Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Данный протокол описывает модель транзиторной фокальной ишемии головного мозга у мышей через внутрипросветную окклюзию средней мозговой артерии. Кроме того, показаны примеры оценки результатов с использованием магнитно-резонансной томографии и поведенческих тестов.

Аннотация

Инсульт является одной из основных причин смерти или хронической инвалидности во всем мире. Тем не менее, существующие оптимальные методы лечения ограничиваются реперфузионной терапией во время острой фазы ишемического инсульта. Для получения информации о физиопатологии инсульта и разработки инновационных терапевтических подходов фундаментальную роль играют модели инсульта у грызунов in vivo . Доступность генетически модифицированных животных особенно стимулировала использование мышей в качестве экспериментальных моделей инсульта.

У пациентов, перенесших инсульт, окклюзия средней мозговой артерии (МЦА) является распространенным явлением. Следовательно, наиболее распространенная экспериментальная модель включает внутрипросветную окклюзию MCA, минимально инвазивный метод, который не требует краниэктомии. Эта процедура включает в себя введение мононити через внешнюю сонную артерию (ЭКА) и продвижение ее через внутреннюю сонную артерию (ВСА) до тех пор, пока она не достигнет точки разветвления МКА. После 45-минутной артериальной окклюзии монофиламент удаляют для проведения реперфузии. На протяжении всего процесса контролируется мозговой кровоток для подтверждения уменьшения во время окклюзии и последующего восстановления после реперфузии. Неврологические и тканевые исходы оцениваются с помощью поведенческих тестов и магнитно-резонансной томографии (МРТ).

Введение

По данным ВОЗ, инсульт является разрушительным заболеванием, от которого ежегодно страдают около 15 миллионов человек во всем мире. Около трети пациентов умирают от этого заболевания, в то время как другая треть испытывает постоянную инвалидность. Инсульт — это сложная патология, в которой участвуют различные типы клеток, такие как нейронные и периферические иммунные клетки, сосудистая сеть и системные реакции1. Сложная сеть реакций, вызванных инсультом на системном уровне, в настоящее время не может быть воспроизведена с помощью моделей in vitro . Таким образом, экспериментальные модели на животных необходимы для изучения механизмов з....

протокол

Работа с животными проводилась в соответствии с законами Каталонии и Испании (Real Decreto 53/2013) и Европейскими директивами, с одобрения этического комитета (Comité Ètic d'Experimentació Animal, CEEA) Университета Барселоны и местных регулирующих органов Женералитата Каталонии. Результаты исследований публикуются в соответствии с рекомендациями ARRIVE. Эта процедура предназначена для проведения у взрослых мышей, начиная с 8-недельного возраста, без возрастных ограничений. Примеры хирургического вмешательства, разработанного на мышах C57BL/6 в возрасте 10-12 недель, приведены здесь. Следует учитывать анатомические различия в зависимости от штамма мышей.

Результаты

Существуют различные подходы к оценке результатов процедуры tMCAo. Здесь используются методы нейровизуализации in vivo (МРТ) и поведенческое тестирование.

У мышей развиваются ишемические поражения в головном мозге, в основном затрагивающие территорию, поставляемую MCA и?.......

Обсуждение

Внутрипросветная процедура tMCAo является наиболее часто используемой моделью фокальной ишемии головного мозга с реперфузией в фундаментальных исследованиях. В настоящее время мыши являются предпочтительной животной моделью из-за наличия генетически модифицированных штаммов. Тем не .......

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

Исследование поддержано грантом PID2020-113202RB-I00, финансируемым Ministerio de Ciencia e Innovación (MCIN)/Agencia Estatal de Investigación (AEI), Gobierno de España/10.13039/501100011033 и «Европейским фондом регионального развития (ЕФРР). Способ сделать Европу». NCC и MAR получили стипендии (PRE2021-099481 и PRE2018-085737 соответственно), финансируемые MCIN/AEI/ 10.13039/501100011033 и «Европейским социальным фондом (ESF) Инвестиции в ваше будущее». Благодарим Франциску Руис-Хаэн и Леонардо Маркес-Кисиновски за техническую поддержку. Мы выражаем признательность за поддержку центра МРТ-визуализации Института биомедицинских исследований ....

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
6/0 suture AragoVascular ligatures
6/0 suture with curved needleAragoSkin sutures
9 mg/mL SalineFresenius KabiCN616003 ECFor hydration
Anaesthesia systemSurgiVet
Blunt retractors, 1 mm wideFine Science Tools18200-09
BuprenorfineBuprexFor pain relief
Clamp applying forcepsFine Science ToolsS&T CAF4
Dumont mini forcepsFine Science ToolsM3S 11200-10
ForcepsFine Science Tools91106-12
GlueLoctiteTo stick LDF probe to the skull
Grip Strength MeterIITC Life Science Inc.#2200
IsofluraneB-BraunCN571105.8
LDF PerimedPerimedPeriflux System 5000
LDF Probe HoldersPerimedPH 07-4
Medical tape
MRI magnetBruker BioSpin, Ettlingen, GermanyBioSpec 70/30 horizontal animal scanner 
Needle Holder with Suture CutterFine Science Tools12002-14
Nylon filamentDoccol701912PK5Re
Recovery cage with heating pad
Sirgical scissorsFine Science Tools91401-12
Small vessel cauterizer kitFine Science Tools18000-00
Stereomicroscope and cold lightLeicaM60
Suture tying forcepsFine Science Tools18025-10
Thermostat, rectal probe and mouse padLetica Science InstrumentsLE 13206
Vannas spring scissors (4mm cutting edge)Fine Science Tools15019-10
Vascular clampsFine Science Tools00396-01

Ссылки

  1. Siddiqi, A. Z., Wadhwa, A. Treatment of acute stroke: current practices and future horizons. Cardiovascular Revascularization Medicine. 49, 56-65 (2023).
  2. Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены