İnmenin Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Özet

Bu protokol, orta serebral arterin intraluminal oklüzyonu yoluyla farelerde geçici fokal serebral iskemi modelini açıklar. Ek olarak, manyetik rezonans görüntüleme ve davranış testleri kullanılarak sonuç değerlendirme örnekleri gösterilmiştir.

Özet

İnme, küresel olarak önemli bir ölüm veya kronik sakatlık nedeni olarak durmaktadır. Bununla birlikte, mevcut optimal tedaviler iskemik inmenin akut fazında reperfüzyon tedavileri ile sınırlıdır. İnme fizyopatolojisi hakkında bilgi edinmek ve yenilikçi terapötik yaklaşımlar geliştirmek için, in vivo kemirgen inme modelleri temel bir rol oynamaktadır. Genetiği değiştirilmiş hayvanların mevcudiyeti, farelerin deneysel inme modelleri olarak kullanılmasını özellikle teşvik etmiştir.

İnme hastalarında orta serebral arter (MCA) tıkanması sık görülen bir durumdur. Sonuç olarak, en yaygın deneysel model, kraniektomi gerektirmeyen minimal invaziv bir teknik olan MCA'nın intraluminal oklüzyonunu içerir. Bu prosedür, dış karotis arterden (ECA) bir monofilament yerleştirmeyi ve MCA'nın dallanma noktasına ulaşana kadar iç karotis arter (ICA) boyunca ilerletmeyi içerir. 45 dakikalık bir arteriyel tıkanıklıktan sonra, reperfüzyona izin vermek için monofilament çıkarılır. İşlem boyunca, oklüzyon sırasında azalmayı ve ardından reperfüzyon üzerine iyileşmeyi doğrulamak için serebral kan akışı izlenir. Nörolojik ve doku sonuçları, davranışsal testler ve manyetik rezonans görüntüleme (MRG) çalışmaları kullanılarak değerlendirilir.

Giriş

Dünya Sağlık Örgütü'ne göre inme, dünya çapında yılda yaklaşık 15 milyon insanı etkileyen yıkıcı bir hastalıktır. Hastaların yaklaşık üçte biri bu duruma yenik düşerken, üçte biri kalıcı sakatlık yaşar. İnme, nöral ve periferik immün hücreler, damar sistemi ve sistemik yanıtlar gibi çeşitli hücre tiplerini içeren karmaşık bir patolojidir¹. Sistem düzeyinde inme ile tetiklenen karmaşık reaksiyon ağı, şu anda in vitro modeller kullanılarak çoğaltılamamaktadır. Bu nedenle, deneysel hayvan modelleri, hastalığın mekanizmalarını araştırmak ve yeni tedaviler geliştirmek ve test etmek için gereklidir. Şu anda, erken doku reperfüzyonu, doku tip....

Protokol

Hayvan çalışmaları, Katalan ve İspanyol yasalarına (Real Decreto 53/2013) ve Avrupa Direktiflerine uygun olarak, Barselona Üniversitesi etik komitesinin (Comité Ètic d'Experimentació Animal, CEEA) ve Generalitat de Catalunya'nın yerel düzenleyici kurumlarının onayı ile yürütülmüştür. Çalışmalar ARRIVE kılavuzlarına uygun olarak raporlanmaktadır. Bu prosedür, yaş sınırı olmaksızın 8 haftalıktan başlayarak yetişkin farelerde gerçekleştirilmek üzere tasarlanmıştır. 10-12 haftalık C57BL/6 farelerde geliştirilen cerrahi prosedür örnekleri burada verilmiştir. Fare suşuna bağlı anatomik farklılıklar göz önünde bulundurulmalıdır.

1. Hayvan ha....

Tartışmalar

İntraluminal tMCAo prosedürü, temel araştırmalarda reperfüzyonlu fokal beyin iskemisinin en sık kullanılan modelidir. Şu anda, genetiği değiştirilmiş suşların mevcudiyeti nedeniyle fareler tercih edilen hayvan modelidir. Bununla birlikte, genetiği değiştirilmiş farelerin ve genetik geçmişlerinin beyin vaskülarizasyonunu etkileyebileceğini kabul etmek önemlidir. Farklı arter bölgeleri arasında kollateral dolaşım ve anastomozların varlığı, deneysel prosedürlerin sonuçlarını önemli öl?.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
6/0 suture	Arago		Vascular ligatures
6/0 suture with curved needle	Arago		Skin sutures
9 mg/mL Saline	Fresenius Kabi	CN616003 EC	For hydration
Anaesthesia system	SurgiVet
Blunt retractors, 1 mm wide	Fine Science Tools	18200-09
Buprenorfine	Buprex		For pain relief
Clamp applying forceps	Fine Science Tools	S&T CAF4
Dumont mini forceps	Fine Science Tools	M3S 11200-10
Forceps	Fine Science Tools	91106-12
Glue	Loctite		To stick LDF probe to the skull
Grip Strength Meter	IITC Life Science Inc.	#2200
Isoflurane	B-Braun	CN571105.8
LDF Perimed	Perimed	Periflux System 5000
LDF Probe Holders	Perimed	PH 07-4
Medical tape
MRI magnet	Bruker BioSpin, Ettlingen, Germany		BioSpec 70/30 horizontal animal scanner
Needle Holder with Suture Cutter	Fine Science Tools	12002-14
Nylon filament	Doccol	701912PK5Re
Recovery cage with heating pad
Sirgical scissors	Fine Science Tools	91401-12
Small vessel cauterizer kit	Fine Science Tools	18000-00
Stereomicroscope and cold light	Leica	M60
Suture tying forceps	Fine Science Tools	18025-10
Thermostat, rectal probe and mouse pad	Letica Science Instruments	LE 13206
Vannas spring scissors (4mm cutting edge)	Fine Science Tools	15019-10
Vascular clamps	Fine Science Tools	00396-01