Bu çalışma JP Konhilas ve Kardiyovasküler Bilimleri Disiplinlerarası Eğitim Grant (HL007249 verilen NIH Ulusal ve mentored Araştırma Bilim Geliştirme Ödülü (K01 AR052840) ve Bağımsız Bilim İnsanı Ödülü (K02 HL105799) ile NIH hibe (HL 098256) tarafından desteklenmiştir .) Destek Arizona Üniversitesi Sarver Kalp Merkezi&#39;nden ve Steven M. Gootter Vakfı alındı.

Tüm deneyler, konut, ve hayvanlar için bakım kurallarına uyulması ve Arizona Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için 2011 NIH talimatlarına protokolleri kullanılarak yapıldı. 1.. 4-vinilsikloheksen diepoksit ile tedavi <ol><li> VCD dozaj protokolü: kimyasal bir davlumbaz olarak, temiz bir şişeye VCD 0,587 ml ilave susam yağı ile 10 ml nihai hacme getirmek ve daha sonra yavaşça, kapak ters çevirerek karıştırın ve Parafilm ile sağlanır. , Bir dozlama çözeltisi şişeye aktarın Parafilm ile sızdırmaz ve en çok 7 gün boyunca 4 ° C&#39;de saklayın. Tüm reaktifler steril olduğundan emin olun. <ol><li> VCD susam yağı içinde çözülmüş olarak, araç kontrolü olarak susam yağı kullanın. Mağaza VCD (MW = 140.2 g / mol, yoğunluğu = 1.09 g / ml) -20 ° C. </li><li> VCD enjeksiyon protokolü: yaşı 2 ayda, tartmak ve oda öfke günlük periton enjeksiyonları yönetmek20 gün boyunca 160 mg / kg &#39;lık bir dozda ature VCD. 2.5 ml / kg &#39;lık bir hacimde, araç solüsyonu, susam yağı ile benzer bir şekilde, kontrol fareleri enjekte edilir. Not: Enjeksiyon döneminde, yerel enfeksiyon olasılığını azaltmak için enjeksiyon siteleri alternatif deneyin. Enjeksiyon için gerekli hacmi hesaplamak için aşağıdaki denklem kullanın: Vücut ağırlığı (g) x kg / 1000 gx 2.5 ml / kg = 27 G iğne kullanılarak, yaklaşık 50 ml / enjeksiyonda enjekte edilen hacim (mi) çözeltisi ilave edildi. Nedeniyle iğne boyutuna lokal anestetikler gerekli değildir. </li><li> Östrus döngüsü izleme: Enjeksiyon süresi tamamlandıktan sonra, vajinal smear alınarak günlük östrus döngülerini kontrol. Sırt scruff yöntemini kullanarak fareler dizginlemek. 0.5 sm bir derinliğe kadar vajinal deliği içine steril tuzlu su, 0.2 ml bir damlalık yerleştirin. Tuzlu su (3x) çiğnemek ve boş bir slayt üzerine 1 damla yerleştirin. Hemen mikroskopik standart bir ışık Microsc kullanarak örnekleri değerlendirmek100X büyüklüğü de ope. Not:. Vajinal sitoloji bisiklet kaybını sağlamak ve bu nedenle yumurtalık yetmezliğine doğrulamak için kararlı olduğunu Şekil 2A, tipik vajinal farelerde östrus döngüsünün farklı aşamalarında genelinde sitoloji, yani proestrus, kızgınlık, Metestrus, 17-19 diöstrüste göstermektedir. Proestrus sırasında, hücreler, çekirdekli epitel hücreleri (Şekil 2A, oklar çekirdekli hücreleri işaret eder) içerir; kızışma sırasında, hücreler ağırlıklı olarak yassı epitel hücreleri açığa çıkan edilir; Metestrus lökositlerin baskın olduğu, hücre tiplerinin bir karışımı ile karakterize edilir; Diöstrüste lökositler hakimdir. Odak düzlemine ayarlanması, numune boyunca hücre ve çekirdeklerin görselleştirmek için gerekli olabilir. Şekil 2B&#39;de gösterildiği gibi, tipik bir kemirgen östrus döngüsü 4-5 gündür. Fareler kalıcı diöstrusun 15 ardışık gün sonra asiklik olarak kabul edilir. Sürekli başına Çalışmanın süresi boyunca estrojen döngüleri izlemekiyodür VCD tedavi edilen farelerde östrüs siklusu eksikliği onaylamak için. </li></ol></li></ol> 2. Gönüllü Cage teker Egzersiz Inbred C57BL / 6 ve B6C3F1 dişi fareler, yaşlı 7 ay, gönüllü Kafes tekerlek çalışan maruz kalmaktadır. 28 gün için bir kafes tekerleğe yüksüz giriş ile bir kafes (47 cm x 26 cm x 14.5 cm) ayrı ayrı Ev hayvanları. <ol><li> Ekipman kurulumu: kafes tekerlek tertibatı geniş tekerlek dönme ile aktive olan bir dijital manyetik sayacı ile donatılmış bir yüzeye uzanan bir 5.0 sm olan bir 11.5 cm çapındaki bir tekerlek oluşur. Her tekerlek çalışan testten önce, üreticinin talimatlarına göre kafes tekerleği kalibre. , Çalışan tekerleğin iç çapını ölçün çevresi hesaplamak ve tekerlek boyutu gibi dijital sayaç içine bu değeri girin. <ol><li> Bandı kullanarak tekerlek stand manyetik dijital sayaç bilgisayar bölümünü takın. </li><li> Bilgisayar bağlantı noktası takınbandı kullanarak tekerlek stand manyetik dijital sayaç iyon. </li><li> Mıknatıs tekrar zarar çiğneme mıknatısı korumak için yeterince bantlama, bilgisayara kablolu aynı tarafta merkezi çubuğuna dijital manyetik karşı serbest mıknatıs takın. Çarkın her dönüşü tekerlek dönme tamamlamak için herhangi bir müdahale olmadan ya da direnç bilgisayar tarafından kaydedilir ve böylece mıknatısların konumlandırılmalıdır. Not: Kanal bant çalışan tekerlek için manyetik dijital sayacın parçaları bağlamak için başarılı bir şekilde kullanılmıştır. Bantlama tamamen mıknatıs kapağı ve hayvan tarafından çiğneme zarar görmesini önlemek için yeterli olmalıdır. Mıknatıs hareketini engelleyen olmadan tekerleğe mümkün olduğunca yakın yerleştirilmelidir. Ancak, kurulum hasar çiğneme için günlük olarak izlenmekte ve gerekli tamir edilmelidir. </li><li> Tekerlek hayvan kafesinin üst kablolama ile stand kaydırarak kafesine tekerleği takın. T tekerlek standı Güvenlibağlayıcı klipleri ile o kafes kablolama. Not: klip hayvandan uzak, kablolama üstünde olmalıdır. Kafes kablo yoluyla bilgisayar bölümünü ve herhangi bir ekstra kablo besleyin. Hayvanın ulaşamayacağı bilgisayar ve aşırı kablo yerleştirin. Bu, orta büyüklükte bir plastik bilgisayarı ve fazla kabloyu tutmak için kafesin kablo üstüne çanak ağırlık yerleştirerek gerçekleştirilebilir. </li></ol></li><li> Egzersiz: Belirli bir çöp için, rastgele sedanter kontrol veya egzersiz rejimi ya fareler atayın. Tüm hayvanlar su ve standart sabit kemirgen yemi ad libitum verin. <ol><li> Elle manyetik sayaç tarafından verilen mesafe koştu (km / gün) ve çalışan harcanan toplam zaman (saat / gün), günlük değerleri kaydedin. Aynı 1 saat zaman diliminde rekor mesafe ve zaman değerleri egzersiz süresinin 28 günlük süresi boyunca doğru ve tutarlı değerler için her gün. Clear (sıfır) manyetik sayaç sonra doğru okumaları takibini sağlamak için her gün kayıtgün ing. </li><li> Her grup için mesafe ve hız ortalama değerlerini hesaplar. Her bir fare için, her gün mesafe ve zaman verilen değerlere göre hızını hesaplar. Veriler, her ölçülen parametre için günlük ya da haftalık ortalama görüntülenebilir. </li></ol></li><li> Doku hasat: özel egzersiz süresinin sonunda, solunan anestezi altında servikal dislokasyon ile kafesleri çıkarıldıktan 30 dakika içinde icra ve sedanter kontrol hayvanları euthanize. Vücut kitle ve hızlı tüketim kalpler, kas iskelet ve yumurtalıklar tartılır. <ol><li> Doku hasat zamanda, montaj ve hemotoksilinle ve eozin (H &amp;e; Şekil 2C) ile toplanır yumurtalıklar leke. Büyütme altında, saymak ve her VCD-tedavi ve kontrol hayvan için 20 primordial, primer, sekonder veya Antral gibi folikülleri sınıflandırır. Bir ilkel folikül küçük birincil olgunlaşmamış dişi gamet, yakın oosit aksine, yassı veya skuamöz granüloza hücre tek bir katman ve bir bazal içerirlamina. Birincil folikül oositi çevreleyen tek bir tabaka halinde düzenlenir, bir ya da daha fazla kübik granüloza hücre varlığı ile tanımlanır. İkincil folikül birden fazla oosit etrafında katmanları ve bir teka oluşturan granüloza hücreleri içerir. Bir antral folikülü sıvı ihtiva eden bir oyuk ya da &quot;antrum&quot; ile karakterize edilir. </li><li> Kalbi kesilmesinde, ventral tarafta medial kesi yapmak ve diyaframı açtıktan sonra kalbi görselleştirmek. Hızla soğuk fosfat tamponlu tuz yeteri kadar yıkama-out rezidüel ventriküler kan içinde taban ve yerde kalp kesip. , Aşırı doku kalbi Trim bütün kalp tartmak ve snap-dondurma, sıvı azot içinde. </li><li> Izopentan içinde değiştirilmiş bir buzla soğutulmuş fosfat tamponlu tuz çözeltisi (PBS) ile diğer tüm kesilmiş dokuları yıkayın ve ek dondurularak sıvı azot içinde soğutuldu. </li></ol></li></ol> 3. Zorla Koşu Bandı Egzersiz <ol><li> Zorla egzersiz paradigma t istihdam zamano egzersiz kapasitesini ölçmek, bir koşu bandı kullanmak ve aşağıdaki gibi ayarlayın: <ol><li> Koşu bandı rampanın dibinde bir elektrik şoku ızgara yerleştirin. Oluşturulan bu şok egzersiz için bir uyarıcı olarak hizmet vermektedir. Elektrik uyaranlara sıklığı ve şiddeti kullanıcı tarafından manuel olarak kumanda edilir. Izgaralar etkin veya her kulvar için ayrı ayrı devre dışı bırakılabilir. Tüm veri toplama elle yapılır. </li><li> Periyodik, üreticinin talimatlarına göre koşu bandını kalibre. <ol><li> Koşu Bandı Denetleyici ön paneli değiştirme &quot;DUR&quot; olarak ayarlanmış olduğundan emin olun. </li><li> Güvenli bir yer hız koşu bandı kemer lane1 üzerinde sensör ve aşağıda gösterilen konumda vida somunu ile sabitleyin. </li><li> Koşu Bandı Denetleyici ön paneldeki kadranının kullanılması, 88.7 m / dk hızını ayarlamak Sonra, Koşu Bandı Denetleyici ön panelinde 2 Hz elektrik uyarı frekansını ayarlayın. </li><li> Kalibrasyon prosedürü başlatmak için &quot;ODOMETER RESET&quot; düğmesine basınız. <strong&gt; Not: Hareketsiz veya nonexercise kontrol grupları deneysel tasarım dahil edilmelidir. Sedanter grup egzersiz grubuna eşleştirilmiş yaştır. Daha önce kardeşler ile yer hareketsiz farelere göre icra farelere eşit büyüklükte kafeslerde bireysel olarak hareketsiz farenin ilgili parametreleri etki yoktu konut göstermiştir. Bu nedenle, hareketsiz fareler icra fare gibi aynı odada kardeşleri ile tutuldu. </li></ol></li></ol></li><li> Acclimation: 3-7 gün önce günlük deney için koşu bandı için fareler alıştırıldı. Bunu yapmak için, kapalı, ama (gürültü) üzerine kayış motor kayışı kıpırdamadan ve şok ızgaraları ile koşu bandı içinde yer fareler. En az 15 dakika boyunca rahatsız edilmeden fareler bırakın. </li><li> Isınma aşağıdaki gibidir: Bu protokolde kullanıldığı gibi adımlar Isınma: <ol><li> Koşu bandı üzerinde her fare yerleştirin. Şok ızgara devre dışı bırakmak ve 15 dakika boyunca 4 m / dak bant hızını arttırır. </li><li> Şok ızgara etkinleştirin ve kayış hızını sürdürmekIlave bir 10 dakika boyunca 4 m / dak bant hızı. </li></ol></li><li> Egzersiz eğitim rejimleri <ol><li> Sıcak takip, üzerinde şok ızgaraları tutmak ve 15 dakika için 5 m / dk bant hızını artırmak. </li><li> Ilave bir 15 dakika boyunca 15 m / dk &#39;ya bant hızını arttırır. </li><li> Eğitim sonrasında geri kafeslerine fareler transfer. Not: Bu çalışmada, egzersiz eğitimi 1 hafta boyunca günde gerçekleştirildi. </li><li> Akut egzersiz rejimi: Akut egzersiz rejimi aşırı egzersiz stres, kısa ve uzun vadeli etkilerini belirlemek için tasarlanmıştır. <ol><li> Isınma sonra, 10, 15, 20, 25 5 m / dk &#39;dan bant hızını artırmak ve 30 m / dak, 10 dak ara. Not: fareler yorgunluk veya sıkıntı çalışan veya göstermek işaretleri devam edemiyoruz eğer egzersiz sonlandırın. Çalışmamızda, hayvanların çoğu 25 m / dak durdu ve hiçbir hayvan 30 m / dak aşamada geçirildi. </li><li> Her testte arasında 2-3 gün izin, her fareye üç kez test edin. Tüm Egzersiz ve eğitimi boyunca ortalama değerlerini hesaplamakHer fare için leştirilebilmesi oturumları. </li></ol></li><li> Dayanıklılık için egzersiz rejimi: Bir dayanıklılık egzersiz protokolü koşu bandı egzersiz uyarıcı bir uzun pozlama için fareler yetiştirmek için tasarlanmıştır. Bu tür bir protokol ılımlı egzersiz stresin uzun dönemli etkilerini tolere kapasitesini test. <ol><li> Isınma dönemi, 4 m / dak sırasında belirtilen bant hızı ile başlayın. </li><li> Yavaş yavaş 20 m&#39;lik bir nihai hızına kadar 1m/min göre bant hızını artırmak / dak ulaşılır. Tipik bir çalışma protokolü toplam süresi 50 dk. </li><li> Egzersiz rejimi sonra geri kafeslerine fareler transfer. Not: bitkinlik fareler Koşu kaçınılmalıdır. Bir fare yorgunluk belirtileri gösteren deney sırasında herhangi bir noktada ise, şok ızgara devreden ve fare dinlenme ve kurtarmak için izin verir. </li></ol></li></ol></li></ol> 4. Veriler ve İstatistiksel Analiz <ol><li> Olarak mevcut sonuçlar ortalama ± SEM ve 2-yönlü ANOVA (tedavi grubu ve exe kullanınana faktörler olarak rcise) Öğrenci-Newman Keuls post hoc testi veya ortalama değerler arasındaki farklılıkları karşılaştırmak için bir öğrencinin t testi izledi. </li><li> Hareketsiz grubunun ortalama kalp kütlesine her icra hayvanın kütlesi karşılaştırarak egzersiz ile kalp kütlesindeki yüzde değişim belirler. Kalp kütle farkı Daha sonra her hayvan için yerleşik hayvan bir yüzde değişiklik olarak ifade edilir. &lt;0.05 p değerleri istatistiksel olarak anlamlı kabul edilir. </li></ol>

