Üçüncü instar larva beyninin canlı hücre görüntülemesini gerçekleştirmek için, diseksiyon ve görüntüleme ortamını içeren üç kuyucuklu bir diseksiyon kabının son kuyucuğunda disseke edilmiş beyinleri ve izole edilmiş yağ cisimlerini toplayarak başlayın. Bir slaytın arkasına gaz geçirgen bir membran yerleştirin ve bölünmüş halkayı merkeze bastırın. 200 mikrolitrelik bir mikro pipet kullanarak, mümkün olan maksimum yağ gövdelerine ve 130 ila 140 mikrolitre ortama sahip 10 adede kadar disseke edilmiş beyni zarın merkezine aktarın.
Beyinleri, görüntülenecek nöral kök hücre popülasyonuna ve mikroskop tipine göre yönlendirerek, örneklerin mikroskobun amacına yakın olmasını sağlayın. Örneğin, merkezi beyin loblarındaki nöral kök hücreleri görüntülemek için, beyin loblarının hedefe en yakın olduğundan emin olun. Daha sonra, çözeltiyi beynin ve yağ gövdeleriyle zar boyunca yaymak için çözeltinin üzerine yavaşça bir cam kapak kayması yerleştirin.
Beyinler ezilmeden kapak kaymasına dokunana kadar fazla çözeltiyi lekelemek için laboratuvar dokusunu kapak kayma kenarında tutun. Daha sonra, bir boya fırçası kullanarak kenarları boyunca erimiş petrol jölesi uygulayarak kapak kaymasını hareketsiz hale getirin ve jölenin katılaşmasına izin verin. Çok kuyucuklu bir mikro slaytta bir kuyucuğa 400 mikrolitre görüntüleme ortamı ekleyin.
Daha önce disseke edilmiş yağ gövdelerini bu kuyuya aktarın. Ardından, kuyunun merkezine yakın bir kümeye 10 adede kadar beyin yerleştirin. Beyinleri görüntülenecek nöral kök hücre popülasyonuna ve mikroskop tipine göre yönlendirin.
Beyinlerin iki ila beş dakika boyunca kuyuya yerleşmesine izin verin. Mikro slaydı mikroskopa aktarmadan önce slayt kapağıyla örtün. Fotoğraf ağartmayı en aza indirmek için en düşük lazer gücünü ve pozlama süresini kullanarak edinme sürecini başlatın.
UAS güdümlü Kiraz-Jüpiter ve androjen olarak etiketlenmiş pimler GFP'yi ifade eden larva beyinlerinin çok kuyulu görüntüleme slaytları kullanılarak ve yağ vücut takviyesi olmadan görüntülenmesi, pimlerin, mitotik iğlerin mitoz sırasında tutarlı bir şekilde hizalandığı nöroblastları bölmede belirgin bir apikal hilal oluşturduğunu ortaya koymuştur. Bu örneklerde, görüntüleme süresi arttıkça hücre döngüsü uzunluğu artmıştır. Membrana bağlı bir slayt üzerinde yağ gövdesi takviyeli bir ortamda görüntülenen örnekler, hücre döngüsü uzunluğunda bir artış göstermedi.
Ayrıca, 10 saatlik membrana bağlı slaytta dört bölümlü nöroblastlar gözlendi.