Büyük ve küçük hayvanlarda kuduz Necropsy teknikleri

Özet

Bu protokolün amacı, kuduz testi için tatmin edici doku örnekleri elde etmek için küçük ve büyük hayvanlarda güvenli Otopsi teknikleri göstermektir.

Özet

New York Devlet Sağlık Bakanlığı (NYSDOH) kuduz Laboratuvarı her yıl 9.000 numuneleri 6.000 arasında alır ve New York dışında tüm devlet için kuduz testi gerçekleştirir. Kuduz Laboratuvarı, yarasalardan boporn 'a kadar olan çeşitli hayvanları otopsi. Bu numunelerin çoğu hayvan nörolojik işaretler sergileme, ancak, az 10% aslında kuduz için test pozitif; Bu semptomların nedeni olarak travma, lezyonlar veya diğer bulaşıcı ajanlar ima. Tanısı konulmamış bulaşıcı ajanlar aerosolizasyon riski nedeniyle, kuduz Laboratuvarı elektrik aleti veya testereleri kullanmaz. Kafatasları makas ile girilmez hayvanlar için üç Otopsi teknikleri sunulacak. Laboratuar, enfeksiyöz ajanlar için potansiyel maruz kalma azaltmak, numunenin gereksiz manipülasyon ortadan kaldırmak ve işlem süresini azaltmak için bu teknikleri uyguladı. Tercih edilen bir tekniğin diğerine karşı avantajları, numunenin eğitilmiş bireyin işlenmesine tabidir.

Giriş

Kuduz laboratuarının otopsi katında çalışmak doğal olarak tehlikelidir. Zaman zaman, numuneler gömülü kirpi quills, oklar/mermi/granül veya koruyucu nakliye Wrap nüfuz olabilir maruz kemik parçaları dahil yabancı nesneler ile gelir. Yanlış paketleme, numuneleri açmak isteyen bireyleri tehlikeye atarak sızıntıya neden olabilir. Fiziksel yaralanmalara ek olarak, otopsi teknisyenler CNS ve numunelerin vücut sıvılarından bilinmeyen zoonotik bulaşıcı ajanlar maruz risk. Ayrıca, numune tarafından taşınan Ektoparazitleri diğer zoonotik hastalıkları iletebilir, Pire ve keneler yaygın olarak sunulan hayvanların görülür. Coğrafi konuma ve türlere bağlı olarak maruz kalan hastalıklar farklılık gösterir. Doğu Equine Ensefalit virüsü (eeev) veya Batı Nil virüsü (WNV) gibi arbovirüsler, Lyme hastalığı veya Tularemi de dahil olmak üzere kene kaynaklı hastalıklar, Q ateşi veya tüberküloz neden bakteri, ve bulaşıcı prionlar olası tehlikeleri az sayıda isim^{1 , 2 , 3}' ü yapın.

Bu yöntemlerin amacı, elektrikli aletlerin veya testere^4,5' in aksine aerosolizasyon potansiyelini en aza indiren enstrümanları kullanarak güvenli ve verimli nekropsy teknikleri göstermektir. Genellikle, kuduz laboratuarında küçük hayvanların Nekropsi kranial kaslar uzağa kesme ve bir çekiç kullanarak ve kalvarium⁶kaudal dorsal kısmını açmak için kesmeli gerektirir. Kalvarium bu alanın çıkarılması arka beyin ortaya çıkarır, tüm beyinli ve kranial beyin kökü de dahil olmak üzere. Değiştirilmiş Otopsi teknikleri kafatası ventral kısmında yapılabilir, büyük kranial kaslar ve kafatası kalın bölgelerden kaçınarak. Ancak, bu değiştirilmiş Otopsi teknikleri sadece numune servikal vertebra olmadan mümkündür.

Benzer şekilde, büyük hayvanlarda beyin dokusu kafatası kasları ayırarak ve kafatasının kaudal dorsal kısmını açarak kaldırılabilir⁷. Büyük hayvanların kafatasları genellikle kalın olarak beyinli ve beyin kökü açığa çıkarmak için önemli çaba gereklidir. Kafatasının nüfuz edilmesini önlemek için, büyük bir hayvanın kafası, kafatasının Ventro-caudal kısmı teknisyene bakacak şekilde konumlandırılır. Modifiye enstrümanları kullanarak, serebellum ve beyin kökü foramen magnum üzerinden kaldırılır. Bu, TSE Avrupa Birliği referans laboratuvarı tarafından önerilen, Trans, Spongiform ensefalopati (TSE) araştırmaları için tavsiye edilen örnek edinme yöntemine benzerdir⁸. Cranial vertebra önceden foramen magnum erişim sağlamak için kaldırılmalıdır.