<ol>
	<li>Lindheim, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+estimates+of+insulin+sensitivity+in+pre-+and+postmenopausal+women+using+the+insulin+tolerance+test+and+the+frequently+sampled+intravenous+glucose+tolerance+test.">Comparison of estimates of insulin sensitivity in pre- and postmenopausal women using the insulin tolerance test and the frequently sampled intravenous glucose tolerance test.</a> J. Soc. Gynecol. Invest. 1, 150-154 (1994).</li><li>Dubnov-Raz, G., Pines, A., Berry, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diet+and+lifestyle+in+managing+postmenopausal+obesity.">Diet and lifestyle in managing postmenopausal obesity.</a> Climacteric. 10 Suppl 2, 38-41 (2007).</li><li>Grundy, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+syndrome:+connecting+and+reconciling+cardiovascular+and+diabetes+worlds.">Metabolic syndrome: connecting and reconciling cardiovascular and diabetes worlds.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 47, 1093-1100 (2006).</li><li>Sharma, S., Firoozi, S., McKenna, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+exercise+testing+in+assessing+clinical+state+and+prognosis+in+hypertrophic+cardiomyopathy.">Value of exercise testing in assessing clinical state and prognosis in hypertrophic cardiomyopathy.</a> Cardiol. Rev. 9, 70-76 (2001).</li><li>Guyatt, G. H., Devereaux, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+heart+failure+treatment.">A review of heart failure treatment.</a> Mt. Sinai. J. Med. 71, 47-54 (2004).</li><li>Mayer, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+effects+of+ovarian+follicular+depletion+in+rats+by+4-vinylcyclohexene+diepoxide.">Long-term effects of ovarian follicular depletion in rats by 4-vinylcyclohexene diepoxide.</a> Reprod. Toxicol. 16, 775-781 (2002).</li><li>Mayer, L. P., Devine, P. J., Dyer, C. A., Hoyer, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+follicle-deplete+mouse+ovary+produces+androgen.">The follicle-deplete mouse ovary produces androgen.</a> Biol. Reprod. 71, 130-138 (2004).</li><li>Lohff, J. C., Christian, P. J., Marion, S. L., Hoyer, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+duration+of+dosing+on+onset+of+ovarian+failure+in+a+chemical-induced+mouse+model+of+perimenopause.">Effect of duration of dosing on onset of ovarian failure in a chemical-induced mouse model of perimenopause.</a> Menopause. 13, 482-488 (2006).</li><li>Wright, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+skeletal+effects+of+ovariectomy+versus+chemically+induced+ovarian+failure+in+mice.">Comparison of skeletal effects of ovariectomy versus chemically induced ovarian failure in mice.</a> J. Bone Miner Res. 23, 1296-1303 (2008).</li><li>Ogawa, S., Chan, J., Gustafsson, J. A., Korach, K. S., Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+increases+locomotor+activity+in+mice+through+estrogen+receptor+alpha:+specificity+for+the+type+of+activity.">Estrogen increases locomotor activity in mice through estrogen receptor alpha: specificity for the type of activity.</a> Endocrinology. 144, 230-239 (2003).</li><li>Roy, E. J., Wade, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+estrogens+in+androgen-induced+spontaneous+activity+in+male+rats.">Role of estrogens in androgen-induced spontaneous activity in male rats.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 89, 573-579 (1975).</li><li>Fahrbach, S. E., Meisel, R. L., Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preoptic+implants+of+estradiol+increase+wheel+running+but+not+the+open+field+activity+of+female+rats.">Preoptic implants of estradiol increase wheel running but not the open field activity of female rats.</a> Physiol. Behav. 35, 985-992 (1985).</li><li>Morgan, M. A., Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+estrogen+on+activity+and+fear-related+behaviors+in+mice.">Effects of estrogen on activity and fear-related behaviors in mice.</a> Horm. Behav. 40, 472-482 (2001).</li><li>Gorzek, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estradiol+and+tamoxifen+reverse+ovariectomy-induced+physical+inactivity+in+mice.">Estradiol and tamoxifen reverse ovariectomy-induced physical inactivity in mice.</a> Med. Sci. Sports Exerc. 39, 248-256 (2007).</li><li>Kadi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+physical+activity+and+estrogen+treatment+on+rat+fast+and+slow+skeletal+muscles+following+ovariectomy.">The effects of physical activity and estrogen treatment on rat fast and slow skeletal muscles following ovariectomy.</a> J. Muscle Res. Cell Motil. 23, 335-339 (2002).</li><li>Konhilas, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+modifies+exercise+and+cardiac+adaptation+in+mice.">Sex modifies exercise and cardiac adaptation in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, 2768-2776 (2004).</li><li>Caligioni, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+reproductive+status/stages+in+mice.">Assessing reproductive status/stages in mice.</a> Curr. Protoc. Neurosci. 4, (2009).</li><li>Goldman, J. M., Murr, A. S., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rodent+estrous+cycle:+characterization+of+vaginal+cytology+and+its+utility+in+toxicological+studies.">The rodent estrous cycle: characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies.</a> Birth Defects Res. B. Reprod. Toxicol. 80, 84-97 (2007).</li><li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performing+vaginal+lavage,+crystal+violet+staining,+and+vaginal+cytological+evaluation+for+mouse+estrous+cycle+staging+identification.">Performing vaginal lavage, crystal violet staining, and vaginal cytological evaluation for mouse estrous cycle staging identification.</a> J. Vis. Exp. , (2012).</li><li>McKee, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexually+dimorphic+myofilament+function+and+cardiac+troponin+I+phosphospecies+distribution+in+hypertrophic+cardiomyopathy+mice.">Sexually dimorphic myofilament function and cardiac troponin I phosphospecies distribution in hypertrophic cardiomyopathy mice.</a> Arch. Biochem. Biophys. 535, 39-48 (2013).</li><li>Konhilas, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise+can+prevent+and+reverse+the+severity+of+hypertrophic+cardiomyopathy.">Exercise can prevent and reverse the severity of hypertrophic cardiomyopathy.</a> Circ. Res. 98, 540-548 (2006).</li><li>Perez, N. J., Chen, H., Regan, J. A., Emert, A., Constantopoulos, E., Lynn, M., Konhilas, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+chemically-induced+ovarian+failure+on+voluntary+cage+wheel+exercise+and+cardiac+adaptation+in+mice.">The impact of chemically-induced ovarian failure on voluntary cage wheel exercise and cardiac adaptation in mice.</a> Compar. Med. In press, (2013).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Kafes tekerlek egzersiz ve koşu bandı egzersiz rejimleri çalışan iki önceki çalışmalarda 16,21,22 kullanılmıştır. Tüm hayvanlar, çevre veya insan rahatsızlıkları en aza indirmek için özel bir egzersiz odaları tutulur. Hayvanların herhangi bir rahatsızlık egzersiz performansını &#39;biyolojik ritminde önemli ölçüde hayvanların etkileyebilir&#39;. Bu nedenle, tüm hayvan bakım, performans izleme ve kayıt, ve egzersiz rejimleri aynı günlük zaman dilimi içinde yapılmalıdır. Müfettişler, stres maruz kalma süresini sınırlayan ve uygun olduğunda kafesleri kapsayan gibi önlemler sergileyerek hayvanlara ekstra stres önlemek için gayret göstermelisiniz. Cage tekerlek egzersiz Kafes tekerlek aparatı hazırlanırken fare mount ve çıkış için, tekerlek kolaylıkla erişilebilir olmalıdır. Orada gerektiği tekerlek çevresinde iç içe ve fre engelleyen fareler önlemek için kafesin altındaki asgari yatake tekerlek hareketi. Fare icra olarak tekerleğin her bir dönüşünde saymak üzere Manyetik sensör, tekerleğin sabit bölümü ve serbest tekerlek tespit mıknatıs yerleştirilmiştir. Manyetik sensör bağlı kayıt cihazı kafesin tel kapağının üzerine konulması, ve tüm maruz telleri zarar çiğneme karşı bir bariyer sağlayacak şekilde, farelerin bantlanmış veya ulaşamayacağı tutulması ya gerekir. Mıknatıs ve manyetik sensör aynı zamanda hasar ve istenmeyen hareketini hem de önlemek için uygun yapılara bantlanmış. Günlük veri toplama sırasında, tüm bantlanmış kabloları yakından teller sağlam kalır ve gerekli retaped olmalıdır sigorta için kontrol edilmelidir. Fareler yeni ortama alışmak ve düzenli egzersiz başlamak için birkaç gün gerekebilir yana, veri kayıt her hayvana uygun olmalıdır. Hayvanlar tekerlek birçok saat harcama eğilimi olsa da, çalışan çoğu geceleri ortaya çıkar. Bu nedenle, bazı hayvanlar HIG ortaya çıkarabilirh performans etkinliği onlar gündüz atıl görünmese bile. Ayrıca, bazı hayvanların sınırlı kafes Tekerlek çalışan sergileyecek nadir değildir. Tipik olarak, ortalama 1 km / gün veya daha az tutarlar kafesli tekerlekli aktivite rastgele kafes faaliyetin sonucudur ve anlamlı bir çalışma uyarıcı ile ilişkili değildir. Bu nedenle, kimin koşu parametreleri 1 km / gün veya 1 saat / gün veya daha az olan hayvanlar son veri analizi nonrunners hariç olmalıdır. Tek bir çalışma ve ilgili farelerin soylarının spesifik amaçları bağlı olarak, egzersiz uzunluğu değiştirilebilir. Daha önceki çalışmada yer alan iki fare suşları için, ortalama tekerlek çalışan hızları ve kafes tekerlek üzerinde egzersiz süresi giderek zamanla artmış ve 4 hafta plato olduğunu gösterdi. Kafes tekerlek çalışan genel olarak daha az stresli koşullar altında gerçekleştirilirken olarak alınır hayvan modellerinde gönüllü egzersiz türüdür. UNLbelirli parametreler önceden edilebileceği ike koşu bandı egzersiz, tüm test kafesinde çalışan gönüllü ve kolayca çevresel veya davranışsal ipuçları etkilenir. Büyük deney grupları sayılar kullanılır sürece Bu nedenle, farklı deneysel ayarlar arasındaki karşılaştırmalar genellikle kaçınılır. Egzersiz paradigmanın bu tip yararlanabilir araştırma Diğer potansiyel alanları gibi bilişsel nörobilim gibi fizyolojik sonuçları ile davranışsal tepkileri dahil çalışmalardır. Gönüllü kafes tekerlek paradigmayı kullanan çalışmalar için, en kritik adımlar kafes kurmak ve egzersiz faaliyetlerinin izlenmesi vardır. Koşu bandı egzersiz Acclimation adımlar koşu bandı egzersiz protokolü için hayvanları hazırlamak için gereklidir. Bireysel çalışma için özel olarak bağlı olarak, bir alışma periyodunun süresi değişebilir. Bu çalışmada, bir haftalık bir süre hayvan acclim sağlamak için seçildiısınmak süreleri egzersiz eğitim rejiminin önemli bir adım olan, koşu bandı aparat ve kafes motor gürültüsü yedik. Insan meslektaşları benzer, fareler yaralanma ve olası veri bozulmaları önlemek için herhangi bir yoğun egzersiz rejimleri girmeden önce ısınmış olması gerekir. Şok ızgaralar 15 dakika boyunca kapalı Bu çalışmada, mümkün olan en düşük hızda (4 m / dak) de kemer başladı. Katılan tüm fareler üzerinde ve kemer koşmaya başladı. Şok ızgaralar daha sonra açık ve bant hızı / dk 4 m sürdürdü. Aşırı basınç fareler önlemek için, hafif bir seviyede (1 Hz), elektrik çarpmasına ayarlayın. Birkaç gün içinde, tüm fareler koşu bandı kemer uyarlanmış. Koşu süresi hem de aynı zamanda her bir hızlanma deney tasarımı için uygun olabilir. Bir önerilen başlangıç ​​hızlanma oranı / dak 1 m&#39;dir. Yorgunluk belirtileri gösteren farelerin koşu bandı şeritleri derhal kapatılması gerekir. Mi tarafından sergilenen tükenme Tipik belirtileriaşağıdaki gibi koşu bandı üzerinde ce şunlardır: <ol><li> &gt; 5-10 saniye şok şebekeye sürekli maruz kalma, </li><li> Tek bir egzersiz rejimi sırasında şok ızgara maruz&gt; 5x sonuçlanan kapasite çalışan ve Kaybı </li><li> Şok ızgara maruz kalma sonucunda kapasite çalışan kaybı, tek bir egzersiz rejimi sırasında&gt; 2 sn en az 3x. </li></ol> Yukarıda listelenen değerler esas belirli bir deney için kılavuz olarak kullanılmak üzere bulunmaktadır. Bu parametreler o fare soyundan araştırmacı fare zorlanma, deneme deney ve araştırmacı değişir gibi her egzersiz protokolü için tespit edilmesi gerekmektedir. Kafes tekerlek egzersiz aksine, koşu bandı çalışmalar performansı çalışan çevre ve biyolojik faktörlerin etkisini ortadan kaldırmak için birkaç kez tekrar edilmelidir. Hatta aynı hayvan için testler arasında performans çalışan dalgalanmalar görmek için nadir değildir. Her egzersiz rejimi bir stre fareler çalıştıran ortaya koyar yanass, testler arasında uygun bir dinlenme aralığı gereklidir. Bizim tecrübelerimize göre, her bir testin arasındaki dinlenme periyodunu 2-3 gün fareler kurtarmak için yeterli oldu. İnsan koşu bandı egzersiz gibi, dayanıklılık egzersizi için hız en iyi kalp hızı ve kan oksijen doygunluğu, fare çalışmaları ile teknik olarak zor feat tarafından belirlenir. Koşu bandı çalışmalarının en kritik adım, genellikle bireysel fareler arasında değişmektedir bitkinlik, belirlenmesi, ve% 80 maksimal hız olarak belirlendi. Tükenme için kriterler çoğunlukla öznel beri kendi deneyim sonuçlarının kayıt ölçüde, bireysel araştırmacılar arasında farklılık gösterebilir. Bu durumda, kayıt sırasında aynı kriterler uygun uygulama kritiktir.

Menopoz başlangıcı sonunda doğal yumurtalık yaşlanma ile sonuçlanır atrezi yoluyla ilkel yumurtalık folikül tükenmesi ile karakterizedir. Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde, bir kadın ömür boyu% 30, menopoz sonrası harcanacak. Yumurtalık fonksiyonunun bir azalmaya yanıt olarak, çeşitli fizyolojik ve psikolojik etkileri artan yağlanma, damar instabilite ve ruh hali ya da uyku bozuklukları da dahil olmak üzere, meydana gelebilir. Çünkü premenopozal meslektaşları 1,2 ile karşılaştırıldığında artış obezite / yağlanmanın, postmenopozal kadınlarda kardiyovasküler hastalık (CVD) 3 dahil olmak üzere metabolik sendrom ve ilişkili yandaş, özellikle daha hassastır. Ayrıca, kardiyovasküler hastalarda başarılı bir kardiyak rehabilitasyon düzenli aerobik egzersiz içerdiğini giderek daha belirgin hale geliyor ve bu egzersiz bu konularda 4,5 kardiyovasküler morbidite ve mortaliteyi azaltır. Oysa, ne kadar egzersiz kapasitesi chaöncesi ve sonrası, menopoz geçiş sırasında nges iyi çalışılmamıştır. Daha da önemlisi, menopoz sonrası kadınlarda KVH risk için önleyici bir tedbir olarak egzersizin rolü oldukça ilgili yeterli kalır. Kadınlarda menopoz taklit için en yaygın olarak kullanılan model, uyarılabilir ovariektomi uygulanmış olan (OVX) kemirgen. Son zamanlarda, mesleki kimyasal 4-vinilsikloheksen diepoksit (VCD) özel olarak bir sonuç olarak, diğer dokularda bulunan 6 belirgin bir toksisite ile yumurtalık yetmezliği ile sonuçlanan atrezi doğal sürecinin hızlandırılması göre küçük birincil ve ilkel yumurtalık folikül hedef olduğu gösterilmiştir. Insan adet döngüsü için benzer VCD ile tedavi edilmiş farelerin çevrimi, VCD enjeksiyon tamamlanmasından sonra 2-3 ay içinde sona erdiği peri-menopoz sonrası östrojen taklit eden bir kademeli çekilmesi, sonuçları açmak geçiş. Böylece, bir folikül-dasitanî, yumurtalık-sağlam hayvan yakından doğal insan yaklaşıryoluyla ilerleme pre-peri-post-menopoz geçiş 7-9. Dahası, bu gibi enfeksiyon gibi ameliyat sonrası komplikasyonlar, indirgeme OVX modeli için bir cerrahi olmayan bir alternatif sağlar. Bu çalışmada, menopoz farelerde kalp adaptasyonu egzersizin etkilerini incelemek için VCD kaynaklı menopoz fareler kullanılmıştır. Her iki cinsiyette kemirgenlerde 10-13 östrojen ve kafes tekerlek egzersiz arasındaki ilişkiyi önermek çeşitli örnekleri vardır. Cerrahi OVX&#39;in tarafından östrojen tükenmesi fareler ve sıçanlarda 14,15 gönüllü egzersiz aktivitesini azaltır. Egzersiz iki yöntem VCD kaynaklı menopoz farelerin egzersiz kapasitesini test etmek için bu çalışmada kullanılmıştır. Cage tekerlek çalışan genellikle hayvan modellerinde gönüllü egzersiz türü olarak kabul edilir ve daha az stresli koşullar altında, muhtemelen, gerçekleştirilir. Ancak, kafes tekerlek çalışan Exerci hayvanları gerektiren hayvanların göreli egzersiz kapasitesi, göstergesi değildirse çok daha yüksek seviyeleri. Zorla koşu bandı egzersiz yoğunluğu ve dayanıklılık egzersiz için bir tolerans olarak ölçülen egzersiz kapasitesini belirlemek için kullanılmıştır. Buna ek olarak, daha önce kafes tekerlekli egzersiz kalp hipertrofisi için bir uyarıcı sağladığını göstermiştir ve bu hipertrofik büyüme cinsiyete bağlı 16 olduğunu. Bu nedenle, biz de VCD kaynaklı menopozal farelerde kafes tekerlek egzersiz kardiyak adaptasyon ölçülür.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="682">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr>
			<td>4-vinylcyclohexene diepoxide (VCD)</td>
			<td>Sigma, cat# V-3630</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>11.5-cm-diameter wheel with a 5.0-cm-wide running surface</td>
			<td>Petsmart,model 6208</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital magnetic counter</td>
			<td>Sigma Sport,model BC 600</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Treadmill exercise</td>
			<td>Columbus Instruments , model 1055SDRM</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a method to study the impact of chemically-induced ovarian failure on exercise capacity and cardiac adaptation in mice

Kardiyovasküler hastalık riski (CVD) menopoz sonrası kadınlarda artar, henüz, egzersiz rolünü, menopoz sonrası kadınlarda KVH risk için önleyici bir tedbir olarak yeterince incelenmemiştir. Buna göre, biz gönüllü kafes-tekerlek egzersiz ve menopoz farelerde kardiyak adaptasyon zorla koşu bandı egzersiz etkisi araştırılmıştır. Kadınlarda menopoz taklit için en yaygın olarak kullanılan model, uyarılabilir ovariektomi uygulanmış olan (OVX) kemirgen. Bununla birlikte, OVX modeli insanlarda menopoz birkaç farklılıkları vardır. Bu çalışmada menopoz farelerde egzersiz etkisini incelemek için alternatif bir model olarak menopoz yumurtalık yetmezliği hızlandırır ki, dişi farelere 4-vinilsikloheksen diepoksit, (VCD) uygulanmıştır. VCD seçici yakından gelen doğal ilerlemesini taklit eden bir endokrin durumunda ortaya çıkan birincil ve ilkel köklerinin kaybını hızlandırır insanlarda peri-post-menopoz öncesi için. Egzersiz egzersiz etkisini belirlemek içinKapasite ve VCD ile tedavi edilen dişi farelerde kalp adaptasyon, iki yöntem kullanılmıştır. İlk olarak, bir gönüllü kafes tekerleğe VCD-muamele edilmiş ve tedavi edilmemiş fareden oluşan bir gruba maruz kalmaktadır. İkincisi, yoğunluğu ve dayanıklılık egzersiz için bir tolerans olarak ölçülen ayrı bir grup VCD-tedavi edilen ve edilmeyen farelerde egzersiz kapasitesini belirlemek zorunda koşu bandı egzersizi kullanılır.

Bunlar da bu çalışmada kullanılan bu gibi tipik bir deneysel protokol, Şekil 1 &#39;de gösterilmiştir. VCD tedavi 20 ardışık gün sonra, vajinal sitoloji VCD-enjekte edilmiş farelerde varlığını veya yokluğunu belirlemek çevrimi için kullanılmıştır; aracı ile enjekte edilmiş fareler de izlenmiştir. Östrus döngüsü aşaması vajinal, yayma, epitel hücreler, Boynuzsu epitel hücreleri ve lökositlerin oranı (Şekil 2A) ile belirlenmiştir. Sadece açığa çıkan epitel hücrelerinin varlığı fare kızışma gösterdi ve bu nedenle yine bisiklet edildi. Farelerde çevrimi dolayısıyla tipik VCD hayvanlar asiklik vajinal sitoloji lökositlerin bir çoğunluğu (Şekil 2A) ifşa ettiği kalıcı diöstrüste, 15 gün sonra olarak kabul edildi enjeksiyonlu, 4 gün sürer. VCD ile tedavi edilmiş farelerin çevrimi düzensiz oldu, ardından VCD enjeksiyon başlangıcında (Şekil 2B) sonra 2-3 ay içinde sona </strong&gt;. VCD yumurtalık doku kontrolleri ile karşılaştırıldığında, önemli ölçüde atrofi gösterdi. Yüksek büyütmede, ilköğretim ve primordial folikülleri (Şekil 2C) tam tükenmesi bkz. Egzersiz performansı VCD kaynaklı yumurtalık yetmezliği etkisini test etmek için, rasgele 7 aylık VCD ve araç ile tedavi edilmiş fareler (iki suş, C57BL / 6 ve B6C3F1) hareketsiz veya kafes tekerlek egzersiz grupları 4-6 hafta sonra ya Bisiklet bırakma (Şekil 1). Günlük egzersiz değerler 4 haftalık egzersiz süresince her icra hayvan için zaman ve mesafe kaydedildi. Uzaklık, zaman ve hız için günlük işletme değerlerinin haftalık ortalama bir araç ya da VCD ile muamele C57BL / 6 fareleri için, Şekil 3 &#39;de gösterilmiştir. Biz C57BL / 6 veya B6C3F1 fare ya da VCD ve araç-tedavi edilen gruplar arasındaki kafes tekerlek üzerinde ortalama günlük zaman, mesafe ve hız ile ölçülen egzersiz performansında önemli farklılıklar görmedimsuşu (Şekil 4A). Hesaplanan tekerlek çalışan hızları yavaş yavaş daha önce 16 gösterildiği gibi 4 haftalık çalışma süresince artmıştır, ancak deney grupları arasında anlamlı farklılık yoktu. Bu çalışmalar gönüllü kafes tekerlek egzersiz VCD kaynaklı over yetmezliği etkisi en az 2 fare suşları aşar göstermektedir. Gönüllü kafes tekerlek egzersiz protokolünün süresi sonrasında, vücut morfometrik kaydedildi ve hayvanların kalbi, hızlıca kesilip çıkarılmıştır ve tartılmıştır. Daha önce gönüllü kafes tekerlek egzersiz kalp kütlesinin 16 bir artışa neden olduğunu göstermiştir. Burada, aynı zamanda mutlak kalp ağırlığının (HW) ile ölçülür ve HW tibial uzunlukta (TL) (Tablo 1) için normalize kafes tekerlek egzersize yanıt olarak kardiyak hipertrofi gösterir. Hareketsiz muadilleri ile karşılaştırıldığında mutlak kalp kitlesi ve HW / TL oranı, araç ve VCD-ile tedavi edilmiş farelerde önemli ölçüde daha yüksek idi. Ancak, measu vardıgönüllü kafes tekerlek egzersiz sonrası kontrol ve VCD kaynaklı over yetmezliği fareler arasında kardiyak hipertrofiye bilirliği farklılıklar. Sonra, koşu bandı egzersiz kapasitesini belirlemek için çalışan istemsiz (zorla) kullanılır. Biz ilk yorulana kadar ortalama hızı adım adım her 10 dakikada artan bir yüksek yoğunluklu protokolüne fareler tabi. Ortalama olarak, araç ile tedavi edilen farelerin maksimum hız 26.7 ± 0.95 m / dk ve VCD tedavi edilen farelerin maksimum hız tükenme öncesi dk 28 ± 1.4 m / oldu. Bu dayanıklılık kapasitesi için tahlil, 20 ° C&#39;de m / dk (maksimal yaklaşık% 80) çalışan düşük-yoğunluk kullanılır. Şekil 4B&#39;de gösterildiği gibi, yüksek ya da düşük yoğunluklu egzersiz kapasitesinde anlamlı bir fark VCD kaynaklı yumurtalık yetmezliği fare egzersiz kapasitesi üzerinde hiçbir etkiye sahip olduğunu gösteren, araç ve VCD tedavi grubu arasında bulunmuştur. Sonuç olarak, VCD muamele ile uyarılan menopoz gönüllü ya da zorunlu ya da r üzerinde hiçbir etkisi yoktur<html> unning kapasite yanı sıra, egzersiz için kalp adaptif tepki. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51083/51083fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51083/51083fig1.jpg" /> Şekil 1. VCD-yönetim ve deneysel protokol kullanılır. VCD Fareler 20 gün boyunca yaşı 2 aylıkken başlanarak (160 mg / kg) ya da susam yağı (taşıt kontrol) uygulandı. VCD ve araç enjeksiyonu takiben estrojen döngüleri takip edildi ve Yöntemler bölümünde tarif edildiği gibi cyclicities belirlenmiştir. Yumurtalık işlevinin kaybı 60-90 gün içinde meydana geldi ve vajinal sitoloji ile teyit edilmiştir. 7 aylıkken farelere 4 hafta boyunca gönüllü kafes tekerlek egzersiz maruz kaldıkları ya da koşu bandı egzersiz protokolüne tabi. oad/51083/51083fig2highres.jpg &quot;src =&quot; / files/ftp_upload/51083/51083fig2.jpg &quot;/&gt; . Farelerde Şekil 2 VCD kaynaklı over yetmezliği A:. Östrus döngüsünün dört aşamalarını gösteren bir araç enjekte fare bir boyanmamış vaginal smear Sitoloji: 1) proestrous, un ile karakterize ağırlıklı nükleatlı epitel hücrelerinde oluşan 2) kızgınlıklar, boynuzsu hücrelerin-çekirdeklendirilebilmektedir; Çekirdekli epitel hücreleri (oklar), un-çekirdekli Boynuzsu epitel hücreleri (oklar) ve lökositlerin oluşan 3) Metestrus; Lökositlerin öncelikle oluşan 4) diöstrusun; ve B:. araç-VCD-enjekte grupların östrus döngüsü ortalama uzunluğu (gün). Bir döngü kızışma sonraki dönemin ilk gün kızışma ilk günden itibaren ölçülür. Vajinal sitoloji enjeksiyonlarının hücumunu takip eden yaklaşık 6 hafta başladı. VCD enjekte edilen hayvanların estrojen döngüleri aracı ile enjekte edilmiş hayvan ile karşılaştırıldığında, düzensiz hale. 8 aydan yumurtalık dokusu H &amp; E boyama: s ve 12 estrus çevriminden sonra, her VCD sitoloji bisiklet C belirtilmedikçe artık enjeksiyon yapılan hayvanlar. Araç-tedavi (sol panel) ve 20X de VCD-tedavi (sağ panel) fareler (üst panel) ve 200X (alt panel) büyütme için 5 mikron kalınlığında yapılan kesitler. 200X büyütmede yumurtalık dokusu araç-kıyasla VCD-tedavi edilen farelerde için folikül sayısını gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51083/51083fig2highres.jpg" target="_blank">, bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51083/51083fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51083/51083fig3.jpg" /> Şekil 3. Araca veya VCD-tedavi C57Bl/6J dişi farelerde Gönüllü kafes tekerlek performans. Sol Panel: Ortalama koşu mesafesi (km /gün) 4 haftalık çalışma süresi boyunca her 1 hafta süreyle Orta Panel:.. Ortalama çalışma süresi (saat / gün) 4 haftalık çalışma süresi Sağ Panel üzerinde her 1 hafta süreyle: Ortalama çalışma hızı (km / saat) Her için 4 haftalık çalışma süresi boyunca 1 haftalık dönemdir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51083/51083fig3highres.jpg" target="_blank">, bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 4," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51083/51083fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51083/51083fig4.jpg" /> Şekil 4,. Gönüllü kafes tekerlek ve araç ve VCD ile tedavi edilen farelerde ayak değirmeni performansı. A: (Üst Panel) C57BL / 6 ortalama çalışma mesafesi (km / gün) ve 4 haftalık çalışma süresi boyunca her 24 saat için tekerlek (saat / gün) harcanan zaman. (Bottom Panel) &amp; #160; B6C3F1 ortalama çalışma mesafesi (km / gün) ve 4 haftalık çalışma süresi B üzerinde her 24 saat için tekerlek (saat / gün) harcanan zaman: C57BL / 6 koşu bandı çalışan parametreleri.. Maksimum süre yöntemler bölümünde ayrıntılı protokolleri kullanarak (Üst Panel) ve maksimum hız (Botoom Panel).

Watch this Scientific Journal Video about A Method to Study the Impact of Chemically-induced Ovarian Failure on Exercise Capacity and Cardiac Adaptation in Mice at JoVE.com

A Method to Study the Impact of Chemically-induced Ovarian Failure on Exercise Capacity and Cardiac Adaptation in Mice

İki paradigmalar egzersiz egzersiz kapasitesi ve egzersiz kardiyak adaptasyon menopozun etkisini incelemek için yeni geliştirilen kimyasal kaynaklı menopoz fare modeli üzerinde test edildi.

Farelerde Egzersiz Kapasitesi ve Kardiyak Uyum Kimyasal kaynaklı Yumurtalık Yetmezliği Etkisi Eğitim için Bir Yöntem

The risk of cardiovascular disease (CVD) increases in post-menopausal women, yet, the role of exercise, as a preventative measure for CVD risk in ...

a-method-to-study-impact-chemically-induced-ovarian-failure-on

Research

JoVE Journal

Medicine

15.3K Görüntüleme.  University of Arizona.  İki paradigmalar egzersiz egzersiz kapasitesi ve egzersiz kardiyak adaptasyon menopozun etkisini incelemek için yeni geliştirilen kimyasal kaynaklı menopoz fare modeli üzerinde test edildi. 

Video: A Method to Study the Impact of Chemically-induced Ovarian Failure on Exercise Capacity and Cardiac Adaptation in Mice

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these strategies is to examine their effects on heart function. There are several techniques to measure in vivo cardiac mechanics (e.g., echocardiography, pressure/volume relations, etc.). Compared to echocardiography, real-time left ventricular (LV) pressure/volume analysis via catheterization is more precise and insightful in assessing LV function. Additionally, LV pressure/volume analysis provides the ability to instantaneously record changes during manipulations of contractility (e.g., &#946;-adrenergic stimulation) and pathological insults (e.g., ischemia/reperfusion injury). In addition to the maximum (+dP/dt) and minimum (-dP/dt) rate of pressure change in the LV, an accurate assessment of LV function via several load-independent indexes (e.g., end systolic pressure volume relationship and preload recruitable stroke work) can be attained. Heart rate has a significant effect on LV contractility such that an increase in the heart rate is the primary mechanism to increase cardiac output (i.e., Bowditch effect). Thus, when comparing hemodynamics between experimental groups, it is necessary to have similar heart rates. Furthermore, a hallmark of many cardiomyopathy models is a decrease in contractile reserve (i.e., decreased Bowditch effect). Consequently, vital information can be obtained by determining the effects of increasing heart rate on contractility. Our and others data has demonstrated that the neuronal nitric oxide synthase (NOS1) knockout mouse has decreased contractility. Here we describe the procedure of measuring LV pressure/volume with increasing heart rates using the NOS1 knockout mouse model.

This article describes the measurement of murine left ventricular function via pressure/volume analysis at different heart rates.

Bowditch Efekt incelenmesi: Basınç Hacim İlişkisi Tedbir Fare Kardiyak Kateterizasyon

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Tıp

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo and noninvasively in humans via phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS). However, the approach has not been widely adopted in translational and clinical research, with variations in methodology and limited guidance from the literature. Increased optimization, standardization, and dissemination of methods for in vivo 31PMRS would facilitate the development of targeted therapies to improve OXPHOS capacity and could ultimately favorably impact cardiovascular health. 31PMRS produces a noninvasive, in vivo measure of OXPHOS capacity in human skeletal muscle, as opposed to alternative measures obtained from explanted and potentially altered mitochondria via muscle biopsy. It relies upon only modest additional instrumentation beyond what is already in place on magnetic resonance scanners available for clinical and translational research at most institutions. In this work, we outline a method to measure in vivo skeletal muscle OXPHOS. The technique is demonstrated using a 1.5 Tesla whole-body MR scanner equipped with the suitable hardware and software for 31PMRS, and we explain a simple and robust protocol for in-magnet resistive exercise to rapidly fatigue the quadriceps muscle. Reproducibility and feasibility are demonstrated in volunteers as well as subjects over a wide range of functional capacities.

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

This work demonstrates the feasibility of an in vivo phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS) technique to quantify mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity in human skeletal muscle.

Fosfor-31 Manyetik Rezonans Spektroskopisi: Ölçme için Aracı<em&gt; İn Vivo</emİnsan İskelet Kası içinde&gt; Mitokondriyal Oksidatif Fosforilasyon Kapasitesi

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

Since its invention in the late 19th century, the Langendorff ex vivo heart perfusion system continues to be a relevant tool for studying a broad spectrum of physiological, biochemical, morphological, and pharmacological parameters in centrally denervated hearts. Here, we describe a setup for the modulation of the intracardiac autonomic nervous system and the assessment of its influence on basic electrophysiology, arrhythmogenesis, and cyclic adenosine monophosphate (cAMP) dynamics. The intracardiac autonomic nervous system is modulated by the mechanical dissection of atrial fat pads-in which murine ganglia are located mainly&#8212;or by the usage of global as well as targeted pharmacological interventions. An octapolar electrophysiological catheter is introduced into the right atrium and the right ventricle, and epicardial-placed multi-electrode arrays (MEA) for high-resolution mapping are used to determine cardiac electrophysiology and arrhythmogenesis. F&#246;rster resonance energy transfer (FRET) imaging is performed for the real-time monitoring of cAMP levels in different cardiac regions. Neuromorphology is studied by means of antibody-based staining of whole hearts using neuronal markers to guide the identification and modulation of specific targets of the intracardiac autonomic nervous system in the performed studies. The ex vivo Langendorff setup allows for a high number of reproducible experiments in a short time. Nevertheless, the partly open nature of the setup (e.g., during MEA measurements) makes constant temperature control difficult and should be kept to a minimum. This described method makes it possible to analyze and modulate the intracardiac autonomic nervous system in decentralized hearts.

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

Here, we present a protocol for the modulation of the intracardiac autonomic nervous system and the assessment of its influence on basic electrophysiology, arrhythmogenesis, and cAMP dynamics using an ex vivo Langendorff setup.

Kardiyak Elektrofizyoloji ve Arrhythmogenesis bir Ex Vivo Langendorff sisteminde intrakardiyak nöronların etkisi

Since its invention in the late 19th century, the Langendorff ex vivo heart perfusion system continues to be a relevant tool for studying a broad spectrum ...

The Generation of Closed Femoral Fractures in Mice: A Model to Study Bone Healing

Bone fractures impose a tremendous socio-economic burden on patients, in addition to significantly affecting their quality of life. Therapeutic strategies that promote efficient bone healing are non-existent and in high demand. Effective and reproducible animal models of fractures healing are needed to understand the complex biological processes associated with bone regeneration. Many animal models of fracture healing have been generated over the years; however, murine fracture models have recently emerged as powerful tools to study bone healing. A variety of open and closed models have been developed, but the closed femoral fracture model stands out as a simple method for generating rapid and reproducible results in a physiologically relevant manner. The goal of this surgical protocol is to generate unilateral closed femoral fractures in mice and facilitate a post-fracture stabilization of the femur by inserting an intramedullary steel rod. Although devices such as a nail or a screw offer greater axial and rotational stability, the use of an intramedullary rod provides a sufficient stabilization for consistent healing outcomes without producing new defects in the bone tissue or damaging nearby soft tissue. Radiographic imaging is used to monitor the progression of callus formation, bony union, and subsequent remodeling of the bony callus. Bone healing outcomes are typically associated with the strength of the healed bone and measured with torsional testing. Still, understanding the early cellular and molecular events associated with fracture repair is critical in the study of bone tissue regeneration. The closed femoral fracture model in mice with intramedullary fixation serves as an attractive platform to study bone fracture healing and evaluate therapeutic strategies to accelerate healing.

The murine closed femoral fracture model is a powerful platform to study fracture healing and novel therapeutic strategies to accelerate bone regeneration. The goal of this surgical protocol is to generate unilateral closed femoral fractures in mice using an intramedullary steel rod to stabilize the femur.

Farelerde kapalı femur kırığı nesil: kemik şifa çalışması için bir Model

Bone fractures impose a tremendous socio-economic burden on patients, in addition to significantly affecting their quality of life. Therapeutic strategies ...

Conducting Maximal and Submaximal Endurance Exercise Testing to Measure Physiological and Biological Responses to Acute Exercise in Humans

Regular physical activity has a positive effect on human health, but the mechanisms controlling these effects remain unclear. The physiologic and biologic responses to acute exercise are predominantly influenced by the duration and intensity of the exercise regimen. As exercise is increasingly thought of as a therapeutic treatment and/or diagnostic tool, it is important that standardizable methodologies be utilized to understand the variability and to increase the reproducibility of exercise outputs and measurements of responses to such regimens. To that end, we describe two different cycling exercise regimens that yield different physiologic outputs. In a maximal exercise test, exercise intensity is continually increased with a greater workload resulting in an increasing cardiopulmonary and metabolic response (heart rate, stroke volume, ventilation, oxygen consumption and carbon dioxide production). In contrast, during endurance exercise tests, the demand is increased from that at rest, but is raised to a fixed submaximal exercise intensity resulting in a cardiopulmonary and metabolic response that typically plateaus. Along with the protocols, we provide suggestions on measuring physiologic outputs that include, but are not limited to, heart rate, slow and forced vital capacity, gas exchange metrics, and blood pressure to enable the comparison of exercise outputs between studies. Biospecimens can then be sampled to assess cellular, protein, and/or gene expression responses. Overall, this approach can be easily adapted into both short- and long-term effects of two distinct exercise regimens.

To assess the influence of exercise intensity on physiologic and biologic responses, two different exercise testing protocols were utilized. Methods outlining exercise testing on a cycle ergometer as an incremental maximal oxygen consumption test and endurance, steady state submaximal endurance test are described.

Maksimal ve Submaximal dayanıklılık egzersiz akut egzersiz insanlarda biyolojik ve fizyolojik yanıtlarını ölçmek için test iletken

Regular physical activity has a positive effect on human health, but the mechanisms controlling these effects remain unclear. The physiologic and biologic ...

Non-invasive Assessment of Dorsiflexor Muscle Function in Mice

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively affect skeletal muscle. This can result in a loss of muscle mass (atrophy) and/or loss of muscle quality (reduced force per unit of muscle mass), both of which are prevalent in chronic disease, muscle-specific disease, immobilization, and aging (sarcopenia). Skeletal muscle function in animals can be evaluated by a range of different tests. All tests have limitations related to the physiological testing environment, and the selection of a specific test often depends on the nature of the experiments. Here, we describe an in vivo, non-invasive technique involving a helpful and easy assessment of force frequency-curve (FFC) in mice that can be performed on the same animal over time. This permits monitoring of disease progression and/or efficacy&#160;of a potential therapeutic treatment.

Measurement of rodent skeletal muscle contractile function is a useful tool that can be used to track disease progression as well as efficacy of therapeutic intervention. We describe here the non-invasive, in vivo assessment of the dorsiflexor muscles that can be repeated over time in the same mouse.

Non-invaziv Dorsiflexor kas fonksiyonu farelerde değerlendirilmesi

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively ...

Isolation of Atrial Myocytes from Adult Mice

The electrophysiological properties of atrial myocytes importantly affect overall cardiac function. Alterations in the underlying ionic currents responsible for the action potential can cause pro-arrhythmic substrates that underlie arrhythmias, such as atrial fibrillation, which are highly prevalent in many conditions and disease states. Isolating adult mouse atrial cardiomyocytes for use in patch-clamp experiments has greatly advanced our knowledge and understanding of the cellular electrophysiology in the healthy atrial myocardium and in the setting of atrial pathophysiology. In addition, studies using genetic mouse models have elucidated the role of a vast array of proteins in regulating atrial electrophysiology. Here we provide a detailed protocol for the isolation of cardiomyocytes from the atrial appendages of adult mice using a combination of enzymatic digestion and mechanical dissociation of these tissues. This approach consistently and reliably yields isolated atrial cardiomyocytes that can then be used to characterize cellular electrophysiology by measuring action potentials and ionic currents in patch-clamp experiments under a number of experimental conditions.

This protocol is used to isolate single atrial cardiomyocytes from the adult mouse heart using a chunk digestion approach. This approach is used to isolate right or left atrial myocytes that can be used to characterize atrial myocyte electrophysiology in patch-clamp studies.

Yetişkin fareler atriyal Miyoksit izolasyonu

The electrophysiological properties of atrial myocytes importantly affect overall cardiac function. Alterations in the underlying ionic currents ...

Implantation of an Isoproterenol Mini-Pump to Induce Heart Failure in Mice

Isoproterenol (ISO), is a non-selective beta-adrenergic agonist, that is used widely to induce cardiac injury in mice. While the acute model mimics stress-induced cardiomyopathy, the chronic model, administered through an osmotic pump, mimics advanced heart failure in humans. The purpose of the described protocol is to create the chronic ISO-induced heart failure model in mice using an implanted mini-pump. This protocol has been used to induce heart failure in 100+ strains of inbred mice. Techniques on surgical pump implantation are described in detail and may be relevant to anyone interested in creating a heart failure model in mice. In addition, the weekly cardiac remodeling changes based on echocardiographic parameters for each strain and expected time to model development are presented. In summary, the method is simple and reproducible. Continuous ISO administered via the implanted mini-pump over 3 to 4 weeks is sufficient to induce cardiac remodeling. Finally, the success for ISO model creation may be assessed in vivo by serial echocardiography demonstrating hypertrophy, ventricular dilation, and dysfunction.

The chronic administration of isoproterenol via an implanted osmotic pump has been used widely to mimic advanced heart failure in mice. Here, we describe detailed methods in surgical mini-pump implantation for the continuous isoproterenol administration over 3 weeks, as well as, echocardiographic assessment for the successful model creation.

Farelerde Kalp Yetmezliğine Neden Olmak Için İzoproterenol Mini PompasıNın İmplantasyonu

Isoproterenol (ISO), is a non-selective beta-adrenergic agonist, that is used widely to induce cardiac injury in mice. While the acute model mimics ...

Integration of Brain Tissue Saturation Monitoring in Cardiopulmonary Exercise Testing in Patients with Heart Failure

Cerebral hypo-oxygenation during rest or exercise negatively impacts the exercise capacity of patients with heart failure with reduced ejection fraction (HF). However, in clinical cardiopulmonary exercise testing (CPET), cerebral hemodynamics is not assessed. NIRS is used to measure cerebral tissue oxygen saturation (SctO2) in the frontal lobe. This method is reliable and valid and has been utilized in several studies. SctO2 is lower during both rest and peak exercise in patients with HF than in healthy controls (66.3 &#177; 13.3% and 63.4 &#177; 13.8% vs. 73.1 &#177; 2.8% and 72 &#177; 3.2%). SctO2 at rest is significantly linearly correlated with peak VO2 (r = 0.602), oxygen uptake efficiency slope (r = 0.501), and brain natriuretic peptide (r = -0.492), all of which are recognized prognostic and disease severity markers, indicating its potential prognostic value. SctO2 is determined mainly by end-tidal CO2 pressure, mean arterial pressure, and hemoglobin in the HF population. This article demonstrates a protocol that integrates SctO2 using NIRS into incremental CPET on a calibrated bicycle ergometer.

This protocol integrated near-infrared spectroscopy into conventional cardiopulmonary exercise testing to identify the involvement of the cerebral hemodynamic response in exercise intolerance in patients with heart failure.

Kalp Yetmezliği Olan Hastalarda Kardiyopulmoner Egzersiz Testinde Beyin Dokusu Doygunluğu İzlenmesinin Entegrasyonu

Cerebral hypo-oxygenation during rest or exercise negatively impacts the exercise capacity of patients with heart failure with reduced ejection fraction ...

Generation and Characterization of Right Ventricular Myocardial Infarction Induced by Permanent Ligation of the Right Coronary Artery in Mice

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In contrast to the extensively used mouse myocardial infarction (MI) model generated by left coronary artery ligation, the RVI mouse model is rarely employed due to the difficulty associated with model generation. Research on the mechanisms and treatment of RVI-induced RV remodeling and dysfunction requires animal models to mimic the pathophysiology of RVI in patients. This study introduces a feasible procedure for RVI model generation in C57BL/6J mice. Further, this model was characterized based on the following: infarct size evaluation at 24 h after MI, assessment of cardiac remodeling and function with echocardiography, RV hemodynamics assessment, and histology of the infarct zone at 4 weeks after RVI. In addition, a coronary vasculature cast was performed to observe the coronary arterial arrangement in RV. This mouse model of RVI would facilitate the research on mechanisms of right heart failure and seek new therapeutic targets of RV remodeling.

There are several differences between the right and left ventricles. However, the pathophysiology of right ventricular infarction (RVI) has not been clarified. In the present protocol, a reproducible method for RVI mouse model generation is introduced, which may provide a means to explain the mechanism of RVI.

Farelerde Sağ Koroner Arterin Kalıcı Ligasyonu ile İndüklenen Sağ Ventrikül Miyokard İnfarktüsünün Oluşumu ve Karakterizasyonu

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In ...