Разработка модели хронической травмы вращательной манжеты плеча у кролика для изучения фиброза и мышечно-жировой дегенерации

Этот протокол демонстрирует сложную хирургическую технику индуцирования хронического повреждения вращательной манжеты плеча у кроликов и полезен для изучения патогенеза вращательной манжеты плеча и разработки регенеративной терапии. Кролики - это модели животных среднего и крупного размера, которых легко содержать с точки зрения логистики, манипулировать хирургическим путем и которые демонстрируют высокий уровень жировой дегенерации мышц вращательной манжеты плеча при травме, как и люди. Показанная здесь модель травмы подлопаточной мышцы анатомически аналогична сухожильному комплексу надостной кости, одной из наиболее часто травмируемых единиц вращательной манжеты плеча.

Для начала подготовьте операционное окно, сбрив предполагаемое место разреза кролика, находящегося под наркозом. Используя ватные палочки, очистите область тремя чередующимися аппликациями бетадина и 70% спирта круговыми движениями. Вводят 20 миллиграмм на килограмм цефалексина внутримышечно в качестве профилактического противоинфекционного средства.

Сделайте трех-четырехсантиметровый разрез кожи ниже ключицы, разделите дельтопекторальный промежуток с помощью ножниц и втяните, чтобы получить доступ к плечу. Чтобы найти сухожилие подлопаточной мышцы, сначала определите сухожилие коракобрахиальной мышцы. Затем определите сухожилие подлопаточной кости и вставьте зажим под прямым углом, чтобы обнажить все сухожилие в месте его прикрепления к малой бугристости плечевой кости.

Изолируйте сухожилие подлопаточной мышцы. После локального введения предоперационного анальгетика рядом с местом рассечения оберните сухожилие подлопаточной мышцы трубкой пенроуза на силиконовой основе, чтобы предотвратить нежелательное прикрепление к окружающим тканям и облегчить последующее извлечение тканей. Чтобы вызвать травму, создайте рассечение на всю толщину в месте соединения сухожилий мышцы с помощью хирургического скальпеля No 11.

При необходимости остановите кровотечение, надавливая куском марли, и используйте физиологический раствор для орошения раны по мере необходимости. Чтобы закрыть рану, используйте шовный материал из полигликолевой кислоты 4-0 для восстановления дельтовидной мышечной ткани и нейлоновый или шелковый шов 4-0 для закрытия кожной раны с последующей очисткой раны. Вводите 0,03 мг на килограмм бупренорфина подкожно в качестве анальгетика один раз сразу после операции и два раза в день в течение следующих 48 часов.

На рисунке показан гистологический анализ хронической модели повреждения вращательной манжеты плеча через четыре недели. Окрашивание H&E подтвердило потерю мышечной клеточности и организации, которая была заменена большим количеством адипоцитов в поврежденных подлопаточных мышцах по сравнению с контрольной группой. Количественная оценка процента накопления поврежденного мышечного жира представлена на этом рисунке.

Трихромное окрашивание по Массону также подтвердило мышечную атрофию и дезорганизацию расположения коллагеновых волокон в поврежденных подлопаточных мышцах по сравнению с контрольной группой. Количественная оценка доли мышечной и фиброзной ткани показана на этом рисунке. Оценка показала снижение мышечной клеточности поврежденных подлопаточных мышц по сравнению с контрольной группой.

Высокая степень фиброза наблюдалась и в травмированных подлопаточных мышцах. Идентификация сухожилия подлопаточной мышцы и обертывание сухожилия подлопаточной мышцы в трубку Пенроуза являются наиболее важными этапами этой процедуры. После этой процедуры может быть применено терапевтическое вмешательство.

В этом случае описанные здесь анализы, наряду с дополнительной миографией или анализом походки, могут быть использованы для оценки результата вмешательства. Этот метод имеет решающее значение для помощи исследователям в изучении патофизиологии вращательной манжеты плеча, а также для содействия разработке новых терапевтических средств для восстановления и регенерации мышечных сухожилий.