JoVE Logo
Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Yapısal ve görsel dökümanları Rodents optik koherens tomografi ve optokinetic yanıt tarafından değerlendirilmesi için detaylı bir protokol sunulmuştur. Sonuçları Oftalmolojik gibi nörolojik araştırma için değerli bilgiler sağlar.

Özet

Optik koherens tomografi (OCT) yüksek çözünürlüklü Retina görüntüleme sağlayan hızlı, non-invaziv, dalgaboyu bir tekniktir. Ateş, neuroprotection ve nöro-onarım görsel sistemin bu kez correlate Retina değişiklikleri ile ilgili işlemlerin incelenmesi için ideal bir araçtır. Fonksiyonel bir okuma görsel olarak uyarılmış telafi edici göz ve baş hareketleri deneysel modelleri görsel işlevi içeren yaygın olarak kullanılır. Her iki teknikleri birleştiren bir nicel içinde vivo araştırma yapısı ve patolojik koşullarını veya roman therapeutics potansiyelini değerlendirmek için kullanılan işlev sağlar. Sunulan tekniklerin büyük yarar sağlayan dinamik süreçler, değişkenliği azaltmak incelenmesi boyuna çözümlemesi yapma ihtimali ve hayvanların deneyler için gerekli sayıda aşağı keser. Protokol amaçları Alım ve yüksek kaliteli retina taramalarını fareler ve sıçanlar inhalational anestezi sunmak için bir seçenek ile düşük maliyetli bir özelleştirilmiş tutucu kullanarak analiz için bir kılavuz sağlamak için nitelendirdi. Ayrıca, önerilen Kılavuzu bir öğretim kılavuzu kendi özel ihtiyaçlarına ve çıkarları için adapte edilebilir Rodents optokinetic yanıt (OKR) analizi ile araştırmacılar yöneliktir.

Giriş

Görsel yolu, sınav merkezi sinir sisteminin bir parçası olarak sadece Oftalmolojik1,2,3,4,5 ele etkili bir başlangıç noktası olması için kanıtlanmıştır , ama ayrıca nörolojik6,7,8,9,10,11,12,13,14 ,15,16 soru. Son yıllarda, OCT ve OKR çok çeşitli retinopathies ve çeşitli kemirgen modelleri17,18,19 Retina belirtileri değerlendirmek için yararlı analitik, non-invaziv araçları olarak tespit edilmiştir , 20 , 21 , 22 , 23 , 24 , 25. hızlı ve yüksek çözünürlük vivo içinde görsel olarak retina Morfoloji ve fare ve sıçanlar, yapısında histolojik kesitler iyi doğrultusunda sonuçlarını gösteren hayvanlar retinae26OCT sağlar. OKR kantitatif görsel işlevini değerlendirmek için hızlı ve sağlam bir yöntem kabul ettiğiniz anlamına gelir.

Birçok OCT aygıt tanılama Retina patolojileri, yani Kılavuzu farklı dalga boylarında, lipofuscin mevduat görüntülenmesini veya Retina değişiklikleri ile aynı anda confocal tarama Lazer ophthalmoscopy (cSLO) görüntüleme izin pigment epitel27. Ayrıca, transjenik hayvanlar hücrelerde etiketli floresans in vivo görüntüleme mümkün28,29,30,31,32' dir. Ancak, OCT teknoloji kemirgen modellerinde hala, ağırlıklı olarak küçük göz boyutu nedeniyle meydan okuyor. Çeşitli ticari olarak kullanılabilir aygıtlar uyarlamalar gerektirir ve sık sık sahibi farklı bir boyutunu farklı tür hayvanların Image için gereklidir. Ayrıca, hayvanlar ölçüm için anestezi gerektirir.

OKR cihazlar kemirgenler görsel işlevinde değerlendirmek için kullanılabilir. Hayvanlar bir gerçek ya da sanal silindir hareketli bir görüntüleme merkezi bir platform üzerinde yansımalı baş ve boyun hareketleri ile hayvanlar izleyen ızgara, yerleştirilir. Bu optokinetic yanıt azaltılmış veya azaltma veya görsel fonksiyon kaybı söz konusu olduğunda ortadan kaldırılmıştır.

Bu iletişim kuralının amacı bir soluk çeken anestezi sağlayan özel bir sahibi ile piyasada bulunan OCT aygıtı kullanarak Retina kalınlığı ölçümü için el sunmaktır. Protokol, yazılım üreticisi tarafından sağlanan kullanarak ses taramaları analiz verilmektedir. Görsel sınama, OKR değerlendirmek için ticari olarak kullanılabilir bir sistem kullanımı hakkında yönergeler sağlamak için amaçtır.

Protokol

Tüm hayvan yordamlar bölgesel yetkililer (kamu kurumu doğa, çevre ve tüketici koruma; başvuru numarası 84-02.04.2014.A059) tarafından onaylanmış deneysel yönergelere uygun olarak gerçekleştirilen ve derneğin için uygun Vizyon ve Oftalmoloji (ARVO) deyim kullanımı hayvan Ophthalmic ve vizyon araştırma ve Avrupa Yönergesi 2010/63/AB bilimsel amaçlarla kullanılan hayvanların korunması için araştırma.

1. confocal tarama Lazer Ophthalmoscopy optik koherens tomografi

Not: CSLO-Ekim ölçüm için tüm suşların laboratuvar fareler ve sıçanlar için uyarlanabilir protokolüdür.

  1. Kurulum ve öncesi görüntüleme ürünleri
    Not: Bu protokol için kullanılan OCT cihazın sistem yapılandırma zaten başka bir bölümünde31.
  2. Kemirgen hazırlık için soluk çeken anestezi
    1. Kemirgen bir indüksiyon odasında yerleştirip isoflurane konsantrasyonu % 2, 2 L/min O2Buharlaştırıcı ayarlarsınız.
    2. Kemirgen kuyruk pinching tarafından anestezi, odasından kaldırın bakın ve sıcak tutmak için kağıt havlu sarın.
    3. Buharlaştırıcı (% 2.5 isoflurane 2 L/dk O2) bağlı ağız parçası entegre ısırık çubuğundaki üst kesici dişler kanca ve kemirgen özel tutucu33 olarak yerleştirin.
    4. Phenylephrine 2.5%-Tropicamide bir damla % 0.5 her gözün gözbebeği genişlemesi için uygulayın.
    5. Göz damlası herhangi bir aşırı sıvı 1 dakika sonra silin ve Metil Selüloz esaslı oftalmik jel gözlerle yağlamak (örneğin, mellose % 0,3 göz damlası) kurutma önlemek için out ve bulanıklık kornea.
    6. Özel kontakt lens (4 diyoptriden) fare göz el ya da forseps kullanarak yerleştirin. Bir uçak yüzey sağlamak için optik özellikleri olmadan (örneğin, yuvarlak 12 mm çapında cam coverslip) bir cam levha ile sıçan gözünü kapat.
      Not: Anestezi sırasında solunum hızı monitörü. Gerekirse Isoflurane konsantrasyon azaltabilir veya artırabilirsiniz.
  3. Ölçüm ve analiz
    Not: Gerçekleştirmek ve34 APOSTEL öneriler doğrultusunda OCT ölçümleri rapor ve kalite kontrol OSCAR-IB fikir birliği kriterleri35göre gerçekleştirmek emin olun. Bu önerileri insan OCT görüntüler için geliştirilmiştir gibi bazı kriterlere ya da sadece değildir kısmen uygulanabilir.
    1. Sol göz görüntü için sol gözünü ampul kemirgen yüz emin olmak için Şekil 1A ' kamera sunulan tutucu getirin.
    2. Başlat düğmesi satın alma modunu başlatmak için Denetim Masası görüntü sağ köşesinde basın.
    3. R için filtre mandalının ve BR + OCT mavi yansıma fundus görüntüleme ve kontrol panelindeki B-tarama satın alma için seçin.
    4. Yaklaşık 38 diyoptriden odak düğmesi kameranın arka kullanarak odak mesafesini ayarlamak ve retina üzerinde OCT tarama ekranda görünene kadar yakınlaştırın.
      Not: İlk ölçüm kemirgen ölçüm için adapte başvuru kol var. Kombinasyonu Ctrl + Alt + üst karakter + O tuşlarına basın ve OCT-inceden inceye gözden geçirmek ekranda görünene kadar açık pencerede başvuru kol değerini ayarlayın.
    5. Tüm uçaklar retinada bir dik açı ile öğrenci ortasına bir ışın yol sağlamak için optik disk ışıklı alan (BR) ortasında konumlandırın ve yatay ve dikey çizgi B-inceden inceye gözden geçirmek yatay bir düzeye döner/dönüm tarafından ayarlamak tutucu (Şekil 1B) veya kamera hareketli.
    6. Birim tarama modunu seçin ve yüksek çözünürlüklü modunda 50 otomatik gerçek zamanlı izleme (sanat, rasterleştirilmiş 50 Ortalama A-taramaları) yazılım ekranında 25 B-inceden inceye gözden geçirmek için ayarlayın.
    7. Optik disk üzerinde birim tarama kılavuzunun orta merkezi ve edinme siyah hassasiyet topuzu ve zaman Kontrol Paneli'nde basarak başlatın.
    8. Aiçin filtre mandalının, Mavi otomatik Variety (BAF) kontrol panelinde seçin ve hassasiyet topuzu ile görüntü parlaklığını ayarlayın. Hassasiyet topuzu ve kazanmak için görüntü floresan hücreleri (örneğin, EGFP) veya Otomatik floresan mevduat tuşuna basın.
    9. Kemirgen hayvan bir ısı kaynağı ile ayrı bir kafeste koymak ve su kaybı önlemek için göz göze ait jel uygulayın.
    10. Kadar tamamen ayrı bir kafeste anestezi kurtarıldı ve ayrı ayrı muhafaza kemirgen gözetmek. Ne zaman hayvan Ambulatuvar, ev kafese geri.
    11. Analiz Birimi tarama, tarama üzerinde sağ tıklatarak OCT aygıtın yazılım otomatik ayrılmasını kullanın ve segmentasyon sonra Tüm katmanlarıseçin. OCT görüntülerin kalitesi yeterli olduğundan emin olun ve kalite cutoffs deneyler, Örneğin, her kümesinin tanımlamak > 20 desibel.
    12. Katmanların el ile düzeltme yanında çift tıkırtı üzerinde istenen tarama gerçekleştirmek, Kalınlığı profili seçin ve Katman Segmentations Düzenleüzerinde'yi tıklatın. Bir katmanı seçin, örneğin, ILM iç zar sınırlamaiçin tuşuna basın ve, gerekirse, yeşil hat kırmızı nokta ile doğru konumuna sürükleyip taşıyarak düzeltin.
      Not: El ile düzeltme gerçekleştirme araştırmacı deneysel grupları kör emin olun.
    13. Seçme belgili tanımlık etiket Kalınlığı harita ve diyabetik retinopati çalışma (ETDRS) kılavuz 1, 2, 3 mm erken tedavi seçin. İç Daire (Şekil 2, sol) optik disk üzerinde ortalayın.
    14. Faiz farklı Retina sektörleri için yazılım tarafından sağlanan kalınlığı değerlerden Retina katmanları kalınlığı hesaplamak. Birim taramaları ortalama kalınlığı değerleri hesaplamak için tüm 1 kullanın yaklaşık 25 ° optik disk (Şekil 2, sağ) içeren iç 1 mm daire hariç, açısı kapsayan 2, 3 mm ETDRS kılavuz.
    15. Yeterli yazılım kullanarak istatistiksel çözümleme gerçekleştirme. Her iki gözde bir hayvanın varsa, konu arası göz korelasyon içinde bir istatistiksel model hesaplanmasında dikkate alın (örneğin, denklemler tahmin Genelleştirilmiş veya karışık doğrusal modeller), bir konu tabii ki istatistiksel olarak bağımlı olduğu gibi36 .

2. Optokinetic yanıt

Not: Aşağıda, OKR ölçümleri fareler ve sıçanlar için ayrıntılı bir kılavuz, bireysel belirli ihtiyaçlarına göre adapte edilebilir sağlanır.

  1. Kurulum ve öncesi ölçüm ürünleri
    1. Bilgisayarı açın. Sistem önyükleme sonra37ekranları test odası daha ayrıntılı başka bir yerde açıklandığı gibi açın.
    2. Fare ya da sıçan ölçümü için uygun bir platform seçin.
      Not: Platform boyutu kemirgen vücut boyutuna göre seçilir. Hayvan-meli muktedir düzgün dolaşmak için yetenek olmadan platformun üzerinde durur.
    3. Yazılım üzerinde çift tıklayarak ön ayarları penceresini açmak, Yeni grubunu seçin ve grup adı, konular, tür ve suşların sayısını seçin. Değişken bir uyarıcı seçin: kayma/zamansal frekans, kontrast duyarlılık, hız veya yönlendirme açılır menüsünden, ardından Yeni grup oluşturtuşuna basın.
    4. Kameranın üst kısmında odası odak halkasını işleyerek platform üzerinde odaklanmak ve (sürükle ve bırak) yerleştirerek sistemi kalibre platformunda siyah daire kırmızı çember.
  2. Ölçüm ve analiz
    1. Hayvan platformda yer, ~ 5 dk. hayvan geri platformda (Şekil 3A) düşerse Lift ortamına uyum izin.
    2. Konu numarası ve koşul yazılım ekran (Şekil 3B) sağ üst köşesinde seçin. Bir uyarıcı değişkendir, diğer uyaranlara sabit tutulur. Bu uyarıcı yanında açık kilit veya kapalı kilit simgesi tarafından doğrulanır.
    3. Ölçüm hayvan izler veya sırasıyla izlemez ◄ Evet veya ■ için Hayıriçin seçerek başlayın.
      Not: Saat yönünde izleme sol ve saat yönünün tersine izleme sağ gözü'karşılık gelir. Yazılım rastgele hareketli kılavuz yönünü değiştirir.
    4. Uyarıcı adım boyutunu el ile değişken uyarıcı yanındaki yukarı ve aşağı okları tıklatarak seçin ya da uyarıcı eşik yakınsar Eğer yazılım tarafından otomatik olarak uyum.
    5. En iyi sonuçlar için hayvan, Örneğin, yüksek sesleri ıslık ve silme, yazılım ekranında siyah ya da beyaz kutu simgesini tıklatarak animasyon. Bu eylemleri tekrar tekrar uzun süreli ölçümleri söz konusu olduğunda.
    6. Veri çözümlemeleri için Özet sekmesini seçin ve tıklayın Dosya | İstenen veri kümesini dışa aktarmak için Dışa Aktar tablo/grafik .
    7. İstenen yazılım kullanarak istatistiksel analiz (Ayrıca bkz: adım 1.3.15).

Sonuçlar

Miyelin oligodendrocyte glikoprotein (MOG) peptid 3rd üretimi OCT Imaging'i kullanma indüklenen deneysel otoimmun ensefalomiyelit (EAE) fare modelleri, yüksek çözünürlüklü morfolojik bölümleri fare Retina elde edilmiştir. Bu teknolojiyi kullanarak, farklı maddeler koruyucu kapasiteleri gösterdiği17yaşındaydın. Histolojik Retina wholemounts (Şekil 4) boyama tarafından elde edilen Retina ganglion hücrelerinin (RGC) sayıda iyi doğrultusunda elde edilen iç Retina katmanları (IRL) kalınlığı değerleri vardır.

OKR izleme tarafından Ekim görülen ateş işlevsel bir okuma sağlar. Bu deneylerde, görsel işlev olarak uzamsal frekansta OKR tarafından değerlendirildi ve neuroaxonal hasar tarafından Ekim, IRL inceltme olarak değerlendirildi yakın korelasyon17' idi. Çeşitli protokoller kayma veya zamansal frekans, kontrast duyarlılık, yönlendirme veya hareketli kılavuz hızını değiştirerek görme keskinliği incelemek için istihdam edilebilir. EAE modelinde, tedavi edilmezse MOG EAE fareler (Şekil 5) karşılaştırıldığında geliştirilmiş bir kayma frekansı 0,05 devir/derecesi (c/d) Madde 1 ile tedavi hayvanların tespit edilmiştir.

figure-results-1424
Şekil 1: özel tutucuyla OCT ölçüm için. (A) OCT görüntüleme özel tutucu33 ve (B) dönme ekseni etrafında kemirgen göz kullanarak bir C57BL/6J fare. Döndürme transvers düzlemde (solda) ve Aksiyel düzlemde (sağda) gösterilmiştir. Bu rakam Dietrich, M. değiştirildi vd.33. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

figure-results-2112
Şekil 2: OCT edinme analiz sonrası. "1, 2, 3 mm" ETDRS ızgara üzerinde 25 B-tarama birimi iletişim kuralı (solda). Retina katman kalınlığı farklı Retina sektörleri için yazılım (sağ) tarafından sağlanır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

figure-results-2644
Şekil 3: fareler ve uyarıcı OKR ölçüm ayarlarını. (A)Top görüntülemek C57BL/6J fare odasında platformda analiz kamera. (B) Kullanıcı arabirimi ve OKR yazılımının ayarlar. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

figure-results-3177
Şekil 4: C57BL/6J fareler MOG EAE ile göstermek madde tedavi edilmezse kontrollere göre 1 ile tedavi ederken bir zayıflatılmış hastalığı kursu. (A) iç Retina katmanları dejenerasyonu olan azaltılmış (B) ve klinik EAE puanı EAE boyunca zayıflatılmış ne zaman madde 1 yönetiliyordu. Fareler her gün skorlanmıştır ve OCT ölçümleri aylık 120 gün bir süre içinde gerçekleştirilmiştir. Grafikler ortalama ve standart hata grubu başına en az on hayvanların temsil eder. (*p < 0,05, ***p < 0,001, ANOVA tarafından Dunnett'ın öğleden hoc testi ile karşılaştırıldığında eğri altındaki alan). (C) IRL kalınlığı değişimdir içinde RGC kaybı ile iyi uyum (***p < 0,001, ANOVA ile Dunnett'ın öğleden hoc testi tedavi edilmezse MOG fareler için karşılaştırıldığında tarafından). Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

