JoVE Logo
Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

İnsektisitlerin kahve meyvesi delicisine (CBB) karşı toksisitesini test etmek için yeşil kahve meyvelerini (GF'ler) kullanan bir yöntem geliştirilmiştir. İnsektisitler veya toksik maddeler, CBB istilasından önce veya sonra dezenfekte edilmiş GF'lere uygulandı. Böcek mortalitesi, iticilik ve üreme kapasitesi, diğer parametrelere ek olarak değerlendirildi.

Özet

Kahve meyvesi delici (CBB) Hypothenemus hampei'yi tedavi etmek için böcek öldürücüleri önermeden önce, bu böcek öldürücülerin yetişkin böceklere karşı mortalitesini ve kovuculuğunu veya üreme çıktısı üzerindeki etkilerini bilmek değerlidir. Bununla birlikte, şu anda mevcut yöntemler sadece yetişkin mortalitesini değerlendirmekte ve yeni insektisitlerin seçimini farklı bir etki şekli ile sınırlandırmaktadır. Bu çalışmada, laboratuvar koşullarında CBB üzerindeki çeşitli etkileri tanımlamak için farklı deneysel yöntemler incelenmiştir. Bunun için yeşil kahve meyveleri (GF'ler) toplandı ve sodyum hipoklorit çözeltisine daldırılarak ve ardından UV ışık ışınlaması ile dezenfekte edildi. Paralel olarak, bir koloniden CBB yetişkinleri, sodyum hipoklorit çözeltisine daldırılarak dezenfekte edildi. Meyve korumasını (ön istila) değerlendirmek için meyveler plastik kutulara yerleştirildi ve böcek öldürücüler uygulandı. Daha sonra, CBB yetişkinleri GF başına iki CBB oranında serbest bırakıldı. GF'ler, CBB istilasını ve 1, 7, 15 ve 21 gün sonra sağkalımı değerlendirmek için kontrollü koşullar altında bırakıldı. CBB istilasından (postinfestasyon) sonra insektisit etkinliğini değerlendirmek için, CBB yetişkinleri GF'lere 21 ° C'de 3 saat boyunca 2: 1 oranında salındı. CBB yetişkinlerini karınları kısmen açıkta bırakmış olarak gösteren istila edilmiş meyveler seçildi ve 96 kuyucuklu raflara yerleştirildi ve meyvelere sıkılan CBB'ler doğrudan tedavi edildi. 20 gün sonra, meyveler disseke edildi ve her meyvenin içindeki CBB biyolojik aşamaları kaydedildi. GF'ler, CBB'ye karşı toksik, kimyasal ve biyolojik böcek öldürücüleri değerlendirmek için doğal koşulları taklit eden substratlar olarak görev yaptı.

Giriş

Kahve meyvesi delici (CBB), Hypothenemus hampei, ilk olarak 1988'de Kolombiya'da tespit edildi ve o zamandan beri kahve mahsulünün en önemli haşere türü haline geldi. CBB dişileri, doğum meyvesini zaten döllenmiş olarak bırakır ve 1,2 yaydıkları uçucu kimyasallar tarafından yönlendirilen yeni meyveler ararlar. Tam bir döngü 23 gün içinde3 25 ° C sıcaklıkta yerine getirilir. Döngü, kurucu dişinin tohuma nüfuz etmesi ve meyve endospermine yumurta bırakması ile başlar. Kapalı larvalar tohumu yer. Meyveler bu noktada disseke edilirse, hem kurucu dişi hem de yavrularını gözlemlemek mümkün olacaktır. 14 gün sonra, larvalar genellikle pupa haline gelir, pupa aşaması 5 gün sürer. Yetişkin aşamasında, dişiler kardeşleriyle çiftleşir ve yeni döllenmiş dişiler, yeni bir döngü4'e başlamak için yeni kahve meyveleri arayan hasarlı meyvelerden uzaklaşırlar.

Hem penetrasyon süreci hem de larva beslemenin sonucu kahve tohumuna zarar verir, kahve içeceğinin kalitesini düşürür ve geliri önemli ölçüde azaltır; kahve tarlalarında% 5'ten fazla istila genellikle ekonomik eşik olarak kabul edilir.

