Spontan Solunum Yapan Farelerde Balon Kateter Kullanılarak Uzaktan Tetiklenen LAD Oklüzyonu

Özet

Bu makale, farelerde miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını (IRI) indüklemek için benzersiz bir kapalı göğüs tekniği sunmaktadır. Sunulan yöntem, farelerin uzaktan miyokard iskemisini indüklerken kendiliğinden nefes almalarını sağlar. Bu, iskemi ve reperfüzyonun dinamik süreçlerini yerinde ve noninvaziv görüntüleme yoluyla gerçek zamanlı olarak incelemek için hayvana erişim sağlar.

Özet

Akut miyokard infarktüsü (AMİ) sık görülen ve yüksek mortaliteye sahip bir kardiyovasküler hastalıktır. için revaskülarizasyon stratejilerindeki gelişmelere rağmen, sıklıkla miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarına (IRI) yol açarak kardiyak hasarı arttırır. Murin modelleri, hem akut yaralanmayı hem de kronik miyokardiyal yeniden şekillenmeyi in vivo olarak araştırmak için hayati araçlar olarak hizmet eder. Bu çalışma, farelerde miyokardiyal IRI'yi uzaktan indüklemek için benzersiz bir kapalı göğüs tekniği sunar ve MRI veya PET gibi in vivo görüntüleme kullanılarak oklüzyon ve reperfüzyonun çok erken evresinin araştırılmasını sağlar. Protokol, göğüs kapatıldıktan sonra iskemi başlangıcı üzerinde hassas kontrol sağlayan bir uzaktan oklüzyon yöntemi kullanır. Cerrahi travmayı azaltır, spontan nefes almayı sağlar ve deneysel tutarlılığı artırır. Bu tekniği diğerlerinden ayıran şey, oklüzyon ve reperfüzyon olayları sırasında ultrason ve manyetik rezonans görüntüleme (MRI) dahil olmak üzere eşzamanlı noninvaziv görüntüleme potansiyelidir. Doku tepkilerini neredeyse gerçek zamanlı olarak analiz etmek için eşsiz bir fırsat sunarak, iskemi ve reperfüzyon sırasındaki süreçler hakkında kritik bilgiler sağlar. Bu yenilikçi yaklaşımın kapsamlı sistematik testleri yapıldı, enfarktüs için kardiyak nekroz belirteçleri ölçüldü, kontrastlı MRG kullanılarak risk altındaki alan değerlendirildi ve yara olgunlaşma aşamasında enfarktüsler boyandı. Bu araştırmalar sayesinde, miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarına yönelik araştırma yaklaşımlarını ilerletmede ve hedefe yönelik müdahalelerin geliştirilmesini hızlandırmada önerilen aracın değerine vurgu yapılmıştır. Önerilen yenilikçi deneysel protokolün noninvaziv görüntüleme teknikleri ile kombine edilmesinin uygulanabilirliğini gösteren ön bulgular burada sunulmuştur. Bu ilk sonuçlar, aynı anda MRI taramaları yaparken miyokardiyal iskemiyi uzaktan indüklemek için amaca yönelik hayvan beşiğinin kullanılmasının faydasını vurgulamaktadır.

Giriş

Akut miyokard infarktüsü (AMİ), sık görülen global bir kardiyovasküler hastalıktır ve yüksek mortalite oranları ve morbidite ile ilişkilidir¹. hastaları için erken ve etkili revaskülarizasyon stratejilerini mümkün kılan teknolojik gelişmelere rağmen, hastalar bu girişimleri takiben hala miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarı (IRI) yaşamaktadır². Bu nedenle, IRI'yi azaltmak için temel mekanizmaları anlamak ve yaklaşımlar formüle etmek çok önemlidir. IRI, çok sayıda karmaşık biyolojik süreci içeren karmaşık bir patofizyolojik durumu temsil eder. Bunlar, düzenlenmiş hücre ölümünü, oksidatif stres tepkilerini, iltihaplanmayı, yara iyileşmesini, fibrozu ve ventriküler yeniden şekillenmeyi kapsar. Fareler gibi hayvan modelleri, IRI araştırmaları için büyük önem taşımıştır ve maliyet etkinlikleri, hızlı üremeleri ve transgenik modellerden elde edilen mekanik bilgi zenginliği nedeniyle yaygın olarak kullanılmaktadır³.

Bu protokol, insan patolojisini daha yakından taklit eden, kapalı bir göğsü olan kendiliğinden nefes alan farelerde IRI'yi uzaktan indüklemek için yenilikçi bir teknik sunar. Sol ön inen arteri (LAD) tıkamak için miyokarddan uzakta konumlandırılan balon kateter kullanılarak uzaktan oklüzyon sağlandı. Bu yaklaşım, ultrason veya manyetik rezonans görüntüleme (MRI) dahil olmak üzere eşzamanlı görüntüleme modalitelerini kolaylaştırarak, oklüzyon ve reperfüzyonun tam anlarında atan kalbe sürekli erişim sağlar. Bu noninvaziv yöntemler, oklüzyon ve reperfüzyon olaylarından önce, sırasında ve sonrasında doku tepkileri hakkında önemli bilgiler sağlayabilir.

Fare modellerinde IRI'yi indüklemek için çeşitli cerrahi teknikler mevcuttur. Açık göğüs koroner ligasyon modellerinde torakotomiden kaynaklanan cerrahi travma, iskemi ve reperfüzyon ile ilişkili çeşitli mekanizmaları etkileyen bir immün yanıtı tetikler. Doğuştan gelen bağışıklık sisteminin aktivasyonu, miyokard enfarktüsünün derecesini etkileme potansiyeline sahiptir⁴. Önerilen uyarlanmış teknik, açık toraks zaman dilimini maksimum 5 dakikaya indirgeyerek murin IRI çalışmalarında miyokardiyal ön ve son koşullandırmayı keşfetmek ve muhtemelen cerrahi travmaya doğuştan gelen bağışıklık tepkisinin etkisini azaltmak için potansiyel bir yaklaşım sağlar. Ayrıca, yeni geliştirilen teknik, ventilatöre bağlı akciğer hasarının neden olduğu proinflamatuar sekellerin azaltılmasına da katkıda bulunabilir⁵. Bununla birlikte, bu yeni kapalı göğüs yönteminin birleşik etkileri daha derinlemesine araştırma gerektirecektir.

Önerilen tekniğin kapsamlı bir şekilde doğrulanması, LAD'nin cerrahi göğüs diseksiyonu ve ligatür kaynaklı oklüzyon yoluyla 30 dakika boyunca açığa çıkarılmasını içeren geleneksel yöntemle karşılaştırılarak gerçekleştirildi. Kardiyak enfarktüs boyutunu yansıtan troponin ölçümleri, gadolinyum kontrast arttırımlı MRG kullanılarak risk altındaki alanın değerlendirilmesi, histolojik trifenil tetrazolyum klorür (TTC) boyaması ve Sirius Red (SR) boyama yoluyla nihai yara izi boyutlarının belirlenmesi dahil olmak üzere her iki teknikten elde edilen sonuçlar karşılaştırıldı. Sonuç, murin modellerinde iskemi-reperfüzyon hasarını incelemek için önerilen yaklaşımın sağlamlığını ve etkinliğini göstermektedir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

Bu hayvan protokolü, Leuven Katolik Üniversitesi'ndeki Hayvan Deneyleri Etik Komitesi (ECD) tarafından belirlenen yönergeler ve düzenlemeler tarafından onaylanmıştır ve bunlara uygundur. Yerel ECD tarafından geliştirilen tüm politikalar, 2010/63/EU sayılı Direktifte belirtildiği gibi Avrupa Birliği'nin laboratuvar hayvanlarının refahı ile ilgili düzenlemelerini takip eder. Aşağıda açıklanan tüm testler 8-12 haftalık (vücut ağırlığı = 20-23 g) erkek C57BL / 6 fareler üzerinde gerçekleştirilmiştir. Akut deneyler, ameliyattan hemen sonra sakrifiye edilen hayvanları temsil ediyor. Hayatta kalma deneyleri, troponin ölçümü, MRI ve SR boyama dahil olmak üzere dört haftalık bir takibi temsil ediyordu.

1. Anestezi ve endotrakeal entübasyon

1. Anestezi öncesi ilaçları bir ketamin karışımı (7.5 mg / kg; Nimatek 100 mg / mL), ksilazin (1 mg / kg; Rompun, 20 mg / mL) ve asepromazin (0.1 mg / kg; Plicivet, 10 mg / mL) (KXA) (Malzeme Tablosuna bakınız) intraperitoneal olarak% 0.9 tuzlu su seyreltici ile. Bu, daha yumuşak ve daha az invaziv bir entübasyon sağlar.
2. Fareyi bir indüksiyon odasına yerleştirin (Malzeme Tablosuna bakınız) ve saf oksijende %2,5 izofluran kullanarak 1 L / dk akış hızıyla doğru ve ayak parmağını sıkıştırma refleksi kaybolana kadar anestezi uygulayın.
3. Hayvanı ısıtılmış bir pede (±38 °C) aktarın ve başı cerraha bakacak şekilde sırtüstü pozisyonda konumlandırın. Kuyruk ve ön pençeleri pedin üzerine bantla sabitleyin. Ön uzuvların aşırı gerilmediğinden emin olun, çünkü bu solunumu tehlikeye atabilir.
4. Üst kesici dişlerin etrafına 2-0 ipek sütür ( Malzeme Tablosuna bakınız) yerleştirin ve fareyi gergin bir şekilde çekmek için pediskin kenarına bantlayın. Gerekirse, dikişin gerginliğini korumak için bir iğne tutucu takın. Bir burun konisi kullanarak 1 L / dk'lık bir akışla% 100 oksijen içinde% 2 izofluran kullanılarak uyuşturulmuş hayvanı koruyun.
5. Sternumun hemen rostral kısmına bir ışık kaynağı yerleştirin, burun konisini çıkarın ve izofluran beslemesini ventilatörün üzerine yerleştirin. Dili yukarı kaldırarak ve dilin bazal kısmını daha fazla kaldırmak ve ses tellerini görselleştirmek için kendi kendine yapılan bir laringoskop tutarak fareyi forseps kullanarak entübe edin.
6. Ses telleri arasındaki kör bir iğneye 18 G'lik bir kateter kullanarak kendi kendine yapılan bir trakeal tüp yerleştirin. Kateteri yukarı doğru hareket ettirin, kör iğneyi çıkarın ve tüpü fare ventilatörüne bağlayın (bkz. Malzeme Tablosu).
7. Entübasyon tüpünü ventilatöre bağlamak için modifiye edilmiş Y şeklinde bir konektör kullanın ( Malzeme Tablosuna bakın). Trakeal tüpün doğru konumlandırılması, simetrik göğüs genişlemesinin değerlendirilmesiyle doğrulanabilir.
8. Tidal hacmi (mL) vücut ağırlığı (BW) (g) x 7'ye ve ventilasyon hızını dakikada 53,5 x (BW (g)^-0,26) vuruşa ayarlayın ve gerekirse belirli bir farenin vücut ağırlığına ayarlayın⁶ (örneğin, 25 g'lık bir fare için tidal hacim dakikada 140 vuruşta 175 mL'dir).
9. İzofluranı% 100 oksijende% 1'e düşürün, çünkü hayvan premedikasyon nedeniyle anestezi altında kalacaktır. Bununla birlikte, bir ayak parmağı çimdikleme yaparak anestezi derinliğini düzenli olarak değerlendirin. İzofluran konsantrasyonunu anestezi derinliğine göre uyarlayın.
10. Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için bir damla oftalmik merhem sürün.

2. IRI aracının kurulumu

NOT: Tüm bantları çıkarın ve hayvanı amaca yönelik olarak üretilmiş IRI aletinin taban plakasına yerleştirin. IRI aracının özellikleriyle ilgili ayrıntılar Ek Dosya 1'de belirtilmiştir.

1. Amaca yönelik olarak üretilmiş uzaktan IRI aletinin taban plakasını cerrahın önünde yan konuma sabitleyin. Kuyruğu ve pençeleri bant kullanarak sabitleyin. Kazara hareketi önlemek için üst kesici dişlerin etrafına 2-0 ipek sütür kullanarak başı sabitleyin (Şekil 1).
2. Vücut sıcaklığını izlemek için rektal termal probu yerleştirin ( Malzeme Tablosuna bakın) ve sıcaklığı 37 °C civarında tutmak için hayvanın üzerinde bir kızılötesi ısıtma lambası kullanın. Aşırı ısınmayı önlemek için hayvan ile lamba arasındaki yeterli mesafeye dikkat edin.
3. Kalp atış hızını ve EKG dalga biçimini gözlemlemek ve kaydetmek için EKG iğne elektrotlarını dört pençenin tümüne yerleştirin. Rektal probu ve EKG elektrotlarını bant kullanarak platforma sabitleyin.
4. Tüyleri almak ve net bir cerrahi alan oluşturmak için göğüs kafesinin sol tarafına tüy dökücü krem sürün.
   NOT: Kimyasal yanıkları önlemek için uygulama süresini sınırlayın ve kremin tamamen çıkarılmasına dikkat edin.

3. Torakotomi

1. Betadine Solüsyonu kullanarak cildin aseptik hazırlığını gerçekleştirin, ardından steril bir ortam sağlamak için sol göğüs kafesine cerrahi bir örtü yerleştirin. Prosedürü gerçekleştirmek için sterilize edilmiş ekipman kullanın. Göğüs kasının orta kısmında, yaklaşık 1 cm uzunluğunda ve sol sternal sınırdan 2 mm uzakta dikey bir cilt kesisi yapın.
2. Altındaki kaburgaları ortaya çıkarmak için göğüs kasını tükürün. Geminin kazara yaralanmasını önleyin. Kanama olursa, herhangi bir kanamayı durdurmak için pamuklu aplikatörler kullanın.
3. Kaburgaları görselleştirin ve ince, yarı saydam göğüs duvarından şişen akciğeri gözlemleyerek interkostal boşlukları tanımlayın. Üçüncü interkostal aralıkta 6-8 mm'lik bir kesi yaparak cerrahi makas kullanarak göğüs boşluğunu açın. Kesinin, internal torasik arterin bulunduğu sternal sınırdan en az 2 mm uzakta olduğundan emin olun.
4. İnterkostal boşluğa küçük bir sıçan gözü spekulumu yerleştirin ( Malzeme Tablosuna bakınız). Bu, bir kaburga ekartörü olarak işlev görecektir (Şekil 1A).
5. Perikardları kavisli forseps ile yavaşça kaldırın ve ayırın.
6. Akciğerin üzerine küçük bir parça pamuk yerleştirin ve yavaşça aşağı doğru itin.

4. LAD hazırlığı

1. LAD parlak kırmızı görünür ve sol kulak kepçesinin altındaki aorttan apekse doğru uzanır. Ligatür için ideal konumlandırma, sol kulak kepçesinin ucundan yaklaşık 2 mm daha aşağıdır. Sol kulak kepçesini tanımlamaya ve ışık akışını kullanarak LAD görselleştirmesini optimize etmeye yardımcı olmak için pulmoner gövdeyi bir işaretleyici olarak kullanın (Şekil 2).
2. LAD'ın etrafından 7-0 polipropilen sütür geçirmek için konik bir iğne kullanın. İğneyi sol ventriküle girebileceği için çok derine veya LAD'ye zarar verebileceği için çok sığ yerleştirmeyin.
3. Küçük pamuk parçasını çıkarın ve sol akciğerin hala havalandırılıp havalandırılmadığını kontrol edin.
4. Kaburga ekartörünü çıkarın.
5. Dikişin her iki ucunda en az 15 cm uzunluğunda olduğundan emin olun. İğneyi kesin.
6. 1 mm'lik bir PE-50 boru parçasının üzerine bir parça 15 mm PE-10 boru yerleştirin (bkz. Malzeme Tablosu). Sütürün her iki ucunu PE-10 tüpünden geçirin ve PE tüpünü daha kalın ucu kalbe doğru kaydırın.

5. Göğüs kapatma ve ekstübasyon

1. Açık interkostal boşluğa bir miktar fusidik asit jeli uygulayın ve ventilatörün dışarı akışını kısa bir süre engelleyerek kalan intratorasik havanın nazikçe kaçmasına izin verin. Göğüs kafesine hava girişini önlemek için PE tüpünün dış kısmına ek fusidik asit jeli eklenebilir.
2. Göğüs kasını, PE tüpünün seviyesinin üstünde ve altında 5-0 polipropilen X dikişle kapatın ve PE tüpünün kalınlaşmış kısmının kas seviyesinin altında olduğundan emin olun.
3. PE tüpünün üstünde ve altında iki adet 5-0 polipropilen X dikişle cildi kapatın (Şekil 1B ve Şekil 3).
4. Kapalı bir göğüs ile hayvan tekrar kendiliğinden nefes alabilir. Tidal hacmi ve solunum hızını yavaşça azaltarak hayvanı ventilatörden ayırın. Hayvan nefes almaya başladığında, ventilatör tüpünü kendiliğinden dikkatlice ayırın, ancak stabil bir solunum paterni gözlenene kadar yerinde tutun.
5. İzofluran kaynağını, hayvanın burnunun üzerine yerleştirilen ve taban plakasına sabitlenen bir nosekon ile bağlayın.

6. Uzak IR aracının montajı

1. Dikey yan parçayı yarıklara yerleştirerek taban plakasına yerleştirin.
2. İki dikiş ucunu almak için ince bir kanca kullanın ve bunları balonun arkasındaki yan kısımdaki merkezi delikten çekin (bkz. Malzeme Tablosu).
3. Dikişlerden birinin uçlarını balonun üzerine ve etrafına yönlendirin. Balonun altındaki ve etrafındaki diğer dikiş ucu ile devam edin. Sütürün daha düzgün yönlendirilmesi için fusidik asit jeli uygulayın.
4. Dikiş uçlarını yan kısmın üst kısmındaki yarıklardan geçirin. Sütürün distal kısmında, her bir dikiş ucunu yerinde tutmak için 2.1 g'lık bir ağırlık uygulayın (Şekil 1C ve Şekil 4).
   NOT: Uygun ağırlıkların konfigürasyonu değişebilir ve önceden test edilmelidir. Ayrıntılar için Ek Şekil 1 ve Ek Dosya 1'e bakın. Uzak IRI araç tasarımı Ek Şekil 2'de verilmiştir.

7. İskemi ve reperfüzyonun indüksiyonu

1. Vasküler balon pompasını kullanarak balonu 2 bar'a kadar hemen şişirerek iskemiyi indükleyin. Pompayı kilitleyin. Balonun şişirilip şişirilmediğini ve ağırlıkların kaldırılıp kaldırılmadığını görsel olarak kontrol edin (Şekil 4).
2. EKG izindeki değişikliği gözlemleyerek iskemiyi doğrulayın.
3. Balonu belirli çalışma protokolüne göre ayarlanan süre boyunca şişirilmiş halde bırakın (sunulan deneylerde 30 dakika).
4. Pompanın kilidini açarak tıkanıklığı durdurun. Balonu dikkatlice söndürün. Balonun sönüp sönmediğini ve ağırlıkların indirilip indirilmediğini görsel olarak kontrol edin.

8. Uzak IR aracının sökülmesi

1. Hayvan ile yan kısım arasındaki dikişi ve tüpü kesin ve yan kısmı dikkatlice çıkarın.
2. Borunun göğüs kafesine yerleştirildiği yere fusidik asit jeli uygulayın. Cildi tüpe doğru nazikçe itmek için kavisli forseps kullanın ve tüpü çıkarmak için başka bir forseps kullanın. Cilde yakın kalan dikişleri kesin.
3. Tüpün çıkış bölgesini kapatmak ve göğüs kafesine hava girişi riskini en aza indirmek için ekstra bir 5-0 polipropilen sütür yerleştirin.

9. Narkozun sona ermesi ve iyileşmesi

1. İzofluran kaynağını durdurun ve hayvanın sessiz, sıcak ve oksijen açısından zengin bir ortamda uyanmasına izin verin.
2. Farenin herhangi bir solunum sıkıntısı içinde olmadığını, tamamen iyileşene kadar gözlemleyerek onaylayın. Dehidrasyonu önlemek için intraperitoneal enjeksiyonla 0.3 mL steril salin (vücut sıcaklığında) sağlayın.
3. Postoperatif analjezi için, hayvan ayaktan olmadan önce deri altına bir opioid analjezik (buprenorfin, 0.1 mg / kg) uygulayın. Farelerin ağrı kesici ilaçlara yanıt verdiğinden emin olmak ve ek ağrı kesici ilaçlara ihtiyaç olup olmadığını belirlemek için buprenorfin verildiğinde sonraki 24-48 saat boyunca fareleri her 4-6 saatte bir kontrol edin. Ek destek, ameliyat sonrası kafes tabanına yerleştirilen standart bir destekleyici bakım diyeti, jel veya püre içermelidir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

İskemiyi indükleme yeteneğinin doğrulanması dört testle gerçekleştirilmiştir: Trifenil tetrazolyum klorür (TTC) ve Sirius Red (SR) boyama, kardiyak troponin I ölçümü ve Geç gadolinyum güçlendirme (LGE) MR görüntüleme. İstatistiksel anlamlılık, sınırlı örneklem büyüklükleri göz önünde bulundurularak Mann-Whitney non-parametrik test kullanılarak değerlendirildi. İstatistiksel anlamlılık p < 0.05 olarak belirlendi.

A...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Bu çalışmada tanıtılan yeni uzaktan oklüzyon tekniği, ilk cerrahi sırasında doğrudan damar manipülasyonu ihtiyacını ortadan kaldırarak ve erken reperfüze miyokardın eşzamanlı multimodal görüntülemesine izin vererek iskemi-reperfüzyon yaralanma modellemesi alanındaki araştırmaları ilerletmek için benzersiz bir platform sunmaktadır. Troponin-I ölçümleri, LGE kontrast MRG, TTC ve SR boyama dahil olmak üzere kapsamlı karakterizasyon, önerilen tekniğin mevcu...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
2-0 silk suture	Sharpoint Products	DC-2515N
5-0 polypropylene suture	Ethicon	8710H
7-0 polypropylene suture	Ethicon	8206H
ACCLARENT Balloon Inflation Device	Johnson&Johnson MedTech	BID30
Acepromazine	Kela
BD Vialon 18 G	BD	381347
BD Vialon 20 G	BD	381334
Betadine Solution	Purdue Pharma	25655-41-8
Buprenorphine (Buprenex Injectable)	Reckitt Benkiser Healthcare	NDC 12496-0757-1
Carp Zoom Styl Knijplood 2.1 g (lead fishing weights)	Visdeal.nl
Dumont #3 Forceps	Fine Science Tools	11231-30
Dumont #5 Forceps	Fine Science Tools	11251-30
Fine Scissors	Fine Science Tools	14040-10
Fucidine gel	Leo Pharma
Isoflurane	Abbott	NDC 5260-04-05
KD Mouse/Rat Eye Speculum	World Precision Instruments	501897
KD mouse/rat eye speculum	World Precision Instruments	501897
Ketamine	Dechra
Light source	Zeiss	KL 1500 LCD
MRI system	Bruker BioSpin, Ettlingen, Germany	BioSpec 70/30
NatriumChloride 0.9%	Baxter
Nocturnal Infrared Heat Lamp	Zoo Med Laboratories, Inc.	RS-75
ParaVision software	Bruker BioSpin	version 6.0.1
polyethylene tubing PE-10	SAI Infusion technologies	PE-10
polyethylene tubing PE-50	SAI Infusion technologies	PE-50
remote IRI tool (PMMA)	homemade
Rodent Surgical Monitor	Indus instruments
Segment v4.0	Medviso, segment.heiberg.se	R12067
Self-gated gradient echo sequence	Bruker BioSpin, Ettlingen, Germany	IntraGate, ParaVision 6.0.1
Slim Elongated Needle Holder	Fine Science Tools	12005-15
Sure-Seal Mouse/Rat Induction Chamber	World Precision Instruments	EZ-178
Tubing Connectors, Poly, Y Shape	Westlab	072025-0001
Ultraverse 035 PTA Dilatation Catheter: 5mm x 40mm, 17 ATM RBP balloon on 130 cm long catheter	Bard Peripheral Vascular, Inc.	00801741092671
Veet (depilatory creme)	Reckitt Benkiser Healthcare
Ventilator, MiniVent Model 845	Hugo Sachs	73-0043
Vidisic	BAUSCH & LOMB PHARMA	685313
Xylazine	Bayer