figure-results-4346
Şekil 5: OKR ölçüm MOG EAE ile C57BL/6J farelerin. Madde 120 gün boyunca test uzamsal frekansa eşik tarafından ölçülen tedavi edilmezse MOG EAE farelere göre 1 ile geliştirilmiş görme keskinliği hayvan tedavi (A) OKR ortaya çıkarır. Grafikler ortalama ve standart hata grubu başına en az altı hayvanların temsil (**p < 0,01, ***p < 0,001, ANOVA tarafından Dunnett'ın öğleden hoc testi ile karşılaştırıldığında eğri altındaki alan). (B) görüntü test odasında bir C57BL/6J fare. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Tartışmalar

Bu iletişim kuralı bir yönerge kalınlığı ölçümleri ve görsel fonksiyon incelenmesi Rodents için sağlar. Görsel dökümanları giderek translasyonel araştırma18,26,38,39,40 içinde kullanılan ve klinik için kolayca transfer edilebilir. Boyuna analizleri büyük ölçüde değişkenlik ve sayısını azaltarak dinamik patolojik süreçlerin soruşturma izin mümkündür, Ekim hayvan deneyleri histolojik araştırmalar ile karşılaştırıldığında önemli avantaj olduğunu hayvan çalışma gerekli. Ayrıca, OCT ile içinde vivo görüntülemede kesme veya katman kalınlığı histolojik araştırmalarda etkileyebilir eserler boyama fiksasyon, tabi değildir.

Ancak, lazer ışını retina ile ilgili olarak tüm uçaklarda ortogonal oryantasyon kalite ve tekrarlanabilirlik kalınlığı değerleri sağlamak için kritik bir adımdır. Bu araştırmacı bazı eğitim gerektirir ve OCT taramaları edinme önce zorunludur. Ticari cihazlar insan uygulamalar için inşa edilir gibi Ayrıca, kemirgen OCT görüntülerin kalitesi insan hasta B taranmasını karşılaştırıldığında hala aşağı kalır yanı yok. Yazarın deneyimi farklı iç Retina ayırt etmek zor olabilir katmanları (retina sinir lifi tabakası, ganglion hücre katmanı ve iç pleksiform tabaka) el ile Düzeltme sırasında. Bu yüzden bu katmanlar bir bileşik okuma (IRL) analiz öneririz.

Deneysel Kur uçucu anestezi, örneğin, hangi, deneyim, daha güvenli ve daha kolay ketamin-xylazine41,42 enjekte edilebilir anestezi Örneğin, kontrol ve riskini azaltır soluk çeken isoflurane için bir seçenek sağlar kemirgenler uzun satın alma durumunda erken Uyanış (örn., düşsel fluorescently etiketli hücre gerçekleştirirken) kere. Bir ön çalışmada, birim taramalar iletişim kuralları en yüksek geçerlilik ve güvenilirliği ile tespit edilmiştir. Ne zaman cilt taramaları optik disk içeren orta kesiminde hariç tüm değerlendirmeler için 0.85 üzerindeki ICC (Intra-sınıf korelasyon katsayısı) değerleri ile değerlendirildi arası Oylayıcısı ve test testi tekrarlayın güvenilirlik mükemmel.

Optokinetic yanıt ölçümü yanıt olarak sürekli hareketli bir alan oluşur istemsiz optokinetic refleks dayanır. Diğer türler, aksine Rodents sadece gözleri, ama kolayca kamera ile tespit edilebilir tüm baş hareketi içerir.

"İzleme" arasında ayırt edici veya normal hayvanların davranış hareketleri gerektirir araştırmacı bazı eğitim ve deney grubu için kör önemlidir. Buna ek olarak, hayvanların deneysel ayarı ve uzun süredir ölçüm protokolleri sırasında karşılamak için bir adaptasyon faz ihtiyacım var, "izleme" OKR eşik ulaşmasını nedeniyle değil de, azalan temin için art arda animasyon hayvanlar var dikkat. Önemli zorlanma değişkenliği ile ilgili laboratuvar fareler ve sıçanlar43,44görsel fonksiyonu da vardır. Kemirgen görme keskinliği önce test edilir ve gen Pde6brd1 için homozigoz oldukları gibi SJL fareler gibi bazı suşları bile OKR ölçümleri için uygun olmayabilir bu nedenle değerlendirilmelidir (Retina dejenerasyonu 1).

