Fareyi feda ettikten sonra köpük bir yüzeye yerleştirin ve ön ayakları bant veya pimlerle sabitleyin. Her iki arka bacak da dizlerin üzerinden kesmek için ameliyat makası kullanın. Her bir arka uzuv ayrı bir diseksiyon odasına aktarın ve dokuyu kaplamak için soğuk Tyrode solüsyonu ekleyin.
İlk arka ayağı diseksiyon odasına sabitleyin ve bacakların arka yüzünün görünür olduğundan emin olun. Büyütme altında, cildi çıkarın, ardından fleksör digitorum brevis veya FDB kasını ortaya çıkarın ve eksize edin. FDB kasını, bir mililitre Tyrode çözeltisi içeren etiketli bir cam şişede saklayın.
İnce makas kullanarak gastroknemius kasını ayırın, ardından soleus kasını çıkarın. Cildi bacağın ön yüzünden çıkarın. Ardından, ayak bileği bölgesindeki tibialis anteriorunun distal tendonlarını ve ekstansör digitorum longus veya EDL kaslarını tanımlayın.
Tibialis'i çıkarın ve atın. Ardından, EDL'nin distal tendonlarını kesin ve EDL kasını tamamen çıkarmak için diseksiyona devam edin. Ekstansör hallusis longus veya EHL kasını tanımladıktan sonra, tendonu ilk basamağa kadar takip ederek diseksiyona başlayın.
Daha sonra, peronei'nin en dış tendonunu tanımlayın ve takip edin ve onu koparmak ve peroneus longus veya PL kasını çıkarın. Tendonu tanımlayın ve dördüncü basamağa kadar izleyin. Ardından, peroneus digiti quarti veya PDQA kasını kesin ve çıkarın.
İkinci arka uzuv diseke edildikten sonra, aynı tipteki kasları Tyrode solüsyonunu içeren etiketli bir cam şişede toplayın. Kalıntıları ve fare kürkünü temizlemek için Tyrode'un solüsyonunu diseksiyon odasına yerleştirin. PL kaslarını diseksiyon odasına dökün ve bütünlüklerini ve kasılmalarını doğrulayın.
Merkezi tendonu takip eden soleus kası üzerinde uzunlamasına veya çapraz kesimler yapın ve uzunluğunun yaklaşık% 80'ini kesin. EDL kası için, bir veya iki tendonu takip edin ve soleus ile aynı uzunlukta kesin. Her bir kas çiftini, ayrışma çözeltisinde üç miligram kollajenaz tip 2 içeren yeni bir cam şişeye aktarın ve hafifçe çalkalayarak 65 ila 90 dakika boyunca 37 santigrat derecelik bir su banyosunda inkübe edin.
65 dakikalık inkübasyondan sonra, şişeyi her beş dakikada bir stereoskop altında kontrol edin. Kas dalgalı ve gevşek göründüğünde ve lifler ayrılmaya başladığında, kollajenazı devre dışı bırakmak ve çıkarmak için kasları oda sıcaklığında Tyrode ile durulayın. Bir dizi ateşle parlatılmış Pasteur pipeti kullanarak, solüsyonu beş milimetre uçlu bir pipetle kasın etrafında çalkalayın.
Ardından, kasları yavaşça ucun içine ve dışına üç ila dört kez çekin. Kaslar lifleri serbest bırakmaya başladığında ve inceldiğinde, dört milimetrelik bir uç kullanarak, daha fazla lif ayırmak için prosedürü tekrarlayın.
