Üretim ve deneysel çalışmalar burada Reynaldo Pareja en sadık ve coşkulu yardım yansıtmaktadır sundu. Kolombiya İdari Bilimler Bölümü, Teknoloji ve Yenilik (Colciencias) tarafından ve Bill &amp; Büyük Zorluklar İncelemeler girişimiyle Melinda Gates Vakfı hibe tarafından finanse edilmiştir.

1. Bitkiler <ol><li> Yüzey sterilize% 0.5 sodyum hipoklorit iki dakika ve% 70 etanol içinde iki dakika için onları daldırarak fasulye tohumları (cv. Calima). Steril distile su ile tohumların üç kez yıkayın. </li><li> Patates dextroxe agar (PDA) medyada son durulama suyuna 100 ul kaplama ve 25, 10 gün boyunca plaka inkübe ederek sterilizasyon başarısının ° C Değerlendirin Herhangi bir büyüme plaka üzerinde görülen ise deney sonlandıralım ve yeniden başlatın. </li><li> 2:1 oranında toprak ve kum steril bir karışımı içeren saksılara üçlü gruplar halinde tohum bitki. 25 bir büyüme odası ° C, ca için tencere aktarın. % 50 bağıl nem ve 12 saat fotoperiyodun. Bir hafta sonra çimlenme, en az iki kuvvetli fideleri ortadan kaldırır. Steril distile su ve NPK 15-15-15 gübre 6 g / L su çözeltisi ile dikimden sonra 10 ve 20 gün dölleme ile Su 2-3 günde. </li></ol> 2. Mantar <ol><li> Bir ticari edininBeauveria bassiana&#39;nın suşu GHA (Mycotrol SE, Laverlam, Cali, Kolombiya) CIAL formülasyonu. </li><li> Tek spor stok kültür oluşturmak için, ca askıya. bir 10 saniye için% 0.1 &#39;lik su Triton-X-100 çözeltisi ve girdap 1 ml Konidyumların tam döngü inokülasyon. 25 de 24 saat süre ile% 2.5 agar ve inkübe Asil üzerinde süspansiyon daha sonra, levha 100 ul ° C. 100 mm levha içeren PDA içine tek bir çimlenme conidium aktarın ve tüm plaka (yaklaşık 3-4 hafta) kapsar kadar büyür. </li><li> Steril koşullar altında, ortam yüzeyinden mantar büyüme kazımak ve 10 ml steril% 0.1 Triton-X-100 içinde askıya. Bir dakika vorteksleyin. Sonra, hif kaldırmak ve stok süspansiyon elde etmek için steril bir tülbentten geçirilerek süspansiyon filtre. </li><li> Stok süspansiyon konidial konsantrasyonu tahmin etmek hemasitometre kullanın. Konidial sayımları kolaylaştırmak için, her seferinde 100 ul o aktarma, stok 10.000 kat seri dilüsyon hazırlamakf konidial% 0.1 Triton-X 100 900 ul süspansiyon ve sonraki seyreltme önce 10 saniye boyunca karıştırın. </li><li> Inokulum üretmek için, aşağıdaki formül kullanılarak 10 8 konidya / ml &#39;lik bir nihai konsantrasyon için stok süspansiyon ayarlayın; <img src="/files/ftp_upload/50360/50360eq1.jpg" alt="denklemi 1" fo:src="/files/ftp_upload/50360/50360eq1highres.jpg"/></li><li> 25 24 saat süreyle% 2.5 Noble Agar ve inkübe üzerinde 10.000 kat seyreltme konidial canlılığı, plaka 100 ul değerlendirmek ° C. Ardından, yüzde çimlenme tahmin etmek 100 Konidyumların üç rasgele grupları inceleyin. Çimlenmiş bir conidium düşünün zaman ondan conidium projelerin yarısından çapından daha görünür bir germ tüp artık. Ortalama yüzde çimlenme% 90 aştığında Sadece süspansiyonu kullanın. </li></ol> 3. Aşılama <ol><li> Onların ilk gerçek yaprak aşamasında (yaklaşık 14 gün ekimden sonra) ulaştığınızda bitkiler inoküle edin. Steril ile toprak kapasitesi Su bitkileri damıtmakaşılar önce ed su 24 saat. </li><li> Yapraktan püskürtme yöntemi için, konidial süspansiyon (tedavi) veya% 0.1 Triton-X 100 (kontrol) yaprakların adaxial (üst) yüzeyine onlar doygunluk ulaşana kadar uygulamak için bir el atomizer kullanın. Toprağa konidial akış önlemek için alüminyum folyo ile pot üstüne örtün. Püskürtme sonra, fungal invazyon kolaylaştırılması nem yüksek düzeyde tutmak için 24 saat boyunca plastik bir torba ile bitkileri kapsamaktadır. </li><li> Toprak ıslatma yöntemi için, konidial süspansiyon (tedavi), 10 ml ya da% 0.1 Triton-X 100 (kontrol) bitki tabanında toprak yüzeyine. Uygulamak için dereceli bir silindir kullanmak </li><li> Aşılar sonra, tesadüf blokları deneme desenine onları düzenliyor büyüme odalarına bitkiler dönün. En az dört ilave deneysel bloklar aynı deney içinde, endofitik kolonizasyon değerlendirme ek olarak, bitki büyüme değerlendirilmesine izin verecek şekilde monte edilmelidir. </li></ol> 4. Evaluations <ol><li> Rastgele sırayla Blokların seçilmesi, bir anda deneme bir blok değerlendirin. Bu, tek bir gün değerlendirmeye edilemez büyük deneyler için özellikle önemlidir. </li><li> Bir bitki işlemeden önce, ölçmek ve tabandan apikal meristem olan yüksekliği kaydedin. Sonra, dikkatle söküp ve akan musluk suyu iyice yıkayın. </li><li> Her bitki, örnek itibaren iki bildiriler, kök iki parça ve kök iki adet. Bitkinin ilk gerçek yaprak rastgele broşür örnekleri seçin. Daha sonra, bitki ortasından ve toprak yüzeyine yakın bir mesafede, iki kök örnekleri, 3 cm uzunluğunda her elde edin. Son olarak, kök orta ve kök ucu arkasında 1 cm de 3 cm uzunluğunda, iki adet kazık kök örnekleri almak. Uygun üç ayrı kağıt torba ve etiket örnekleri yerleştirin. </li><li> Bir blok içinde tüm bitkilerin yıkama ve örnekleme sonra, daha sonra, yaprak işleme göre kökleri başlangıç ​​ve son olarak sapları. </li><li> T sterilize YüzeyeYukarıda 1.1, gibi steril bir laminer akış kaputu konular. Steril distile suya göre her bir örnek üç kez durulayın ve steril havlu kağıt kurumalarını bekleyin. Sonra, teşrih ve endophytes dezenfektanları ile temas nedeniyle elimine edilmiştir nerede olabileceğini, dış kenarları atın. </li><li> Sapları ve kökleri için yaprak ve 6 mm uzunluğundaki için 6x6 mm, ortalama altı bölüme kesilmiş numune kesin. Levha 2 mg / L her birinde antibiyotikler tetrasiklin, streptomisin ve penisilin ile desteklenmiş PDA besiyeri ile 60 mm Petri plaka üzerinde altı bölümden. Parafilm ile plaka mühürleyin ve 25 karanlıkta inkübe ° C Her bitki altı tabak, başına iki bitki parçasını verir. </li><li> Belirli bir bitki parçasını her bloğunun işledikten sonra durulama suyunu değiştirin. Atılmadan önce kullanılan durulama suyu, plaka ° C sterilizasyon başarısının 25 az 10 gün PDA besiyeri ve inkübe üzerinde 100 mikrolitre numune değerlendirmek. Mantar üremesi ensues ise, analiz için gelen numune düşünmüyoruz. </li><li> Fungal büyüme gözlemlemek ve kaydetmek için 20 gün boyunca plakaları 2-3 günde bir kontrol edin. Tüketim ve transfer bitki bölümleri taze PDA içeren tabak mantar endophytes varlığı sergiliyor. Bu orijinal plaka komşu bitki bölümleri kirlenmesini önlemek olacaktır. </li><li> Rekor B. Bitki bölümlerden bassiana büyüme. Beauveria bassiana&#39;nın karakteristik beyaz yoğun Miseller kenarında uçuk sarı krem haline tarafından tespit edilebilir. Şüphe, bir damla su olarak numune monte ve türün karakteristik küresel Konidyumların ve zikzak şekilli konidyoforlar, arıyor, bir mikroskop altında incelemek zaman. </li><li> Bitki biyokütle tedavilerin etkisini değerlendirmek için ilave deneysel blokları kullanın. İlk olarak, taban apikal meristem üst bunların yüksekliği ölçülür. Sonra, dikkatle söküp ve musluk suyu tesisleri yıkama ve kuru ağırlığını belirlemek için üç gün boyunca 45 ° C&#39;de kurumaya bırakın. </li></ol>

<ol>
	<li>Vega, F. E., Meyling, N. V., Luangsa-ard, J. J., Blackwell, M., Vega, F. E., Kaya, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Fungal entomopathogens in Insect Pathology. , 171-220 (2012).</li><li>Vega, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+pathology+and+fungal+endophytes.">Insect pathology and fungal endophytes.</a> Journal of invertebrate pathology. 98, 277-279 (2008).</li><li>Sasan, R. K., Bidochka, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+insect-pathogenic+fungus+Metarhizium+robertsii+(Clavicipitaceae)+is+also+an+endophyte+that+stimulates+plant+root+development.">The insect-pathogenic fungus Metarhizium robertsii (Clavicipitaceae) is also an endophyte that stimulates plant root development.</a> American journal of botany. 99, 101-107 (2012).</li><li>Elena, G. J., Beatriz, P. J., Alejandro, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metarhizium+anisopliae+(Metschnikoff)+Sorokin+promotes+growth+and+has+endophytic+activity+in+tomato+plants.">Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) Sorokin promotes growth and has endophytic activity in tomato plants.</a> Advances in biological research. 5, 22-27 (2011).</li><li>Bing, L. A., Lewis, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+Ostrinia+nubilalis+(H&#252;bner)(Lepidoptera:+Pyralidae)+by+endophytic+Beauveria+bassiana+(Balsamo)+Vuillemin.">Suppression of Ostrinia nubilalis (H&#252;bner)(Lepidoptera: Pyralidae) by endophytic Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin.</a> Environmental entomology. 20, 1207-1211 (1991).</li><li>Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endophytic+Beauveria+bassiana+in+banana+(Musa+spp.)+reduces+banana+weevil+(Cosmopolites+sordidus)+fitness+and+damage.">Endophytic Beauveria bassiana in banana (Musa spp.) reduces banana weevil (Cosmopolites sordidus) fitness and damage.</a> Crop protection. 27, 1437-1441 (2008).</li><li>Gurulingappa, P., Sword, G. A., Murdoch, G., McGee, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonization+of+crop+plants+by+fungal+entomopathogens+and+their+effects+on+two+insect+pests+when+in+planta.">Colonization of crop plants by fungal entomopathogens and their effects on two insect pests when in planta.</a> Biological. 55, 34-41 (2010).</li><li>Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+endophytic+Beauveria+bassiana+on+populations+of+the+banana+weevil,+Cosmopolites+sordidus,+and+their+damage+in+tissue-cultured+banana+plants.">Effect of endophytic Beauveria bassiana on populations of the banana weevil, Cosmopolites sordidus, and their damage in tissue-cultured banana plants.</a> Entomologia experimentalis et applicata. 129, 157-165 (2008).</li><li>Ownley, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beauveria+bassiana:+Endophytic+colonization+and+plant+disease+control.">Beauveria bassiana: Endophytic colonization and plant disease control.</a> Journal of invertebrate pathology. 98, 267-270 (2008).</li><li>Ownley, B. H., Gwinn, K. D., Vega, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endophytic+fungal+entomopathogens+with+activity+against+plant+pathogens:+ecology+and+evolution.">Endophytic fungal entomopathogens with activity against plant pathogens: ecology and evolution.</a> BioControl. 55, 113-128 (2010).</li><li>Akello, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beauveria+bassiana+(Balsamo)+Vuillemin+as+an+endophyte+in+tissue+culture+banana+(Musa+spp.).">Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin as an endophyte in tissue culture banana (Musa spp.).</a> Journal of invertebrate pathology. 96, 34-42 (2007).</li><li>G&#243;mez-Vidal, S., Lopez-Llorca, L. V., Jansson, H. B., Salinas, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endophytic+colonization+of+date+palm+(Phoenix+dactylifera+L.)+leaves+by+entomopathogenic+fungi.">Endophytic colonization of date palm (Phoenix dactylifera L.) leaves by entomopathogenic fungi.</a> Micron. 37, 624-632 (2006).</li><li>Posada, F., Vega, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+the+fungal+entomopathogen+Beauveria+bassiana+(Ascomycota:+Hypocreales)+as+an+endophyte+in+cocoa+seedlings+(Theobroma+cacao).">Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales) as an endophyte in cocoa seedlings (Theobroma cacao).</a> Mycologia. 97, 1195-1200 (2005).</li><li>Tefera, T., Vidal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+inoculation+method+and+plant+growth+medium+on+endophytic+colonization+of+sorghum+by+the+entomopathogenic+fungus+Beauveria+bassiana.">Effect of inoculation method and plant growth medium on endophytic colonization of sorghum by the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana.</a> BioControl. 54, 663-669 (2009).</li><li>Posada, F., Vega, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inoculation+and+colonization+of+coffee+seedlings+(Coffea+arabica+L.)+with+the+fungal+entomopathogen+Beauveria+bassiana+(Ascomycota:+Hypocreales.">Inoculation and colonization of coffee seedlings (Coffea arabica L.) with the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales.</a> Mycoscience. 47, 284-289 (2006).</li><li>Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+Beauveria+bassiana+dose+and+exposure+duration+on+colonization+and+growth+of+tissue+cultured+banana+(Musa+sp.)+plants.">The effects of Beauveria bassiana dose and exposure duration on colonization and growth of tissue cultured banana (Musa sp.) plants.</a> Biological. 49, 6-10 (2009).</li><li>Posada, F., Aime, M. C., Peterson, S. W., Rehner, S. A., Vega, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inoculation+of+coffee+plants+with+the+fungal+entomopathogen+Beauveria+bassiana+(Ascomycota:+Hypocreales).">Inoculation of coffee plants with the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales).</a> Mycological research. 111, 748-757 (2007).</li><li>Brownbridge, M., Reay, S. D., Nelson, T. L., Glare, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+Beauveria+bassiana+(Ascomycota:+Hypocreales)+as+an+endophyte+following+inoculation+of+radiata+pine+seed+and+seedlings.">Persistence of Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales) as an endophyte following inoculation of radiata pine seed and seedlings.</a> Biological control. 61, 194-200 (2012).</li><li>Posada, F. J., Chaves, F. C., Gianfagna, T. J., Pava-Ripoll, M., Hebbar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+the+fungal+entomopathogen+Beauveria+bassiana+as+an+endophyte+in+cocoa+pods+(Theobroma+cacao+L.).">Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana as an endophyte in cocoa pods (Theobroma cacao L.).</a> Revista U.D.C.A. actualidad &amp; divulgaci&#243;n cient&#237;fica. 13, 71-78 (2010).</li><li>Quesada-Moraga, E., Landa, B. B., Mu&#241;oz-Ledesma, J., Jim&#233;nez-D&#237;az, R. M., Santiago-Alvarez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endophytic+colonisation+of+opium+poppy,+Papaver+somniferum,+by+an+entomopathogenic+Beauveria+bassiana+strain.">Endophytic colonisation of opium poppy, Papaver somniferum, by an entomopathogenic Beauveria bassiana strain.</a> Mycopathologia. 161, 323-329 (2006).</li><li>Biswas, C., Dey, P., Satpathy, S., Satya, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+the+fungal+entomopathogen+Beauveria+bassiana+as+a+season+long+endophyte+in+jute+(Corchorus+olitorius)+and+its+rapid+detection+using+SCAR+marker.">Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana as a season long endophyte in jute (Corchorus olitorius) and its rapid detection using SCAR marker.</a> BioControl. , 1-7 (2011).</li><li>Bing, L. A., Lewis, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Occurrence+of+the+entomopathogen+Beauveria+bassiana+(Balsamo)+Vuillemin+in+different+tillage+regimes+and+in+Zea+mays+L.+and+virulence+towards+Ostrinia+nubilalis+(H&#252;bner).">Occurrence of the entomopathogen Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin in different tillage regimes and in Zea mays L. and virulence towards Ostrinia nubilalis (H&#252;bner).</a> Agriculture, ecosystems &amp; environment. 45, 147-156 (1993).</li><li>Akello, J., Sikora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+acropedal+influence+of+endophyte+seed+treatment+on+Acyrthosiphon+pisum+and+Aphis+fabae+offspring+development+and+reproductive+fitness.">Systemic acropedal influence of endophyte seed treatment on Acyrthosiphon pisum and Aphis fabae offspring development and reproductive fitness.</a> Biological. 61, 215-221 (2012).</li><li>Reddy, N. P., Ali Khan, A. P., Devi, U. K., Sharma, H. C., Reineke, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+millet+crop+plant+(Sorghum+bicolor)+with+the+entomopathogenic+fungus+(Beauveria+bassiana)+to+combat+infestation+by+the+stem+borer,+Chilo+partellus+Swinhoe+(Lepidoptera:+Pyralidae.">Treatment of millet crop plant (Sorghum bicolor) with the entomopathogenic fungus (Beauveria bassiana) to combat infestation by the stem borer, Chilo partellus Swinhoe (Lepidoptera: Pyralidae.</a> Journal of Asia Pacific. 12, 221 (2009).</li><li>Quesada-Moraga, E., Mu&#241;oz-Ledesma, F. J., Santiago-Alvarez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+protection+of+Papaver+somniferum+L.+against+Iraella+luteipes+(Hymenoptera:+Cynipidae)+by+an+endophytic+strain+of+Beauveria+bassiana+(Ascomycota:+Hypocreales).">Systemic protection of Papaver somniferum L. against Iraella luteipes (Hymenoptera: Cynipidae) by an endophytic strain of Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales).</a> Environmental entomology. 38, 723-730 (2009).</li><li>Cherry, A. J., Banito, A., Djegui, D., Lomer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+the+stem-borer+Sesamia+calamistis+(Lepidoptera;+Noctuidae)+in+maize+following+seed+dressing,+topical+application+and+stem+injection+with+African+isolates+of+Beauveria+bassiana.">Suppression of the stem-borer Sesamia calamistis (Lepidoptera; Noctuidae) in maize following seed dressing, topical application and stem injection with African isolates of Beauveria bassiana.</a> International journal of pest management. 50, 67-73 (2004).</li><li>Gurulingappa, P., McGee, P. A., Sword, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endophytic+Lecanicillium+lecanii+and+Beauveria+bassiana+reduce+the+survival+and+fecundity+of+Aphis+gossypii+following+contact+with+conidia+and+secondary+metabolites.">Endophytic Lecanicillium lecanii and Beauveria bassiana reduce the survival and fecundity of Aphis gossypii following contact with conidia and secondary metabolites.</a> Crop protection. 30, 349-353 (2011).</li><li>van Schoonhoven, A., Voysest, O., Schwartz, H. F., Pastor-Corrales, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Common beans in Latin America and their constraints in Bean production problems in the tropics. , 33-57 (1989).</li><li>De Vos, M., Jander, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choice+and+no-choice+assays+for+testing+the+resistance+of+A.+thaliana+to+chewing+insects.">Choice and no-choice assays for testing the resistance of A. thaliana to chewing insects.</a> J. Vis. Exp. (15), e683 (2008).</li><li>Parsa, S., Sotelo, G., Cardona, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+herbivore+resistance+mechanisms:+spittlebugs+on+Brachiaria+spp.+as+an+example.">Characterizing herbivore resistance mechanisms: spittlebugs on Brachiaria spp. as an example.</a> J. Vis. Exp. (52), e3047 (2011).</li><li>Atamian, H., Roberts, P., Kaloshian, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+and+low+throughput+screens+with+root-knot+nematodes+Meloidogyne+spp.">High and low throughput screens with root-knot nematodes Meloidogyne spp.</a> J. Vis. Exp. (61), e3629 (2012).</li></ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ederim.

Birçok faktör bir endophyte olarak bir mantar entomopatojenin kurmak için bir denemenin belirli sonucunu etkileyemez. Sonuçlarımız, aşılama yöntemi bunlardan biri olduğunu göstermektedir. Deneme Biyolojik faktörler bitki tür ve çeşidi seçilir ve mantar entomopatojenin türler gerilmesi içeren veya kullanılan izole. Manipülasyonu dikkate alınması gereken diğer faktörler inokulum konsantrasyon, aşılar için tesis yaşı ve bitki yetiştirme koşulları içerir. Bir mantar entomopatojenin 14,17,18,21 tarafından sistemik bitki kolonizasyon neden bir aşılama yöntemi için ideal olacaktır. Bunun yerine, aşılama yöntemleri, yerel kolonizasyonu belirli bir desen tercih eğilimi belirir. Toprak drenches kökte kolonileşme 17, tercih ise kahve, örneğin, yaprak spreyi yaprak kolonizasyonu lehine. Biz ortak fasulye aynı desen bulundu. Sonuçta, inokülasyon yöntemi tercih edilmelidirmuhtemelen hedef otobur ya da bitki patojen niş eşleşen bir tesis içerisindeki endophyte amaçlanan yere göre yönlendirilmelidir. Medya kültürünün esas almasına rağmen yaygın olarak kullanılan, endophyte tespiti ve ölçümü, pahalı zor ve hata eğilimli olabilir. Örneğin, 10.800 bitki bölümleri (1.800 Petri kapları üzerine ekildi) toplam B. optimize etmek için bir deney değerlendirildi muz 16 bassiana aşılar. Bunların dışında, 4.496 bölümleri varsayılan bir B. tarafından kolonize edildi bassiana&#39;nın gibi başlıca koloni morfolojisi ile tanımlanır. Açıktır ki, her koloni için türlerinin mikroskobik doğrulama bir arzu ama kalkılamayacağını adım olurdu. Diğer taraftan, 1.176 bölümleri başka mantarlar tarafından kolonize edildi ve atılır ve veriler 16 eksik olarak tedavi edildi. Olasılığı o B. Bununla birlikte, mevcut bassiana fakir bir rakip ya da büyümek için daha yavaş oldu ve sonunda bu bölümleri ortaya olabilirdi eğerllowed yeterli zamanı. Bu nedenle, medya kültürünün esas endophyte algılama yöntemleri yanlış pozitif ve yanlış negatif tabidir. Buna göre, örneğin daha güvenilir bir şekilde tespiti ve ölçümü yöntemleri, gelişme polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) analizlerinin 20,21,24 dayalı olanlar da daha doğrulamıştır. Inokülasyon deneyler için nihai hedef herbivory ve / veya hastalığa karşı dayanıklı sistemik direnç sağlar etkili bir tedavi geliştirmek olmalıdır. İnandırıcı bir, ama henüz denenmemiş, hipotez endofitik kolonizasyon ölçüde endophyte aracılı direnç derecesi ile pozitif korele gerektiğidir. Aşılama yöntemleri rafine sonra doğal bir sonraki adım, bu nedenle, bu korelasyon incelemek olabilir. Çeşitli Video protokolleri araştırmacılar bir hedef haşere ya da patojen 29-31 için uygun bir direnç testi tasarlamanıza yardımcı olabilir. Sonuçta, bu inokulum başarısını belirleyecek bu ne bir testtirtion, yöntem ve endofitik biyolojik kontrol için ilişkili olması muhtemel.

