Swab Sampling metode til påvisning af menneskelige Norovirus på overflader

A macrofoam based sampling methodology was developed and evaluated for the detection and quantification of norovirus on environmental hard surfaces.

Menneskelige norovira er en førende årsag til epidemien og sporadisk gastroenteritis verdensplan. Fordi de fleste infektioner enten spredes direkte via den person-til-person rute eller indirekte via miljøet overflader eller mad, forurenede fomites og døde overflader er vigtige køretøjer til spredning af virus under norovirus udbrud.

Vi udviklede og evaluerede en protokol ved hjælp makroskum svaberprøver til påvisning og typning af menneskelige norovira fra hårde overflader. Sammenlignet med fiber-tippes podninger eller antistatiske klude, makroskum svaberprøver tillader virus recovery (interval 1,2-33,6%) fra toilet sæde overflader på op til 700 ^cm2. Protokollen omfatter trin til udvinding af virus fra podninger og yderligere koncentrering af det virale RNA ved anvendelse af spin-søjler. I alt 127 (58,5%) af 217 podninger prøver, der var blevet indsamlet fra overflader i krydstogtskibe og langtidspleje faciliteter, hvor norovirus gastroenteritis havde væretrapporteret testet positiv for GII norovirus ved RT-qPCR. Af disse 29 (22,8%) kunne med held genotype. Konklusionen er, påvisning af norovirus på miljømæssige overflader ved hjælp af den protokol, vi udviklede, kan hjælpe med at bestemme niveauet af miljøforurening under udbrud samt påvisning af virus, når kliniske prøver ikke er tilgængelige; Det kan også lette overvågningen af ​​effektiviteten af ​​oprydningsstrategierne.

Menneskelige norovira er en førende årsag til epidemien og sporadisk akut gastroenteritis verdensplan ^{1, 2, 3.} Den virus er ekstremt smitsom og transmission sker gennem direkte person til person interaktion eller indirekte via kontakt med forurenet mad, vand eller miljømæssige overflader. Norovira kan kaste i længere perioder og langvarig overlevelse af virus på miljø overflader er dokumenteret ^{1, 2, 3.} Under spidsbelastning udgydelse, milliarder af viruspartikler frigøres per....

1. Swab Prøveudtagning i Field

1. Bær en ren par handsker.
2. Måle størrelsen af ​​prøveudtagningsarealet uden at røre overfladen med et målebånd eller en lineal. Prøv at estimere området så præcist som muligt og udfylde en formular (Supplerende tabel 1).
3. Tjek podepinden kit til mulige lækager og label prøve transport tasker og podninger kits.
4. Flyt podepinden tværs prøveudtagningsarealet som følger: en slagtilfælde i vandret retning, et slag i lod.......

Figur 1 viser et flowchart af protokollen vatpind prøvetagning. Denne protokol består af fire hovedtrin; 1) prøvetagning, 2) Opbevaring og transport, 3) viral RNA oprensning og koncentration og 4) RT-qPCR assay og genotypebestemmelse.

Figur 1: Flowdiagram af den endelige protokol for overflade prøvetagning af norovirus miljømæ.......

Norovira har en menneskelig infektiøs dosis 50% mellem 18 og 10 ³ viruspartikler ^20. Derfor kan endda forurening af overflader på lavt niveau udgør en risiko for folkesundheden. Flere aspekter af protokollen svaber prøvetagning blev evalueret, herunder: 1) forskellige podninger materialer, 2) opbevaring tilstand svaberprøver under transport, 3) viral RNA-koncentrationen, og 4) colifag MS2 som intern udvinding kontrol.

Indtil for nylig havde kun udføre.......

The authors have no acknowledgements.