Bu tekniklerin uygulanması, kuduz laboratuvarlarında uygun şekilde eğitimli teknisyenler için faydalıdır. Kuduz laboratuvarı çeşitli boyutlarda örnekler aldığında, juvenil yarasalar yetişkin taslak atlar⁹, teknisyen bireysel koşula göre seçim için çeşitli yöntemler vardır. Büyük bir hayvan için gösterilen yöntem, alanda otopsi gerçekleştiren veterinerler için de uygundur, çünkü kuduz testi için tüm büyük bir hayvan kafası nakliye hantal ve pahalıdır. Bu tekniklerden herhangi birini uygulamak, aerosol üretiminin potansiyelini azaltarak, numunenin işlenmesini azaltarak ve işlem süresini tasarruf ederek güvenliği artıracaktır. Ancak, alanda kuduz testi için özel olarak ayarlanan bir laboratuar ile aynı avantajlara sahip olmadığı için, bu prosedürlerde yapılan değişikliklerin özellikle kişisel koruyucu ekipmanların (PPE) kullanımı güvenlik üzerine odaklanmasını gereklidir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

Açıklanan tüm yöntemler Wadsworth Center kurumsal hayvan bakımı ve kullanım Komitesi (ıAYUC) tarafından onaylanmıştır.

1. hazırlık

1. Don PPE, minimum göz koruması (gözlük veya yüz kalkanı), cerrahi veya N-95 maske ve lateks içermeyen eldivenler.
2. Tek kullanımlık çalışma yüzeyi (örn. Kraft kağıt veya emici pedler) ve temiz Otopsi aletleri (Şekil 1) ile, ideal olarak bir bio-güvenlik dolabı (BSc), çalışma alanı hazırlayın.
3. Numunenin çalışma yüzeyine yerleştirin ve dekompasyonu, kafatası hasarı, olası tehlikeleri (örneğin, kirpi quills, neşter bıçakları) ve kırılma kalitesi de dahil olmak üzere numunenin durumunu değerlendirmek için araçları kullanın.

2. ventral Yöntem

Not: örnek düzgün çene hattı, foramen magnum ve oksipital kondyle açık olacak dekolçlama olduğunda. Ventral yöntemi, beyinli ve beyin kökü almak için daha az karmaşıktır.

1. Örnekten ventral yan yukarı ve burun BSC arka doğru distale yönlendirme ile konumlandırın.
2. Bir ortopedik çekiç/Mallet sağ elle (sağ el) ve aynı zamanda bir meclis üyesi sol elinde kesmeli tutun tutun.
3. Bir "V" açılış yapma temporal kemik ve oksipital kemik sağ tarafı arasında yönlendirmenin köşe noktası ile 45 ° açı kesikli konumlandırın.
4. İki kemik ayrı kadar çekiç ile kesikli üst grev. Basisphenoid kemiğinin bitişiğinde kesim yapın.
5. Temporal kemik/oksipital kemiğin sol tarafında tekrar edin (Şekil 2a).
6. Kafatasının "V" alanını keskiyle aşağı doğru bend. Beynin tüm rhombencephalon alanını (serebellum ve beyin kökü) açığa çıkarır (Şekil 2B).
7. Beyin sapı ve beyinli makas ve forseps ile dışarı Scoop. Beyin kökü ve serebellum tek bir parça içinde çıkmadı Eğer kafatası kalan tüm parçaları çıkarın.

3. dorsal yöntemi

Not: numune (foramen magnum görünmez) kötü bir debelitasyon varsa ve boyun kolayca otopsi sırasında kaldırılamaz veya beyine zarar şüpheleniyorsanız, dorsal yöntemi kullanılmalıdır.

1. Numunenin burun ile dorsal, BSC arka doğru distale yönlendirerek konumlandırın.
2. Tümör tenacula kullanarak, tenacula dişleri ile sol temporal kas kavramak ve kolu sıkarak kilit.
3. Keskin oyma bıçağı ile kemik aşağı temporal kas kes.
4. Numune 180 ° ' yi tenacula ve bıçakla döndürün (el değil) ve ters temporal kas üzerinde işlemi tekrarlayın. Kafatasını açığa çıkarın.
5. Parietal ve intraparietal kemik kavşakında kafatası ortasına kesenin köşe noktası ile 45 ° açı bir kesikli konumlandırın.
6. Parietal kemik kafatası üst yarısında yatay bir açılış yapılıncaya kadar bir çekiç ile kesin üst grev.
7. Numuneyi 180 ° döndürün ve işlemi ters tarafta tekrarlayın.
8. Kesim 1 ' in sonuna (Şekil 3A) ve 90 ° ' lik yatay açılarak kesin noktasını yerleştirin. Açılış Oksipital kemiğe ulaşana kadar çekiç ile grev (numunenin boyutuna bağlı olarak yaklaşık 10 cm).
9. Numuneyi yuvarlayın ve kesme 2 ' nin sonundaki ters tarafta tekrarlayın.
   Not: BSC 'nin arkasına doğru yerleştirilmiş numune dorsal ve burun Ile kafatasındaki açıklıklar bir baş aşağı "U" benzer.
10. "U" altındaki kafatası içine tenacula dişleri takın ve kendini doğru burnumu. Beyin ve serebellum (Şekil 3B) kaudal ucunu açığa çıkarın.
11. Bir kepçe olarak makas kullanın ve boşluğun içinden tüm serebellum dışarı burnumu.
12. Foramen beyin kök kızdırmak için doku forseps kullanın.

4. büyük hayvan yöntemi

1. Numuneyi, kafatasının dorsal kısmının, kafatası ve foramen magnum 'un teknisyene bakan kaudal kısmı ile otopsi yüzeyi ile temas etmesi için konumlandırın.
2. Değiştirilmiş Stiletto bıçağı omurilik ve spinal meningler arasında mümkün olduğunca foramen magnum içine yerleştirin.
3. Spinal meninges serebellum ve beyin kökü ayırmak için omurilik etrafında puan. Bıçak foramen magnum aracılığıyla yerleştirildikten sonra, yavaşça kafatası boyunca takip etmek için bıçak açı mümkün olduğunca.
4. Nöral doku ve spinal meningler arasındaki uzaya bir kimya spatula veya ince, uzun işlenmiş kaşık yerleştirin.
5. Spinal menenjlerin bağlantı sağlamak için omurilik ve beyine etrafında prob kesilmiş olmuştur.
6. Beyin sapı forseps ile tutun. Öte yandan, kaşık rostrally sonra dorsal serebellum kadar toplamak için ilerlemek. Aynı anda forseps ile beyin kökünü geri çekin ve kaşık kullanarak serebellum dışarı kepçe.
   Not: kuduz testi için yeterli serebellum kurtarmak için birden fazla girişimde bulunabilir.

5. Post nekropsy

1. Tüm tek kullanımlık malzemelerin (eldiven, pedler, çalışma alanı kaplamaları) ve kullanılmayan dokularda biyotehlikeli atıkların atılması.
2. Tüm enstrümanları (örn. Endüstriyel Bulaşık makinesi, otoklav, kimyasal dezenfektan, kaynatma) kullanılabilir yöntemle temizleyin ve dezenfekte edin.
3. % 20 çamaşır suyu ve/veya% 70 etanol ile tüm çalışma yüzeylerini temizleyin ve dezenfekte edin.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

31 Ocak 2019 ve 28 Şubat 2019 tarihleri arasında kafatası ile gönderilen tüm karasal numuneler, bir boyun varlığı ve toplanan otopsi yöntemi ile ilgili bilgiler vardı. Bu süre zarfında 170 kafaları temsil edilen 18 tür ile necropsied edildi. 52% (89/170) düzgün bir şekilde çökmemiş. Kalan üç tüm vücut örnekleri dahil olmak üzere en az bir vertebra bağlı vardı. % 75 (128/170) kullanılan ventral Yöntem, o zaman, bu boynları, 49 tarihinde mevcuttu. Bir boyun i...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Kuduz otopsi için gönderilen numuneler genellikle nörolojik bir hastalıktır ile uyumlu klinik belirtiler öyküsü vardır. Klinik hastalığın varlığı, Zoonotik hastalıklar da dahil olmak üzere çeşitli bozukluklar ile ilişkili olabilir, bir laboratuar personeli için risk artan enfeksiyon elde. Bu riskleri azaltmak için, numunelerin işlenmesi ve manipülasyonunu azaltan teknikler uygulanmaktadır.

Gösterilen Yöntemler sadece tek bir hayvandan istenen dokulardan kaldırmak i?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Chemistry spoon	Any
Curved, sharp-blunt mayo scissors	Sklar	14-2055	Sklar Operating Scissors 5-1/2 Inch Premium OR Grade Stainless Steel Finger Ring Handle Curved Sharp/Blunt
Large sharp restaurant-quality carving knife	Dexter	P94848	8" Scalloped Utility Knife, white handle
Locking tumor-tenacula	Diamond Scientific and Surgicals	N/A	Czerny Tenaculum Forcep
Modified stiletto knife (6.5 inch long blade carving knife ground to 0.5 inch wide)	Dexter	P94848	Modified 8" Scalloped Utility Knife, white handle
Orthopedic mallet-hammer	Mortech	N/A	Postmortem hammer with hook
Sharp councilman orthopedic bone chisel	Shandon	60-5	Councilman's Chisel Blade: 2 in x 2.25 in standard 7 in
Sharpened tablespoon or other long handled spoon	Any
Smooth-tipped tissue dressing forceps without teeth	Shandon	63-03	Shandon Broad Point Dressing Thumb Forceps
Powder-free non-latex gloves	Any
Safety glasses, goggles, or faceshield	Any
Surgery or N-95 mask	Any
Kraft paper, butcher paper, absorbent pad, etc	Any