Mantar Entomopatojenlerin mycopesticides 1 olarak önemli bir potansiyele sahip böcek populasyonları önemli düzenleyiciler vardır. Ancak son zamanlarda, ancak, mantar Entomopatojenlerin endophytes, hem de doğal ve çeşitli aşılama yöntemleri 2 yanıt olarak meydana gösterilmiştir. Endofitik mantar Entomopatojenlerin ve ekolojik işlevleri büyük ölçüde bilinmemektedir, ancak bazı çalışmalar bitki büyüme 3,4, otobur direnci 5-8 ve hastalık direnci 9,10 bunları koymaktadır. Burada sunulan yöntemlerin genel amacı endofitik biyolojik kontrolü müteakip değerlendirmeler için hazırlık, bir endophyte olarak bir mantar entomopatojenin tanıtmaktır. Beauveria bassiana&#39;nın (Balsamo) Vullemin (Ascomycota: Hypocreales) iyi okudu endofitik mantar entomopatojenin 5-9,11-19 olduğunu ve ticari mycopesticide olarak kullanılabilir. Aşılama yöntemleri kurmak için test <em&gt; B. Bir endophyte olarak bassiana toprak drenches 14,17, tohum kaplama 18 ve immersiyonlar 14, radikula sosları 13,15, kök ve köksap immersiyonlar 11,16,18, kök enjeksiyonlar 17, yaprak spreyleri 14,17,20 ve çiçek spreyler 19 içerir. Bu yöntemleri kullanarak, araştırmacılar B. girmiştik bassiana muz 11, fasulye 7, kakao 13, kahve 17, mısır 7, pamuk 7, hurma 12, jüt 21, afyon 20, kabak 7 radiata çam 18, sorgum 14, domates 7 ve buğday 7 içine. Son kanıtlar, endofitik B. göstermektedir bassiana sadece eklembacaklı zararlıları 5-7,22-27 bitkileri korumak için bir potansiyele sahip, ama aynı zamanda bazı bitki patojenleri 9. Ortak fasulye (Phaseolus vulgaris) zararlılara karşı en hassas bitkiler arasında yer alıyorve hastalıklar. Bu kimin krizi bölgelerde 28 genelinde en sınırlayıcı fasulye üretim faktörü olduğu düşünülmektedir 400&#39;den fazla zararlıları ve 200 patojenler, etkilenebilir. Buna göre, ortak fasulye B. tarafından endofitik biyolojik kontrolün tam spektrum incelemek için mükemmel bir model kırpma olabilir bassiana. Bu yönde ilk adım olarak, bu makalede ortak fasulye bir endophyte olarak B.bassiana tanıtmak için aşılama yöntemleri gibi yapraktan sprey ve toprak drenches açıklar.

<table border="1">
<tbody>
	<tr>
 	<td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>REAGENTS</td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Mycotrol SE	</td>
 <td>Laverlam</td>
 <td>4167</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Noble agar</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>A5431-250G</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Penicillin G sodium salt</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>P3032-25MU</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Petri dish (100 x 15 mm)</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>08-757-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Petri dish (60 x 15 mm)</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>08-757-13A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Potato dextrose agar</td>
 <td>Difco</td>
 <td>213400</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Regular bleach (NaOCl)</td>
 <td>CLOROX</td>
 <td>N/A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Streptomycin sulfate salt</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>S6501-25G</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Tetracycline</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>T3258-25G</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Triple quince (NPK)</td>
 <td>ABOCOL</td>
 <td>N/A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Triton X-100</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>X-100</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>EQUIPMENT</td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Biological safety cabinet</td>
 <td>NuAire</td>
 <td>NU-425-600</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Hemocytometer</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>02-671-10 </td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 	<td>Leica DM LB microscope</td>
 <td>Leica</td>
 <td>N/A</td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

establishing fungal entomopathogens as endophytes: towards endophytic biological control

Beauveria bassiana&#39;nın endophytically bitkileri kolonize etme yeteneğine sahip bir mantar entomopatojenin olduğunu. Bir endophyte, B. gibi bassiana herbivory ve hastalıktan bitkilerin korunmasında rol oynayabilir. Bu protokol B. kurmak için iki aşılama yöntemleri gösterilmektedir endofitik biyolojik kontrol daha sonraki değerlendirmeler için hazırlık sık fasulye (Phaseolus vulgaris), içinde endophytically bassiana. Bitkiler bir B. almadan önce iki hafta boyunca yüzeye sterilize tohumlardan yetiştirilen 10 8 Konidyumların / ml (veya su) bassiana tedavisi bir yapraktan sprey veya toprak ıslatma olarak da uygulanır. İki hafta sonra, bitkiler hasat edilir ve onların yaprakları, sapları ve kökleri endofitik fungal kolonizasyon değerlendirmek için numune alınır. Bunun için, numuneler ayrı ayrı birçok parçaya kesilir, sterilize yüzey ve 20 gün boyunca patates dekstroz agar ortamında bekletilen. Medya olarak mantar üremesi gözlemlemek 2-3 günde denetlenirbitki bölümleri ile sociated ve B. oluşumu kaydetmek bassiana onun endofitik kolonizasyon ölçüde tahmin etmek. Aşılama başarı analizleri B. oluşumu karşılaştırmak tedaviler ve kontroller arasında belirli bir bitki parçası içinde bassiana (yani yaprakları, sapları veya kökleri). Aşılama yöntem ek olarak, deney Belirli bir sonucu hedef mahsul türleri ya da farklı bağlı olabilir, mantar entomopatojenin tür zorlanma veya kullanılan ayırma ve bitki yetiştirme koşulları.

B. bassiana P. endophytically-kolonize başardı gösterdi aşılama tedavileri (Şekil 1) yanıt vulgaris. Yaprak spreyleri ve toprak drenches Hem B. tarafından endofitik kolonizasyonu sonuçlandı tedavi bitkilerin% 80&#39;inden fazlasında bassiana (Şekil 2). Ancak, kolonizasyon ölçüde değerlendirilmiştir bitki parçası ve kullanılan aşılama yöntemi bağlıydı. Yapraklar sprey aşılar en yanıtladı. Kökler, diğer yandan, sadece ıslatma aşılar cevap verdi. Nihayet, sapları hem aşılama yöntemleri benzer şekilde yanıtladı. B. bassiana kontrolü bitki bölümlerden herhangi saptanmadı. B. başka muamele, endophytes bağımsız olarak bassiana değerlendirilen bitki bölümlerin% 15 büyüdü, ancak komşu bölümleri istila ve sonuçlarını etkileyebilecek önce onlar medya plakalar üzerinden diseke edildi. Tedavi ve kontrol bitkilerine iki hafta aşısından sonra gözle ayırt edilemez hale geldi. Hiçbir fark, kuru ağırlığının ve yüksekliği saptandı. <img src="/files/ftp_upload/50360/50360fig1.jpg" alt="Şekil 1"/> Şekil 1. Beauveria bassiana&#39;nın tarafından fasulye bitkilerinin endofitik kolonizasyonu (. Phaseolus vulgaris cv Calima) üzerine aşılama tedavilerinin Temsilcisi sonuçları sol Üst:. Kontrolü yok büyüme ile plakalar. Sağ Üst: Tüm plağı kirleten bir bitki bölümünden Mantar endophyte. Alt sol: B. bassiana iki bitki bölümlerinden büyüyor. Sağ alt: Endofitik B. bassiana Konidyumların ve konidyoforlar gibi mikroskop altında görülebilir. <img src="/files/ftp_upload/50360/50360fig2.jpg" alt="Şekil 2," fo:content-width="4.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50360/50360fig2highres.jpg"/> Şekil 2. Bea endofitik kolonizasyonu üzerine aşılama tedavilerinin Etkisisuşu GHA ile aşısından sonra Beauveria bassiana&#39;nın iki hafta n bitkiler (Phaseolus vulgaris cv. Calima). Yüzde kolonizasyon kültürlü bölümlerin sayısına bölünmesiyle kolonize bitki bölümlerin sayısını temsil eder.

Watch this Scientific Journal Video about Establishing Fungal Entomopathogens as Endophytes: Towards Endophytic Biological Control at JoVE.com

Establishing Fungal Entomopathogens as Endophytes: Towards Endophytic Biological Control

Bu protokol mantar entomopatojenin tanıtmak için iki aşılama yöntemleri gösterilmektedir<em&gt; Beauveria bassiana&#39;nın</em&gt; Ortak fasulye bir endophyte olarak (<em&gt; Phaseolus vulgaris</em&gt;), Endofitik biyolojik kontrol daha sonraki değerlendirmeler için hazırlık.

Endophytes olarak Mantar Entomopatojenlerin Kurulması: Endofitik Biyolojik Kontrol Doğru

 Beauveria bassiana is a fungal entomopathogen with the ability to colonize plants endophytically. As an endophyte, B. bassiana may play a role in ...

establishing-fungal-entomopathogens-as-endophytes-towards-endophytic

Research

JoVE Journal

Bioengineering

34.4K Görüntüleme.  International Center for Tropical Agriculture (CIAT), Cali, Colombia. Bu protokol mantar entomopatojenin tanıtmak için iki aşılama yöntemleri gösterilmektedir Beauveria bassiana'nın Ortak fasulye bir endophyte olarak ( Phaseolus vulgaris), Endofitik biyolojik kontrol daha sonraki değerlendirmeler için hazırlık.

Video: Establishing Fungal Entomopathogens as Endophytes: Towards Endophytic Biological Control

Engineering Biological-Based Vascular Grafts Using a Pulsatile Bioreactor

Much effort has been devoted to develop and advance the methodology to regenerate functional small-diameter arterial bypasses. In the physiological environment, both mechanical and chemical stimulation are required to maintain the proper development and functionality of arterial vessels1,2.
Bioreactor culture systems developed by our group are designed to support vessel regeneration within a precisely controlled chemo-mechanical environment mimicking that of native vessels. Our bioreactor assembly and maintenance procedures are fairly simple and highly repeatable3,4. Smooth muscle cells (SMCs) are seeded onto a tubular polyglycolic acid (PGA) mesh that is threaded over compliant silicone tubing and cultured in the bioreactor with or without pulsatile stimulation for up to 12 weeks. There are four main attributes that distinguish our bioreactor from some predecessors. 1) Unlike other culture systems that simulate only the biochemical surrounding of native blood vessels, our bioreactor also creates a physiological pulsatile environment by applying cyclic radial strain to the vessels in culture. 2) Multiple engineered vessels can be cultured simultaneously under different mechanical conditions within a controlled chemical environment. 3) The bioreactor allows a mono layer of endothelial cells (EC) to be easily coated onto the luminal side of engineered vessels for animal implantation models. 4) Our bioreactor can also culture engineered vessels with different diameter size ranged from 1 mm to 3 mm, saving the effort to tailor each individual bioreactor to fit a specific diameter size. 
The engineered vessels cultured in our bioreactor resemble native blood vessels histologically to some degree. Cells in the vessel walls express mature SMC contractile markers such as smooth muscle myosin heavy chain (SMMHC)3. A substantial amount of collagen is deposited within the extracellular matrix, which is responsible for ultimate mechanical strength of the engineered vessels5. Biochemical analysis also indicates that collagen content of engineered vessels is comparable to that of native arteries6. Importantly, the pulsatile bioreactor has consistently regenerated vessels that exhibit mechanical properties that permit successful implantation experiments in animal models3,7. Additionally, this bioreactor can be further modified to allow real-time assessment and tracking of collagen remodeling over time, non-invasively, using a non-linear optical microscopy (NLOM)8. To conclude, this bioreactor should serve as an excellent platform to study the fundamental mechanisms that regulate the regeneration of functional small-diameter vascular grafts.

Our group has developed a bioreactor culture system that mimics the physiological pulsatile stresses of the cardiovascular system to regenerate implantable small-diameter vascular grafts.

Pulsatif Biyoreaktör kullanarak Mühendislik Biyolojik Tabanlı Vasküler Greftler

Much effort has been devoted to develop and advance the methodology to regenerate functional small-diameter arterial bypasses. In the physiological ...

Biyomühendislik

Imaging of Biological Tissues by Desorption Electrospray Ionization Mass Spectrometry

Mass spectrometry imaging (MSI) provides untargeted molecular information with the highest specificity and spatial resolution for investigating biological tissues at the hundreds to tens of microns scale. When performed under ambient conditions, sample pre-treatment becomes unnecessary, thus simplifying the protocol while maintaining the high quality of information obtained. Desorption electrospray ionization (DESI) is a spray-based ambient MSI technique that allows for the direct sampling of surfaces in the open air, even in vivo. When used with a software-controlled sample stage, the sample is rastered underneath the DESI ionization probe, and through the time domain, m/z information is correlated with the chemical species' spatial distribution. The fidelity of the DESI-MSI output depends on the source orientation and positioning with respect to the sample surface and mass spectrometer inlet. Herein, we review how to prepare tissue sections for DESI imaging and additional experimental conditions that directly affect image quality. Specifically, we describe the protocol for the imaging of rat brain tissue sections by DESI-MSI.

Desorption electrospray ionization mass spectrometry (DESI-MS) is an ambient method by which samples, including biological tissues, can be imaged with minimal sample preparation. By rastering the sample below the ionization probe, this spray-based technique provides sufficient spatial resolution to discern molecular features of interest within tissue sections.

Desorpsiyon Elektrosprey İyonizasyon Kütle Spektrometresi ile Biyolojik Dokuların Görüntüleme

Mass spectrometry imaging (MSI) provides untargeted molecular information with the highest specificity and spatial resolution for investigating biological ...

In situ TEM of Biological Assemblies in Liquid

Researchers regularly use Transmission Electron Microscopes (TEMs) to examine biological entities and to assess new materials. Here, we describe an additional application for these instruments- viewing viral assemblies in a liquid environment. This exciting and novel method of visualizing biological structures utilizes a recently developed microfluidic-based specimen holder. Our video article demonstrates how to assemble and use a microfluidic holder to image liquid specimens within a TEM. In particular, we use simian rotavirus double-layered particles (DLPs) as our model system. We also describe steps to coat the surface of the liquid chamber with affinity biofilms that tether DLPs to the viewing window. This permits us to image assemblies in a manner that is suitable for 3D structure determination. Thus, we present a first glimpse of subviral particles in a native liquid environment.

In situ TEM of Biological Assemblies in Liquid

Here we describe a procedure to image viral complexes in liquid at nanometer resolution using a transmission electron microscope.

Yerinde Sıvıda Biyolojik Montajlar TEM

Researchers regularly use Transmission Electron Microscopes (TEMs) to examine biological entities and to assess new materials. Here, we describe an ...

Synthesis of Hydrogels with Antifouling Properties As Membranes for Water Purification

Hydrogels have been widely utilized to enhance the surface hydrophilicity of membranes for water purification, increasing the antifouling properties and thus achieving stable water permeability through membranes over time. Here, we report a facile method to prepare hydrogels based on zwitterions for membrane applications. Freestanding films can be prepared from sulfobetaine methacrylate (SBMA) with a crosslinker of poly(ethylene glycol) diacrylate (PEGDA) via photopolymerization. The hydrogels can also be prepared by impregnation into hydrophobic porous supports to enhance the mechanical strength. These films can be characterized by attenuated total reflection Fourier transform infrared spectroscopy (ATR-FTIR) to determine the degree of conversion of the (meth)acrylate groups, using goniometers for hydrophilicity and differential scanning calorimetry (DSC) for polymer chain dynamics. We also report protocols to determine the water permeability in dead-end filtration systems and the effect of foulants (bovine serum albumin, BSA) on membrane performance.

This paper reports practical methods to prepare hydrogels in freestanding films and impregnated membranes and to characterize their physical properties, including water transport properties.

Su Arıtma Membranlar olarak Zehirli Özelliklere Sahip Hidrojeller Sentezi

Hydrogels have been widely utilized to enhance the surface hydrophilicity of membranes for water purification, increasing the antifouling properties and ...

Synthesis of Biocompatible Liquid Crystal Elastomer Foams as Cell Scaffolds for 3D Spatial Cell Cultures

Here, we present a step-by-step preparation of a 3D, biodegradable, foam-like cell scaffold. These scaffolds were prepared by cross-linking star block co-polymers featuring cholesterol units as side-chain pendant groups, resulting in smectic-A (SmA) liquid crystal elastomers (LCEs). Foam-like scaffolds, prepared using metal templates, feature interconnected microchannels, making them suitable as 3D cell culture scaffolds. The combined properties of the regular structure of the metal foam and of the elastomer result in a 3D cell scaffold that promotes not only higher cell proliferation compared to conventional porous templated films, but also better management of mass transport (i.e., nutrients, gases, waste, etc.). The nature of the metal template allows for the easy manipulation of foam shapes (i.e., rolls or films) and for the preparation of scaffolds of different pore sizes for different cell studies while preserving the interconnected porous nature of the template. The etching process does not affect the chemistry of the elastomers, preserving their biocompatible and biodegradable nature. We show that these smectic LCEs, when grown for extensive time periods, enable the study of clinically relevant and complex tissue constructs while promoting the growth and proliferation of cells.

This study presents a methodology to prepare 3D, biodegradable, foam-like cell scaffolds based on biocompatible side-chain liquid crystal elastomers (LCEs). Confocal microscopy experiments show that foam-like LCEs allow for cell attachment, proliferation, and the spontaneous alignment of C2C12s myoblasts.

3D Mekansal Hücre Kültürleri için hücre yapı iskeleleri olarak biyo-uyumlu sıvı kristal Elastomer Köpüklerin sentezi

Here, we present a step-by-step preparation of a 3D, biodegradable, foam-like cell scaffold. These scaffolds were prepared by cross-linking star block ...

Biological Compatibility Profile on Biomaterials for Bone Regeneration

Large non-union bone fractures are a significant challenge in orthopedic surgery. Although auto- and allogeneic bone grafts are excellent for healing such lesions, there are potential complications with their use. Thus, material scientists are developing synthetic, biocompatible biomaterials to overcome these problems. In this study, we present a multidisciplinary platform for evaluating biomaterials for bone repair. We combined expertise from bone biology and immunology to develop a platform including in vitro osteoclast (OC) and osteoblast (OB) assays and in vivo mouse models of bone repair, immunogenicity, and allergenicity. We demonstrate how to perform the experiments, summarize the results, and report on biomaterial biocompatibility. In particular, we tested OB viability, differentiation, and mineralization and OC viability and differentiation in the context of &#946;-tricalcium phosphate (&#946;-TCP) disks. We also tested a &#946;-TCP/Collagen (&#946;-TCP/C) foam which is a commercially available material used clinically for bone repair in a critical-sized calvarial bone defect mouse model to determine the effects on the early phase of bone healing. In parallel experiments, we evaluated immune and allergic responses in mice. Our approach generates a biological compatibility profile of a bone biomaterial with a range of parameters necessary for predicting the biocompatibility of biomaterials used for bone healing and repair in patients.

The number of novel biomaterials engineered for repairing large bone lesions is continuously expanding with the aim to enhance bone healing and overcome the complications associated with bone transplantation. Here, we present a multidisciplinary strategy for pre-clinical biocompatibility testing of biomaterials for bone repair.

Biyolojik uyumluluğu Biyomalzeme kemik rejenerasyon için profil sayfası

Large non-union bone fractures are a significant challenge in orthopedic surgery. Although auto- and allogeneic bone grafts are excellent for healing such ...

Initial 3D Cell Cluster Control in a Hybrid Gel Cube Device for Repeatable Pattern Formations

The importance of in vitro 3D cultures is considerably emphasized in cell/tissue culture. However, the lack of experimental repeatability is one of its restrictions. Producing few repeatable results of pattern formation deteriorates the analysis of the mechanisms underlying the self-organization. Reducing variation in initial culture conditions, such as the cell density and distribution in the extracellular matrix (ECM), is crucial to enhance the repeatability of a 3D culture. In this article, we demonstrate a simple but robust procedure for controlling the initial cell cluster shape in a 3D extracellular matrix to obtain highly repeatable pattern formations. A micromold with a desired shape was fabricated by using photolithography or a machining process, and it formed a 3D pocket in the ECM contained in a hybrid gel cube (HGC). Highly concentrated cells were then injected in the pocket so that the cell cluster shape matched with the fabricated mold shape. The employed HGC allowed multi-directional scanning by its rotation, which enabled high-resolution imaging and the capture of the entire tissue structure even though a low-magnification lens was used. Normal human bronchial epithelial cells were used to demonstrate the methodology.&#160;

We present a procedure for controlling the initial cell cluster shape in a 3D extracellular matrix to obtain a repeatable pattern formation. A cubic device containing two different hydrogels is employed to achieve multi-directional imaging for tissue pattern formation.

İlk 3D hücre küme denetimi içinde a Hybrid jel küp aygıt için tekrarlanabilir model oluşumları

The importance of in vitro 3D cultures is considerably emphasized in cell/tissue culture. However, the lack of experimental repeatability is one of its ...

Experimental Methods to Study Human Postural Control

Many components of the nervous and musculoskeletal systems act in concert to achieve the stable, upright human posture. Controlled experiments accompanied by appropriate mathematical methods are needed to understand the role of the different sub-systems involved in human postural control. This article describes a protocol for performing perturbed standing experiments, acquiring experimental data, and carrying out the subsequent mathematical analysis, with the aim of understanding the role of musculoskeletal system and central control in human upright posture. The results generated by these methods are important, because they provide insight into the healthy balance control, form the basis for understanding the etiology of impaired balance in patients and the elderly, and aid in the design of interventions to improve postural control and stability. These methods can be used to study the role of somatosensory system, intrinsic stiffness of ankle joint, and visual system in postural control, and may also be extended to investigate the role of vestibular system. The methods are to be used in the case of an ankle strategy, where the body moves primarily about the ankle joint and is considered a single-link inverted pendulum.

This article presents an experimental/analytic framework to study human postural control. The protocol provides step-by-step procedures for performing standing experiments, measuring body kinematics and kinetics signals, and analyzing the results to provide insight into the mechanisms underlying human postural control.

İnsan Postural Kontrolünü İncelemek İçin Deneysel Yöntemler

Many components of the nervous and musculoskeletal systems act in concert to achieve the stable, upright human posture. Controlled experiments accompanied ...

Synthesis of Near-Infrared Emitting Gold Nanoclusters for Biological Applications

Over the past decade, fluorescent gold nanoclusters (AuNCs) have witnessed growing popularity in biological applications and enormous efforts have been devoted to their development. In this protocol, a recently developed, facile method for preparation of water soluble, biocompatible, and colloidally stable near-infrared emitting AuNCs have been described in detail. This room-temperature, bottom-up chemical synthesis provides easily functionalizable AuNCs capped with thioctic acid and thiol-modified polyethylene glycol in aqueous solution. The synthetic approach requires neither organic solvents or additional ligand exchange nor extensive knowledge of synthetic chemistry to reproduce. The resulting AuNCs offer free surface carboxylic acids, which can be functionalized with various biological molecules bearing a free amine group without adversely affecting the photoluminescent properties of the AuNCs. A quick, reliable procedure for flow cytometric quantification and confocal microscopic imaging of AuNC uptake by HeLa cells also been described. Due to the large Stokes shift, proper setting of filters in flow cytometry and confocal microscopy is necessary for efficient detection of near-infrared photoluminescence of AuNCs.

A reliable and easily reproducible method for preparation of functionalizable, near-infrared emitting photoluminescent gold nanoclusters and their direct detection inside HeLa cells by flow cytometry and confocal laser scanning microscopy is described.

Biyolojik Uygulamalar için Yakın Kızılötesi Yayan Altın Nanokümelerin Sentezi

Over the past decade, fluorescent gold nanoclusters (AuNCs) have witnessed growing popularity in biological applications and enormous efforts have been ...

Electric and Magnetic Field Devices for Stimulation of Biological Tissues

Electric fields (EFs) and magnetic fields (MFs) have been widely used by tissue engineering to improve cell dynamics such as proliferation, migration, differentiation, morphology, and molecular synthesis. However, variables such stimuli strength and stimulation times need to be considered when stimulating either cells, tissues or scaffolds. Given that EFs and MFs vary according to cellular response, it remains unclear how to build devices that generate adequate biophysical stimuli to stimulate biological samples. In fact, there is a lack of evidence regarding the calculation and distribution when biophysical stimuli are applied. This protocol is focused on the design and manufacture of devices to generate EFs and MFs and implementation of a computational methodology to predict biophysical stimuli distribution inside and outside of biological samples. The EF device was composed of two parallel stainless-steel electrodes located at the top and bottom of biological cultures. Electrodes were connected to an oscillator to generate voltages (50, 100, 150 and 200 Vp-p) at 60 kHz. The MF device was composed of a coil, which was energized with a transformer to generate a current (1 A) and voltage (6 V) at 60 Hz. A polymethyl methacrylate support was built to locate the biological cultures in the middle of the coil. The computational simulation elucidated the homogeneous distribution of EFs and MFs inside and outside of biological tissues. This computational model is a promising tool that can modify parameters such as voltages, frequencies, tissue morphologies, well plate types, electrodes and coil size to estimate the EFs and MFs to achieve a cellular response.

This protocol describes the step-by-step process to build both electrical and magnetic stimulators used to stimulate biological tissues. The protocol includes a guideline to simulate computationally electric and magnetic fields and manufacture of stimulator devices.

Biyolojik Dokuların Uyarılması için Elektrikli ve Manyetik Alan Cihazları

Electric fields (EFs) and magnetic fields (MFs) have been widely used by tissue engineering to improve cell dynamics such as proliferation, migration, ...