a rojo oscuro revela que la perfusión renal se ha vuelto inadecuada. En comparación con los controles, los niveles séricos de nitrógeno ureico en sangre y creatinina aumentaron dos días después de la reperfusión renal. Esta técnica allana el camino para que los investigadores exploren nuevos enfoques terapéuticos contra la lesión renal aguda.