Özetle, Retina Morfoloji ve görsel fonksiyon incelenmesi hayvan modellerinde non-invaziv, Boylamsal araştırmalar EAE bağlamında meydana gelen yapısal ve işlevsel hasar için izin verir ve görsel içeren diğer modellerinde yararlı olabilir Sistem, ancak bunlarla sınırlı olmamak retinopathies ya da optik sinir yaralanma modelleri de dahil olmak üzere.

Açıklamalar

Sunulan iş ilişkisi olmayan yazarlar aşağıdaki mali açıklamalar ilan:

Michael Dietrich hoparlör honoraria Novartis aldı. Andrés Cruz-Herranz Ulusal multipl skleroz Derneği bir doktora sonrası adam var. Ari J. yeşil MedImmune, Novartis, OCTIMS, kurulduğu günden 5 Biosciences ve Bionure Bilimsel Danışma Kurulu görev yaptı; JAMA Nöroloji bir editör olduğunu; Nöroloji içerik yönetim kurulu üyesi vardı; bir patent remyelination moleküller ve yollar için tutar; kurulduğu günden 5 Bilimler için istişare; Novartis Pharma OCTIMs, kurulduğu günden bu Bilimler SRA, NINDS, NIA, Ulusal MS Derneği, Sherak Vakfı ve Hilton Vakfı alınan araştırma desteği; hisse senedi ya da hisse senedi seçenekleri başlangıçtan 5'te tutar; ve Mylan v Teva Pharma adlı bir bilirkişi olarak görev yaptı. Hans-Peter Hartung, direksiyon komitelere hizmet ücretlerini aldı, Biogen Yunanistan'dan IDEC, GeNeuro, Sanofi Genzyme, Merck, Novartis ilaç, Octapharma, Opexa tedavi, Teva eczacılık, MedImmune, Bayer HealthCare, ileri Pharma, ve Roche, Biogen Yunanistan'dan IDEC, Sanofi Genzyme, Merck, Novartis ilaç, Octapharma, Opexa tedavi, Teva Eczacılık ve Roche danışma kurullarında hizmet ücretlerini ve ders ücretleri Biogen Yunanistan'dan IDEC, Sanofi Genzyme, Merck, Novartis ilaç , Octapharma, Opexa tedavi, Teva eczacılık, MedImmune ve Roche. Philipp Albrecht Ipsen, Novartis, Biogen bilimsel danışma kurullarında hizmet için tazminat aldı; hoparlör honoraria aldığı ve destek seyahat Novartis, Teva, Biogen, Merz ilaç, Ipsen, Allergan, Bayer Healthcare, Esai, UCB ve Glaxo Smith Kline; Novartis, Biogen, Teva, Merz ilaç, Ipsen ve Roche araştırma desteği aldı. Diğer yazarlar hiçbir açıklamaları rapor.

Teşekkürler

Bu eser hibe Dr Robert Pfleger-Vakfı ve Ilselore Luckow-Vakfı, yanı sıra Biogen ve PA Novartis tarafından desteklenmiştir Şekil 1B çoğaltılamaz "tüm vücut pozisyonel manipülatörler anaesthetized fareler ve sıçanlar oküler görüntüleme için:-it-yourself bir rehber. Dietrich, M., Cruz-Herranz, A., yurttaş, H., Aktaş, O., Brandt, A. U., Hartung, HP., yeşil, A., Albrecht, P. BMJ açık göz hastalıkları. 1 (1), e000008, 2017" izniyle BMJ Publishing Group Ltd

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Heidelberg Spectralis HRA+OCT system Heidelberg Engineering, GermanyN/Aophthalmic imaging platform system
Heidelberg Eye ExplorerHeidelberg Engineering, GermanyN/AVersion 1.9.10.0
blue 25D non-contact  lensHeidelberg Engineering, GermanyN/Alens for rodent mesurement
OptoMotryCerebralMechanics Inc., CanadaN/Asystem for visual function analysis
OptoMorty HD softwareCerebralMechanics Inc., CanadaN/AVersion 2.1.0
Inhalation Anesthetic IsofluranePiramal Critical Care, Bethlehem, PA, USA 803250inhalation anesthetic
Phenylephrin 2.5%-Tropicamide 0.5% University Hospital Düsseldorf, GermanyN/Apupillary dilation 
Visc-OphtalDr. Robert Winzer Pharma GmbH, Berlin, Germany58407ophthalmologic eye gel
GraphPad PrismGraphPad Software Inc, San Diego, CA, USAN/Astatistical analysis software, Version 5.00
IBM SPSS StatisticsIBM Corporation, Armonk, New York, USAN/Astatistical analysis software, Version 20

