Sarah Kossak&#39;ın, Mitchell Guanzon, Sung Yeun Yang ve deney hayvanlarının endoskopik değerlendirilmesi sırasında işbirliği Li Guo Jia, Özel teşekkürler.

1.. Endoskopi Sistemi Kurma <ol><li> Üreticinin talimatlarına, fareler anestezi önce endoskopi sistemi kurun. Bu protokol için, insanlar için dizayn edilmiş bir görüntü üreteroskop (Şekil 1) kullanın. Ekleme tüpün dış çapı 9,9 Fr (3.3 mm) olan, kendi uzak uç 8,5 Fr (2.8 mm) olan ve enstrümantasyon kanalın iç çapı 6 Fr (1,2 mm) &#39;dir. </li><li> Endoskop kullanımının hastalık bulaşma ile bağlantılı olmasına rağmen [9], spor oluşturan mikroorganizmalar ile çalışırken% 70 etanol 10 ile ya da uygun tekniklerle endoskop ve lens sterilize. Bakteriyostatik steril yağ ve non-kaşıma endoskop ucu doyurmak için dokuları silin hazırlayın. </li><li> Enstrümantasyon kanalın üst hava dolu bir 3 ml şırınga (ya da uygun bir CO2 gaz karışımı) takın. </li><li> Gücü açın ve normal beyaz ışık beyaz dengesini kurmak,uygulanabildiği gibi dar bantlı görüntüleme (NBI) modu. Bu karakteristik anormal kanlanmalı 11 var ülseratif ve tümöral lezyonların dahil mukoza üzerinde ince damar yapıları, vurgular gibi 2001 yılından bu yana, NBI tanısal görüntüleme faydalar sağlamıştır. NBI-filtre modunda hemoglobin olan yapıların vurgular 390-445 nm ve 530-550 nm, yakalanan ışığın dalga boyunu kısıtlar. </li><li> Bulgularını kaydetmek için değerlendirme puanlama formu (Şekil 2) yazdırın. (Bkz. Bölüm 6.1) sınav öncesi beklenen normal ve NBI görüntüleri (Şekil 3A) ve tanım ve her kriter sınıflarda aşina. </li><li> Arzu edildiği takdirde, kromoendoskopi için fosfat tamponlu tuzlu su (PBS) bir boyar madde bazlı çözelti hazırlayın. Kromoendoskopi olarak, sınav mukozal değişiklikleri vurgulamak için bir kontrast ortamı olarak bir boya kullanılarak gerçekleştirilir. Metilen mavisi (% 0.1-1) ve indigo karmin (% 0.1) çözümleri (Şekil 3B) kullanın. Notbu metilen mavisi numune analiz engelleyebilir oksitleyici radikalleri, amino asit kalıntılarının dolaylı çapraz bağlanmasını, bozulmasını ve DNA 12, üretebilen bir oksitleme-indirgeme maddesidir. </li></ol> 2. Fare Genel Anestezi <ol><li> Anestezik ajan ve yönetim rotayı seçin. Bağışıklık sistemi ve araştırma hedefleri ile ilaçların olası müdahalesi konusunda bir hayvan kaynak tesis veya Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) bir veteriner danışın. Bazı ilaçlar kemirgenler de dahil olmak üzere 13, hayvanlarda sitokin profili ifade etkileyebilir. Uygun kontroller ile birlikte, sağkalım endoskopi terminal prosedürleri izofluran veya enjektabl tribromoethanol kullanın. </li><li> Indüksiyonu için, 0.2-0.5 L / dk &#39;lık bir oranda% 100 oksijen izofluran 4-5% yönetmek, bakım için 0.5-2% kullanın. Bu protokol, tüm hayvanlar için uygun değildir. Lütfen tesis veteriner hekiminuygun talimatlar ve eğitim için. Hayvan refahı için en yüksek standartlara ulaşmak için ilgili IACUC tavsiyelerine uymak. Fare tamamen anestezi eğer emin olun. </li><li> &quot;Kayış &#39;laboratuar yapışkan bant kullanılarak bir dorsal veya ventral bir pozisyonda bir destek yüzeyi tabloya anestezi fare. Lütfen endoskop ekranda anatomik oryantasyon sakının. Alt ekstremite ve kuyruk sabitleyin. Bant bir bant da uzak respiratöre gelen hareketini engellemek, ancak göğüs solunum hareketlerini kısıtlayan önlemek için göğüs üzerine yerleştirilebilir. </li></ol> 3. Ayrıntılı Endoskopik Sınav <ol><li> Sonra anüs yoluyla kapsamını ilerlemek, rektum içine endoskop takmadan önce perianal lezyonlar arayın. </li><li> Coat steril cerrahi yağlayıcı ile endoskop. Değil CCD (şarj bağlı cihaz) sensör kat yüzeyini emin olun. </li><li> Endoskop takın ve kaydetmeye başlayın. Kaydedilen videolar m için yararlıdırmuayeneden sonra gerekirse endoskopi eticulous değerlendirilmesi. Mukozal / bağırsak tahrişi en aza indirmek için zaman mümkün olan en az uzunluğu endoskopi gerçekleştirmek için çalışın. </li><li> Yavaş yavaş bağırsak duvarları ayrı ayarlamak için bir şırınga kullanarak hava uygulayın. Fare boyutuna bağlı olarak, havanın 1-2 ml kullanın. Aşırı hava insuflasyonu kaçının, bu anestezi fare solunum sıkıntısı ve ölüme neden olabilir. </li><li> Eğer hava veya kapsam nazik rotasyonu ile önünü olarak öne endoskop ilerlemek. Eğer bağırsak ışığını göremiyorsanız endoskop ilerlemek etmeyin. Perforasyonlar ya da kolon / rektal yırtıklar, özellikle genç farelerde (&lt;8-10 haftalık), bu aşamada oluşabilir. Gerektiğinde fotoğraf çekmek. </li><li> Kapsamı ilerledikçe (tanımlandığı gibi doğal olarak meydana gelen mukozal kanama travmatik endoskopi ile ilişkili olmayan) kendiliğinden kanama olup olmadığını değerlendirmek. Endoskop rektum ve kolon girer gibi spontan kanamalar görülebilir. </li><li> Olarakkolon duvarının şeffaflık Sess. Şeffaflık kolon içi kan damarları görselleştirmek ve çevredeki diğer organların (Şekil 4) yeteneği olarak tanımlanır. Kapsam nazik hareketi (back-forward, saat yönünde, saat yönünün tersine) kan damarlarının diğer organların bağlamında görülebilir olmadığını belirlemede yardımcı olacaktır. Mezenterik yağ dokusu da görülebilir. Pelvik boşluğun içindeki rektum karın boşluğunda kolonik duvar daha az saydam görünür olmadığına dikkat ediniz. </li><li> Fokal lezyonların (ödemli alanlar, erozyonlar, ülserler, tümoral kitlelerin) türünü ve sayısını belirlemek için kontrol edin. Bu kolon enflamasyon skoru ve geliştirilmiştir ondalık tanımlayıcıları kullanarak puanlama şeklinde kaydedilecektir. </li><li> Kolon yakın kolon içine caudally şişiriyor alan ulaşıldığında, yavaş yavaş endoskop çekilme ve sonra ufalanabilirliğinin mukozal kanama nedeniyle oluşur temas (varlığı için bakmakendoskop) ileri veya kaldırılır. Bu kasıtlı olarak kolon yüzeyine temas için gerekli değildir. Sağlıklı kolorektal mukoza uygun endoskopik muayene sonrasında kanamaz. </li></ol> 4. Biyopsi <ol><li> Biyopsileri ihtiyaç olduğunda, enstrümantasyon için özel endoskop kanalından biyopsi forseps yerleştirin. Intestinal perforasyon önlemek için endoskop ekranda forseps ilerlemesini izleyin. </li><li> 60-80 ° cup-fincan açı yaklaşık forseps biyopsi bardak açın ve ilgi alanına yönlendirmek. Aşırı açılmış forseps veya basınç sağlıklı şeffaf bağırsak duvarlarının bir biyopsi kaynaklı delinmesi ile sonuçlanan bağırsak dokusu, ekstra katmanları kavramak olabilir. Perforasyon ortaya çıkarsa, IACUC şu önerilerde anestezi sırasında hayvan euthanize. Perforasyonlar endotokseminin ve peritonit sonucu. </li><li> Biyopsi bardak kapatın ve forseps kapalı tutarken onları çekin. </li><li> Remodoku ve forseps nazik bir çözelti ile yıkama ile doku Forseps numune ettik. RNA daha sonra PBS ve ortak bir çalışma çözüm yolu; gerekirse, örnek çıkarmak için iğne kullanın. Forcep bardak aşındıran ya da kesme kenarları kaçının. </li></ol> 5. Anestezi Kurtarma <ol><li> Kurtarır kadar muayene tamamlandıktan sonra, fare için sıcak bir ortam sağlamak. Bir elektrik ışığı veya 37 ° C&#39;ye ayarlanmış sıcak bir bez ya da kullanma Aşırı ısınmayı önlemek; periferik damar genişlemesi hayvan kurtarma uzlaşma. Tam iyileşme kadar yakından fare izleyin. </li></ol> 6. Ondalık tanımlayıcıları ile Kolorektal Sağlık Entegre Endoskopik Puanlama Sistemi <ol><li> Için: (Parametre Tanımlar ve Protokolü bir ondalık ağırlıklı Puanlama Sisteminin Kullanılması Mürin Kolorektal iltihaplanma ve Tümörler Endoskopik Değerlendirilmesi) puanlama formu (Şekil 2) ve aşağıdaki parametre tanımlarını kullanınörnekler ve nonbiased değerlendirilmesi ve ayrıntılı kayıt tutmak için kurallar olarak isteğe bağlı &#39;Distal-Proksimal Endoskopik Kolit skorlama sistemi&#39; (D-PECS). </li><li> Skorlama sistemi şeklinde (Şekil 2) açıklandığı kolorektal inflamasyon dört parametre skor. Titizlikle perianal bölgeyi, bağırsak şeffaflık, kanama bağırsak tipini (varsa) ve varlığı ve fokal lezyonların miktarını (erozif, ülseratif ve / veya tümöral) değerlendirir. </li><li> Araştırma amaçlı tümörleri değerlendirirken, miktarı, konumu ve boyutunu incelemek ve kolon harita ve puanlama formunda çubuk grafiği kullanarak bunları açıklamak. Elde edilen puanları ve lezyon sayısı (varsa) ait sayısal toplamı plan kolon iltihabı, lezyonun en baskın türü ve lezyonların sayısını belirleyecektir. </li></ol>

<ol>
	<li>Huang, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonoscopy+in+mice.">Colonoscopy in mice.</a> Surg. Endosc. 16, 22-24 (2002).</li><li>Wirtz, S., Becker, C., Blumberg, R., Galle, P. R., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+T+cell-dependent+experimental+colitis+in+SCID+mice+by+local+administration+of+an+adenovirus+expressing+IL-18+antisense+mRNA.">Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing IL-18 antisense mRNA.</a> J. Immunol. 168, 411-420 (2002).</li><li>Funovics, M. A., Alencar, H., Su, H. S., Khazaie, K., Weissleder, R., Mahmood, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Miniaturized+multichannel+near+infrared+endoscope+for+mouse+imaging.">Miniaturized multichannel near infrared endoscope for mouse imaging.</a> Mol Imaging. 2, 350-357 (2003).</li><li>Becker, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+colitis+and+colon+cancer+development+in+mice+using+high+resolution+chromoendoscopy.">In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy.</a> Gut. 54, 950-954 (2005).</li><li>Ravnic, D. J., Konerding, M. A., Huss, H. T., Wolloscheck, T., Pratt, J. P., Mentzer, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+microvideo+endoscopy+of+the+colonic+microcirculation.">Murine microvideo endoscopy of the colonic microcirculation.</a> J. Surg. Res. 142, 97-103 (2007).</li><li>Hamilton, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+for+mast+cell+tryptase+in+acute+experimental+colitis.">Essential role for mast cell tryptase in acute experimental colitis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 290-295 (2011).</li><li>Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+colonoscopy+in+live+mice.">High resolution colonoscopy in live mice.</a> Nat. Protoc. 1, 2900-2904 (2006).</li><li>Hensley, H. H., Merkel, C. E., Chang, W. C., Devarajan, K., Cooper, H. S., Clapper, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoscopic+imaging+and+size+estimation+of+colorectal+adenomas+in+the+multiple+intestinal+neoplasia+mouse.">Endoscopic imaging and size estimation of colorectal adenomas in the multiple intestinal neoplasia mouse.</a> Gastrointest. Endosc. 69, 742-749 (2009).</li><li>Banerjee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+control+during+GI+endoscopy.">Infection control during GI endoscopy.</a> Gastrointest. Endosc. 67, 781-790 (2008).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cleaning+and+disinfection+of+equipment+for+gastrointestinal+endoscopy.+Report+of+a+Working.">Cleaning and disinfection of equipment for gastrointestinal endoscopy. Report of a Working.</a> Party of the British Society of Gastroenterology Endoscopy Committee. Gut. 42, 585-593 (1998).</li><li>Sano, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+diagnostic+method+based+on+color+imaging+using+narrow+band+imaging+(NBI)+system+for+gastrointestinal+tract.">New diagnostic method based on color imaging using narrow band imaging (NBI) system for gastrointestinal tract.</a> Gastrointest. Endosc. 53, 125-12 (2001).</li><li>Davies, J., Burke, D., Olliver, J. R., Hardie, L. J., Wild, C. P., Routledge, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methylene+blue+but+not+indigo+carmine+causes+DNA+damage+to+colonocytes+in+vitro+and+in+vivo+at+concentrations+used+in+clinical+chromoendoscopy.">Methylene blue but not indigo carmine causes DNA damage to colonocytes in vitro and in vivo at concentrations used in clinical chromoendoscopy.</a> Gut. 56, 155-156 (2007).</li><li>Chiang, N., Schwab, J. M., Fredman, G., Kasuga, K., Gelman, S., Serhan, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetics+impact+the+resolution+of+inflammation.">Anesthetics impact the resolution of inflammation.</a> PLoS One. 3, e1879 (2008).</li><li>Zilberman, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+digital+flexible+ureteroscope:+in+vitro+assessment+of+optical+characteristics.">The digital flexible ureteroscope: in vitro assessment of optical characteristics.</a> J. Endourol. 25, 519-522 (2011).</li><li>Machida, H., Sano, Y., Hamamoto, Y., Muto, M., Kozu, T., Tajiri, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Narrow-band+imaging+in+the+diagnosis+of+colorectal+mucosal+lesions:+a+pilot+study.">Narrow-band imaging in the diagnosis of colorectal mucosal lesions: a pilot study.</a> Endoscopy. 36, 1094-1098 (2004).</li><li>Dohoo, I., Martin, W., Stryhn, H., McPike, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cohort+studies.">Cohort studies.</a> Veterinary Epidemiologic Research. , 151-162 (2003).</li><li>Yiou, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+pelvic+floor+disorders:+evidence+from+a+histomorphologic+study+of+the+perineum+and+a+mouse+model+of+rectal+prolapse.">The pathophysiology of pelvic floor disorders: evidence from a histomorphologic study of the perineum and a mouse model of rectal prolapse.</a> J. Anat. 199, 599-607 (2001).</li></ol>

Mali ya da ifşa çıkar çatışması yok.

Farelerde endoskopik tekniğinin modifikasyonu ve sorun giderme ile ilgili çeşitli hususlar vardır. Esnek endoskopi kullanımı sırasında hakim olması gereken prosedürün kritik yönleri açılanma ve tork kontrollerinin koordinasyonu ile karın şişliği ve fare solunum uzlaşma önlemek için gerekli hava hacmi ayarı ve görünümü kontrol minör teknik yönlerini kapsamaktadır . Tork kontrol intestinal perforasyon riskini en aza indirmek için önemlidir. Düzgün bir şekilde ele alınıp, kemirgen esnek ...

Mürin endoskopi bir yılda 1-3 için yararlı bir araştırma aracı olarak yapılmıştır. Bazıları da fleksibl sigmoidoskopi kullanılan olmasına rağmen bugüne kadar, kemirgen endoskopi kullanılarak çalışmaların çoğu, rijit endoskoplar kullandık. Mürin endoskopi hemen sonuç sağlar ve bağırsak normallik, inflamasyon şiddeti ve vücut kilo kaybı, ishal, ve histoloji gibi dolaylı önlemler, (lezyonlar yamalı zaman suboptimaldir) kıyasla progresyonla ölçüde daha objektif tahmin ederken kolon genel sağlık anlayışlar sunan. Ötenazi ve iki nokta üst üste analiz 1 için hasat edilecek olan hayvan gerektiren geleneksel histolojik inceleme aksine En önemlisi, endoskopi, zaman içinde laboratuvar hayvan modellerinin tekrar değerlendirilmesi için izin verir. Bu avantajlara rağmen, murin endoskopik teknolojisinin kullanımı yaygın olmamıştır ve implementati için standart protokoller eksikliği ile sınırlıdırve patolojik bulgular puanlama. Düzgün uygulanan, kemirgen endoskopi daha anlayışımızı ve inflamatuvar barsak hastalıkları, kolit, ve kolorektal tümörler dahil olmak üzere birçok kronik gastrointestinal hastalık durumlarında, hayvan modellerinin karakterizasyonu kolaylaştırmak için büyük umut vaat ediyor. Kemirgen endoskopik teknoloji programı standart bir muayene prosedürlerinin varlığını ve bağırsak patolojileri için tutarlı olmayan gereksiz ve güvenilir puanlama sistemi gerektirir üretilebilmesi ve nesnellik, üzerine menteşeleri. En az üç açıklayıcı puanlama kolit 4-6 endoskopik değerlendirme sistemleri, hem de kolon tümörleri farelerde 4,7,8 için yayınlanmıştır. Ancak, bu rapor yaklaşımlar ve puanlama sistemleri çalışmalar arasında kolayca karşılaştırılabilir değildir. Birçok durumda, lezyonların sınıflandırılması için kullanılan kriterlerin net bir tanımı yoktur, ve kriterler verildiğinde, onlar büyük ölçüde değişmektedir. Ayrıca,kolit ve tümörler, tek bir ölçme aracı haline anda ortaya çıkar ve sonuç üzerinde interaktif etkileri olabilir en yaygın kolon patolojilerin iki, hem de değerlendirmesini entegre bildirilen hiçbir skorlama sistemleri vardır. Son olarak, kolit için var olmayan endoskopik skorlama sistemleri genellikle sınırlı ayrımcılık ile inflamatuvar kategoriler var (yani. Genellikle 1-4 kısa tamsayı ölçekleri üzerinde dar puanlama seçenekleri) düzgün hastalığın ilerlemesi senaryolar temsil ve parametrik istatistiksel analiz kullanımını etkinleştirmek için. Bu yazıda, murin kolit ve kolonik tümörlerin şiddetini değerlendirmek ve perianal bölge, rektum ve distal kolon anatomik değerlendirilmesinde bu teknolojiyi kullanarak için standart bir protokolü tarif etmek için esnek bir endoskop kullanılmasını tarif eder. Biz Travma ve görüntü bozulmalarını en aza indirmek için endoskopi sırasında etkili giderme göstermek, ve biz bir tekrarlanabilir skorlama sistemi tanımlamakvalide yayınlanan klinik parametrelere dayalı. Skorlama sistemi (özel tanı değeri ile bulgularını vurgulamak için 12 iltihap, tümör haritalama olası notları ve komplo seçenekleri ve yeni bir ondalık birim sistemi (yani, ondalık tanımlayıcılar) ile ayrımcılık yüksek düzeyde kullanarak bağırsak iltihabı ve tümörlerin hem de değerlendirme bütünleştirir yani tümör geliştirme, endoskopi, vb sırasında komplikasyonlar). Ondalık tanımlayıcıların kullanılması daha fazla alt analizi hakkında veri setlerinin hızlı izleme sağlar. Son olarak, kolit ve kolit ile ilişkili kanser (dekstran sülfat sodyum (DSS) kaynaklı-kolit, Clostridium difficile enfeksiyonu ve azoksimetan / DSS-kaynaklı kolon kanseri) birden kemirgen modellerinde güvenilirlik ve puanlama sisteminin geçerliliği test gerçekleştirin.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="696">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Isoflurane, USP</td>
			<td style="width:160px;">Webster Veterinary&#160;</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">Surgical lubricant</td>
			<td style="width:160px;">Savage laboratories</td>
			<td style="width:217px;">surgilube, 0281-0205-45</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">Phosphate Buffered Saline</td>
			<td style="width:160px;">Thermo Scientific&#160;</td>
			<td style="width:217px;">SH30256</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">RNAlater</td>
			<td style="width:160px;">Ambion</td>
			<td style="width:217px;">AM7021</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">Methylene Blue 1% Aqueous Solution</td>
			<td style="width:160px;">Fisher Science Education</td>
			<td style="width:217px;">S96393</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:240px;"></td>
			<td style="width:160px;"></td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Flexible digital ureteroscope</td>
			<td style="width:160px;">Olympus America</td>
			<td style="width:217px;">URF-V</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Video system center</td>
			<td style="width:160px;">Olympus America</td>
			<td style="width:217px;">VISERA Pro OTV-S7 Pro</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Xenon light source</td>
			<td style="width:160px;">Olympus America</td>
			<td style="width:217px;">VISERA Pro CLV-S40 Pro</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Video recorder</td>
			<td style="width:160px;">MediCapture, Inc.</td>
			<td style="width:217px;">MediCap USB200</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Flexible biopsy cup forceps</td>
			<td style="width:160px;">Olympus America</td>
			<td style="width:217px;">FBC-3115</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Anesthesia machine</td>
			<td style="width:160px;">Euthanex Corporation</td>
			<td style="width:217px;">EZ-7000 Classic System</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

flexible colonoscopy in mice to evaluate the severity of colitis and colorectal tumors using a validated endoscopic scoring system

Araştırma amaçlı, modern endoskopi kullanımı büyük ölçüde gastrointestinal patolojilerin anlayışımızı kolaylaştırmıştır. Özel olarak, deneysel endoskopi, kronik enflamatuar bağırsak hastalığının mekanizmaları ve kolorektal kanserin ilerlemesini değerlendirmek gibi tek bir laboratuar hayvanına tekrar değerlendirme gerektiren çalışmaları için oldukça faydalı olmuştur. Ancak, çalışmalar arasında kullanılan yöntemler oldukça değişkendir. En az üç endoskopik skorlama sistemleri kemirgen kolit yayınlanan ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesi için protokoller eşzamanlı kolon iltihabı varlığını ele başarısız yayınlanmıştır. Bu çalışma, geliştirir ve aynı zamanda inflamasyon ve tümörlerin hem de değerlendirme bütünleştirir tekrarlanabilir bir endoskopik skorlama sistemi doğrular. Perianal bulgularına dayanarak kolorektal inflamasyon ölçüde ve şiddeti 1) değerlendirme (wal şeffaflık: Bu yeni puanlama sistemi üç ana bileşeni vardırl, mukozal kanama, ve fokal lezyonlar), 2) tümör lezyonları (grid harita ve bar grafiği), ve gözlenen lezyonların atanmış kategorilerin ondalık birimlere dayanarak patolojik ve araştırma alaka klinik vakaların 3) sayısal sıralama kantitatif kayıt ve Endoskopik komplikasyonlar (ondalık tanımlayıcılar). Burada sunulan görüntü ve el yazması araştırmacılar yakın endoskopik kolit (D-PECS gelen distalinde ayırt etmek için sistem seçeneği ile, iyi doğrulanmış ve yüksek tekrarlanabilir endoskopik yöntem kullanılarak kendi deneysel fareler puan için izin, IACUC onaylı protokolleri takip hazırlandı .)

Bu çalışmada sunulan protokol ve görüntüleri Olympus URF-V esnek endoskop 14 ve NBI 11,15 ile hazırlanmıştır. Video görüntüleri MPEG-2 formatında ve JPG, TIF, PNG, veya standart USB flash taşınabilir belleklere devredilemez maksimum 1.280 x 1.024 piksel, ile DICOM formatındaki resimlerin kaydedildi. NBI hemoglobin içeren dokuların görsel kontrast artırır. Normal ışık ve NBI görüntüleme kolorektal mukozanın normal anatomi ve ülser ve tümör gelişimi (Şekil 3A...

Watch this Scientific Journal Video about Flexible Colonoscopy in Mice to Evaluate the Severity of Colitis and Colorectal Tumors Using a Validated Endoscopic Scoring System at JoVE.com

Flexible Colonoscopy in Mice to Evaluate the Severity of Colitis and Colorectal Tumors Using a Validated Endoscopic Scoring System

Son birkaç yılda, yeni nesil endoskoplar kemirgen kolit ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesinde önemli bir tanı araştırma yardımcıları olarak ortaya çıkmıştır. Bu farelerde enflamasyonun ve kolorektal tümörleri endoskopik değerlendirme, hem de kolit ve kolorektal tümörleri endoskopik şiddetini belge ondalık tanımlayıcıları kullanan yeni bir skorlama sistemi için bu tarifnamede detaylı bir protokol mevcut.

Bir Geçerliliği Endoskopik Puanlama Sisteminin Kullanılması Kolit ve Kolorektal Tümörlerin Şiddetini Değerlendirmek için Farelerde esnek Kolonoskopi

The use of modern endoscopy for research purposes has greatly facilitated our understanding of gastrointestinal pathologies. In particular, experimental ...

flexible-colonoscopy-mice-to-evaluate-severity-colitis-colorectal

Research

JoVE Journal

Medicine

31.5K Görüntüleme.  Case Western Reserve University School of Medicine, Cleveland.  Son birkaç yılda, yeni nesil endoskoplar kemirgen kolit ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesinde önemli bir tanı araştırma yardımcıları olarak ortaya çıkmıştır. Bu farelerde enflamasyonun ve kolorektal tümörleri endoskopik değerlendirme, hem de kolit ve kolorektal tümörleri endoskopik şiddetini belge ondalık tanımlayıcıları kullanan yeni bir skorlama sistemi için bu tarifnamede detaylı bir protokol mevcut. 

Video: Flexible Colonoscopy in Mice to Evaluate the Severity of Colitis and Colorectal Tumors Using a Validated Endoscopic Scoring System

Establishment and Propagation of Human Retinoblastoma Tumors in Immune Deficient Mice

Culturing retinoblastoma tumor cells in defined stem cell media gives rise to primary tumorspheres that can be grown and maintained for only a limited time. These cultured tumorspheres may exhibit markedly different cellular phenotypes when compared to the original tumors. Demonstration that cultured cells have the capability of forming new tumors is important to ensure that cultured cells model the biology of the original tumor. 
Here we present a protocol for propagating human retinoblastoma tumors in vivo using Rag2-/- immune deficient mice. Cultured human retinoblastoma tumorspheres of low passage or cells obtained from freshly harvested human retinoblastoma tumors injected directly into the vitreous cavity of murine eyes form tumors within 2-4 weeks. These tumors can be harvested and either further passaged into murine eyes in vivo or grown as tumorspheres in vitro. Propagation has been successfully carried out for at least three passages thus establishing a continuing source of human retinoblastoma tissue for further experimentation. 
Wesley S. Bond and Lalita Wadhwa are co-first authors.

A method is described to propagate human retinoblastoma tumors in mice. Tumor cells are directly injected into the eyes of immune deficient mice. Secondary tumors have been successfully established using both cells directly harvested from human tumors and cultured tumorspheres.

Bağışıklık Eksik Fare Kuruluş ve İnsan Retinoblastom Tümörler yayılımı

Culturing retinoblastoma tumor cells in defined stem cell media gives rise to primary tumorspheres that can be grown and maintained for only a limited ...

Tıp

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several techniques, including infusion of exogenous bacterial toxin (endotoxemia) or bacteria (bacteremia), as well as surgical perforation of the cecum by cecal ligation and puncture (CLP)1-3. CLP allows bacteria spillage and fecal contamination of the peritoneal cavity, mimicking the human clinical disease of perforated appendicitis or diverticulitis. The severity of sepsis, as reflected by the eventual mortality rates, can be controlled surgically by varying the size of the needle used for cecal puncture2. In animals, CLP induces similar, biphasic hemodynamic cardiovascular, metabolic, and immunological responses as observed during the clinical course of human sepsis3. Thus, the CLP model is considered as one of the most clinically relevant models for experimental sepsis1-3.
Various animal models have been used to elucidate the intricate mechanisms underlying the pathogenesis of experimental sepsis. The lethal consequence of sepsis is attributable partly to an excessive accumulation of early cytokines (such as TNF, IL-1 and IFN-&gamma;)4-6 and late proinflammatory mediators (e.g., HMGB1)7. Compared with early proinflammatory cytokines, late-acting mediators have a wider therapeutic window for clinical applications. For instance, delayed administration of HMGB1-neutralizing antibodies beginning 24 hours after CLP, still rescued mice from lethality8,9, establishing HMGB1 as a late mediator of lethal sepsis. The discovery of HMGB1 as a late-acting mediator has initiated a new field of investigation for the development of sepsis therapies using Traditional Chinese Herbal Medicine. In this paper, we describe a procedure of CLP-induced sepsis, and its usage in screening herbal medicine for HMGB1-targeting therapies.

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection, and can be simulated by a surgical technique termed cecal ligation and puncture (CLP). Here we describe a method to use CLP-induced animal model to screen medicinal herbs for therapeutic agents.

Roman Bitkisel Tedaviler Değerlendirmek için Sepsis Hayvan Modeli kullanımı

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Non-invasive Assessment of the Efficacy of New Therapeutics for Intestinal Pathologies Using Serial Endoscopic Imaging of Live Mice

Animal models of inflammatory bowel disease (IBD) and colorectal cancer (CRC) have provided significant insight into the cell intrinsic and extrinsic mechanisms that contribute to the onset and progression of intestinal diseases. The identification of new molecules that promote these pathologies has led to a flurry of activity focused on the development of potential new therapies to inhibit their function. As a result, various pre-clinical mouse models with an intact immune system and stromal microenvironment are now heavily used. Here we describe three experimental protocols to test the efficacy of new therapeutics in pre-clinical models of (1) acute mucosal damage, (2) chronic colitis and/or colitis-associated colon cancer, and (3) sporadic colorectal cancer. We also outline procedures for serial endoscopic examination that can be used to document the therapeutic response of an individual tumor and to monitor the health of individual mice. These protocols provide complementary experimental platforms to test the effectiveness of therapeutic compounds shown to be well tolerated by mice.

We describe methods for longitudinal monitoring of the efficacy of therapeutics for the treatment of colonic pathologies in mice using a rigid endoscope. This protocol can be readily used for the characterization of the therapeutic response of an individual tumor in live mice and also for monitoring potential disease relapse.

Canlı Fareler Seri endoskopik Görüntüleme kullanma Bağırsak Patolojilerde Yeni Therapeutics Etkinliğinin Non-invaziv Değerlendirme

Animal models of inflammatory bowel disease (IBD) and colorectal cancer (CRC) have provided significant insight into the cell intrinsic and extrinsic ...

Dry Powder and Nebulized Aerosol Inhalation of Pharmaceuticals Delivered to Mice Using a Nose-only Exposure System

Obstructive respiratory diseases like asthma and chronic obstructive pulmonary disease (COPD) are currently treated by inhaled anti-inflammatory and bronchodilator drugs. Despite the availability of multiple treatments, both diseases are growing public health concerns. The majority of asthma patients are well controlled on current inhaled therapies but a substantial number of patients with severe asthma are not. Asthma affects an estimated 300 million people worldwide and approximately 20 percent have a severe form of the disease. In contrast to asthma, there are few effective therapies for COPD. An estimated 10% of the population has COPD and the trend in death rates is increasing for COPD while decreasing for other major diseases. Although developing drugs for inhaled delivery is challenging, the nose-only inhalation unit enables direct delivery of novel drugs to the lung of rodents for pre-clinical efficacy and safety/toxicology studies. Inhaled drug delivery has multiple advantages for respiratory diseases, where high concentration in the lung improves efficacy and minimizes systemic side effects. Inhaled corticosteroids and bronchodilators benefit from these advantages and inhaled delivery may also hold potential for future biologic therapies. The inhalation unit described herein can generate, sample for characterization, and uniformly deposit a drug aerosol in the lungs of rodents. This enables the pre-clinical determination of the efficacy and safety of drug doses deposited in the lungs of rodents, key data required before initiating clinical development.

The inhalation unit described herein can generate, sample for characterization, and uniformly deposit a drug aerosol in the lungs of rodents. This enables the pre-clinical determination of the efficacy and safety of drug doses deposited in the lungs; key data enabling clinical inhaled drug development.

Kuru Toz ve Eczacılık Nebulize Aerosol Soluma bir Burun sadece Pozlama Sistemi Kullanarak Fare teslim

Obstructive respiratory diseases like asthma and chronic obstructive pulmonary disease (COPD) are currently treated by inhaled anti-inflammatory and ...

Taste Exam: A Brief and Validated Test

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement classic taste-testing methods in two ways. First, we explain how to do a brief assessment of the mouth, including the tongue, to ensure that taste papillae are present and to note evidence of relevant disease. Second, we draw on genetics to validate taste test data by comparing reports of perceived bitterness intensity and inborn receptor genotypes. Discordance between objective measures of genotype and subjective reports of taste experience can identify data collection errors, distracted subjects or those who have not understood or followed instructions. Our expectation is that fast and valid taste tests may persuade researchers and clinicians to assess taste regularly, making taste testing as common as testing for hearing and vision. Finally, because many tissues of the body express taste receptors, taste responses may provide a proxy for tissue sensitivity elsewhere in the body and, thereby, serve as a rapid, point-of-care test to guide diagnosis and a research tool to evaluate taste receptor protein function.

This protocol measures human taste responses and includes a brief anatomical assessment, a short taste test, and a validation method using the subject&#39;s reported sensation and taste receptor genotype.

Tat sınavı: Bir kısa ve doğrulanan Test

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement ...

The Pilocarpine Model of Temporal Lobe Epilepsy and EEG Monitoring Using Radiotelemetry System in Mice

Temporal lobe epilepsy (TLE) is a common neurological disorder in adulthood. For translational studies of chronic epilepsy, pilocarpine-induced status epilepticus (SE) is frequently selected to recapitulate spontaneous recurrent seizures (SRS). Here we present a protocol of SE induction by intraperitoneal (i.p.) injection of pilocarpine and monitoring of chronic recurring seizures in live animals using a wireless telemetry video and electroencephalogram (EEG) system. We demonstrated notable behavioral changes that need attention after pilocarpine injection and their correlation with hippocampal neuronal loss at 7 days and 6 weeks post-pilocarpine. We also describe the experimental procedures of electrode implantation for video and EEG recording, and analysis of the frequency and duration of chronic recurrent seizures. Finally, we discuss the possible reasons why the expected results are not achieved in each case. This provides a basic overview of modeling chronic epilepsy in mice and guidelines for troubleshooting. We believe this protocol can serve as a baseline for suitable models of chronic epilepsy and epileptogenesis.

This manuscript describes a method of inducing status epilepticus by systemic pilocarpine injection and of monitoring spontaneous recurrent seizures in live animals using a wireless telemetry video and electroencephalogram system. This protocol can be utilized for studying the pathophysiologic mechanisms of chronic epilepsy, epileptogenesis, and acute seizures.

Temporal LOB epilepsi ve EEG farelerde Radiotelemetry sistemini kullanarak izleme Pilokarpin modeli

Temporal lobe epilepsy (TLE) is a common neurological disorder in adulthood. For translational studies of chronic epilepsy, pilocarpine-induced status ...

Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice

Diversion colitis (DC) is a frequent clinical condition occurring in patients with bowel segments excluded from the fecal stream as a result of a diverting enterostomy. The etiology of this disease remains ill-defined but appears to differ from that of classical inflammatory bowel diseases such as Crohn's disease and ulcerative colitis. Research aimed to decipher the pathophysiological mechanisms leading to the development of this disease has been severely hampered by the lack of an appropriate murine model. This protocol generates a murine model of DC that facilitates the study of the immune system's role and its interaction with the microbiome in the development of DC. In this model using C57BL/6 animals, distal parts of the colon are excluded from the fecal stream by creating a distal colostomy, triggering the development of mild to moderate inflammation in the excluded bowel segments and reproducing the hallmark lesions of human DC with a moderate systemic inflammatory response. In contrast to the rat model, a large number of genetically-modified murine models on the C57BL/6 background are available. The combination of these animals with our model allows the potential roles of individual cytokines, chemokines, or receptors of bioactive molecules (e.g., interleukin (IL)-17; IL-10, chemokine CXCL13, chemokine receptors CXCR5 and CCR7, and the sphingosine-1-phosphate receptor 4) to be assessed in the pathogenesis of DC. The availability of congenic mouse strains on the C57BL/6 background largely facilitates transfer experiments to establish the roles of distinct cell types involved in the etiology of DC. Finally, the model offers the opportunity to assess the influences of local interventions (e.g., modification of the local microbiome or local anti-inflammatory therapy) on mucosal immunity in affected and non-affected bowel segments and the on systemic immune homeostasis.

Murine distal colostomy provides a murine model for human diversion colitis, a predominantly lymphocytic colitis in colon segment excluded from the fecal stream.

Fare Distal kolostomi, C57BL/6 farelerde saptırma kolit roman modeli

Diversion colitis (DC) is a frequent clinical condition occurring in patients with bowel segments excluded from the fecal stream as a result of a ...

Using a Knee Arthrometer to Evaluate Tissue-specific Contributions to Knee Flexion Contracture in the Rat

Normal knee range of motion (ROM) is critical to well-being and allows one to perform basic activities such as walking, climbing stairs and sitting. Lost ROM is called a joint contracture and results in increased morbidity. Due to the difficulty of reversing established knee contractures, early detection is important, and hence, knowing risk factors for their development is essential. The rat represents a good model with which the effect of an intervention can be studied due to the similarity of rat knee anatomy to that of humans, the rat's ability to tolerate long durations of knee immobilization in flexion, and because mechanical data can be correlated with histologic and biochemical analysis of knee tissue.
Using an automated arthrometer, we demonstrate a validated, precise, reproducible, user-independent method of measuring the extension ROM of the rat knee joint at specific torques. This arthrometer can be used to determine the effects of interventions on knee joint ROM in the rat.

The goal of the protocol is to measure the extension range of motion of the rat knee. The effects of various diseases that increase the stiffness of the knee joint and the effectiveness of treatments can be quantified.

Diz Arthrometer diz fleksiyon kontraktürü fare içinde doku özgü katkıları değerlendirmek için kullanma

Normal knee range of motion (ROM) is critical to well-being and allows one to perform basic activities such as walking, climbing stairs and sitting. Lost ...

Murine Appendectomy Model of Chronic Colitis Associated Colorectal Cancer by Precise Localization of Caecal Patch

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal cancer, inflammatory bowel disease, and Parkinson&#8217;s disease. To study the function of the appendix, a gut disease-associated murine appendectomy model has been established and its step-by-step protocol is described here. This report introduces a facile protocol for caecal patch removal in mice followed by the chemical induction of chronic colitis-associated colorectal cancer using a combination of dextran sulfate sodium (DSS) and azoxymethane (AOM). IgA specific cells and IgA concentration were significantly reduced upon removal of the caecal patch in male C57BL/6 mice&#160;compared to those in the sham group. Simultaneously administering 2% DSS and AOM resulted in nearly 80% mice survival in both sham and appendectomy groups without significant body weight loss. Histological results confirmed colonic inflammation and different degrees of adenocarcinoma. This model can be used for the study of the functional role of the appendix in maintaining gut microbiota homeostasis and pathogenesis of gut colitis and malignancies, as well as for the potential development of drug targeting therapies.

The presented protocol describes a facile surgical removal of the appendix (caecal patch) in a mouse followed by the induction of inflammatory bowel disease-associated colorectal cancer. This murine appendectomy model enables investigation of the biological role of the appendix in the pathogenesis of human gastrointestinal disease.

Kaekal Patch Kesin Lokalizasyonu ile Kronik Kolit İlişkili Kolorektal Kanser Murine Apendektomi Modeli

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal ...

Establishing In Situ Closed Circuit Perfusion of Lower Abdominal Organs and Hind Limbs in Mice

Ex vivo perfusion is an important physiological tool to study the function of isolated organs (e.g. liver, kidneys). At the same time, due to the small size of mouse organs, ex vivo perfusion of bone, bladder, skin, prostate, and reproductive organs is challenging or not feasible. Here, we report for the first time an in situ lower body perfusion circuit in mice that includes the above tissues, but bypasses the main clearance organs (kidney, liver, and spleen). The circuit is established by cannulating the abdominal aorta and inferior vena cava above the iliac artery and vein and cauterizing peripheral blood vessels. Perfusion is performed via a peristaltic pump with perfusate flow maintained for up to 2 h. In situ staining with fluorescent lectin and Hoechst solution confirmed that the microvasculature was successfully perfused. This mouse model can be a very useful tool for studying pathological processes as well as mechanisms of drug delivery, migration/metastasis of circulating tumor cells into/from the tumor, and interactions of immune system with perfused organs and tissues.

A protocol is described for in situ perfusion of the mouse lower body, including the bladder, the prostate, sex organs, bone, muscle and foot skin.

Farelerde Alt Karın Organları nın ve Arka Ekstremitelerin Situ Kapalı Devre Perfüzyonunun Oluşturulması

Ex vivo perfusion is an important physiological tool to study the function of isolated organs (e.g. liver, kidneys). At the same time, due to the small ...