Entwicklung eines Kaninchen-Verletzungsmodells für chronisch ähnliche Rotatorenmanschetten zur Untersuchung von Fibrose und muskulärer Fettdegeneration

Dieses Protokoll demonstriert eine komplexe Operationstechnik zur Induktion einer chronisch ähnlichen Rotatorenmanschettenverletzung bei Kaninchen und ist nützlich für die Untersuchung der Pathogenese der Rotatorenmanschette und die Entwicklung regenerativer Therapien. Kaninchen sind mittelgroße bis große Tiermodelle, die logistisch leicht unterzubringen sind, chirurgisch zu manipulieren sind und bei Verletzungen ein hohes Maß an Fettdegeneration der Rotatorenmanschettenmuskulatur aufweisen, ähnlich wie beim Menschen. Das hier gezeigte Subscapularis-Verletzungsmodell ist anatomisch analog zum Supraspinatus-Knochensehnenmuskelkomplex, einer der am häufigsten verletzten Rotatorenmanschetteneinheiten.

Bereiten Sie zunächst das Operationsfenster vor, indem Sie die vorgesehene Schnittstelle eines betäubten Kaninchens rasieren. Reinigen Sie den Bereich mit Wattestäbchen mit drei abwechselnden Anwendungen von Betadin und 70%Alkohol in kreisenden Bewegungen. Verabreichen Sie 20 Milligramm pro Kilogramm Cephalexin intramuskulär als prophylaktisches Antiinfektivum.

Machen Sie einen drei bis vier Zentimeter langen Hautschnitt unterhalb des Schlüsselbeins, teilen Sie das deltopektorale Intervall mit einer Schere und ziehen Sie sich zurück, um Zugang zur Schulter zu erhalten. Um die Sehneneinheit des Musculus subscapularis zu lokalisieren, ist zunächst der Musculus coracobrachialis zu identifizieren. Identifizieren Sie dann die Subscapularissehne und führen Sie eine rechtwinklige Klemme ein, um die gesamte Sehne an ihrem Ansatz an der kleinen Tuberositas des Oberarmknochens freizulegen.

Isolieren Sie die Sehne des Musculus subscapularis. Nach der Verabreichung eines präoperativen Analgetikums lokal in der Nähe der Durchtrennungsstelle wickeln Sie die Muskelsehneneinheit subscapularis in einen Penroseschlauch auf Silikonbasis, um eine unerwünschte Anhaftung an das umgebende Gewebe zu verhindern und die anschließende Gewebeentnahme zu unterstützen. Um eine Verletzung herbeizuführen, führen Sie mit einem chirurgischen Skalpell Nummer 11 eine Durchtrennung in voller Dicke an der Muskelsehnenverbindung durch.

Wenn nötig, stoppen Sie die Blutung, indem Sie Druck mit einem Stück Gaze ausüben und die Wunde bei Bedarf mit Kochsalzlösung spülen. Um die Wunde zu verschließen, verwenden Sie eine 4-0-Polyglykolsäure-Naht, um das Deltamuskelgewebe wieder anzunähern, und eine 4-0-Nylon- oder Seidennaht, um die Hautwunde zu schließen, gefolgt von einer Wundreinigung. Verabreichen Sie 0,03 Milligramm pro Kilogramm Buprenorphin subkutan als Analgetikum einmal unmittelbar nach der Operation und zweimal täglich für die nächsten 48 Stunden.

Die histologische Analyse des chronisch ähnlichen Rotatorenmanschettenverletzungsmodells nach vier Wochen ist in dieser Abbildung dargestellt. Die H&E-Färbung bestätigte den Verlust der Muskelzellularität und -organisation, der im Vergleich zur Kontrollgruppe durch eine große Anzahl von Adipozyten in den verletzten Subscapularis-Muskeln ersetzt wurde. Die Quantifizierung des Prozentsatzes der Ansammlung von verletztem Muskelfett ist in dieser Abbildung dargestellt.

Massons Trichrom-Färbung bestätigte auch Muskelatrophie und desorganisierte Kollagenfaseranordnungen in verletzten Subscapularis-Muskeln im Vergleich zur Kontrollgruppe. Die Quantifizierung des Anteils von Muskel- und fibrotischem Gewebe ist in dieser Abbildung dargestellt. Die Untersuchung zeigte eine Verringerung der Muskelzellularität bei verletzten Subscapularis-Muskeln im Vergleich zur Kontrollgruppe.

Ein hoher Grad an Fibrose wurde auch in der verletzten Subscapularis-Muskulatur beobachtet. Die Identifizierung der Subscapularissehne und das Umwickeln der Subscapularis-Muskelsehneneinheit mit Penrose-Schläuchen sind die wichtigsten Schritte dieses Verfahrens. Im Anschluss an dieses Verfahren kann eine therapeutische Intervention angewendet werden.

In diesem Fall können die hier beschriebenen Analysen zusammen mit einer zusätzlichen Myographie oder Ganganalyse zur Beurteilung des Interventionsergebnisses verwendet werden. Diese Technik ist von entscheidender Bedeutung, um Forscher bei der Untersuchung der Pathophysiologie der Rotatorenmanschette zu unterstützen und die Entwicklung neuartiger Therapeutika für die Reparatur und Regeneration von Muskelsehnen zu erleichtern.