Referanslar

  1. Folgar, F. A., Jaffe, G. J., Ying, G. -. S., Maguire, M. G., Toth, C. A. Comparison of optical coherence tomography assessments in the comparison of age-related macular degeneration treatments trials. Ophthalmology. 121 (10), 1956-1965 (2014).
  2. Mowatt, G., et al. Optical coherence tomography for the diagnosis, monitoring and guiding of treatment for neovascular age-related macular degeneration: a systematic review and economic evaluation. Health Technology Assessment. 18 (69), 1-254 (2014).
  3. Schlanitz, F. G., et al. Identification of Drusen Characteristics in Age-Related Macular Degeneration by Polarization-Sensitive Optical Coherence Tomography. American Journal of Ophthalmology. 160 (2), 335-344 (2015).
  4. Makiyama, Y., et al. Prevalence and spatial distribution of cystoid spaces in retinitis pigmentosa: investigation with spectral domain optical coherence tomography. Retina. 34 (5), 981-988 (2014).
  5. Al Rashaed, S., Khan, A. O., Nowilaty, S. R., Edward, D. P., Kozak, I. Spectral-domain optical coherence tomography reveals prelaminar membranes in optic nerve head pallor in eyes with retinitis pigmentosa. Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 22, (2015).
  6. Albrecht, P., et al. Retinal pathology in idiopathic moyamoya angiopathy detected by optical coherence tomography. Neurology. 85 (6), 521-527 (2015).
  7. Albrecht, P., Fröhlich, R., Hartung, H. -. P., Kieseier, B. C., Methner, A. Optical coherence tomography measures axonal loss in multiple sclerosis independently of optic neuritis. Journal of Neurology. 254 (11), 1595-1596 (2007).
  8. Albrecht, P., et al. Retinal neurodegeneration in Wilson's disease revealed by spectral domain optical coherence tomography. PLoS One. 7 (11), e49825 (2012).
  9. Albrecht, P., et al. Optical coherence tomography in parkinsonian syndromes. PLoS One. 7 (4), e34891 (2012).
  10. Albrecht, P., et al. Degeneration of retinal layers in multiple sclerosis subtypes quantified by optical coherence tomography. Multiple Sclerosis Journal. 18 (10), 1422-1429 (2012).
  11. Bhaduri, B., et al. Detection of retinal blood vessel changes in multiple sclerosis with optical coherence tomography. Biomedical Optics Express. 7 (6), 2321-2330 (2016).
  12. Knier, B., et al. Optical coherence tomography indicates disease activity prior to clinical onset of central nervous system demyelination. Multiple Sclerosis Journal. 22 (7), 893-900 (2016).
  13. Ringelstein, M., et al. Subtle retinal pathology in amyotrophic lateral sclerosis. Annals of Clinical and Translational Neurology. 1 (4), 290-297 (2014).
  14. Ringelstein, M., et al. Retinal pathology in Susac syndrome detected by spectral-domain optical coherence tomography. Neurology. 85 (7), 610-618 (2015).
  15. Satue, M., et al. Relationship between Visual Dysfunction and Retinal Changes in Patients with Multiple Sclerosis. PLoS One. 11 (6), e0157293 (2016).
  16. Thomson, K. L., Yeo, J. M., Waddell, B., Cameron, J. R., Pal, S. A systematic review and meta-analysis of retinal nerve fiber layer change in dementia, using optical coherence tomography. Alzheimer's & Dementia. 1 (2), 136-143 (2015).
  17. Dietrich, M., et al. Early alpha-lipoic acid therapy protects from degeneration of the inner retinal layers and vision loss in an experimental autoimmune encephalomyelitis-optic neuritis model. Journal of Neuroinflammation. 15 (1), 71 (2018).
  18. Knier, B., et al. Neutralizing IL-17 protects the optic nerve from autoimmune pathology and prevents retinal nerve fiber layer atrophy during experimental autoimmune encephalomyelitis. Journal of Autoimmunity. 56, 34-44 (2014).
  19. Augustin, M., et al. In Vivo Characterization of Spontaneous Retinal Neovascularization in the Mouse Eye by Multifunctional Optical Coherence Tomography. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 59 (5), 2054-2068 (2018).
  20. Tode, J., et al. Thermal Stimulation of the Retina Reduces Bruch's Membrane Thickness in Age Related Macular Degeneration Mouse Models. Translational Vision Science & Technology. 7 (3), 2 (2018).
  21. Gabriele, M. L., et al. Optic nerve crush mice followed longitudinally with spectral domain optical coherence tomography. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 52 (5), 2250-2254 (2011).
  22. Carpenter, C. L., Kim, A. Y., Kashani, A. H. Normative Retinal Thicknesses in Common Animal Models of Eye Disease Using Spectral Domain Optical Coherence Tomography. Advances in Experimental Medicine and Biology. 1074, 157-166 (2018).
  23. Alam, N. M., et al. A mitochondrial therapeutic reverses visual decline in mouse models of diabetes. Disease Models & Mechanisms. 8 (7), 701-710 (2015).
  24. Bricker-Anthony, C., Rex, T. S. Neurodegeneration and Vision Loss after Mild Blunt Trauma in the C57Bl/6 and DBA/2J Mouse. PLoS One. 10 (7), e0131921 (2015).
  25. Segura, F., et al. Assessment of Visual and Chromatic Functions in a Rodent Model of Retinal Degeneration. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 56 (11), 6275-6283 (2015).
  26. Fischer, M. D., et al. Noninvasive, in vivo assessment of mouse retinal structure using optical coherence tomography. PLoS One. 4 (10), e7507 (2009).
  27. Ward, M. E., et al. Individuals with progranulin haploinsufficiency exhibit features of neuronal ceroid lipofuscinosis. Science Translational Medicine. 9 (385), (2017).
  28. Chauhan, B. C., et al. Longitudinal in vivo imaging of retinal ganglion cells and retinal thickness changes following optic nerve injury in mice. PLoS One. 7 (6), e40352 (2012).
  29. Lidster, K., et al. Neuroprotection in a novel mouse model of multiple sclerosis. PLoS One. 8 (11), e79188 (2013).
  30. Munguba, G. C., et al. Nerve fiber layer thinning lags retinal ganglion cell density following crush axonopathy. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (10), 6505-6513 (2014).
  31. Kokona, D., Jovanovic, J., Ebneter, A., Zinkernagel, M. S. In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy. Journal of Visualized Experiments. (129), (2017).
  32. Leung, C. K. S., et al. In vivo imaging of murine retinal ganglion cells. Journal of Neuroscience Methods. 168 (2), 475-478 (2008).
  33. Dietrich, M., et al. Whole-body positional manipulators for ocular imaging of anaesthetised mice and rats: A do-it-yourself guide. BMJ Open Ophthalmology. 1 (1), e000008 (2017).
  34. Cruz-Herranz, A., et al. The APOSTEL recommendations for reporting quantitative optical coherence tomography studies. Neurology. 86 (24), 2303-2309 (2016).
  35. Tewarie, P., et al. The OSCAR-IB consensus criteria for retinal OCT quality assessment. PLoS One. 7 (4), e34823 (2012).
  36. Fan, Q., Teo, Y. -. Y., Saw, S. -. M. Application of advanced statistics in ophthalmology. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 52 (9), 6059-6065 (2011).
  37. Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45 (12), 4611-4616 (2004).
  38. Groh, J., Stadler, D., Buttmann, M., Martini, R. Non-invasive assessment of retinal alterations in mouse models of infantile and juvenile neuronal ceroid lipofuscinosis by spectral domain optical coherence tomography. Acta Neuropathologica Communications. 2, 54 (2014).
  39. Seeliger, M. W., et al. In vivo confocal imaging of the retina in animal models using scanning laser ophthalmoscopy. Vision Research. 45 (28), 3512-3519 (2005).
  40. Shindler, K. S., Guan, Y., Ventura, E., Bennett, J., Rostami, A. Retinal ganglion cell loss induced by acute optic neuritis in a relapsing model of multiple sclerosis. Multiple Sclerosis Journal. 12 (5), 526-532 (2006).
  41. Calderone, L., Grimes, P., Shalev, M. Acute reversible cataract induced by xylazine and by ketamine-xylazine anesthesia in rats and mice. Experimental Eye Research. 42 (4), 331-337 (1986).
  42. Szczesny, G., Veihelmann, A., Massberg, S., Nolte, D., Messmer, K. Long-term anaesthesia using inhalatory isoflurane in different strains of mice-the haemodynamic effects. Zeitschrift für mikroskopisch-anatomische Forschung. 38 (1), 64-69 (2004).
  43. Prusky, G. T., Harker, K., Douglas, R. M., Whishaw, I. Q. Variation in visual acuity within pigmented, and between pigmented and albino rat strains. Behavioural Brain Research. 136 (2), 339-348 (2002).
  44. Wong, A. A., Brown, R. E. Visual detection, pattern discrimination and visual acuity in 14 strains of mice. Genes, Brain, and Behavior. 5 (5), 389-403 (2006).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

Neurosciencesay 143optik koherens tomografioptokinetic yan tok ler g r nt lemeg rsel yolusahibikemirgen modelleri

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır