Biz özel yapılmış böbrek perfüzyon devreleri bize sağlamış Sorin Group (Milano, İtalya) teşekkür etmek istiyorum. Ayrıca biz Steen çözümü BBraun AG&#39;nin şırınga pompası ile temini için (Melsungen, Almanya) ve Rieber GmbH &amp; Co KG (Reutlingen, Almanya) bize sağlamış XVIVO Perfüzyon A.Ş. (Goteborg, İsveç) teşekkür ederim.

Not: Bu çalışma protokolü şematik bir genel görünüşü Şekil 1&#39;de gösterilmiştir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig1.jpg" /> Şekil 1. Çalışma Protokolü. Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon Bu çalışma protokolü bir domuz modeline dayanmaktadır. Cerrahi böbrek greft damarlarının diseksiyonu ve histidin-triptofan-ketoglutaratın 500 ml (HTK) ile yıkama sonrasında greft alınabilir. 3 saat boyunca soğuk hava deposu (SCS) sonra, böbrek greft belirlenen transplantasyon kadar birden fazla saat Normotermik ex vivo (NEVKP) perfüze edilir. Bütün hayvanlar, &#39;Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından yayınlanan&#39; Laboratuvar Hayvanları Bakım için Kılavuzu &#39;Tıbbi Araştırma ve&#39; Ulusal Derneği tarafından formüle &#39;Laboratuar Hayvan Bakımı İlkeleri&#39; ile uyumlu insancıl bakım almışOntario, Canada. Toronto Genel Araştırma Enstitüsü Hayvan Bakım Komitesi, tüm çalışmalarını onayladı. 1. Hayvanlar <ol><li> Bu protokolde - (33 kg 27) erkek Yorkshire domuz kullanın. </li></ol> 2. Organ Alma <ol><li> Ameliyat öncesi Prosedürü <ol><li> Ev, en az bir hafta için bir araştırma tesisi erkek Yorkshire domuz onların stres düzeyini azaltmak için. Anestezi verilmeden önce 6 saat en az domuz oruç. </li><li> Ketamin (25 mg / kg) ve atropin (0,04 mg / kg) ve midazolama (0.15 mg / kg) içeren bir intramüsküler enjeksiyon ile domuz anesthetization başlatın. Daha sonra, ameliyathane (OR) konut tesisinden hayvan taşıma. </li><li> YA masaya yatar pozisyonda domuz yerleştirin. Kendiliğinden izofluran% 5 oksijen 2 L nefes alsın. Gevşeme sonra, bir laringoskop ile ses telleri ortaya çıkarmak ve entübasyon nedeniyle bir spazm önlemek için% 2 lidokain ile püskürtün. Afhava 5 ml - 6,5 mm tüp ile entübasyon ter, 3 manşeti engeller. Not: Kapnometri trakeal tüpün doğru konumunu ortaya koymaktadır. </li><li> % 2.5 izofluran gaz indirin. 16 nefes / dk ve 10 tidal hacim - - 15 ml / kg vücut ağırlığı 14 ventilatör ayarlayın. Yakından domuz izleyin. Kalp hızı ve oksijen satürasyonu Pulse oksimetre ile kaydedilir. </li><li> Steril koşullar altında, bir 8.5 Fr. tanıtmak Seldinger tekniği 13 juguler ven içine x 10 cm kateter. Bu nedenle, venöz damar delinme bir iğne kullanın. Bir tel tanıttıktan sonra, bir kateter ile iğne değiştirin. Tel eleyin ve cildi kateter sabitleyin. Ameliyat boyunca saatte Ringer Laktat solüsyonu 200 ml uygulayın. </li></ol></li><li> Cerrahi Prosedür <ol><li> Dezenfeksiyon ve cerrahi alanın kapsamı ardından, pubis eklemi için xiphoid bir ensizyon gerçekleştirin. Pozlama iyileştirmek için, cerrahi yaklaşım uzatmakBir sol yanal kesi. Bir havlu ile büyük ve küçük bağırsakları Kapak ve sağ böbrekte optimal erişim için sol tarafına onları konumlandırmak. </li><li> Abdominal aorta gelen inferior vena kava (IVC) ayırın. Aort arkasından ligatı aort dalları. </li><li> Arka tam aort diseksiyonu sonra, böbrek dallarına aort kafatasın etrafında bir bitişik harfleri geçmektedir. Ayrıca, iliak çatallanma kafatası iki bitişik harfler yerleştirin. Sol renal arter etrafında bir kravat yerleştirin. </li><li> Onun yapışık dokudan sağ böbreği boşaltın. Renal ven, arter ve üreter teşrih. </li><li> Diyaframı açın ve kalp içine kg donör ağırlığı başına 1,000 IU heparin yönetmek. Bir DCD modeli için, kardiyak arrest ikna etmek için intrakardiyak 3 dk sistemik heparin sonrası KCl 40 mval enjekte. kardiyak arrest sıcak iskemi başlangıç ​​noktası olarak değerlendirilir. </li><li> Öte yandan, kan toplanması için, CPDA torbalar (sitrat, fosfat, dekstroz, a hatlarını bağlamakdenosine) Sol üst juguler ven tanıtıldı kateter. Yumuşak bir bir spin (frensiz 1.500 xg) gerçekleştirin. Plazma ve steril koşullar altında buffy coat (biyogüvenlik kabine sınıf II) çıkartın ve transfüzyon eritrosit saklayın. </li><li> Iliak bifurkasyonunun üstünde bir organ floş hattı ile aorta cannulate. Aorta ve sol renal arter bitişik harfler Kravat. </li><li> 100 cm H2O bir basınç ile histidin-triptofan-ketoglutarat (HTK) çözeltisi ile böbrek yıkayın Torasik cava Kelepçe ve juguler kateter yoluyla kan toplamak. Böbreğin optimal floş güvenli renal venin altında karın cava kesin. </li><li> Sağ böbreğin tam dalgadan sonra, aorta bir segment greft almak. Renal ven kesin ve uzun üreter bırakın. </li></ol></li><li> Perfüzyon için Böbrek Graft geri Tablosu Hazırlama <ol><li> Yapışık doku böbrek boşaltın. Bir kravat a ile aortun kafatası parçasını kapatınnd 1/4 &quot;x 3/8&quot; redüktör ile alt kısmı cannulate. Aorta gelen küçük arter dalları kapalı kravat. </li><li> Doğrudan 1/4 &quot;x 3/8&quot; redüktör ile renal ven cannulate. 8 Fr. ile üreter entübe tüp besleme. </li><li> NEVKP başlangıcına kadar buz üzerinde böbrek yerleştirin. </li></ol></li></ol> 3. Normotermik ex vivo Böbrek perfüzyon (NEVKP) <ol><li> Perfüzyon Devre Hazırlama perfüzyon devresi yenidoğan kardiyopulmoner baypas ekipmanı (Şekil 2) oluşur. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig2.jpg" /> Perfüzyon Devre Şekil 2. şematik çizimi. Devre yenidoğan kardiyopulmoner baypas teknolojisinin oluşur. perfüzyon çözeltisi venöz hazne içinde toplanmaktadır. Santrifüjlü bir pompa oksijen ile zenginleştirilmiş ve 37 ° C&#39;ye ısıtılır oksitleyici, Solüsyonu iter. Pa sonraböbrekte renal arter yoluyla 80 mmHg - arteriyel kabarcık filtresi ssing, Perfüzat 60 bir basınç ile tahrik edilir. Venöz çıkış (0-3 mmHg) venöz hazneye geri perfüzat yol açar. Şırınga ve infüzyon pompaları ek bileşikler ile arzı sağlamak. İdrar perfüzyon boyunca toplanır. Perfüzyon devre karakteristikleri sürekli olarak kaydedilir. Saatlik venöz ve arteriyel kan gazı örnekleri ve böbrek hasarı belirteçleri analiz edilmektedir. <ol> <li> Böbrek perfüzyon cihazına özel yapılmış perfüzyon devresini bağlayın. </li><li> Venöz hazne ve oksitleyici hortumu bağlayın. Oksijenatör arteriyel çıkışına arteriyel hat boru bağlayın ve yuvasına kabarcık filtreyi yerleştirin. Tasfiye hattını bağlayın. Toplar damar haznesinin girişinin venöz hat boru bağlayın. </li><li> Perfüzyon sırasında değerlendirilmesinde, arteriyel prize takın sıcaklık probu debimetre ve met bağlamakbble arteriyel hat boru sensör ve basınç hatlarını bağlayın. Seviye sensörü bağlayın. </li><li> Venöz ve arteriyel örnek limanlarına venöz ve arteriyel örnek hatlarını bağlayın. </li><li> Bir stand organ odasına yerleştirin ve hazırlanan deliklerden venöz ve arteriyel tüp tanıtmak. Sıkıca masa ve odasına boru sabitleyin. </li><li> Roller pompa içine emme hortumunu takın ve sıvıları toplamak için odasına bir ucunu yerleştirin. </li><li> % 95 O 2 /% 5 CO 2 ve oksijenatör ihtiva eden gaz tankına oksijen tüpünü bağlayın. Oksijenatör ve organ odasına ısıtma ünitesi boru bağlayın. </li><li> Kullanım boru venöz ve arteriyel çıkış hatlarını kapatmak için kelepçeler. Venöz rezervuar çıkışına başka boru kelepçe uygulayın. </li></ol></li><li> Perfüzyon Çözüm hazırlanması, Ek Takviyeler ve Devre Astar <ol><li> Üretilen idrar yerine tek infüzyon pompası kullanınRinger laktat. </li><li> Venöz hazne içine ve insülin (5 IU / saat) (0.5 ml / saat, amino asitler 0.5 mi / saat glukoz) besin uygulaması için, bir şırınga pompası kullanın. Şirketinden arteryel hat bir vasodilatör (verapamil, 0.25 mg / st) enjekte etmek için ikinci şırınga pompası kullanmaktadır. </li><li> Perfüzyon çözeltisi ile venöz doldurun. Bu nedenle, Ringer Laktat (175 mi), venöz hazne içine STEEN çözeltisi (200 mi), DRO (27 mi), heparin (1000 IU), pH değerini ayarlamak için, sodyum bikarbonat ve kalsiyum glukonat dökün. Son olarak, yıkanmış eritrositler (125 mi) ilave edin. </li><li> Kalp akciğer makinesi (HLM) açın. Basınç, sıcaklık, seviye ve kabarcık sensörü panelleri etkinleştirin. Perfüzyon boyunca veri kaydetmek için Veri Yönetim Sistemi (DYS) etkinleştirin. Perfüzyon solüsyonu ve 37 ° C, organ bölmeyi ısıtmak için ısıtma ünitesini aktif hale getirin. O 2 beslemesini açın. </li><li> Venöz rezervuar arkasındaki boru kelepçesini açın ve centrifug ücretsizTamamen havadan el pompa kafası. 1000 rpm&#39;de santrifüj pompa başlayın ve çözelti devresi boyunca hareketli izin verir. Arteriyel filtresi atlayarak boru Kelepçe ve arteriyel filtreden havayı serbest bırakın. </li><li> Basınç hatları sıfır. Şırınga ve infüzyon pompaları etkinleştirin. </li></ol></li><li> Böbrek Greft Perfüzyonu <ol><li> Buz böbrek çıkarın ve organ odasında yatak üzerinde böbrek yerleştirin. Idrar kolektörü içine idrar kateteri yerleştirin. Venöz ve arteriyel boru havanın serbest emin olduktan sonra tüp konnektörleri takın. </li><li> Arteriyel ve venöz boru hatları arasında kısayolu kapatın. Santrifüj pompanın hızını düzenleyerek 75 mmHg arter basıncı ayarlayın. </li><li> Tutanak basınçları, arteriyel akış, sıcaklık, ve DMS sürekli kabarcıklar varlığı. Perfüzyon boyunca dikkatli değerleri dikkate alınmalıdır. Perfüzyon sırasında odasına kan sızdırıyor colle olduğunuLütfen venöz hazne içine emiş boruları ile cted. </li><li> Üretilen idrar miktarı kaydedilir. Saatlik venöz kan ve idrar örnekleri toplamak. Venöz ve arteriyel kan gazı örnekleri ve aspartat aminotransferaz (AST) ve laktat analizi alarak perfüzyon izleyin. </li><li> Perfüzyon sonunda renal arter gelen boru bağlantısını kesin ve ven, soğuk HTK ile greft yıkayın ve transplantasyon kadar steril bir organ torba buz üzerinde saklayın. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Wolfe, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mortality+in+all+patients+on+dialysis,+patients+on+dialysis+awaiting+transplantation,+and+recipients+of+a+first+cadaveric+transplant.">Comparison of mortality in all patients on dialysis, patients on dialysis awaiting transplantation, and recipients of a first cadaveric transplant.</a> The New England journal of medicine. 341 (23), 1725-1730 (1999).</li><li>Rabbat, C. G., Thorpe, K. E., Russell, J. D., Churchill, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mortality+risk+for+dialysis+patients+and+cadaveric+first+renal+transplant+recipients+in+Ontario,+Canada.">Comparison of mortality risk for dialysis patients and cadaveric first renal transplant recipients in Ontario, Canada.</a> Journal of the American Society of Nephrology : JASN. 11 (5), 917-922 (2000).</li><li>Fuquay, R., Teitelbaum, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplant+outcomes+and+dialysis+modality.">Transplant outcomes and dialysis modality.</a> Contributions to nephrology. 178, 251-257 (2012).</li><li>Ingsathit, A., Kamanamool, N., Thakkinstian, A., Sumethkul, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+advantage+of+kidney+transplantation+over+dialysis+in+patients+with+hepatitis+C:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Survival advantage of kidney transplantation over dialysis in patients with hepatitis C: a systematic review and meta-analysis.</a> Transplantation. 95 (7), 943-948 (2013).</li><li>Davis, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+extent+and+predictors+of+waiting+time+geographic+disparity+in+kidney+transplantation+in+the+United+States.">The extent and predictors of waiting time geographic disparity in kidney transplantation in the United States.</a> Transplantation. 97 (10), 1049-1057 (2014).</li><li>Perico, N., Cattaneo, D., Sayegh, M. H., Remuzzi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+graft+function+in+kidney+transplantation.">Delayed graft function in kidney transplantation.</a> Lancet. 364 (9447), 1814-1827 (2004).</li><li>Maggiore, U., Cravedi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+marginal+kidney+donor.">The marginal kidney donor.</a> Current opinion in organ transplantation. 19 (4), 372-380 (2014).</li><li>Dittrich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+cold+storage+on+renal+ischemia+reperfusion+injury+after+non-heart-beating+donor+explantation.">Influence of cold storage on renal ischemia reperfusion injury after non-heart-beating donor explantation.</a> Nephron. Experimental nephrology. 96 (3), e97-e102 (2004).</li><li>Summers, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+donor+age+and+cold+storage+time+on+outcome+in+recipients+of+kidneys+donated+after+circulatory+death+in+the+UK:+a+cohort+study.">Effect of donor age and cold storage time on outcome in recipients of kidneys donated after circulatory death in the UK: a cohort study.</a> Lancet. 381 (9868), 727-734 (2013).</li><li>Hosgood, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.+pilot+study+assessing+the+feasibility+of+a+short+period+of+normothermic+preservation+in+an+experimental+model+of+non+heart+beating+donor+kidneys.">et al. pilot study assessing the feasibility of a short period of normothermic preservation in an experimental model of non heart beating donor kidneys.</a> The Journal of surgical research. 171 (1), 283-290 (2011).</li><li>Hosgood, S. A., Patel, M., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+conditioning+effect+of+ex+normothermic+perfusion+in+an+experimental+kidney+model.">The conditioning effect of ex normothermic perfusion in an experimental kidney model.</a> The Journal of surgical research. 182 (1), 153-160 (2013).</li><li>Nicholson, M. L., Hosgood, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+after+ex+vivo+normothermic+perfusion:+the+first+clinical+study.+American+journal+of+transplantation.">Renal transplantation after ex vivo normothermic perfusion: the first clinical study. American journal of transplantation.</a> official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 13 (5), 1246-1252 (2013).</li><li>Seldinger, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter+replacement+of+the+needle+in+percutaneous+arteriography;+a+new+technique.">Catheter replacement of the needle in percutaneous arteriography; a new technique.</a> Acta radiologica. 39 (5), 368-376 (1953).</li><li>Stubenitsky, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exsanguinous+metabolic+support+perfusion--a+new+strategy+to+improve+graft+function+after+kidney+transplantation.">Exsanguinous metabolic support perfusion--a new strategy to improve graft function after kidney transplantation.</a> Transplantation. 70 (8), 1254-1258 (2000).</li><li>Delpech, P. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+warm+ischaemia+combined+with+cold+preservation+on+the+hypoxia-inducible+factor+1&#945;+pathway+in+an+experimental+renal+autotransplantation+model.">Effects of warm ischaemia combined with cold preservation on the hypoxia-inducible factor 1&#945; pathway in an experimental renal autotransplantation model.</a> The British journal of surgery. , (1002).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation.">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England journal of medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li><li>Knaak, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subnormothermic+Ex+vivo+liver+perfusion+reduces+endothelial+cell+and+bile+duct+injury+after+DCD+pig+liver+transplantation.">Subnormothermic Ex vivo liver perfusion reduces endothelial cell and bile duct injury after DCD pig liver transplantation.</a> Liver transplantation : official publication of the American Association for the Study of Liver Diseases and the International Liver Transplantation Society. , (2014).</li><li>Hosgood, S. A., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+normothermic+perfusion+of+declined+human+kidneys+after+inadequate+in+situ+perfusion.">Ex vivo normothermic perfusion of declined human kidneys after inadequate in situ perfusion.</a> American journal of transplantation official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 14 (2), 490-491 (2014).</li><li>Op den Dries, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+normothermic+machine+perfusion+and+viability+testing+of+discarded+human+donor+livers.">Ex vivo normothermic machine perfusion and viability testing of discarded human donor livers.</a> American journal of transplantation official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 13 (5), 1327-1335 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Bu çalışma, bir eritrosit bazlı solüsyon NEVKP bir domuz modelinde, uzun bir zaman dönemi için mükemmel sonuçlar ile yapılabilir göstermektedir. 10 saat ex vivo perfüzyon sırasında böbrekler istikrarlı perfüzyon parametreleri, aktif renal metabolizma, homeostazını ve minimal böbrek hasarı gösterdi. İdrar üretimi ve böbrek hasarı perfüzyon çözeltisi bileşimine bağlıdır. Bu fizyolojik aralık içinde onkotik basıncı ve perfüzat ozmolarite tutmak önemlidir. Özel olarak, düşük onkotik basıncı önemli derecede böbrek ödem ve böbrek hasarı artan işaretleri ile fizyolojik olmayan şekilde yüksek bir idrar üretimi ile sonuçlanacaktır. STEEN çözeltisi albümin içeren onkotik basıncı düzenlemek için ve böbrek için fizyolojik koşulları taklit etmek için, bu modelde seçilir. Sodyum bikarbonat, ve kalsiyum glukonat, pH fizyolojik değerlerini elde etmek için sisteme eklenen, HCO3 </sub&gt; sodyum, potasyum, kalsiyum ve klorür. vazodilatör seçimi ve doz yeterli kan akımı ve oksijen kaynağı sağlamak için önemlidir. Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon tekniği çeşitli sınırlamalar vardır. ex vivo perfüzyon olumsuz artık perfüzyon dönemleri etkileyebilecek böbrek, hormonal desteği ile ilişkili değildir. Buna ek olarak, yeni bir teknoloji, zaman içinde bu noktada, artan maliyetler ile bağlantılıdır. Gelecek gelişmeler teknoloji basitleştirmek ve maliyetleri azaltmak olabilir. taşınabilir böbrek perfüzyon cihazın geliştirilmesi tamamen gelecekte soğuk böbrek depolama önlemek için izin verebilir. Şiddetli ve inatçı organ yetersizliği marjinal organları (AKD veya DCD böbrek greft) 7 bir artış kullanımına yol açar. Şu anda, organ korunması, statik, soğuk depolama veya hipotermik makine perfüzyon dayanmaktadır. Bir uzun süreli soğuk iskemi zaman önemli bir imp vardır şöylestandart kriterlere 15 ve marjinal greft 8,9 böbrek fonksiyonunun sonucu üzerine hareket, soğuk hava deposu minimize yeni koruma teknikleri özel ilgi 16-19 vardır. Bir büyük engel daha geniş marjinal greft kullanımı transplantasyon öncesinde organlarının kalitesi ve canlılığını değerlendirmek için yetersizlik için. Şu anda böyle bir donör yaşı, donör ilgili hastalıklar ve greft sıcak iskemi süresi olarak sadece klinik parametreler bir organ kabul veya transplantasyon için reddedildi olup olmadığı kararı kullanılmaktadır. Normotermik koşullarda greft koruyarak, greft değerlendirme perfüzyon özelliklerine göre ve veri mümkündür. Böyle renal vasküler akış, basınç, böbrek içi direnç, idrar üretimi, oksijen tüketimi ve (örneğin AST ve laktat gibi), böbrek hasarı parametreleri olarak gerçek zamanlı parametreleri greft canlılığını değerlendirmek için yararlı parametreler olması gerekiyordu. Addit olarakion, NEVKP sırasında etkin metabolizma transplantasyon öncesinde marjinal böbrek greft geliştirmek için tamir stratejileri uygulama sağlar. Örneğin, pro-enflamatuar yollar, immünomodülasyon, gen transferi, hem de kök hücre idaresi inhibisyonu korunması süresi boyunca, böbrek greft değiştirebilir ve alıcı sonucunu geliştirmek için, gelecekteki teknikler olabilir.

Böbrekler en sık nakledilen katı organlardır. Diyaliz 1-4 ile karşılaştırıldığında son dönem böbrek hastalığı hastalar için, böbrek nakli daha iyi yaşam beklentisi ve yaşam kalitesi sunuyor. kalıcı organ yetersizliği nakli tıp (Tablo 1) 5 alanda ciddi bir problem teşkil etmektedir. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td></td><td> Amerika Birleşik Devletleri * </td><td> Eurotransplant bölge ** </td></tr><tr><td> Böbrek nakli bekleme listesinde hastalar </td><td> 101.563 (Şubat, 2015) </td><td> 10689 (Aralık 2014) </td></tr><tr><td> Merhum donör böbrekler 2014 yılında nakledilen </td><td> 10.650 </td><td> 3,119 </td></tr><tr><td> Medyan (yıl olarak) Kadavradan böbrek nakli için bekleme süresi </td><td> Up to 5 yıl * </td><td> 4 yıla kadar ** </td></tr></tbody></table> Tablo 1. BöbrekABD ve Eurotransplant Bölgesi&#39;nde Greft yetersizliği. böbrek nakli sonucu olumsuz uzun süreli diyaliz 6 maruz hastalar için kötü sonuçla, bekleme süresi etkilenir. Bu tür kardiyak ölüm (DCD) sonra bağışlanan eski donörden böbrek, birden komorbidite ile donörlerden (genişletilmiş kriterler vericilerden (AKD) ve böbrekler gibi ek bir donör kaynağı olarak marjinal böbrek greft, ilgi tetiklemiştir. Olurdu Marjinal donör böbrek Geçmişte azaldı şimdi transplantasyon 7 için kabul edilir. Marjinal böbrek greft kullanımı için önemli bir engel soğuk anoksik depolama korunması tekniğidir. Şu anda, böbrek greft buz üzerinde statik depolanan veya oksijen olmadan 4 ° C&#39;de perfüze edilir. Soğuk anoksik koruma tekniği böbrek korunması sırasında devam eden greft yaralanması ile ilişkilidir ve bu nedenle Metab eksikliği greft değerlendirmesini izin vermezolism ve idrar üretimi. Özellikle, marjinal böbrek greft önemli böbrek hasarı ile sonuçlanan, kötü soğuk depolama tahammül ve gecikmiş greft fonksiyonu (VGM) 8,9 oranlarının yüksek. VGM kötü uzun dönem greft fonksiyonu için bir prognostik faktördür. Ekstrakorporal böbrek perfüzyon organların korunması, değerlendirilmesi ve onarım için alternatif bir yöntem temsil eder. Bir domuz modelinde, yararlı sonuçlar normotermik koşullarda 10,11 altında ex vivo perfüze böbrekler için sunuldu. Genişletilmiş kriterler donörlerden alınan böbreklerin nakli 12 hemen önce 1 saat perfüze edildi zaman 2013 yılında yapılan ilk klinik deneme gecikmiş greft fonksiyonu daha düşük bir oran gösterdi. Bu kağıt Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon (NEVKP) bir model sunuyor. Bu çalışmanın amacı minimum uygulanan soğuk iskemi süresini azaltmak ve NEVKP süresini uzatmaktır. NEVKPsoğuk depolama teknikleri neden olabilir zararı azaltmak için hedefleyen alternatif bir koruma yöntemidir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Neonatal cardiopulmonary bypass technology</td>
			<td>SORIN GROUP Canada Inc (Markhan, Canada)</td>
			<td>Custom made</td>
			<td>Neonatal venous reservoir D100 (500 mL, 1/16&#34; in- and outflow), neonatal oxygenator D100, centrifugal pump head (Revolution), arterial bubble filter (D130)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heart lung machine, St&#246;ckert S3</td>
			<td>SORIN GROUP Canada Inc (Markhan, Canada)</td>
			<td>Custom made</td>
			<td>Centrifugal pump, roller pump, control panel (sensors for pressure, flow, temperature, bubbles, and level), oxygen blender, heater unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="3">Tubing</td>
			<td>SORIN GROUP Canada Inc (Markhan, Canada)</td>
			<td>01906BPC SG XS</td>
			<td>3/16&#34;x 1/16&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>019071PC SG XS</td>
			<td>1/4&#34;x 1/16&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>019060PC SG XH</td>
			<td>3/8&#34;x 1/16&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tubing connectors</td>
			<td>SORIN GROUP Canada Inc (Markhan, Canada)</td>
			<td></td>
			<td>Various sizes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>STEEN solution</td>
			<td>XVIVO (G&#246;teborg, SWE)</td>
			<td>19004</td>
			<td>200 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringer&#39;s lactate</td>
			<td>Baxter (Mississauga, ON, CAN)</td>
			<td>JB2324</td>
			<td>175 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate</td>
			<td>Hospira (Montr&#233;al, QC, CAN)</td>
			<td>6625050</td>
			<td>pH dependent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium gluconate</td>
			<td>Pharmaceutical Partners of Canada (Richmond Hill, ON)</td>
			<td>C31110</td>
			<td>Calcium dependent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Sandoz Canada Inc (Toronto, ON, CAN)</td>
			<td>10750</td>
			<td>1000 IU</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amino acid and glucose, Travasol 10%</td>
			<td>Baxter (Mississauga, ON, CAN)</td>
			<td>JB6760</td>
			<td>1 mL/h</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast acting insulin, Novorapid</td>
			<td>Novo Nordisk Canada Inc (Mississauga, ON, CAN)</td>
			<td>DS6H748</td>
			<td>5 IE/h</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Verapamil</td>
			<td>Sandoz Canada Inc (Quebec, QC, CAN)</td>
			<td>52216</td>
			<td>0,25 mg/h</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

normothermic ex vivo kidney perfusion for the preservation of kidney grafts prior to transplantation

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a serious problem. Therefore, the acceptance criteria for organ donors have been extended leading to the usage of marginal kidney grafts. These marginal organs tolerate cold storage poorly resulting in increased preservation injury and higher rates of delayed graft function. To overcome the limitations of cold storage, extensive research is focused on alternative normothermic preservation methods.
Ex vivo normothermic organ perfusion is an innovative preservation technique. The first experimental and clinical trials for ex vivo lung, liver, and kidney perfusions demonstrated favorable outcomes.
In addition to the reduction of cold ischemic injury, the method of normothermic kidney storage offers the opportunity for organ assessment and repair. This manuscript provides information about kidney retrieval, organ preservation techniques, and isolated ex vivo normothermic kidney perfusion (NEVKP) in a porcine model. Surgical techniques, set up for the perfusion solution and the circuit, potential assessment options, and representative results are demonstrated.

Kalp-yenerek böbrek alma modeli kullanarak altı deneylerin sonuçlarını aşağıda sunulmuştur. Yerinde temizleme ve böbrek alma sonrası, greft eritrositler hazırlanmıştır ise 3 saat (SCS) için buz üzerinde bekletildi. Klinik ortamda, bu alma ve geri tablo hazırlanması için gerekli süreyi simüle eder. NEVKP 10 saat süre ile gerçekleştirildi. Fizyolojik koşulları sağlamak ve in vivo böbrek çevredeki simüle etmek için, organ odası ısıtılmış ve mühürlü olmalıdır. Perfüzyon ve idrar değiştirme çözüm kan gazı analizi, onkotik basıncı ve ozmolarite için fizyolojik değerleri temsil etmelidir. In situ Yorkshire domuzlar elde edilen normal değerler (bazal değerleri), her şekil açıklamasında bulunan, sırasıyla (3-13 Şekiller). NEVKP amacı greft yeterli oksijen ve beslenme ile birlikte olduğundan emin olmaktır. Iskemi ca gibiBöylece, intrarenal direncini artırarak istikrarlı bir basınç sabit akış elde, vazokonstriksiyon kullanan yeterli oksijenlenme için iyi bir göstergedir. 37 ° C hedef greft sıcaklığı SCS sonra organ yeniden ısıtma yoluyla ulaşıldıktan sonra, debi değerleri ve intrarenal direnç bütün perfüzyon boyunca etrafında 60-80 mmHg sabit fizyolojik basınç sabit kalır (Şekil 3 ve 4). idrar üretimi miktarı perfüzyon çözeltisi (Şekil 5) bileşimine esas olarak bağlıdır. Venöz ve arteriyel pO 2 saatlik ölçümleri böbrek metabolik aktivitesini gözler önüne sermektedir. (Şekil 6) 14 - oksijen tüketimi denklemini (pO 2 ven) x akışı / ağırlık (pO 2 sanatı) kullanılarak hesaplanmıştır. Perfüzyon pH sırasında, HCO 3 ve elektrolitler müdahaleleri (- 10 Şekil 7) gerektirmeden stabildir. AS Gerçek zamanlıT ve laktat ölçümleri hücresel hasarı izlemek için hizmet vermektedir. Hücre hasarının parametrelerin herhangi bir artış NEVKP süre (Şekil 11 ve 12) içinde tespit edilir. Perfüzyon çözeltisinin ozmolaritesi stabil (Şekil 13). Histolojik değerlendirme küçük değişiklikler (- 16 Şekil 14) ortaya koymaktadır. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig3.jpg" /> Standart sapma (ml / dakika) ile Şekil 3. Ortalama arteryel akışı. Perfüzyon boyunca akış fizyolojik aralıkta kalır. Yerinde ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: sanatı anlamına gelir. Akış: 170 ± 57 ml / dak (aralık 83-325 ml / dakika). <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig4.jpg" /> Şekil 4. İntrarenal direnç (İKO), ortalama ve standart sapma (mmHg / </strong&gt; Ml / dk). Ortalama arter basıncı (MAP) 60 ila 80 mmHg arasında sabit kalır. intrarenal direnç sürekli / ml / dak 0.5 mmHg altında. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig5.jpg" /> Şekil 5. Toplam idrar hacmi, ortalama ve standart sapma (ml). Total idrar hacmi ağırlıklı perfüzyon çözeltisi bileşimine bağlıdır. idrar üretimi düşük onkotik basıncı ve osmolarite kadar yüksek olur. <img alt="Şekil 6," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig6.jpg" /> Şekil 6. oksijen tüketimi, ortalama ve standart sapma (ml / dk / g). <img alt="Şekil 7," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig7.jpg" /> Şekil 7. pH venöz, ortalama ve standart sapma. PH remabikarbonat idaresi olmadan fizyolojik aralıkta ins sabiti. Yerinde ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: pH 7.46 ± 0.06 (aralık 7,34-7,63). <img alt="Şekil 8," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig8.jpg" /> Şekil 8. HCO3- venöz, ortalama ve standart sapma (mmol / L). HCO3 bikarbonat uygulanmadan fizyolojik aralıkta kalır. Yerinde ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: HCO 3 30.3 ± 2.4 mg / L (aralık 21,6-35,8 mg / L). <img alt="Şekil 9," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig9.jpg" /> Şekil 9. Venöz sodyum konsantrasyonu, ortalama ve standart sapma (mmol / L). Sodyum fizyolojik aralıkta kalır. In situ olarak ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: 137.1 &amp;177.; 3.8 mg / L (aralık 118,7-140,9 mmol / L). <img alt="Şekil 10," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig10.jpg" /> Şekil 10. Venöz potasyum konsantrasyonunun ortalama ve standart sapma (mmol / L). Potasyum fizyolojik aralığında sabit kalır. Yerinde ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: 3.85 ± 0.46 mg / L (aralık 3,5-5,36 mg / L). <img alt="Şekil 11," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig11.jpg" /> Şekil 11. Venöz aspartat aminotransferaz, ortalama ve standart sapma. (AST; U / L) ex vivo normotermik böbrek perfüzyon yılında AST hücre hasarı işaretleyici gösterir. AST değerleri perfüzyon boyunca düşüktür. <img alt="Şekil 12" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig12.jpg" /> Şekil 12: Laktat<html> , Ortalama ve standart sapma (mg / L). Ex vivo normotermik böbrek perfüzyon olarak, laktat hücre hasarı işaretleyici temsil eder. değerler perfüzyon boyunca stabildir. <img alt="Şekil 13," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig13.jpg" /> Şekil 13:. Serum Ozmolarite, ortalama ve standart sapma (mosm / L) perfüzyon çözeltisi içinde sabit bir ozmolarite düşük ama sürekli idrar üretimini korur. In situ olarak ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: 282 ± 1.7 mOsm / L (erim 279-283 mOsm / L). <img alt="Şekil 14" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig14.jpg" /> Şekil 14:. Histoloji (H &amp; E) hafif tübüler vakuolizasyon gösteren Kortikomedüller kavşak 50X / 200X büyütme. Nekroz belirtisi yok.arget = &quot;_ blank&quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. <img alt="Şekil 15" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig15.jpg" /> Şekil 15: Histoloji (PAS) hafif tübüler vakuolizasyon gösteren Kortikomedüller kavşak 50X / 200X büyütme.. Nekroz belirtisi yok. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52909/52909fig15large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 16" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig16.jpg" /> Şekil 16:. Histoloji (TÜNEL boyama) 25X / 200X büyütme. Çok nadiren çekirdekler apoptoz çok düşük oranları gösteren lekeli. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52909/52909fig16large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation at JoVE.com

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Şiddetli organ yetersizliği nakli için marjinal böbrek greft artan kullanımı sonuçlandı. Marjinal greftler, özellikle kötü soğuk depolama tahammül çünkü bu, alternatif depolama yöntemleri ilgi tetikledi. Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon tekniği (NEVKP) transplantasyon öncesinde böbrek greft için yeni bir koruma yöntemi temsil eder.

Normotermik<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Böbrek Koruma Böbrek Nakli Perfüzyon önce greftler

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a ...

normothermic-ex-vivo-kidney-perfusion-for-preservation-kidney-grafts

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

18.9K Görüntüleme.  Toronto General Hospital.  Şiddetli organ yetersizliği nakli için marjinal böbrek greft artan kullanımı sonuçlandı. Marjinal greftler, özellikle kötü soğuk depolama tahammül çünkü bu, alternatif depolama yöntemleri ilgi tetikledi. Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon tekniği (NEVKP) transplantasyon öncesinde böbrek greft için yeni bir koruma yöntemi temsil eder. 

Video: Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize their blood glucose levels, islet transplantation has been proposed to be a potential treatment for type 1 diabetes 1,2. More recently, advances in human islet transplantation have further strengthened this view 1,3. However, two major limitations prevent islet transplantation from being a widespread clinical reality: (a) the requirement for large numbers of islets per patient, which severely reduces the number of potential recipients, and (b) the need for heavy immunosuppression, which significantly affects the pediatric population of patients due to their vulnerability to long-term immunosuppression. Strategies that can overcome these limitations have the potential to enhance the therapeutic utility of islet transplantation.
Islet transplantation under the mouse kidney capsule is a widely accepted model to investigate various strategies to improve islet transplantation. This experiment requires the isolation of high quality islets and implantation of islets to the diabetic recipients. Both procedures require surgical steps that can be better demonstrated by video than by text. Here, we document the detailed steps for these procedures by both video and written protocol. We also briefly discuss different transplantation models: syngeneic, allogeneic, syngeneic autoimmune, and allogeneic autoimmune.

Transplantation of isolated islets has been proposed to be a potential treatment for type 1 diabetes. Here we describe a method to isolate islets from mouse pancreata and transplant them to the subcapsular space of the kidney.

Murin Islet İzolasyon ve subkapsüler Böbrek Nakli Bir Yöntem

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

Tıp

Steps for the Autologous Ex vivo Perfused Porcine Liver-kidney Experiment

The use of ex vivo perfused models can mimic the physiological conditions of the liver for short periods, but to maintain normal homeostasis for an extended perfusion period is challenging. We have added the kidney to our previous ex vivo perfused liver experiment model to reproduce a more accurate physiological state for prolonged experiments without using live animals. Five intact livers and kidneys were retrieved post-mortem from sacrificed pigs on different days and perfused for a minimum of 6 hr. Hourly arterial blood gases were obtained to analyze pH, lactate, glucose and renal parameters. The primary endpoint was to investigate the effect of adding one kidney to the model on the acid base balance, glucose, and electrolyte levels. The result of this liver-kidney experiment was compared to the results of five previous liver only perfusion models. In summary, with the addition of one kidney to the ex vivo liver circuit, hyperglycemia and metabolic acidosis were improved. In addition this model reproduces the physiological and metabolic responses of the liver sufficiently accurately to obviate the need for the use of live animals. The ex vivo liver-kidney perfusion model can be used as an alternative method in organ specific studies. It provides a disconnection from numerous systemic influences and allows specific and accurate adjustments of arterial and venous pressures and flow.

Steps for the Autologous Ex vivo Perfused Porcine Liver-kidney Experiment

Study of the animal organ physiology can be achieved by performing an experimental ex vivo perfusion system. The addition of a porcine kidney, as a homeostatic organ to our previously developed ex vivo liver perfusion model can be a principal step to achieve a better physiological environment.

The use of ex vivo perfused models can mimic the physiological conditions of the liver for short periods, but to maintain normal homeostasis for an ...

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for liver transplantation die without receiving an organ transplant or are delisted for disease progression. One strategy to increase the donor pool is the utilization of marginal grafts, such as fatty livers, grafts from older donors, or donation after cardiac death (DCD). The current preservation technique of cold static storage is only poorly tolerated by marginal livers resulting in significant organ damage. In addition, cold static organ storage does not allow graft assessment or repair prior to transplantation.
These shortcomings of cold static preservation have triggered an interest in warm perfused organ preservation to reduce cold ischemic injury, assess liver grafts during preservation, and explore the opportunity to repair marginal livers prior to transplantation. The optimal pressure and flow conditions, perfusion temperature, composition of the perfusion solution and the need for an oxygen carrier has been controversial in the past.
In spite of promising results in several animal studies, the complexity and the costs have prevented a broader clinical application so far. Recently, with enhanced technology and a better understanding of liver physiology during ex vivo perfusion the outcome of warm liver perfusion has improved and consistently good results can be achieved.
This paper will provide information about liver retrieval, storage techniques, and isolated liver perfusion in pigs. We will illustrate a) the requirements to ensure sufficient oxygen supply to the organ, b) technical considerations about the perfusion machine and the perfusion solution, and c) biochemical aspects of isolated organs.

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

Marginal grafts, such as fatty livers, grafts from older donors, or livers retrieved after cardiac death (DCD) tolerate conventional, cold static storage only poorly. We developed a novel model of subnormothermic ex vivo liver perfusion for preservation, assessment, and repair of marginal liver grafts prior to transplantation.

Subnormothermic Tekniği<em&gt; Ex vivo</em&gt; Karaciğer Depolama, Değerlendirme Perfüzyon ve Marjinal Karaciğer Greft Onarımı

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for ...

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely replicates both the technical and pathological processes that occur in human renal transplantation. Although mouse models of allogeneic rejection in organs other than the kidney exist, and are more technically feasible, there is evidence that different organs elicit disparate rejection modes and dynamics, for instance the time course of rejection in cardiac and renal allograft differs significantly in certain strain combinations. This model is an attractive tool for many reasons despite its technical challenges. As inbred mouse strain haplotypes are well characterized it is possible to choose donor and recipient combinations to model acute allograft rejection by transplanting across MHC class I and II loci. Conversely by transplanting between strains with similar haplotypes a chronic process can be elicited were the allograft kidney develops interstitial fibrosis and tubular atrophy. We have modified the surgical technique to reduce operating time and improve ease of surgery, however a learning curve still needs to be overcome in order to faithfully replicate the model. This study will provide key points in the surgical procedure and aid the process of establishing this technique.

Here, we present a protocol to study the immunology of rejection. The surgical model presented reports a short operating time and a concise technique. Depending on the donor-recipient strain combination, the transplanted kidney may develop acute cellular rejection or chronic allograft damage, defined by interstitial fibrosis and tubular atrophy.

Fare Böbrek Transplantasyonu: Allogreft Reddi Modelleri

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous perfusion of organs provides the opportunity to improve organ quality and allows ex situ viability assessment of donor livers prior to transplantation. This video article provides a step by step protocol for ex situ normothermic machine perfusion (37 &#176;C) of human donor livers using a device that provides a pressure and temperature controlled pulsatile perfusion of the hepatic artery and continuous perfusion of the portal vein. The perfusion fluid is oxygenated by two hollow fiber membrane oxygenators and the temperature can be regulated between 10 &#176;C and 37 &#176;C. During perfusion, the metabolic activity of the liver as well as the degree of injury can be assessed by biochemical analysis of samples taken from the perfusion fluid. Machine perfusion is a very promising tool to increase the number of livers that are suitable for transplantation.

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Here we present a protocol describing oxygenated ex situ machine perfusion of donor liver grafts. This article contains a step by step protocol to procure and prepare the liver graft for machine perfusion, prepare the perfusion fluid, prime the perfusion machine and perform oxygenated normothermic machine perfusion of the liver graft.

Donör karaciğerleri Ex Situ Normotermik Makinesi Perfüzyonu

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous ...

Murine Kidney Transplant Technique

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique using the donor aorta to form the arterial anastomosis instead of the renal artery was developed and reported in 1993 by Kalina and Mottram 2 with a further advancement coming from the same laboratory in 1999 3. While one can become proficient in this model, a search of the literature reveals that many labs still experience a high proportion of graft loss due to arterial thrombosis. We describe here a technique that was devised in our laboratory that vastly reduces the arterial thrombus reported by others 4,5. This is achieved by forming a heel-and-toe cuff of the donor infra-renal aorta that facilitates a larger anastomosis and straighter blood flow into the kidney.

The goal of this manuscript is to describe the steps required to perform a kidney transplant in a mouse, paying particular attention to the details of the arterial anastomosis.

Murin Böbrek nakli Tekniği

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been introduced as a method to evaluate and modify organ function. NEVLP has many advantages in comparison to hypothermic and subnormothermic perfusion including reduced preservation injury, restoration of normal organ function under physiologic conditions, assessment of organ performance, and as a platform for organ repair, remodeling, and modification. Both murine and porcine NEVLP models have been described. We demonstrate a rat model of NEVLP and use this model to show one of its important applications &#8212; the use of a therapeutic molecule added to liver perfusate. Catalase is an endogenous reactive oxygen species (ROS) scavenger and has been demonstrated to decrease ischemia-reperfusion in the eye, brain, and lung. Pegylation has been shown to target catalase to the endothelium. Here, we added pegylated-catalase (PEG-CAT) to the base perfusate and demonstrated its ability to mitigate liver preservation injury. An advantage of our rodent NEVLP model is that it is inexpensive in comparison to larger animal models. A limitation of this study is that it does not currently include post-perfusion liver transplantation. Therefore, prediction of the function of the organ post-transplantation cannot be made with certainty. However, the rat liver transplant model is well established and certainly could be used in conjunction with this model. In conclusion, we have demonstrated an inexpensive, simple, easily replicable NEVLP model using rats. Applications of this model can include testing novel perfusates and perfusate additives, testing software designed for organ evaluation, and experiments designed to repair organs.

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant liver donor shortage, and criteria for liver donors have been expanded. Normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been developed to evaluate and modify organ function. This study demonstrates a rat model of NEVLP and tests the ability of pegylated-catalase, to mitigate liver preservation injury.

Ex Vivo Normothermic karaciğer perfüzyon küçük bir hayvan Model

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Orthotopic Kidney Auto-Transplantation in a Porcine Model Using 24 Hours Organ Preservation And Continuous Telemetry

In the present era of organ transplantation with critical organ shortage, various strategies are employed to expand the pool of available allografts for kidney transplantation (KT). Even though, the use of allografts from extended criteria donors (ECD) could partially ease the shortage of organ donors, ECD organs carry a potentially higher risk for inferior outcomes and postoperative complications. Dynamic organ preservation techniques, modulation of ischemia-reperfusion and preservation injury, and allograft therapies are in the spotlight of scientific interest in an effort to improve allograft utilization and patient outcomes in KT.
Preclinical animal experiments are playing an essential role in translational research, especially in the medical device and drug development. The major advantage of the porcine orthotopic auto-transplantation model over ex vivo or small animal studies lies within the surgical-anatomical and physiological similarities to the clinical setting. This allows the investigation of new therapeutic methods and techniques and ensures a facilitated clinical translation of the findings. This protocol provides a comprehensive and problem-oriented description of the porcine orthotopic kidney auto-transplantation model, using a preservation time of 24 hours and telemetry monitoring. The combination of sophisticated surgical techniques with highly standardized and state-of-the-art methods of anesthesia, animal housing, perioperative follow up, and monitoring ensure the reproducibility and success of this model.

Large animal models play an essential role in preclinical transplantation research. Due to its similarities to the clinical setup, the porcine model of orthotopic kidney auto-transplantation described in this article provides an excellent in vivo setting for the testing of organ preservation techniques and therapeutic interventions.

24 Saat Organ Koruma Ve Sürekli Telemetri Kullanılarak Bir Domuz Modelinde Ortotopik Böbrek OtoTransplantasyonu

In the present era of organ transplantation with critical organ shortage, various strategies are employed to expand the pool of available allografts for ...

Digital Home-Monitoring of Patients after Kidney Transplantation: The MACCS Platform

The MACCS (Medical Assistant for Chronic Care Service) platform enables secure sharing of key medical information between patients after kidney transplantation and physicians. Patients provide information such as vital signs, well-being, and medication intake via smartphone apps. The information is transferred directly into a database and electronic health record at the kidney transplant center, which is used for routine patient care and research. Physicians can send an updated medication plan and laboratory data directly to the patient app via this secure platform. Other features of the app are medical messages and video consultations. Consequently, the patient is better-informed, and self-management is facilitated. In addition, the transplant center and the patient's local nephrologist automatically exchange notes, medical reports, laboratory values, and medication data via the platform. A telemedicine team reviews all incoming data on a dashboard and takes action, if necessary. Tools to identify patients at risk for complications are under development. The platform exchanges data via a standardized secure interface (Health Level 7 (HL7), Fast Healthcare Interoperability Resources (FHIR)). The standardized data exchange based on HL7 FHIR guarantees interoperability with other eHealth solutions and allows rapid scalability to other chronic diseases. The underlying data protection concept is in concordance with the latest European General Data Protection Regulation. Enrollment started in February 2020, and 131 kidney transplant recipients are actively participating as of July 2020. Two large German health insurance companies are currently funding the telemedicine services of the project. The deployment for other chronic kidney diseases and solid organ transplant recipients is planned. In conclusion, the platform is designed to enable home monitoring and automatic data exchange, empower patients, reduce hospitalizations, and improve adherence, and outcomes after kidney transplantation.

The MACCS platform&#160;is a comprehensive telemedicine concept aiming at better outcomes after kidney transplantation by sharing key medical information between patients and physicians. A telemedicine team reviews incoming data to detect potential complications and to improve adherence in kidney transplant recipients to achieve better long-term outcomes.

Böbrek Nakli Sonrası Hastaların Dijital Evde İzlenmesi: MACCS Platformu

The MACCS (Medical Assistant for Chronic Care Service) platform enables secure sharing of key medical information between patients after kidney ...

Robot-Assisted Kidney Transplantation

This paper describes robot-assisted kidney transplantation (RAKT) from a living donor. The robot is docked between the parted legs of the patient, placed in the supine Trendelenburg position. Kidney allografts are provided by a living donor. Before vascular anastomosis, the kidney allograft is prepared by inserting a double-J stent in the ureter, and the temperature for the anastomosis is lowered by wrapping it in an ice-packed gauze. A 12 mm or 8 mm port for the robotic camera and three 8 mm ports for robotic arms are placed. A peritoneal pouch is created for the kidney allograft by raising the peritoneal flaps on both sides over the psoas muscle before dissecting the iliac vessels and bladder. A 6 cm Pfannenstiel incision is made to insert the kidney into the peritoneal pouch, lateral to the right iliac vessels. 
After clamping the external iliac vein with Bulldogs clamps, a venotomy is performed, and the graft renal vein is anastomosed to the external iliac vein in an end-to-side continuous manner with a 6/0 polytetrafluoroethylene suture. After clamping the graft renal vein, the iliac vein is declamped. This is followed by clamping of the external iliac artery, arteriotomy, arterial anastomosis with a 6/0 polytetrafluoroethylene suture, clamping of the graft renal artery, and declamping of the external iliac artery. Reperfusion is then carried out, and ureteroneocystostomy is performed using the Lich-Gregoir technique. The peritoneum is closed at a few locations with polymer locking clips, and a closed-suction drain is placed through one of the working ports. After deflating the pneumoperitoneum, all incisions are closed.

This paper provides technical details for robot-assisted kidney transplantation from a living donor.

Robot Yardımlı Böbrek Nakli

This paper describes robot-assisted kidney transplantation (RAKT) from a living donor. The robot is docked between the parted legs of the patient, placed ...