Bu eser (HPL için) NIH hibe R01 GM087609, (MTL) (HPL için) Anthony Shu, NIH hibe U01 HL099776 onuruna Ingrid Lai ve Bill Shu bir Hediyesi, Hagey Laboratuvarı için bir hibe ile kısmen desteklenmiştir Pediatrik Rejeneratif Tıp ve (MTL ve HPL için) Meşe Vakfı. GGW Tıp Stanford School, Stanford Tıp Bilim Adamı Yetiştirme Programı tarafından desteklenen ve NIGMS eğitim hibe GM07365 oldu. MSH CIRM Klinik Fellow Eğitim Hibe TG2-01159 tarafından desteklenmiştir. Gxy Sarnoff Kardiyovasküler Vakfı fon tarafından desteklenmiştir.

NOT: Bu yazıda anlatılan tüm işlemler Laboratuar Hayvan Bakımı Stanford İdari Paneli (APLAC) tarafından oluşturulan kurallara göre yapılır. 1. Zamanlı Gebelikler - Süperovulasyon Tekniği (Şekil 1) NOT: Kesinlikle E16.5 E18.5 ve fetal cerrahi fare embriyoları gebelik yaşı zamanlama kritik önem taşımaktadır. Superovulasyon neden hamile kısrakların serum (PMS) ve insan koryonik gonadotropin (HCG) enjeksiyonları kullanarak fare gebeliklerin zamanlama bizim protokol bu bölümde detaylı olarak. <ol><li> 1:00 ve 1 gün için 3:00 arasında, 100 ul PBS hacminde PMS&#39;nin 3,0-5,0 uluslararası ünitedir (IU) ile dişi farelere (kafes başına &lt;5) intraperitonal olarak (İP) enjekte edilir. </li><li> 12:00 ve 3. gün (kırk beş PMS enjeksiyonundan sonra saat 47), 2:00 arasında, 100 ul PBS hacminde HCG 3,0-5,0 IU dişi fareler IP enjekte edilir. NOT: HCG enjeksiyonu endükleyicisi<html> yumurtlama yaklaşık 12 saat sonrası enjeksiyon. </li><li> Hemen HCG enjeksiyonları sonrasında 8-16 hafta yaş arası erkeklerde ile kadın dostum. NOT: Biz genellikle bireysel erkeklerin bir kafese iki kadın yerleştirin. </li><li> Fetal yaş E0.5 olarak - (10:00 6:00) ve kayıt günün 4 sabahı erkeklerden ayrı kadın. NOT: Vajinal fişler şu anda kontrol edilebilir; Ancak, bir vajinal fiş gözlem gebelik garanti etmez ve hiçbir fiş gözlenen zaman kadın hamile olabilir. Gebelik gün 4 sabahı vajinal fişleri kontrol, gebelik yaşları E16.5 E18.5 ve görsel muayene ve / veya palpasyonla genellikle gözlemlenebilir olduğu göz önüne alındığında kesinlikle gerekli değildir. Bizim deneyimimizde, ve zorlanma bağlı olarak, süper ovulasyon kadınların yaklaşık% 30-50 burada açıklanan tekniği kullanılarak gebe. </li></ol>pg &quot;/&gt; Şekil Süperovulasyon Tekniği 1. şematik. Farelerde superovulation zamanlı gebeliklerde şematik gösteren prosedürü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52297/52297fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 2. Murin Fetal Cerrahi E16.5 E18.5 ve Embryolarının üzerinde (Dorsal Yaralama) (Şekil 2) <ol><li> İşlem öncesi,% 70 izopropil alkol ile ameliyathane ve ekipman tüm yüzeylerini temizleyin. Buna ek olarak, onları otoklav ile prosedüründe kullanılacak tüm cerrahi malzemeleri ve aletleri sterilize. Bazı kurumlar sıcak boncuk sterilizasyon sonraki kullanımına izin verebilir. Operasyon Başına, gazlı bez ve cerrahi aletler, steril paketleri kullanın. </li><li> Dakikada başına 1 L bakım anestezi ardından dk başına 2 L% 2.5 izofluran / oksijen karışımı altında gebe annelerin anestezi (fetal yaş E16.5 E18.5 veya) neden olur. </li><li> ConFirma uygun Anesthetization, fare derin pedal refleksleri bastırılmış sağlamak ve yüzüstü pozisyonda fare koyun. </li><li> Puralube prosedürü sırasında göz tahrişine veya kuruluğunu önlemek için böyle bir veteriner oftalmik merhem sürün. </li><li> Artık 30 sn (Şekil 2A) için tüy dökücü krem ışık uygulaması tatbik edilmesiyle karın hazırlayın. </li><li> Povidon-iyot ve alkol (Şekil 2B ve 2C) ile aseptik cerrahi karın hazırlayın. </li><li> Mikrocerrahi makas (Şekil 2B ve 2E) kullanarak mikroskop altında orta hat laparotomi gerçekleştirin. </li><li> Yavaşça cerrahi (Şekil 2F) için seçilen rahim ve fetus maruz. </li><li> Bir kör uçlu iğne kullanılarak sıcak (38 ° C), fosfat tamponlu tuz (PBS) ile cerrahi alanı yıkayınız NOT: Bir dikkatli bir şekilde büyük çaplı iğne ucu bükülmesiyle yapılabilir. (Şekil 2G ve 2H). </li><li> Izin şekilde fetus yerleştirinsırtında tam erişim s. </li><li> Amaçlanan dorsal yaralama (Şekil 2I) site örten rahim içinden 7-0 naylon sütür kullanarak bir çanta dize dikiş geçirin. Pozisyon kese sol veya omurilik sağındaki sırtı bir bölge üzerinde dizisi ve büyük kan damarlarının yoksun uterus duvarına bir bölgede. </li><li> Çanta dize (Şekil 2J) merkezinde rahim duvarı ve amniyon kesesi yoluyla 3 mm kesi yapmak. </li><li> Sıcak (38 ° C) PBS ile kesi sitesini yıkayınız. </li><li> Mikrocerrahi makas kullanarak, fetusun sırtında, tek bir tam kalınlıkta eksizyonel yara, uzunluğu yaklaşık 1 mm kesti. </li><li> Yavaşça leke kesi sitesi pamuk uçlu aplikatör ile kurulayın. </li><li> Yaranın konumunu (Şekil 2K) işaretlemek için yara içine 3 ul hacmi Hindistan mürekkep subkutan enjekte edilir. </li><li> Mürekkep yara site içinde muhafaza edilmiştir sağlamak için ılık (38 ° C) PBS ile sulayın. </li><li> Cerrahi asistanı i varnject çanta dizesi olarak amniyon kesesi içine künt uçlu 10 G şırınga aracılığıyla sıcak (38 ° C) PBS (Şekil 2L) kapalıdır. Çanta dize kapatma tamamlama (Şekil 2M) yaklaştığında olarak şırınga geri çekin. </li><li> Yavaşça karın boşluğuna (Şekil 2N) içine rahim döndürür. </li><li> Evert cilt ve periton. </li><li> Sıcak (38 ° C) PBS ile karın boşluğuna cerrahi asistanı sulamak var. </li><li> Cilt ve periton zımbalama hızla kapatmak karın (Şekil 2O) kapalı. standart kapama iki kat yapılmaktadır; periton ve ikinci tabaka içinde bir tabakanın, subkutan doku ve deride karın kası. Acil fedakarlık ve fetusun hasat için, bizim gösteri, bir katmanda kapatılmasını gösterir. </li><li> 30 dakika süre ile ya da hayvan sternum yatma muhafaza edilmesi için yeterli bilinci yerine kadar 37 ° C&#39;ye ayarlanmış sıcak bir kuluçka makinesi içinde gözlem altında hayvan yerleştirin. </li><li> Ret etmeyintamamen prosedür kurtarıldı kadar diğer hayvanların şirkete hayvan urn. </li><li> Anestezi ve sonraki 48 saat boyunca uyanırken, buprenorfin subkutan enjeksiyonu (0.05 mg / kg) ağrı değerlendirmesine göre gerektiğinde analjezi için her 12 saat yönetmek. Gerektiğinde ek bir post-operatif ağrı tedavisi için deri altı enjeksiyon yoluyla Karprofen (5 mg / kg) uygulayınız. </li><li> Kafes hayvanları dönün ve gıda ve su ad libitum ile bunları sağlamak. </li><li> Ağrı belirtileri yakından izleyin. </li><li> 48 saat ameliyat sonrası, izofluran ve hasat yaralı fetusun aşırı dozda hamile anne kurban. Bunu yapmak için,% 5 ya da daha yüksek bir izofluran konsantrasyonunu ayarlamak ve nefes kesildikten sonra 1 dakika için maruz kalma korumak. Servikal dislokasyon ile ötenazi onaylayın. Yaş uyumlu kontrol için bir yarasız embriyo Hasat. Geç embriyolar gibi IACUC tavsiyeleri, tutarlı ötenazi ayrı bir yöntem olmalıdır decizye, servikal dislokasyon veya kimyasal enjeksiyon. </li></ol><img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52297/52297fig2highres.jpg" /> Şekil 2. şematik Kemirgen Fetal Cerrahi. E16.5 E18.5 ve fare embriyoları yaralama dorsal Genel adımlar. (A) fare karın Depilasyon. (B ve C) fare karın hazırlanması. (D) Mikroskop cerrahi için kullanılan rahim içinden çanta dize dikiş prosedürü. (E) orta hat laparotomi. (F) uterusun Pozlama. künt uçlu iğne (G) oluşturulması. ılık tuzlu su ile rahim (H) Sulama. (I) oluşturulması. (J) Kesi Duvar ve 1 mm kalınlıkta tam eksizyonel yara nesil. (K) Hindistan mürekkep cilt altı enjeksiyonu. (L ve M) kese dize dikiş kapatılması. (N ve O)Karın Kapatma. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52297/52297fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

<ol>
	<li>Larson, B. J., Longaker, M. T., Lorenz, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scarless+fetal+wound+healing:+a+basic+science+review.">Scarless fetal wound healing: a basic science review.</a> Plastic and reconstructive surgery. 126, 1172-1180 (2010).</li><li>Wilgus, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+healing+in+fetal+skin:+a+review+of+the+literature.">Regenerative healing in fetal skin: a review of the literature.</a> Ostomy/wound management. 53, 16-31 (2007).</li><li>Wulff, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mast+cells+contribute+to+scar+formation+during+fetal+wound+healing.">Mast cells contribute to scar formation during fetal wound healing.</a> The Journal of investigative dermatology. 132, 458-465 (2012).</li><li>Lorenz, H. P., Adzick, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scarless+skin+wound+repair+in+the+fetus.">Scarless skin wound repair in the fetus.</a> The Western journal of medicine. 159, 350-355 (1993).</li><li>Longaker, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+healing+in+the+fetus.+Possible+role+for+inflammatory+macrophages+and+transforming+growth+factor-beta+isoforms.">Wound healing in the fetus. Possible role for inflammatory macrophages and transforming growth factor-beta isoforms.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 2, 104-112 (1994).</li><li>Longaker, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+in+fetal+wound+healing.+IV.+Hyaluronic+acid-stimulating+activity+distinguishes+fetal+wound+fluid+from+adult+wound+fluid.">Studies in fetal wound healing. IV. Hyaluronic acid-stimulating activity distinguishes fetal wound fluid from adult wound fluid.</a> Annals of surgery. 210, 667-672 (1989).</li><li>Colombo, J. A., Napp, M., Depaoli, J. R., Puissant, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trophic+influences+of+human+and+rat+amniotic+fluid+on+neural+tube-derived+rat+fetal+cells.">Trophic influences of human and rat amniotic fluid on neural tube-derived rat fetal cells.</a> International journal of developmental neuroscience : the official journal of the International Society for Developmental Neuroscience. 11, 347-355 (1993).</li><li>Colwell, A. S., Longaker, M. T., Peter Lorenz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+differentially+regulated+genes+in+fetal+wounds+during+regenerative+repair.">Identification of differentially regulated genes in fetal wounds during regenerative repair.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 16, 450-459 (2008).</li><li>Hu, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+in+fetal+murine+keratinocytes+and+fibroblasts.">Gene expression in fetal murine keratinocytes and fibroblasts.</a> The Journal of surgical research. , (2014).</li><li>Colwell, A. S., Krummel, T. M., Longaker, M. T., Lorenz, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vivo+mouse+excisional+wound+model+of+scarless+healing.">An in vivo mouse excisional wound model of scarless healing.</a> Plastic and reconstructive surgery. 117, 2292-2296 (2006).</li><li>Wilgus, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+cyclooxygenase-2+mediated+inflammation+on+scarless+fetal+wound+healing.">The impact of cyclooxygenase-2 mediated inflammation on scarless fetal wound healing.</a> The American journal of pathology. 165, 753-761 (2004).</li><li>Iocono, J. A., Ehrlich, H. P., Keefer, K. A., Krummel, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronan+induces+scarless+repair+in+mouse+limb+organ+culture.">Hyaluronan induces scarless repair in mouse limb organ culture.</a> Journal of pediatric surgery. 33, 564-567 (1998).</li><li>Chopra, V., Blewett, C. J., Krummel, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transition+from+fetal+to+adult+repair+occurring+in+mouse+forelimbs+maintained+in+organ+culture.">Transition from fetal to adult repair occurring in mouse forelimbs maintained in organ culture.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 5, 47-51 (1997).</li><li>Adzick, N. S., Longaker, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+the+study+of+fetal+tissue+repair.">Animal models for the study of fetal tissue repair.</a> The Journal of surgical research. 5, 47-51 (1991).</li><li>Block, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+healing+in+the+new-born+opossum+(Didelphis+virginianam).">Wound healing in the new-born opossum (Didelphis virginianam).</a> Nature. 187, 340-341 (1960).</li><li>Longaker, M. T., Dodson, T. B., Kaban, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rabbit+model+for+fetal+cleft+lip+repair.">A rabbit model for fetal cleft lip repair.</a> Journal of oral and maxillofacial surgery : official journal of the American Association of Oral and Maxillofacial Surgeons. 48, 714-719 (1990).</li><li>Longaker, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+for+fetal+cleft+lip+repair+in+lambs.">A model for fetal cleft lip repair in lambs.</a> Plastic and reconstructive surgery. 90, 750-756 (1992).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Burada sunulan cerrahi protokol öncelikle laboratuvar 10 tarafından 2006 yılında yayınlanan fetal kemirgen skarsız şifa bir eksizyonel modelini açıklar. Eksizyonel yaralama 11 diğer kurulan modellere ek olarak, fetal kemirgen skarsız şifa insizyonel modelleri de 12,13 var. Maymun, koyun, tavşan, Chalk ve sıçan fetal skarsız yara iyileşmesinin araştırmalar 14-17 olarak bildirilmiştir. Ancak, fareler nedeniyle nispeten düşük başına diem kafes maliyeti ve iyi karakterize genom fetal skarsız yara iyileşmesini keşfetmek için ideal bir model temsil eder. Ayrıca, fonksiyonun zamansal ve mekansal genetik kayıp / kazanç tam skarsız onarım mekanizmalarını deşifre kemirgen transgenik sistemler sunan imkanlarını kullanarak embriyonik gelişimi sırasında elde edilebilir. Bu avantajlara rağmen, fareler nedeniyle küçük boyutu fetal cerrahi sırasında bazı teknik zorluklar. VerilmişHamile bir anne üzerinde anestezi stresi, büyük bakım izofluran / oksijen seviyesini yönetilen izlemek için alınmalıdır. Dakika başına 1 L korunması için genel anestetikler, ardından dakika başına 2 L% 2.5 izofluran / oksijen karışımı dikkatli bir şekilde dikkate alınmalıdır. Bu kritik faktör sapmalar veya dalgalanmalar önemli ölçüde morbidite etkileyebilir. Çanta dize dikiş Uygun yerleştirme ameliyatı teknik olarak en zor yanını temsil eder. Bu doğru dikiş yerleştirmek için başarısızlık amniyotik sıvı ve PBS sonrası kapanış sızıntı neden olacaktır. Rahim içinde sıvı bir yetersiz hacim embriyolar travma neden olur ve erken rahim kasılması neden olabilir. Bu nedenle, rahim açılması üzerine kayıp amniyotik sıvının değiştirilmesi de bu cerrahi modelde kritik bir adımdır. Bakım çanta dize kapalı olarak sürekli sıcak PBS çıkarmak için alınmalıdır. Bu faktörler önemli sorun giderme gerekli ve biz bu ayrıntıları da dikkat vurgulamakBaşarılı bir ameliyat olasılığını artıracaktır. Ancak, hatta deneyimli cerrahi elleri olanlar E16.5 fetuslarda yaklaşık% 40 morbidite oranı planlamalısınız. Fetal skarsız yara iyileşmesini anlama gelişme yetişkin evrelerinde fibrojenik davranış in vivo modülasyonu amaçlayan öteleme tıp değerini tutar. Yetişkin deriye kıyasla, fetus deri geliştirme deri, düşük gerilme mukavemeti, oluşmakta olan saç folikülleri ve farklı ECM ​​bileşenleri 2,4 sahiptir. Fetal cilt yetişkin deri 4,9 karşılaştırıldığında, yetişkin deri, daha az sayıda ve daha az gelişmiş mast hücreleri, keratin 8 ve 19, ve hiyalüronik asit yüksek seviyelerde ifadesi ile karşılaştırıldığında, tip I kolajen tip III yüksek bir orana sahiptir. Fetusta skarsız şifa yatan mekanizmaları deşifre ederek, bir rejeneratif fenotip doğru yetişkin fibrozis sorumlu moleküler ve hücresel yollar yönlendirmek için başlayabilirsiniz. çıkması ofare f izleme soy ve diğer genetik araçlar fetal skarsız yara iyileşmesi soruşturma umut verici yeni yollar açtık. Morbidite ve fetal cerrahi ile ilişkili erken rahim kasılması doğal olarak yüksek oranları göz önüne alındığında, fetal skarsız cilt araştırmalar in vivo şifa hassas ve tekrarlanabilir cerrahi modeli gerektirir yara. Burada detay E16.5 (skarsız) ve E18.5 (skar) fare embriyoları sırtında fetal skarsız yara iyileşmesi bir tekrarlanabilir bir model.

Fetal cilt yaraları gebelik 1 sonlarına kadar hızlı ve scarlessly iyileşir. Fetal skarsız yara onarımı, normal doku yapısının ve fonksiyonunun rejenerasyonu ile karakterize edilir. yara izi fenotip bir Scarless geçiş insanlarda ve farelerde 2,3 embriyonik günde 18 (E18) etrafında gebeliğin üçüncü trimesterde ortaya çıkar. Yetişkin karşılaştırıldığında fetal yara onarım hızlı epitelizasyonu, bağ dokusu birikimi, ve fibroblast göç ile karakterize edilir. Birçok çalışma erken fetal gelişim sırasında skarsız yara iyileşmesinin olay için olası açıklamalar teklif var. Enflamasyon yetişkin yara tamir temel bileşenidir; Ancak fetal yaralar akut inflamasyon 4 olmaması ile karakterize edilir. Bu İster fetal aşamalarında bağışıklık sisteminin fonksiyonel olgunlaşmamış bir sonucudur belirsiz kalır olduğunu. Yeni yapılan bir çalışmada önerdi bolluk, mat farklılıklarurity ve E18, fetal deri genel E15 mast hücre fonksiyonu, en azından bir fare 3&#39;te skarsız fenotip geçiş sorumlu olabilir. Diğer çalışmalar özellikleri ve fetal ve erişkin yara makrofajlar bolluğu farklılıklar fetal yara onarımı 5 esnasında normal dışı matriks (ECM) reform sorumlu olduklarını varsaymak. Fetal ve erişkin gelişimi sırasında çevresel faktörlerin farklılıklar da yara onarım etkileyebilir. Longaker ve arkadaşları fetus, yara sıvısı 6 yara sıvısında yetişkin hiçbirine kıyasla hiyalüronik asit uyarıcı aktivitesi yüksek seviyelerde sahip olduğunu göstermiştir. Sonuç olarak fetal yara ortamında hiyalüronik asit, hücre motilitesi ve çoğalması için elverişli bir mikro-teşvik eden bir glikozaminoglikan, seviyelerinin erken cenin gelişimi sırasında görülen skarsız fenotipinden sorumlu olabilir. Feta gerçeği kanıtlar noktasının diğer hatlarıl yara ortamı nispeten hipoksemikti ve büyüme faktörleri 7 zengin steril amniyotik sıvı batmış olduğunu. Ancak, kesin bir cevap fibrotik onarım skarsız rejenerasyon geçişi tetikler embriyogenez sırasında kritik bir olay ya da faktörü sağlanmıştır. Fetusta skarsız şifa için mekanizmalar sorumlu anlama kesin ve tekrarlanabilir bir model gerektirir. Burada detay E16.5 (skarsız) ve E18.5 (skar) fare embriyoları sırtında fetal skarsız yara iyileşmesi bir tekrarlanabilir bir model. Buna ek olarak, bu modelin küçük varyasyonlar Fetal yaraların ve deri 8,9 gen ekspresyon analizi gibi ileri çalışmalar, bir dizi gerçekleştirmek için kullanılabilir. Tam zamanlı gebelikler bu fetal skarsız yara iyileşmesi modeli başarılı recapitulation için kritik olduğunu göz önüne alındığında, biz süperovulasyon zamanlanmış gebeliklerde de detay bizim protokol.

<table><tbody><tr><td>7-O MONOSOF Suture</td><td>eSuture</td><td>SN-1647G</td><td></td></tr><tr><td>Surgical Forceps</td><td>Kent Scientific</td><td>INS650916</td><td></td></tr><tr><td>Micro-scissors</td><td>Kent Scientific</td><td>INS600127</td><td></td></tr><tr><td>Autoclip 9 mm</td><td>Texas Scientific Instruments</td><td>205060</td><td></td></tr><tr><td>Insulin Syringe</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>22-272-382</td><td></td></tr><tr><td>Black Pigment</td><td>AIMS</td><td>242</td><td></td></tr><tr><td>BD Safety-Lok 3 ml Syringe</td><td>BD Biosciences</td><td>309596</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate Buffered Saline</td><td>Life Technologies</td><td>10010-049</td><td></td></tr><tr><td>OPMI-MD Surgical Microscope</td><td>Carl Zeiss Surgical Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pregnant Mares Serum (PMS)</td><td>Millipore</td><td>367222</td><td></td></tr><tr><td>Human Chorionic Gonadotropin (HCG)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>CG10</td><td></td></tr><tr><td>Povidone Iodine Prep Solution</td><td>Dynarex</td><td>1415</td><td></td></tr><tr><td>Nair (depilatory cream)</td><td>Church and Dwight Co.</td><td>22600267058</td><td></td></tr></tbody></table>

a mouse fetal skin model of scarless wound repair

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs across species but is age dependent. The transition from a scarless to scarring phenotype occurs in the third trimester of pregnancy in humans and around embryonic day 18 (E18) in mice. However, this varies with the size of the wound with larger defects generating a scar at an earlier gestational age. The emergence of lineage tracing and other genetic tools in the mouse has opened promising new avenues for investigation of fetal scarless wound healing. However, given the inherently high rates of morbidity and premature uterine contraction associated with fetal surgery, investigations of fetal scarless wound healing in vivo require a precise and reproducible surgical model. Here we detail a reliable model of fetal scarless wound healing in the dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

Histolojik analiz için, E16.5 ve E18.5 fare embriyolarından sırt derisinde deri yaraları 48 saat% 4 PFA içinde sabit sonrası yaralanma, ve parafin gömülmüş hasat edilmesi. Floresan transgenik modellerde, Ekim ile dondurulması uygun olabilir. Hücresel ve bağ dokusu mimarisi görselleştirmek için kullanılan olabilir birkaç lekeler vardır. Hematoksilen ve eozin mavi çekirdekleri ve eozinofilik yapıları (yani., Sitoplazma ve hücre dışı kollajen) kırmızı, pembe, turuncu ve çeşitli tonlarında lekeleyen bir iki renkli leke. Mallory trikrom anilin mavisi, asit fuşin ve turuncu G, bağ dokusu hücreleri çevreleyen ayırt etmek için en uygun oluşan üç renkli leke. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52297/52297fig3highres.jpg" /> Şekil 3. Scarless E16.5 Fetal Yaralar Histoloji. (A) Hematoksilen ve eozin leke yenidenveals tam reepithelialization ve inflamatuar hücrelerin sayısında hafif bir artış mevcut (oklar). çubuk = 25; (100x; çubuk = 100 mikron) (B) Eosin leke yenileyici saç köklerinin (ok) (400x civarında Hindistan mürekkep (ok başları) gösterir . bar = 25 mikron); um) (C) Mallory trikrom leke saç folikülü (400x varlığı ile ince retiküler dermal kollajen desen ortaya koymaktadır. Colwell ark. 10 izniyle <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52297/52297fig3large.jpg" target="_blank">bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız.</a> Sırt kesik yarası uygun büyüklükte (1 mm) ve derinliği (tam kalınlık) ise, hematoksilin ve eozin boyama, enflamatuar sayısının en az yaralanma, tam reepithelialization ve sadece küçük bir artış ile bu E16.5 cilt iyileştirici ortaya koyacaktır hücreleri (Şekil 3A). Ayrıca, bu wounds yaklaşık normal deri mimarisi ile iyileşir ve yaralanma site içinde saç köklerinin yenileyici içermelidir (oklar, Şekil 3B). Taze oluşturulan yaraya Hindistan mürekkep Uygun uygulama yaralanma yerinde (Şekil 3B ok başları) mürekkep birikimi yol açmalıdır. Son olarak, Trikrom Nedbesiz dermis (Şekil 3C) ince bir retiküler dermal kollajen desen özelliği açığa çıkarmalıdır. <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52297/52297fig4highres.jpg" /> Şekil 4. Skar E18.5 Fetal Yaralar Histoloji. (A) Hematoksilen ve eozin leke yaralanma yerinde dermis eozin boyama artış (oklar) ortaya koymaktadır. (200x; çubuk = 50 mikron) (B) Mallory trikrom leke yoğun dermal kolajen (oklar) (400x gösterir; çubuğu = 25 um). Colwell ark izni ile yayımlanmaktadır.10 E16.5, hematoksilen ve sırt yaraları E18.5 yapılan ve yaralanma (Şekil 4A) yerinde, normal deri mimarisi kaybı ile yoğun bir yara açığa çıkarmalıdır 48 saat sonrası yaralama hasat eozin boyama yapılan yaralarda karşılaştırıldığında. (Oklar; Şekil 4B) Benzer şekilde, Trikrom dağınık kollajen birikimi yoğun bir desen ortaya koymaktadır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52297/52297fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair at JoVE.com

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

During mammalian development, early gestational skin wounds heal without a scar. Here we detail a reliable and reproducible model of fetal scarless wound healing in the cutaneous dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

Scarless Yara Repair Fare Fetal Cilt Modeli

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

a-mouse-fetal-skin-model-of-scarless-wound-repair

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

12.2K Görüntüleme.  Stanford University School of Medicine. During mammalian development, early gestational skin wounds heal without a scar. Here we detail a reliable and reproducible model of fetal scarless wound healing in the cutaneous dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

Video: A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

The Three-Dimensional Human Skin Reconstruct Model: a Tool to Study Normal  Skin and Melanoma Progression

Most in vitro studies in experimental skin biology have been done in 2-dimensional (2D) monocultures, while accumulating evidence suggests that cells behave differently when they are grown within a 3D extra-cellular matrix and also interact with other cells (1-5). Mouse models have been broadly utilized to study tissue morphogenesis in vivo. However mouse and human skin have significant differences in cellular architecture and physiology, which makes it difficult to extrapolate mouse studies to humans. Since melanocytes in mouse skin are mostly localized in hair follicles, they have distinct biological properties from those of humans, which locate primarily at the basal layer of the epidermis. The recent development of 3D human skin reconstruct models has enabled the field to investigate cell-matrix and cell-cell interactions between different cell types. The reconstructs consist of a "dermis" with fibroblasts embedded in a collagen I matrix, an "epidermis", which is comprised of stratified, differentiated keratinocytes and a functional basement membrane, which separates epidermis from dermis. Collagen provides scaffolding, nutrient delivery, and potential for cell-to-cell interaction. The 3D skin models incorporating melanocytic cells recapitulate natural features of melanocyte homeostasis and melanoma progression in human skin. As in vivo, melanocytes in reconstructed skin are localized at the basement membrane interspersed with basal layer keratinocytes. Melanoma cells exhibit the same characteristics reflecting the original tumor stage (RGP, VGP and metastatic melanoma cells) in vivo. Recently, dermal stem cells have been identified in the human dermis (6). These multi-potent stem cells can migrate to the epidermis and differentiate to melanocytes.

In this report, we describe the three-dimensional skin reconstruct model which mimics human skin in architecture and composition. Melanocyte physiology, melanoma progression and the fate of dermal stem cells have been investigated using the skin reconstruct model. The model is also useful as a preclinical tool for drug assessment.

Üç Boyutlu İnsan Cilt Model Yeniden İnşa: Aracı Normal Cilt ve Melanom İlerleme Eğitim

Most in vitro studies in experimental skin biology have been done in 2-dimensional (2D) monocultures, while accumulating evidence suggests that cells ...

Biyomühendislik

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to evaluate new strategies that aim at improving vascularization, reliable methods are required to make the in-growth of new blood vessels into bio-artificial scaffolds visible and quantify the results. Over the past couple of years, our group has introduced a full skin defect model that enables the direct visualization of blood vessels by transillumination and provides the possibility of quantification through digital segmentation. In this model, one surgically creates full skin defects in the back of mice and replaces them with the material tested. Molecules or cells of interest can also be incorporated in such materials to study their potential effect. After an observation time of one&#8217;s own choice, materials are explanted for evaluation. Bilateral wounds provide the possibility of making internal comparisons that minimize artifacts among individuals as well as of decreasing the number of animals needed for the study. In comparison to other approaches, our method offers a simple, reliable and cost effective analysis. We have implemented this model as a routine tool to perform high-resolution screening when testing vascularization of different biomaterials and bio-activation approaches.

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

Vascularization is key to approaches in successful tissue engineering. Therefore, reliable technologies are required to evaluate the development of vascular networks in tissue-constructs. Here we present a simple and cost-effective method to visualize and quantify vascularization in vivo.

A Tam Cilt Hata Modeli Biyomateryallerin vaskülarizasyonunu değerlendirin<em&gt; In Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Murine Model of Wound Healing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. Impaired wound healing, which occurs in diabetic patients for example, can lead to severe unfavorable outcomes such as amputation. There is, therefore, an increasing impetus to develop novel agents that promote wound repair. The testing of these has been limited to large animal models such as swine, which are often impractical. Mice represent the ideal preclinical model, as they are economical and amenable to genetic manipulation, which allows for mechanistic investigation. However, wound healing in a mouse is fundamentally different to that of humans as it primarily occurs via contraction. Our murine model overcomes this by incorporating a splint around the wound. By splinting the wound, the repair process is then dependent on epithelialization, cellular proliferation and angiogenesis, which closely mirror the biological processes of human wound healing. Whilst requiring consistency and care, this murine model does not involve complicated surgical techniques and allows for the robust testing of promising agents that may, for example, promote angiogenesis or inhibit inflammation. Furthermore, each mouse acts as its own control as two wounds are prepared, enabling the application of both the test compound and the vehicle control on the same animal. In conclusion, we demonstrate a practical, easy-to-learn, and robust model of wound healing, which is comparable to that of humans.

A murine model of cutaneous wound healing that can be used to assess therapeutic compounds in physiological and pathophysiological settings.

Yara Şifa murin Modeli

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Tıp

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models reflect the human wound situation better than animal models. Although two-dimensional models are widely used to investigate processes such as cellular migration and proliferation, models that are more complex are required to gain a deeper knowledge about wound healing. Besides a suitable model system, the generation of precise and reproducible wounds is crucial to ensure comparable results between different test runs. In this study, the generation of a three-dimensional full thickness skin equivalent to study wound healing is shown. The dermal part of the models is comprised of human dermal fibroblast embedded in a rat-tail collagen type I hydrogel. Following the inoculation with human epidermal keratinocytes and consequent culture at the air-liquid interface, a multilayered epidermis is formed on top of the models. To study the wound healing process, we additionally developed an automated wounding device, which generates standardized wounds in a sterile atmosphere.

The goal of this protocol is to build up a three-dimensional full thickness skin equivalent, which resembles natural skin. With a specifically constructed automated wounding device, precise and reproducible wounds can be generated under maintenance of sterility.

Üç-boyutlu Tam Kalınlığı Deri Üretimi Eşdeğer ve Otomatik Yaralama

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

Ischemic Tissue Injury in the Dorsal Skinfold Chamber of the Mouse: A Skin Flap Model to Investigate Acute Persistent Ischemia

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are still occurring, particularly in reconstructive flap surgery. Multiple experimental flap models have been developed to analyze underlying causes and mechanisms and to investigate treatment strategies to prevent ischemic complications. The limiting factor of most models is the lacking possibility to directly and repetitively visualize microvascular architecture and hemodynamics. The goal of the protocol was to present a well-established mouse model affiliating these before mentioned lacking elements. Harder et al. have developed a model of a musculocutaneous flap with a random perfusion pattern that undergoes acute persistent ischemia and results in ~50% necrosis after 10 days if kept untreated. With the aid of intravital epi-fluorescence microscopy, this chamber model allows repetitive visualization of morphology and hemodynamics in different regions of interest over time. Associated processes such as apoptosis, inflammation, microvascular leakage and angiogenesis can be investigated and correlated to immunohistochemical and molecular protein assays. To date, the model has proven feasibility and reproducibility in several published experimental studies investigating the effect of pre-, peri- and postconditioning of ischemically challenged tissue.

The window of the murine dorsal skinfold chamber presented visualizes a zone of acute persistent ischemia of a musculocutaneous flap. Intravital epi-fluorescence microscopy permits for direct and repetitive assessment of the microvasculature and quantification of hemodynamics. Morphologic and hemodynamic results can further be correlated with histological and molecular analyses.

Mouse Dorsal Skinfold Odası&#39;nda İskemik Doku Yaralanması: Bir Cilt Flap Model Akut Kalıcı iskemisi Araştırma

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are ...

Assessment of Acute Wound Healing using the Dorsal Subcutaneous Polyvinyl Alcohol Sponge Implantation and Excisional Tail Skin Wound Models.

Wound healing is a complex process that requires the orderly progression of inflammation, granulation tissue formation, fibrosis, and resolution. Murine models provide valuable mechanistic insight into these processes; however, no single model fully addresses all aspects of the wound healing response. Instead, it is ideal to use multiple models to address the different aspects of wound healing. Here, two different methods that address diverse aspects of the wound healing response are described. In the first model, polyvinyl alcohol sponges are subcutaneously implanted along the mouse dorsum. Following sponge retrieval, cells can be isolated by mechanical disruption, and fluids can be extracted by centrifugation, thus allowing for a detailed characterization of cellular and cytokine responses in the acute wound environment. A limitation of this model is the inability to assess the rate of wound closure. For this, a tail skin excision model is utilized. In this model, a 10 mm x 3 mm rectangular piece of tail skin is excised along the dorsal surface, near the base of the tail. This model can be easily photographed for planimetric analysis to determine healing rates and can be excised for histological analysis. Both described methods can be utilized in genetically altered mouse strains, or in conjunction with models of comorbid conditions, such as diabetes, aging, or secondary infection, in order to elucidate wound healing mechanisms.

Here, two murine wound healing models are described, one designed to assess cellular and cytokine wound healing responses and the other to quantify the rate of wound closure. These methods can be used with complex disease models such as diabetes to determine mechanisms of various aspects of poor wound healing.

Dorsal Subkutan Polivinil Alkol Sünger İmplantasyonu ve Eksizyonal Kuyruk Deri Yara Modelleri kullanılarak Akut Yara İyileşmesinin Değerlendirilmesi.

Wound healing is a complex process that requires the orderly progression of inflammation, granulation tissue formation, fibrosis, and resolution. Murine ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

A Mouse Model of Mechanotransduction-driven, Human-like Hypertrophic Scarring

Hypertrophic scarring (HTS) is an abnormal process of wound healing that results in excessive scar tissue formation. Over the past decade, we have demonstrated that mechanotransduction&#8212;the conversion of mechanical stimuli into cellular responses&#8212;drives excessive fibrotic scar healing. A mouse model to assess human-like hypertrophic scarring would be an essential tool for examining various therapeutics and their ability to reduce scarring and improve healing. Specifically, our laboratory has developed a murine wound model that increases mechanical strain to promote human-like HTS. This&#160;protocol utilizes biomechanical loading devices, made from modified 13 mm palatal expanders, whose arms are placed on either side of the incision and distracted incrementally apart in order to apply continuous tension across the wound bed during healing. Over nearly two decades of use, this model has been significantly advanced to improve efficacy and reproducibility. Using the murine HTS model, significant dermal fibrotic scars can be induced to be histologically comparable to human hypertrophic scars. This murine model provides an environment to develop biologics involved in the treatment of HTS and mechanotransduction-related conditions such as foreign body response.

This protocol will explain how to establish a hypertrophic scarring murine model that increases mechanotransduction signaling to simulate human-like scarring. This method involves increasing mechanical tension across a healing incision in a mouse and using a specialized device to create reproducible, excessive scar tissue for detailed histological and bioinformatic analyses.

Mekanotransdüksiyon Odaklı, İnsan Benzeri Hipertrofik Yara İzinin Bir Fare Modeli

Hypertrophic scarring (HTS) is an abnormal process of wound healing that results in excessive scar tissue formation. Over the past decade, we have ...

Digital Planimetry for Assessing Wound Closure Kinetics in a Mouse Model

Chronic wounds, due to their high prevalence, are a serious global health concern. Effective therapeutic strategies can significantly accelerate healing, thereby reducing the risk of complications and alleviating the economic burden on healthcare systems. Although numerous experimental studies have investigated wound healing, most rely on qualitative observations or quantitative direct measurements. The objective of this study was to standardize an indirect wound measurement method using digital planimetry, incorporating digital scaling and segmentation. This approach addresses the lack of detailed, step-by-step methodologies for accurate wound assessment. A photodocumentation booth was designed and constructed, and computer-assisted digital planimetry tools were employed to minimize variability in measurements of the wound area, perimeter, and the distance from the wound center to its edges. A circular traumatic wound (5 mm in diameter) was created on the dorsal midline at the shoulder blade level of male CD1 mice (n = 4, 10 weeks old, 30-35 g). Wound evolution was photodocumented for 14 days using the custom-designed photo booth, which controlled lighting conditions, focal distance, and subject positioning. Scaling and wound measurements were performed using segmentation in ImageJ software, and statistical analysis was conducted using statistical analysis software. The kinetics of wound closure showed a slight increase in wound size and perimeter between day 0 and day 2, followed by a gradual decrease until complete closure by day 14. The photodocumentation booth and computer-assisted digital planimetry enabled quantitative measurements with minimal variability. In conclusion, these tools provide a reliable and reproducible method for evaluating wound closure kinetics in pre-clinical models.

Wounds represent a global health challenge. This study developed a standardized photo booth utilizing digital planimetry to minimize wound measurement variability. Monitoring wounds in mice over 14 days revealed an initial increase in wound area and perimeter, followed by gradual closure. This methodology may aid in evaluating wound closure kinetics in pre-clinical models.

Bir Fare Modelinde Yara Kapanma Kinetiğini Değerlendirmek için Dijital Planimetri

Chronic wounds, due to their high prevalence, are a serious global health concern. Effective therapeutic strategies can significantly accelerate healing, ...

A Murine Model of a Burn Wound Reconstructed with an Allogeneic Skin Graft

Trivial superficial wounds heal without complications by primary intention. Deep wounds, such as full thickness burns, heal by secondary intention and require surgical debridement and skin grafting. Successful integration of the donor graft into a recipient wound bed depends on timely recruitment of immune cells, robust angiogenic response and new extracellular matrix formation. The development of novel therapeutic agents, which target some key processes involved in wound healing, are hindered by the lack of reliable preclinical models with optimized objective assessment of wound closure. Here, we describe an inexpensive and reproducible model of experimental full thickness burn wound reconstructed with an allogeneic skin graft. The wound is induced on the dorsum surface of anaesthetized inbred wild type mice from the BALB/C and SKH1-Hrhr backgrounds. The burn is produced using a brass template measuring 10 mm in diameter, which is preheated to 80 &#176;C and delivered at a constant pressure for 20 s. Burn eschar is excised 24 hours after the injury and replaced with a full thickness graft harvested from the tail of a genetically similar donor mouse. No specialized equipment is required for the procedure and surgical techniques are straightforward to follow. The method may be effortlessly implemented and reproduced in most research settings. Certain limitations are associated with the model. Due to technical difficulties, the harvest of thinner split thickness skin grafts is not possible. The surgical method we describe here allows for the reconstruction of burn wounds using full thickness skin grafts. It may be used to carry out preclinical therapeutic testing.

The aim of this study was to develop a murine model of burn wound healing. A thermal burn was induced on the dorsal skin of mice using a preheated brass template. Burned tissue was debrided and overlaid with a skin graft harvested from the tail of a genetically similar donor mouse.

Allojenik Deri Grefti ile Yeniden Yapılandırılan Yanık Yarasının Murine Modeli

Trivial superficial wounds heal without complications by primary intention. Deep wounds, such as full thickness burns, heal by secondary intention and ...

Biyoloji

Optimized Protocol for Mouse Wound Healing Model with Stem Cell-Derived Exosomes

Mouse Wound Models and Preparation of Single-Cell Suspensions 

The management of acute full-thickness skin injuries presents a considerable challenge in clinical practice. The complexity of wound healing, involving diverse cell populations and the intricate wound microenvironment, complicates the assessment of treatment effects and their interactions using traditional experimental approaches. Single-cell transcriptome sequencing technology has revolutionized the understanding of cellular functions and mechanisms during wound healing. However, the variability in methodologies for creating mouse wound models introduces confounding factors that can impact experimental results. Furthermore, the process of dissociating mouse skin tissues presents significant technical hurdles, highlighting the critical need for high-quality single-cell suspensions for accurate transcriptome sequencing. Therefore, this study aims to optimize the construction of mouse wound models to accurately assess changes in wound closure while eliminating variables that could influence the subsequent sequencing result. Additionally, the preparation of single-cell suspensions was performed using both enzyme preparation protocols and test kit protocols to optimize cost and effectiveness.

Mouse Wound Models and Preparation of Single-Cell Suspensions

This study presents two crucial experimental techniques: the construction of a murine wound model for assessing wound closure and the preparation of single-cell suspensions from murine skin to preserve cellular viability.

The management of acute full-thickness skin injuries presents a considerable challenge in clinical practice. The complexity of wound healing, involving ...

Scarless Yara Repair Fare Fetal Cilt Modeli

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Üç Boyutlu İnsan Cilt Model Yeniden İnşa: Aracı Normal Cilt ve Melanom İlerleme Eğitim

A Tam Cilt Hata Modeli Biyomateryallerin vaskülarizasyonunu değerlendirin

Yara Şifa murin Modeli

Üç-boyutlu Tam Kalınlığı Deri Üretimi Eşdeğer ve Otomatik Yaralama

Mouse Dorsal Skinfold Odası'nda İskemik Doku Yaralanması: Bir Cilt Flap Model Akut Kalıcı iskemisi Araştırma

Dorsal Subkutan Polivinil Alkol Sünger İmplantasyonu ve Eksizyonal Kuyruk Deri Yara Modelleri kullanılarak Akut Yara İyileşmesinin Değerlendirilmesi.

Mekanotransdüksiyon Odaklı, İnsan Benzeri Hipertrofik Yara İzinin Bir Fare Modeli

Bir Fare Modelinde Yara Kapanma Kinetiğini Değerlendirmek için Dijital Planimetri

Allojenik Deri Grefti ile Yeniden Yapılandırılan Yanık Yarasının Murine Modeli

Mouse Wound Models and Preparation of Single-Cell Suspensions