Perfezionamento tecnico di un modello murino bilaterale di ischemia-riperfusione renale per la ricerca sul danno renale acuto

Il danno renale acuto è un importante fattore di rischio associato a un'elevata mortalità nei pazienti con arresto cardiaco dopo il ritorno della circolazione. Questa procedura può essere eseguita per indurre un danno renale acuto. Questo protocollo serve a indurre la riperfusione dell'ischemia renale in modo accurato, sicuro e coerente.

A dimostrare la procedura sarà Huang Cheng-Wei, un assistente del mio laboratorio. Per iniziare, posizionare un topo maschio C57BL/6 anestetizzato di otto settimane in posizione prona su una piattaforma chirurgica con una coperta elettrica per mantenere la temperatura corporea. Quindi, tocca la schiena, trova la colonna lombare e cerca gli angoli costovertebrali sotto entrambi i lati dell'ultima costola.

Applicare la lozione depilatoria per radersi e strofinare i peli vicino a entrambi i lati della regione dell'angolo costovertebrale. Disinfettare l'area chirurgica utilizzando una soluzione di Betadine e alcol al 75% utilizzando batuffoli di cotone. Utilizzare una pinza a punta fine per sollevare delicatamente la pelle al di sotto dell'angolo costovertebrale sinistro.

Quindi, usando le forbici, crea un'incisione dorsolaterale obliqua di un centimetro lungo le linee di tensione della pelle dalla linea mediana lombare sul fianco sinistro. Successivamente, seziona la parete muscolare del fianco sinistro per visualizzare il rene sinistro. Spingere e separare con cautela il rene sinistro dal tessuto circostante con una pinza.

Quindi, identifica il peduncolo renale. Clampare il peduncolo renale sinistro con una clip microvascolare. Confermare l'ischemia con un visibile cambiamento nel colore del rene dal rosa al rosso scuro.

Per evitare l'essiccazione durante il clampaggio, coprire il rene con batuffoli di cotone sterili bagnati con soluzione fisiologica. Dopo 25 minuti, aprire la clip microvascolare sinistra per iniziare la riperfusione del rene sinistro. Riportare il rene nella cavità addominale.

Chiudere la cavità addominale con materiali di sutura riassorbibili 6/0. Osserva il topo finché non inizia a muoversi liberamente e a nutrirsi. L'ischemia renale dopo il clampaggio del peduncolo renale è mostrata qui.

Un cambiamento di colore del rene dal rosa al rosso scuro rivela che la perfusione renale è diventata inadeguata. Rispetto ai controlli, i livelli sierici di azoto ureico e creatinina nel sangue sono aumentati due giorni dopo la riperfusione renale. Questa tecnica apre la strada ai ricercatori per esplorare nuovi approcci terapeutici contro il danno renale acuto.