Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Representative Results
Discussion
Acknowledgements
Materials
References
Immunology and Infection
약물 내성 칸디다 알비 칸스의 발생률이 증가하는 것은 전 세계적으로 심각한 건강 문제입니다. 항균 광역학 요법 (aPDT)은 약물 내성 곰팡이 감염에 맞서 싸울 수있는 전략을 제공 할 수 있습니다. 본 프로토콜은 시험관내에서 다약제 내성 C. 알비칸 균주에 대한 로즈벵골 매개 aPDT 효능을 기술한다.
침습성 칸디다 알비칸스 감염은 장, 입, 질 및 피부의 가장 흔한 식민지 개척자 중 하나이기 때문에 인간에서 중요한 기회 주의적 곰팡이 감염입니다. 항진균제의 가용성에도 불구하고, 침습성 칸디다증의 사망률은 ~ 50 %로 남아 있습니다. 불행히도, 약물 내성 C. 알비칸의 발생률은 전 세계적으로 증가하고 있습니다. 항미생물 광역학 요법 (aPDT)은 C. 알비칸 생물막 형성을 억제하고 약물 내성을 극복하기 위한 대안 또는 보조제 치료를 제공할 수 있다. 로즈벵골(RB)-매개 aPDT는 박테리아 및 C. 알비칸의 효과적인 세포 사멸을 보여주었다. 이 연구에서, 다제내성 C. 알비칸에 대한 RB-aPDT의 효능이 기재되어 있다. 수제 녹색 발광 다이오드(LED) 광원은 96웰 플레이트의 웰 중앙에 정렬되도록 설계되었습니다. 효모는 상이한 농도의 RB를 갖는 웰에서 배양되었고, 녹색 빛의 다양한 플루언스로 조명되었다. 사멸 효과를 플레이트 희석 방법에 의해 분석하였다. 빛과 RB의 최적 조합으로, 3-로그 성장 억제가 달성되었다. RB-aPDT가 잠재적으로 약물 내성 C. 알비칸을 억제 할 수 있다고 결론지었다.
C. 알비칸은 건강한 개인의 위장관 및 비뇨 생식기에서 식민지화되며 개인의 약 50 %에서 정상적인 미생물로 검출 될 수 있습니다1. 숙주와 병원체 사이에 불균형이 생기면 C. albicans 는 침입하여 질병을 일으킬 수 있습니다. 감염은 국소 점막 감염에서 다발성 장기 부전까지 다양 할 수 있습니다2. 미국의 다중 센터 감시 연구에서 2009 년과 2017 년 사이에 침습성 칸디다증 환자로부터 격리 된 환자의 약 절반이 C. albicans3입니다. 칸디다혈증은 높은 이환율, 사망률, 장기간 입원4와 연관될 수 있다. 미국 질병 통제 예방 센터 (US Centers of Disease Control and Prevention)는 검사 된 모든 칸디다 혈액 샘플의 약 7 %가 항진균제 인 플루코나졸5에 내성이 있다고보고했습니다. 약물 내성 칸디다 종의 출현은 항균제에 대한 대안 또는 보조 요법을 개발하려는 우려를 제기합니다.
항미생물 광역학 요법 (aPDT)은 PS<....
1. aPDT 시스템 준비
도 1은 본 연구에 사용되고 있는 aPDT 시스템을 나타낸 것이다. 고온은 상당한 셀 사멸을 일으킬 수 있기 때문에, LED 어레이는 전기 팬에 의해 냉각되고, 25 ± 1°C에서 일정한 온도를 유지하기 위해 조사 중에 방열판이 사용된다. 열 효과는 할인 될 수 있습니다. 균일한 광 분포를 갖는 것은 또한 성공적인 aPDT를 위한 중요한 결정 인자이다; 따라서 조명 중에 LED 전구를 잘 정밀?.......
곰팡이 각막염에 대한 RB-PDT의 임상 적용의 고무적인 결과가 최근19 보고되었다. RB의 흡수 피크는 450-650 nm에 있다. 성공적인 aPDT를 위해 광원의 플루언스 속도를 결정하는 것이 필수적입니다. 암세포를 치료하기 위해서는 높은 플루언스 (보통 >100 J /cm2)가 필요하지만 감염된 병변을 치료하기 위해서는 더 낮은 플루언스가 필요합니다6. 높은 플루언스는 ?.......
이 작품은 교육부 (MOE)의 고등 교육 새싹 프로젝트의 틀 내에서 특집 지역 연구 센터 프로그램으로부터 응용 나노 의학 센터, 국립 청 쿵 대학 (National Cheng Kung University)과 대만 과학 기술부 [MOST 109-2327-B-006-005]에서 TW Wong에 자금을 지원했습니다. J.H. Hung은 대만 국립 청 쿵 대학 병원 [NCKUH-11006018] 및 [MOST 110-2314-B-006-086-MY3]의 자금을 인정합니다.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
1.5 mL microfuge tube | Neptune, San Diego, USA | #3745.x | |
5 mL round-bottom tube with cell strainer cap | Falcon, USA | #352235 | |
96-well plate | Alpha plus, Taoyuan Hsien, Taiwan | #16196 | |
Aluminum foil | sunmei, Tainan, Taiwan | ||
Aluminum heat sink | Nanyi electronics Co., Ltd., Tainan, Taiwan | BK-T220-0051-01 | |
Centrifuge | Eppendorf, UK | 5415R | disperses heat from the LED array |
Graph pad prism software | GraphPad 8.0, San Diego, California, USA | graphing and statistics software | |
Green light emitting diode (LED) strip | Nanyi electronics Co., Ltd., Tainan, Taiwan | 2835 | |
Incubator | Yihder, Taipei, Taiwan | LM-570D (R) | Emission peak wavelength: 525 nm, Viewing angle: 150°; originated from https://www.aliva.com.tw/product.php?id=63 |
Light power meter | Ophir, Jerusalem, Israel | PD300-3W-V1-SENSOR, | |
Millex 0.22 μm filter | Merck, NJ, USA | SLGVR33RS | |
Multidrug-resistant Candida albicans | Bioresource Collection and Research CenterBioresource, Hsinchu, Taiwan | BCRC 21538/ATCC 10231 | http://catalog.bcrc.firdi.org.tw/BcrcContent?bid=21538 |
OD600 spectrophotometer | Biochrom, London, UK | Ultrospec 10 | |
Rose Bengal | Sigma-Aldrich, MO, USA | 330000 | stock concentration 40 mg/mL = 4%, prepare in PBS, stored at 4 °C |
Sterilized glass tube | Sunmei Co., Ltd., Tainan, Taiwan | AK45048-16100 | |
Yeast Extract Peptone Dextrose Medium | HIMEDIA, India | M1363 |
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