Üç kuyucuklu bir diseksiyon kabının her bir kuyucuğuna yaklaşık 400 mikrolitre diseksiyon ve görüntüleme ortamı pipetleyerek başlayın. Bir diseksiyon mikroskobu altında çalışarak, yiyecek artıklarını gidermek için deneysel larvaları diseksiyon ve görüntüleme ortamında yıkayın. Diseksiyon mikroskobu altında çalışmaya devam ederken, larvaları bir cımbız seti kullanarak ağız kancalarından tutun.
Başka bir cımbız setiyle, larvaların yaklaşık 1 / 3'ünü arka taraftan dikkatlice kesin. Daha sonra, larvaları bir cımbız seti kullanarak ağız kancalarından tutarken, kütikülü ağız kancalarına doğru nazikçe fırçalamak için diğer cımbız setini kullanın. Aynı zamanda, tüm larva içten dışa dönene kadar ağız kancalarını tutan cımbızla içeri doğru itin.
Kütikül ile bağlantılarını korurken merkezi sinir sistemini ve diğer dokuları açığa çıkarmak için larvaları ters çevirin. Yanlışlıkla çıkarılmasını önlemek için merkezi sinir sistemini veya CNS'yi bulun. CNS olmayan dokuları cımbız kullanarak nazikçe çıkarın, sadece CNS ve beyni kütiküle bağlı tutun.
Aksonal bağlantıları keserek beyni kütikülden serbest bırakmak için, mikrodiseksiyon makası kullanarak, beyin loblarının altında yavaşça kesin. Ardından, ventral sinir kordonunun altındaki bağlantıları kesin. Diseksiyon süresini 20 dakikanın altında tutmak için larvaları gruplar halinde disseke edin.
Disseke edilmiş beyni, diseksiyon ve görüntüleme ortamını içeren bir kuyuya aktarın. Üç saatten fazla süren görüntüleme için, ortamı yağlı cisimlerle destekleyin.
