The project was supported by CTSA (UL1TR000058) from the National Center for Advancing Translational Sciences) and the CCTR Endowment Fund of Virginia Commonwealth University. The contents are solely the responsibility of the authors and do not necessarily represent official views of the National Center for Advancing Translational Sciences or the National Institutes of Health.

Tüm kan-çizim prosedürleri lisanslı ve sertifikalı uzmanları tarafından yapılmalıdır. Araştırma için insan deneklerin Kullanımı Kurumsal Değerlendirme Kurulu veya diğer uygun otorite onayı gerektirir. Bilgilendirilmiş onam ile ilgili ve katılımcı kimlik koruyan özel tedbirler takip edilmesi gerekir. Bu protokolde yer alan tüm deneyler insan kanı ve / veya kan ürünleri ve uygun kişisel koruyucu ekipmanın kullanımı her zaman giyilen gerekir içerir. Atık biohazard olarak kabul ve yönetmeliklere uygun olarak bertaraf edilmelidir. 1. Damara Girme <ol><li> Hasta / katılımcıyı belirlemek ve mevcut kayıtları ile onaylayın. Detaylı çalışma açıklar ve bir bilgilendirilmiş onam olsun. </li><li> Düz sabit bir yüzeye işaretli tüplere hasta için kurulmuş bir tepsi var. </li><li> Prosedürü açıklar ve desteklenen kol ile rahatça hasta koltuğu yapmak. Hastayı o ya da sh bilgilendirine küçük bir tutam hissedecek ve prosedür boyunca hareketsiz kalmalıdır. </li><li> Adaptöre iğne takın. </li><li> Ellerinizi yıkayın ve eldiven giyin. </li><li> Dışa merkezine konsantrik daireler% 70 izopropil alkol ile temizleyerek venipunktür için antekübital fossa hazırlayın. 30 saniye süreyle kurumaya siteyi bırakın. </li><li> Palpasyonla uygun ven tanımlayın. </li><li> (Hala radyal nabız duygu ise) çok sıkı olmadığından emin yapma delinme sitesinde Yukarıdaki turnike 3-4 uygulayın. </li><li> Tek bir hareketle cilde iğne 15-30 derece eğimi sokarak Damara gerçekleştirin. Iğne ile kan toplama tüpü itin ve tam kan 9 ml toplamak. </li><li> Turnikeyi çıkarın. Iğneden borusunu sökün. </li><li> İğneyi geri çek ve iğne çıkarılması öncesinde ponksiyon yerinde gazlı bez kare uygulayın. Uygun bir biyolojik tehlikeli atık kabına iğne bertaraf edin. </li><li> Pr korumak için hasta isteyinPonksiyon yerinde essure. </li><li> Tüpler Etiket </li><li> Kanama durduktan emin olmak için lastik sitesini kontrol edin. </li><li> Hasta (ağrı yok, şişlik veya hafif sersemlik) iyi hissediyor olmadığını sormak, gazlı kare üzerinde yapışkan bandaj veya bandı uygulayın </li><li> Taburcu öncesi hasta / katılımcıyı ederiz. </li></ol> 2. L-PRF hazırlanması <ol><li> Hemen kırmızı tepesinde kuru cam tüp içinde venöz kan alımından sonra, Santrifüj yerleştirin. </li><li> Uygun bir sayaç dengesi yerleştirdikten sonra oda sıcaklığında 12 dakika boyunca 400 x g&#39;de santrifüj. </li><li> Döngü sonunda borusunu sökün. Platle açısından zayıf plazmanın (PPP), trombosit bakımından zengin bir fibrin (L-PRF) ve RBC bazı (Şekil 1): üç kat dikkat edin. </li><li> Bir pipet kullanarak PPP aspire. Kullanımı cımbız hafifçe L-PRF çekin ve steril, delikli metal örgü yerleştirin. </li><li> Cerrahi neşter kullanılarak, dikkatli bir devetüyü bırakarak RBC tabakasının toplu kazımaky kat sağlam. </li><li> Yavaşça 30 sn (steril metal plaka, yaklaşık ağırlığı 225 gr kullanarak) L-PRF pıhtı sıkıştırmak. Trombosit fakir plazma dışarı sıkılmış olacak. </li><li> Plaka çıkarın ve yavaşça L-PRF zarı kaldırın. L-PRF membran deneyler 12 kullanıma hazır hale gelir. </li></ol> 3. Tek Eksenli Çekme Testi <ol><li> Kullanım kolaylığı için bir filtre kağıdı üzerine yerleştirin L-PRF zarları (n = 6) ve (7,5 mm&#39;lik bir ölçü uzunluğu ile dar noktası 2,75 mm) ölçüye metal kalıpların kullanılması &quot;köpek kemiği&quot; olarak punch. </li><li> Üç noktalar her numunenin kalınlığını ölçün ve ortalamasını alır. </li><li> Dikkatle tek eksenli test sisteminin çene kulpları merkezinde L-PRF zarı meşgul. </li><li> Dikkatle L-PRF zarı maruz filer kağıt desteğini gözyaşı. </li><li> Program enstrüman hareketli kafa sabit bir oranda (10.0 mm / dak) faaliyet böylece ve ne zaman L denemeyi başlatmakPRF hala ıslak. </li><li> Tek eksenli test sistemi eşlik yazılım kopma, kırmak için enerji ve gerginlik elastik modülü kaydedin. Bu değerler otomatik olarak hesaplanır ve hiçbir kullanıcı tanımlı girdi gereklidir. Şekil 3 bakınız. </li></ol> 4. Dikiş Tutma Gücü <ol><li> Talep L-PRF kullanım kolaylığı için, bir filtre kağıdı üzerinde zarları (n = 3) ve cerrahi bir neşter kullanılarak ölçüm dikdörtgen örneği (10 mm x 25 mm) halinde kesilir. </li><li> Her numune (3 ortalama) kalınlığı ölçülür. </li><li> Paslanmaz çelik ortodontik ligatür tel (çapı 220 mm) kullanılarak numunenin merkezinde bir iğne deliğine yapın. </li><li> Bir döngü oluşturmak ve çekme test makinesine bunu düzeltmek için iğne deliğinden ligature tel geçirin. Alt çene kavrama 13 L-PRF membran kenarını yerleştirin. </li><li> Hareketli kafa sabit bir oranda (10 mm / dak) ve başlangıcında operasyon böylece aleti Programdeney. </li><li> Tek eksenli test sistemi eşlik yazılım kopma, kırmak için enerji ve gerginlik elastik modülü kaydedin. Bu değerler otomatik olarak hesaplanır ve hiçbir kullanıcı tanımlı girdi gereklidir. Şekil 3 bakınız. </li></ol> 5. Morfolojik Sınavı <ol><li> 10 mm dermal biyopsi yumruk kullanarak SEM muayene için L-PRF örnekleri hazırlayın ve 24 plaka koyun. </li><li> PBS ile yıkayın örnekleri ve 20 dakika boyunca (PBS içinde)% 2.5 glutaraldehid ile tespit edin. </li><li> Ardışık olarak 5 dakika her biri için etanol konsantrasyonunun (% 50,% 70,% 80,% 90 ve% 100) artan içine daldırma ile örnekleri kurutmak. </li><li> 5 dakika boyunca% 100 HMDS&#39;nin (Heksametildisilazan) 0.5 ml tedavi edin. HMDS 14 fazla kaldırmak için O / N havalandırınız. </li><li> Bir çift taraflı bant kullanarak koçanları Mount örnekleri, 70 saniye boyunca platin-ceket sputter ve Hızlanma çalışan bir taramalı elektron mikroskobu altında incelenmesieration 20 kV gerilim (veya uygun ayar). </li></ol> L-PRF, tripsin Duyarlılıkları ve Ninhydrin Testi 6. Genipin Çapraz <ol><li> Genipin çapraz bağlanmış L-PRF hazırlanması için, PBS ile yıkayın ve membranlar 48 saat boyunca (% 70 etanol içinde)% 1 genipin çözeltisi 4 ml ile ıslatın. Aşırı genipin 15, 16 kaldırmak için deneylerden önce PBS ile durulayın. </li><li> Tripsin tarafından degradasyona direnci ile L-PRF bölgesinin genipin çapraz bağlanma kararlılığını değerlendirmek. Talep L-PRF membran (n = 3) ve% 0.01 tripsin 500 ul çapraz bağlanmış L-PRF genipin ve tripsin günlük değişikliği ile 3 gün süre ile 37 ° C&#39;de inkübe edildi. <ol><li> Başından pozlama ve 3. günde de fark enzim ve kilo enzimatik bozulmaya 17 temsil sonuna kadar günde 1 önce de örnekleri tartın. </li></ol></li><li> Tahlili ninhidrin ile genipin muamele edilmiş L-PRF (G-PRF) &#39;de çapraz bağlanma miktarını ölçmek. İlk standart bükecektir hazırlamake glisin kullanılarak (1 mM-0.031 mM) eğrisi serbest amino asit konsantrasyonu (FAA) ve absorbans arasındaki ilişkiyi kurmak. <ol><li> 2,% 1 ml ısı PRF örnekleri (a / h), 100 ° C &#39;de 15 dakika boyunca ninhidrin. </li><li> Çözelti oda sıcaklığına soğumaya bırakın ve% 50 etanol içinde 1.5 ml ekleyin izin verin. </li><li> Uygun bir spektrofotometre kullanılarak 570 nm&#39;de absorbans analiz edin. </li><li> 15 aşağıdaki formül kullanılarak çapraz bağlama yüzdesini belirlemek </li></ol></li></ol><img alt="Denklem 1" src="/files/ftp_upload/53221/53221eq1.jpg" /> 7. MTS Hücre Proliferasyon Deneyi <ol><li> % 80 birleşen tek tabakalı elde edilinceye kadar, T-75 şişelerinde Minimum Essential Medium alfa modifikasyonu (αMEM) &#39;de MC3T3 (fare kalvaryal preosteoblasts) büyütün. </li><li> Taze, steril L-PRF membran (hücre kültürü kaput içinde L-PRF tüp açın) hazırlayın ve yeni bir hücre kültürü çanak üzerine membran aktarın. </li><li> Aspire şişeye ortam ve PBS ile yıkayın tek tabaka 5 mi% 0.05 tripsin ilave et ve 5 dakika boyunca 37 o C inkübatör içine yerleştirilir, 5 için 400 x g&#39;de bir santrifüj tüpüne ve santrifüj içine şişenin içeriğini pipet Min. </li><li> Yavaşça, süpernatant boşaltacaktır hücre pelletini kırmak için tüp dokunun ve taze α MEM 4 ml ile yeniden askıya hemasitometre hücre süspansiyonu (50 ul) ve tripan mavisi (50 ul) oluşan bir karışım, dağıtır ve sayısını Hücreler </li><li> Tohum zarlar içinde hücreleri korumak için, L-PRF membran üzerine yerleştirilen 10 mm cam klonlama halkalar içinde 4x10 5 hücreleri (halkaları 24 saat sonra çıkarılabilir). </li><li> 4. günde, 10 dakika boyunca PBS ile üç kez yapıları yıkayın. </li><li> Her bir oyuğa, serumsuz ortam ve 200 ul MTS reaktifi 1 ml ilave edilir ve 37 ° C &#39;de 2 saat süre ile inkübe edilir. </li><li> 490 nm&#39;de 200 ul alikotları absorbansı ölçülür. </li></ol>

<ol>
	<li>Marx, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma+Growth+factor+enhancement+for+bone+grafts.">Platelet-rich plasma Growth factor enhancement for bone grafts.</a> Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 85 (6), 638-646 (1998).</li><li>Rodriguez, I. A., Growney Kalaf, E. A., Bowlin, G. L., Sell, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma+in+bone+regeneration:+Engineering+the+delivery+for+improved+clinical+efficacy.">Platelet-rich plasma in bone regeneration: Engineering the delivery for improved clinical efficacy.</a> BioMed Res In. 2014, (2014).</li><li>Del Corso, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Knowledge+and+Perspectives+for+the+Use+of+Platelet-Rich+Plasma+(PRP)+and+Platelet-Rich+Fibrin+(PRF).">Current Knowledge and Perspectives for the Use of Platelet-Rich Plasma (PRP) and Platelet-Rich Fibrin (PRF).</a> in Oral and Maxillofacial Surgery Part 1: Periodontal and Dentoalveolar Surgery. Curr Pharm Biotechno. 13 (7), 1207-1230 (2012).</li><li>Mazzucco, L., Balbo, V., Cattana, E., Guaschino, R., Borzini, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Not+every+PRP-gel+is+born+equal+Evaluation+of+growth+factor+availability+for+tissues+through+four+PRP-gel+preparations:+Fibrinet,+RegenPRP-Kit,+Plateltex+and+one+manual+procedure.">Not every PRP-gel is born equal Evaluation of growth factor availability for tissues through four PRP-gel preparations: Fibrinet, RegenPRP-Kit, Plateltex and one manual procedure.</a> Vox San. 97 (2), 110-118 (2009).</li><li>Fern&#225;ndez-Barbero, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+and+morphological+characterization+of+platelet-rich+plasma+gel.">Flow cytometric and morphological characterization of platelet-rich plasma gel.</a> Clin Oral Implants Re. 17 (6), 687-693 (2006).</li><li>Li, Z., Guan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogels+for+cardiac+tissue+engineering.">Hydrogels for cardiac tissue engineering.</a> Polymer. 3 (2), 740-761 (2011).</li><li>Zhu, J., Cai, B., Ma, Q., Chen, F., Wu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+bricks-enriched+platelet-rich+plasma+gel+for+injectable+cartilage+engineering+&#8211;+an+in+vivo+experiment+in+nude+mice.">Cell bricks-enriched platelet-rich plasma gel for injectable cartilage engineering &#8211; an in vivo experiment in nude mice.</a> J Tissue Eng Regen Med. 7 (10), 819-830 (2013).</li><li>Dohan, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+fibrin+(PRF):+a+second-generation+platelet+concentrate.+Part+I:+technological+concepts+and+evolution.">Platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part I: technological concepts and evolution.</a> Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 101 (3), e37-e44 (2006).</li><li>Dohan, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+fibrin+(PRF):+a+second-generation+platelet+concentrate.+Part+II:+platelet-related+biologic+features.">Platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part II: platelet-related biologic features.</a> Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 101 (3), e45-e50 (2006).</li><li>Choukroun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+fibrin+(PRF):+a+second-generation+platelet+concentrate.+Part+V:+histologic+evaluations+of+PRF+effects+on+bone+allograft+maturation+in+sinus+lift.">Platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part V: histologic evaluations of PRF effects on bone allograft maturation in sinus lift.</a> Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 101 (3), 299-303 (2006).</li><li>Dohan Ehrenfest, D. M., Bielecki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+the+Fibrin+Architecture+and+Leukocyte+Content+Influence+the+Growth+Factor+Release+of+Platelet+Concentrates?+An+Evidence-based+Answer+Comparing+a+Pure+Platelet-Rich+Plasma+(P-PRP)+Gel+and+a+Leukocyte-+and+Platelet-Rich+Fibrin+(L-PRF).">Do the Fibrin Architecture and Leukocyte Content Influence the Growth Factor Release of Platelet Concentrates? An Evidence-based Answer Comparing a Pure Platelet-Rich Plasma (P-PRP) Gel and a Leukocyte- and Platelet-Rich Fibrin (L-PRF).</a> Curr Pharma Biotechno. 13 (7), 1145-1152 (2012).</li><li>Dohan Ehrenfest, D. M., Rasmusson, L., Albrektsson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classification+of+platelet+concentrates:+from+pure+platelet-rich+plasma+(P-PRP)+to+leucocyte-+and+platelet-rich+fibrin+(L-PRF).">Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF).</a> Trends Biotechno. 27 (3), 158-167 (2009).</li><li>Mine, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suture+Retention+Strength+of+Expanded+Polytetrafluoroethylene+(ePTFE)+Graft.">Suture Retention Strength of Expanded Polytetrafluoroethylene (ePTFE) Graft.</a> Acta Med Okayam. 64 (2), 121-128 (2010).</li><li>Braet, F., De Zanger, R., Wisse, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drying+cells+for+SEM+,+AFM+and+TEM+by+hexamethyldisilazane:+a+study+on+hepatic+endothelial+cells.">Drying cells for SEM , AFM and TEM by hexamethyldisilazane: a study on hepatic endothelial cells.</a> J Micros. 186 (1), 84-87 (1997).</li><li>Yuan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+cross-linking+of+chitosan+microspheres+with+genipin+on+protein+release.">The effect of cross-linking of chitosan microspheres with genipin on protein release.</a> Carbohydr Poly. 68 (3), 561-567 (2007).</li><li>Sell, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-linking+methods+of+electrospun+fibrinogen+scaffolds+for+tissue+engineering+applications.">Cross-linking methods of electrospun fibrinogen scaffolds for tissue engineering applications.</a> Biomed Mater. 3 (4), (2008).</li><li>Gorczyca, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+characterization+of+genipin+cross-linked+porous+chitosan-collagen-gelatin+scaffolds+using+chitosan-CO2+solution.">Preparation and characterization of genipin cross-linked porous chitosan-collagen-gelatin scaffolds using chitosan-CO2 solution.</a> Carbohydr Poly. 102, 901-911 (2014).</li><li>Rozman, P., Semenic, D., Wislet-Gendebien, S. a. b. i. n. e. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+15.+The+Role+of+Platelet+Gel+in+Regenerative+Medicine.">Chapter 15. The Role of Platelet Gel in Regenerative Medicine.</a> Advances In Regenerative Medicine. , 319-349 (2011).</li><li>Dohan Ehrenfest, ., Lemo, D. M., Jimbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selecting+a+relevant+animal+model+for+testing+the+in+vivo+effects+of+Choukroun&#8217;s+platelet-rich+fibrin+(PRF):+Rabbit+tricks+and+traps.">Selecting a relevant animal model for testing the in vivo effects of Choukroun&#8217;s platelet-rich fibrin (PRF): Rabbit tricks and traps.</a> Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 110 (4), 413-416 (2010).</li><li>Guilak, F., Baaijens, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+tissue+engineering:+Ten+more+years+of+progress.">Functional tissue engineering: Ten more years of progress.</a> J Biomec. 47 (9), 1931-1932 (2014).</li><li>Guilak, F., Butler, D. L., Goldstein, S. A., Baaijens, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanics+and+mechanobiology+in+functional+tissue+engineering.">Biomechanics and mechanobiology in functional tissue engineering.</a> J Biomec. 47 (9), 1933-1940 (2014).</li><li>Collet, J. P., Shuman, H., Ledger, R. E., Lee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+elasticity+of+an+individual+fibrin+fiber+in+a+clot.">The elasticity of an individual fibrin fiber in a clot.</a> Proc Natl Acad Sci. 102 (26), 9133-9137 (2005).</li><li>Liu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+fibers+have+extraordinary+extensibility+and+elasticity.">Fibrin fibers have extraordinary extensibility and elasticity.</a> Science. 313 (5787), 634 (2006).</li><li>American National Standard. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+8:+Test+methods+for+vascular+prostheses.">Chapter 8: Test methods for vascular prostheses.</a> Association for the Advancement of Medica lnstrumentation Guidance document: Cardiovascular Implants - Tubular vascular prostheses. , 33-34 (2001).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok ve bu yayın ile ilgili herhangi bir çıkar çatışması yoktur bilinen olduğunu onaylayın.

Otolog trombosit konsantreleri nedeniyle büyüme faktörlerinin bolluğu rejeneratif tıp 18. alanındaki umut vericidir. Ancak, bu preparatlar genellikle cerrahi manipülasyon zor hale getiren bir tayin edilmiş bir yapıya sahip değildi. Birçok kez, süspansiyonlar ve jeller öngörülemeyen sonuçlara neden teslim yerinde etkin bir şekilde korunmaz. L-PRF trombosit evriminde büyük bir ilerleme aslında yakalanmış trombositler ile sağlam bir fibrin membran olmasıdır yoğunlaşmaktadır eder. Bu k...

The use of blood and blood-derived products to seal wounds and improve healing in different clinical situations started with fibrin glues, which are mainly fibrinogen concentrates. Addition of platelets to fibrin glue not only improved their strength but also promoted neoangiogenesis and regeneration. These benefits are attributed to the release of a variety of peptide growth factors from the alpha-granules of platelets upon activation1. Platelet concentrates (PC) were seen as a practical way to deliver growth factors2 and its use was driven by commercial interests rather than research characterization3. In fact, PCs are difficult to characterize unlike homogenous and defined pharmacological preparations, they are a potpourri of signaling molecules and blood cells (platelet and leukocytes) entrapped within a fibrin matrix. Different commercial and proprietary preparations yield a variety of PC that are different in cellular composition, growth factor recovery and kinetics of release4. 
It is important to realize that in most oral surgeries, platelet-rich plasma (PRP) preparations are used as a gel in open surgical wounds and not as platelet suspensions. In these situations, the gelation is induced by the addition of thrombin, calcium chloride, batroxobin or other agents and directly placed in the site of injury5. Due to rapid activation, fibrinogen polymerization is often incomplete and results in friable fibrin gels with very little mechanical strength. In addition, injectable PRP gels undergo rapid fibrinolysis6,7.
In contrast, the processes of blood coagulation (fibrinogen polymerization), platelet enrichment and activation occur simultaneously in the preparation of L-PRF8. The coagulation cascade is triggered when whole blood contacts the walls of a dry glass tube and continues throughout the centrifugation process. This results in the formation of a mechanically-strong blood clot (L-PRF) that can be surgically handled and used. 
Even though L-PRF has been investigated in terms of optimal methods of preparation, growth factor release and cell distribution9-11, detailed mechanical characterization of these membranes are lacking. This is significant gap in knowledge, given the popularity of these membranes in clinical practice as well as its potential to be used as a biomaterial. Current study focusses on the protocol for deriving L-PRF as well as methods that can be employed to study its mechanical properties. This data is intended to serve as baseline for ongoing studies investigating the viscoelastic properties of this interesting natural biomaterial.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Needle 19G</td>
			<td>BD</td>
			<td>305186</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Disposal Container</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>14-827-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red-Topped Glass Collection Tube</td>
			<td>BD</td>
			<td>8020129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Pads</td>
			<td>Tyco</td>
			<td>5750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bandage</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>5005989</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surshield</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SV*S19BL</td>
			<td>Safety winged infusion set</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Collection Assembly</td>
			<td>BD</td>
			<td>303380</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tourniquets</td>
			<td>BD</td>
			<td>367203</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brand Luer Adapter</td>
			<td>Vacutainer</td>
			<td>L42179</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intra-Spin System&#160;</td>
			<td>Intra-Lock International</td>
			<td>ISS110</td>
			<td>Centrifuge and Xpression L-PRF FabricationKit&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes (Serological &#38; Micro)</td>
			<td>Corning</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Exelint</td>
			<td>29552</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTS Bionix 200</td>
			<td>MTS Systems Corporation</td>
			<td></td>
			<td>Material testing systems</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTS Test Works 4</td>
			<td>MTS Systems Corporation</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Whatman Filter Paper</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>1004 070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SS Orthodontic ligature wire</td>
			<td>Patterson Dental</td>
			<td>628-4228</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 Proof Ethanol</td>
			<td>Koptec</td>
			<td>V1001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexamethyldisilazane (HMDS)</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>440191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium Mounting Stubs</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>16324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double Sided Carbon Tape</td>
			<td>PELCO Tabs</td>
			<td>16084-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscope</td>
			<td>JEOL</td>
			<td>LV 5610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>SH30042.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Incubator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Inc</td>
			<td>51026282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic-Antimicotic</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240-062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Genipin</td>
			<td>Wako</td>
			<td>078-03021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Media</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12000-022</td>
			<td>Minimum Essential Medium-Alpha</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTS Reagent</td>
			<td>Promega</td>
			<td>G1118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMS Reagent</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrophotometer</td>
			<td>BioTek</td>
			<td></td>
			<td>Epoch Spectrophotometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mm Glass Cloning Rings</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3166-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T-75 Flask</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430641</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Corning</td>
			<td>55-031-PB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ninhydrin 98%</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>454044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 Well Plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3987</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy Punch</td>
			<td>Acu Punch</td>
			<td>P1025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Micrometer</td>
			<td>Pittsburgh</td>
			<td>68305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G6257</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12 Well Plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3336</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 Well Plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3596</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

characterization of leukocyte-platelet rich fibrin, a novel biomaterial

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral surgery. Unlike platelet rich plasma (PRP) that is a gel or a suspension, Leukocyte-Platelet Rich Fibrin (L-PRF) is a solid 3D fibrin membrane generated chair-side from whole blood containing no anti-coagulant. The membrane has a dense three dimensional fibrin matrix with enriched platelets and abundant growth factors. L-PRF is a popular adjunct in surgeries because of its superior handling characteristics as well as its suturability to the wound bed. The goal of the study is to demonstrate generation as well as provide detailed characterization of relevant properties of L-PRF that underlie its clinical success.

(Üst, orta ve alt) tabakası Şekil 2&#39;de gösterilmiş olup, farklı bölümler L-PRF pıhtı tarama elektron mikroskop görüntüsü. Tabloda görüldüğü üzere, üst kısım içerisinde hücre bulunmayan ağırlıklı olarak fibrin ağı oluşmaktadır. Orta tabaka, aktivasyonu ve degranülasyonunun kanıtı olan trombosit ile zenginleştirilmiştir. Alt tabaka, lökositler ve bir fibrin matrisi içinde sıkışan kırmızı kan hücrelerinin bir karışımı yer alır. <p class="jove_cont...

Watch this Scientific Journal Video about Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial at JoVE.com

Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial

Leucocyte-Platelet Rich Fibrin (L-PRF) represents an FDA cleared preparation of autologous platelet concentrates that possesses unique fibrin architecture, enriched platelets and abundant growth factors. Here, we present a protocol for chair-side generation of L-PRF as well as evaluate its mechanical properties including uniaxial testing and suture retention strength testing.

Lökosit-trombosit Zengin Fibrin, Yeni Bir Biyomateryalinin Karakterizasyonu

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral ...

characterization-of-leukocyte-platelet-rich-fibrin-a-novel-biomaterial

Research

JoVE Journal

Bioengineering

12.8K Görüntüleme.  School of Dentistry, Virginia Commonwealth University. Leucocyte-Platelet Rich Fibrin (L-PRF) represents an FDA cleared preparation of autologous platelet concentrates that possesses unique fibrin architecture, enriched platelets and abundant growth factors. Here, we present a protocol for chair-side generation of L-PRF as well as evaluate its mechanical properties including uniaxial testing and suture retention strength testing. 