CBB kontrolü, kültürel kontrol ve agronomik uygulamalar, doğal biyolojik ajanlar ve güvenlik koşulları ve zamanında uygulama gerektiren kimyasal böcek öldürücülerin kullanımı dahil olmak üzere entegre bir haşere yönetimi (IPM) stratejisine dayanmaktadır4.

CBB'nin kontrolü için yeni insektisitleri değerlendirmek için, hızlı sonuçların elde edilmesini sağlayan düşük maliyetli metodolojilere ihtiyaç vardır. İnsektisitlerin 5,6 dahil edildiği kahve içeren yapay diyetler veya böcek öldürücülerin kuru parşömen kahvesi 7,8,9 üzerine püskürtülmesi de dahil olmak üzere hem laboratuvar hem de saha prosedürleri şu anda kullanılmaktadır. Ayrıca entomolojik kollarla kaplı kahve ağacı dalları kullanılarak sahada yapılan deneyler10,11; ancak bu yöntemler yoğun emek ve uzun değerlendirme süreleri gerektirir.

Doğal alan koşullarına benzeyen, aynı zamanda hızlı ve ucuz olan bir durum, yeşil veya olgun kahve meyvelerinin kullanılmasıdır. Bununla birlikte, bu meyveler CBB'yi geliştirmek için uygun koşullar altında muhafaza edilmeli, kalitelerini ve özelliklerini korumak için mikroorganizmalar tarafından yapılan değişikliklerden ve kirleticilerden kaçınılmalıdır. Bu amaçla, farklı dezenfektanların yanı sıra ısıve radyasyon içeren prosedürler 7,9,12,13,14,15,16 kullanılmıştır.

Ek olarak, CBB'ye karşı insektisit değerlendirme yöntemleri, meyve aramak için uçan veya bu meyvelere nüfuz eden yetişkin dişilerin simülasyonlarını gerektirir17,18. Bunun için 8,11,19 tarlasında yapay meyve istilaları gerçekleştirilmiştir, ancak bu işlem emek yoğun ve çevresel koşullara bağlıdır.

Burada, saha koşullarına benzeyen kontrollü çevresel koşullar altında CBB üzerinde farklı etkileri olabilecek ürünlerin değerlendirilmesi için standartlaştırılmış bir metodoloji açıklıyoruz.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

NOT: Bu protokol, laboratuvar koşullarında CBB üzerindeki farklı etkileri tanımlamak için farklı yöntemleri ele almaktadır.

1. Meyve toplama

  1. Sabahın erken saatlerinde bir kahve plantasyonunda ağaçlardan çiçek açtıktan sonra ~ 120-150 gün gelişim yaşına sahip GF'leri seçin.

2. Meyve dezenfeksiyonu20

  1. Laboratuvara yaklaşık 300 GF getirin. Düzgün boyutlu ve sağlıklı GF'leri seçin ve pedinkülleri geri çekin.
  2. GF'leri bir sabun çözeltisine daldırın (998 mL musluk suyunda 2 mL sıvı bulaşık deterjanı), ardından GF'leri yıkamak için ovalayın. Ardından, meyveleri suyla durulayın, suyu üç kez değiştirin.
  3. GF'leri% 0.5 sodyum hipoklorit çözeltisine (900 mL musluk suyunda 100 mL) batırın ve 15 dakika boyunca 110 rpm'de bir çalkalayıcıda karıştırın. Daha sonra, GF'leri bir çalkalayıcıda karıştırarak ve suyu her 10 dakikada bir üç kez değiştirerek suyla durulayın.
  4. GF'leri steril kağıt havlularla kurulayın.
  5. GF'leri tepsilere (33 cm x 25 cm x 2 cm) yerleştirin ve UV özellikli yatay laminer akış istasyonunun içine UV kaynağından 55 cm mesafeye yerleştirerek 15 dakika boyunca ışınlayın.
  6. 15 dakikalık süre boyunca, her 5 dakikada bir, tüm meyvenin ışınlanmasını sağlamak için GF'leri hareket ettirin.

3. Böcek dezenfeksiyonu21

  1. Biyotahlilleri kurmak için yeni ortaya çıkan (aynı gün) CBB böceklerini kullanın.
  2. CBB'leri% 0.5 sodyum hipoklorit çözeltisine batırın, 10 dakika boyunca bir fırçayla yavaşça çalkalayın.
  3. CBB'leri müslin bir bezden süzün ve steril damıtılmış suyla üç kez yıkayın.
  4. Fazla suyu steril kağıt havlularla temizleyin.

4. Meyveler üzerinde koruyucu etkisi olan bir ürünün değerlendirilmesi (preinfestasyon) (Şekil 1)

  1. Deneysel birim başına bir grup GF kullanın. Genel olarak, deney birimi başına 30 GF'lik bir grup kullanılır.
  2. GF'leri plastik kutulara (deney ünitesi) yerleştirin.
  3. Değerlendirme için test ürününü farklı konsantrasyonlarda uygulayın. Uygulamayı portatif bir püskürtücü ünite ile gerçekleştirin. Burada %5 ve %6'lık bir alkaloid emülsiyon test edildi.
  4. Kontrol olarak, bir grup GF'yi suyla püskürtün.
  5. Tedavi başına en az üç tekrar (deney ünitesi) kullanın, birbiri ardına püskürtün.
  6. Steril bir başlıkta, GF başına iki CBB yetişkinini serbest bırakın (plastik kutulara toplam 60 CBB verilir). 30 dakika sonra kutuları örtün.
  7. Plastik kutuları istila edilmiş GF'lerle birlikte kontrollü koşullar altında (karanlık, 25 ± 2 °C ve bağıl nem% 71 ±% 5) bir odada veya inkübatörde bırakın.
  8. 1, 7, 15 ve 21 gün sonra, her kutudaki meyvelerin dışındaki daha delici meyvelerin ve canlı ve ölü böceklerin sayısını sayın.
  9. Enfestasyon sonrası 20 günde, her GF'yi bir stereomikroskop altında disseke edin, büyütme 10x.
  10. Her meyvedeki böcekler tarafından zarar görmüş sağlıklı tohumların veya tohumların sayısını sayın.
  11. Gözlemlenen farklı CBB biyolojik aşamalarını22 sayın ve deney birimi başına böcek ölümünü belirlemek için her tohumdaki ölü böceklerin sayısını sayın.

5. CBB istilasından sonra (postinfestasyon) bir ürünün etkisinin değerlendirilmesi (Şekil 3)

  1. Tedavi başına 200 meyve grupları kullanın.
  2. Asteril başlıkta, CBB yetişkinlerini (CBB yetişkinlerinin GF'lere 2: 1 oranı) daha önce dezenfekte edilmiş GF'lere bırakın ve istilanın 21 ° C'de 3 saat boyunca ilerlemesine izin verin.
  3. GF'leri inceleyin. 3 saat sonra, çoğu CBB'lerin karnı hala açıkta kalacak şekilde (pozisyon A20), Şekil 2'de gösterildiği gibi istila edilmelidir.
  4. 46 istila edilmiş GF'yi (A pozisyonu) seçin ve bunları 96 delikli plastik raflara (deney ünitesi) yerleştirin. Meyveler bu pozisyonda kalmalıdır, böylece işlem doğrudan meyveyi delen CBB'ye püskürtülebilir.
  5. Tedavi başına en az üç kez (üç raf) püskürtün, birbiri ardına 30 dakika sonra rafları kaplayın.
  6. Rafları istila edilmiş GF'lerle birlikte kontrollü koşullar altında (karanlık, 25 ± 2 °C ve bağıl nem% 71 ±% 5) bir odada veya inkübatörde bırakın.
  7. 20 gün sonra, GF'leri 10x büyütmede bir stereomikroskop altında inceleyin.
  8. Her meyvedeki böcekler tarafından zarar görmüş sağlıklı tohumların veya tohumların sayısını sayın.
  9. Deney birimi başına böcek ölümlerini belirlemek için farklı CBB biyolojik aşamaları22'yi ve her tohumdaki ölü böceklerin sayısını sayın.

6. CBB üzerinde caydırıcı etkisi olan bir ürünün değerlendirilmesi

  1. Meyveler üzerinde koruyucu etkisi olan bir ürünü değerlendirmek için belirtilen 4.1-4.6 adımlarını izleyin.
  2. CBB yetişkinlerini plastik kutulara bıraktıktan sonra, kutulardan uzaklaşan CBB'lerin sayısını ve GF'leri enfekte eden sayıyı sayın. Ardından, 4.7-4.11 arasındaki adımları izleyin.
  3. CBB istilasından sonra ürünü değerlendirmek için özetlenen 5.1-5.5 adımlarını izleyin.
  4. Her tedaviyi A pozisyonundaki böceklere püskürttükten sonra, GF'den çıkan ve / veya GF'den uzaklaşan CBB'lerin sayısını sayın. Ardından, 5.6-5.9 arasındaki adımları izleyin.

7. İstatistiksel analiz

NOT: Yanıt değişkenleri, zaman içindeki ölüm yüzdeleri ve sağlıklı istila edilmemiş kahve tohumlarının yüzdesidir.

  1. Her tedavi için her yanıt değişkeninin ortalama ve standart sapmasını tahmin edin.
  2. Tamamen rastgele bir tasarım için bir modelle her yanıt değişkeni için varyans analizi gerçekleştirin.
    NOT: Dunnett'in% 5'lik karşılaştırma testi, tedavileri mutlak kontrol (su kontrolü) ile karşılaştırmak için gerçekleştirilir.
  3. Tedaviler mutlak kontrolden önemli ölçüde farklı olduğunda, tedavileri karşılaştırmak için% 5 en az anlamlı fark (LSD) testi kullanın.
  4. Testin gücünü değerlendirmek; % 85'ten büyükse, varyansların normalliği ve homojenliği varsayımları karşılanır.

figure-protocol-6575
Şekil 1: İnsektisitlerin CBB üzerindeki preinfestasyon etkilerinin değerlendirilmesi için prosedür. İnsektisitlerin yeşil meyveler (GF'ler) kullanılarak Hypothenemus hampei (CBB) üzerindeki preenfestasyon etkilerini değerlendirme adımları. (A) Meyve seçimi. (B) İnsektisitlerin kahve meyvelerine püskürtülmesi. (C) GF başına 2: 1 CBB oranında kahve meyvelerinin CBB istilası. (D) İstilacı meyveler. (E) Meyvelerin kontrollü koşullar altında kuluçkalanması. (F) Meyve diseksiyonu. (G) Tohumların içindeki CBB popülasyonunu saymak. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-7610
Şekil 2: Kahve meyvelerinin CBB istilasını işleyin. İstilacı meyveler, karınları kısmen açıkta olan CBB yetişkinlerini içerir (pozisyon A). Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-8126
Şekil 3: İnsektisitlerin CBB üzerindeki pozinfestasyon etkilerinin değerlendirilmesi için prosedür. GF'leri kullanarak insektisitlerin CBB üzerindeki istila sonrası etkilerini değerlendirme adımları. (A) Meyve seçimi. (B) Meyvelerin CBB ile GF başına 2:1 CBB oranında istila edilmesi. (C) İstilacı meyvelerin seçimi. (D) İnsektisitin meyvelere püskürtülmesi. (E) Meyvelerin kuluçkalanması. (F) Meyve diseksiyonu. (G) CBB popülasyonunun sayılması. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

Sonuçlar, CBB dişilerinin meyveleri tanıdığını ve meyve yüzeyinin özelliklerine ve yayılan kokulara bağlı olarak, CBB dişilerinin meyvelere 21 ° C'de 3 saat içinde nüfuz etmeye veya sıkmaya başladığını göstermiştir.

Bir insektisitin kahve meyvelerine uygulandığında CBB üzerindeki etkisi (preinfestasyon prosedürü) 24 saat sonra ve zamanla Şekil 4'te gösterilmiştir. LSD testine göre, iki insektisit (% 5 ve% 6'da alkaloid emülsiyonu...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Bu protokolde meyvelerin yanı sıra böceklerin dezenfeksiyonu da kritik adımlardır. Tarladan elde edilen meyveler laboratuvarda kullanıldığında, epidermistemikroorganizmalar ve akarlar bulunduğundan sıklıkla yüksek kontaminasyon ve dehidrasyon gösterirler 7,15,16. Bu nedenle, dezenfekte edilmemiş meyve veya böceklerin kullanılması, bakteri veya mantar gibi mikroorganizmaların neden olduğu kontaminasyon nedeniy...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Açıklamalar

Yazarların hiçbirinin beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Yazarlar, Kolombiya Ulusal Kahve Yetiştiricileri Federasyonu'na, Entomoloji Bölümü asistanlarına (Diana Marcela Giraldo, Gloria Patricia Naranjo), Deney İstasyonu Naranjal'a ve Jhon Félix Trejos'a teşekkürlerini sunarlar.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Beaker with spout, low form 500 mLBRAND PPBR87826
Benchtop ShakerNew Brunswick Scientific Innova 4000 Incubator Shaker
Dishwashing liquid soap-AXIONColgate-PalmoliveAXION
Hood; Horizontal Laminar Flow StationTerra Universal Powder-Coated Steel, 1930 mm W x 1118 mm D x 1619 mm H, 120 V (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html)
Insects CBBBIOCAFE(http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html).
Multi Fold White paper towelsFamilia73551
Preval Spray unit Preval MerckZ365556-1KThttps://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ
5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt
AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk
WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB
Reversible Racks 96-WellheathrowscientificHEA2345Ahttps://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a
Scalpel blades N 11MerckS2771-100EA
Scalpel handles N3MerckS2896-1EA
Sodium HypochlorideThe clorox companyClorox
Stereo MicroscopeZeissStemi 508https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html

Referanslar

  1. Mendesil, E., et al. Semiochemicals used in host location by the coffee berry borer, Hypothenemus hampei. Journal of Chemical Ecology. 35 (8), 944-950 (2009).
  2. Jaramillo, J., et al. Coffee berry borer joins bark beetles in coffee klatch. PLoS ONE. 8 (9), 74277(2013).
  3. Giraldo-Jaramillo, M., Garcia, A. G., Parra, J. R. Biology, thermal requirements, and estimation of the number of generations of Hypothenemus hampei (Ferrari, 1867) (Coleoptera: Curculionidae) in the state of São Paulo, Brazil. Journal of Economic Entomology. 111 (5), 2192-2200 (2018).
  4. Benavides, P., Góngora, C., Bustillo, A. IPM Program to Control Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei, with Emphasis on Highly Pathogenic Mixed Strains of Beauveria bassiana, to Overcome Insecticide Resistance in Colombia. IntechOpen. , (2012).
  5. Martínez, C. P., Echeverri, C., Florez, J. C., Gaitan, A. L., Góngora, C. E. In vitro production of two chitinolytic proteins with an inhibiting effect on the insect coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Ferrari) (Coleoptera: Curculionidae) and the fungus Hemileia vastatrix the most limiting pests of coffee crops. AMB Express. 2, 1-11 (2012).
  6. Padilla, B. E., Acuña, Z., Velásquez, C. S., Rubio, G. J. D. Inhibitors of [alpha]-amylases from the coffee berry borer Hypothenemus hampei in different plant species. Revista Colombiana de Entomología. 32 (2), 125-130 (2006).
  7. Alvarez, J. H., Cortina, H. A., Villegas, J. F. Methods to evaluate antibiosis to Hypothenemus hampei Ferrari in coffee under controlled conditions. Cenicafé. 52 (3), 205-214 (2001).
  8. Arcila, A., Duarte, A. F., Villalba, D. A., Benavides, P. New Product in the Integrated Management of the Coffee Berry Borer in Colombia. National Coffee Research Center (Cenicafé). , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/477 (2014).
  9. Jaramillo, J., Montoya, E., Benavides, P., Góngora, C. Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae for the control of coffee brocade in fruits on the ground. Revista Colombiana de Entomología. 41, 95-104 (2015).
  10. Bastidas, A., Velásquez, E., Benavides, P., Bustillo, A., Orozco, C. Evaluation of preformulated Beauveria bassiana (Bálsam) Vuillemin, for the control of the coffee berry borer. Agronomia. 17, 44-61 (2009).
  11. Villalba-Gault, D., Bustillo, A., Chaves Cordoba, B. Evaluation of insecticides for the control of the coffee berry borer in Colombia. Cenicafe. 46, 152-163 (1995).
  12. Bustillo, A. E., Orozco, J., Benavides, P., Portilla, M. Mass production and use of parasitoids for the control of the coffee berry borer in Colombia. Cenicafe. 47 (4), 215-230 (1996).
  13. Celestino, F. N., Pratissoli, D., Machado, L. C., Santos Junior, H. J. G. D., Mardgan, L., Ribeiro, L. V. Adaptation of breeding techniques of the coffee berry borer [Hypothenemus hampei (Ferrari). Coffee Science. 11 (2), 161-168 (2016).
  14. Domínguez, L., Parzanese, M. Ultraviolet light in food preservation. Argentine Foods. 52 (2), 70-76 (2012).
  15. Jaramillo, J., Chabi-Olaye, A., Poehling, H. M., Kamonjo, C., Borgemeister, C. Development of an improved laboratory production technique for the coffee berry borer Hypothenemus hampei, using fresh coffee berries. Entomologia Experimentalis et Applicata. 130 (3), 275-281 (2009).
  16. Pérez, J., Infante, F., Vega, F. E. Does the coffee berry borer (Coleoptera: Scolytidae) have mutualistic fungi. Annals of the Entomological Society of America. 98 (4), 483-490 (2005).
  17. Benavides, P., Gil, P., Góngora, C., Arcila, A. Integrated pest management. Cenicafe. Manual of the Colombian coffee grower: Research and technology for the sustainability of coffee growing. Manizales: FNC: Cenicafé. 3, 179-214 (2013).
  18. Bustillo, P. A review of the coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae), in Colombia. Revista Colombiana de Entomología. 32 (2), 101-116 (2006).
  19. Arcila, A., Benavides, P., Mejia, J. New Chemical Control Alternative for the Integrated Management of the Coffee Berry Borer. National Coffee Research Center (Cenicafé). , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/557 (2015).
  20. Tapias, L., Martinez, C., Benavides, P., Gongora, C. Laboratory method to evaluate the effect of insecticides on the coffee berry borer. Cenicafé. 68 (2), 76-89 (2017).
  21. Bustillo, A. E., Marín, P. How to reactivate the virulence of Beauveria bassiana to control the coffee berry borer. Manejo Integrado de Plagas. 63, (2002).
  22. Constantino, L. M., et al. morphological and genetic aspects of Hypothenemus obscurus and Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae). Revista Colombiana de Entomología. 37 (2), 173-182 (2011).
  23. Estrela, C., et al. Mechanism of action of sodium hypochlorite. Brazilian Dental Journal. 13 (2), 113-117 (2002).
  24. Diffey, B. L. Solar ultraviolet radiation effects on biological systems. Physics in Medicine and Biology. 36 (3), 299-328 (1991).
  25. BIOCAFE. , Available from: http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html (2022).
  26. Bustillo, A. E., et al. Integrated Management of the Coffee Berry Borer: Hypothenemus hampei Ferrari in Colombia. , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/hangle/10778/848 (1998).
  27. Portilla, R. Development and evaluation of an artificial diet for the rearing of Hypothenemus hampei. Cenicafé. 50, 24-38 (1999).
  28. Portilla, R. M., Streett, D. A. New techniques for automated mass production of Hypothenemus hampei on the modified Cenibroca artificial diet. Cenicafé. 57, 37-50 (2006).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

evre BilimleriSay 181Kahveinsektisitlermortaliteiticilikgeli im a amalar

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır