Biz talepleri için izleme yazılımı özelleştirmek için Electricidade Em po (electricidadeempo.net) teknik yardım için Daniel Veit ve Pedro Gouveia teşekkür ederiz. Biz de filme sürecinde destek için Tom Retzke teşekkür ederiz. Bu çalışma Max Planck Kurumu tarafından desteklenmiştir.

Flywalk inşaat ve teknik detaylar yerde 26 (MK elde edilebilir, bu kurmak daha fazla bilgi kurulması herhangi bir sorun durumunda) tarif edilmiştir. Burada güvenilir sonuçlar elde etmek için yardımcı olacak paradigmanın işleme hakkında ayrıntılı talimatlar odaklanmak. 1. Fly Taşıma <ol><li> 12 saat ışık: 23-25 ​​° C ve% 70 bağıl nemde karanlık rejim Arka 12 saat altında gıda ortamı 27 orta yoğunluklu kültürlerde düşük uçar. Bu amaçla, 20-30 yeni ortaya çıkan yetişkin, daha sonra 1 hafta boyunca büyük bir gıda flakon yeniden yetişkin sinekler atmak ve ortaya yavrular için beklemek uçar izin verir. </li><li> 30-40 yeni ortaya çıkan (yaş &lt;24 saat), yetişkin sinekler toplayın ve 3-5 gün yemek ortamı 27 içeren yeni bir şişede onları yaş. </li><li> Yirmi dört saat davranışsal deney başlamadan önce: Transferi Tüm 30-40 önceden toplanmış 3-5 d eski (2.2 bakınız) yeni bir vi uçarEl nemli kauçuk köpüğü fişi veya bir aspiratör kullanılarak nemli doku kağıt içeren. Not: CO 2 kullanarak sinek uyuşturan etmeyin. </li></ol> Flywalk Kur&#39;un 2. Hazırlık <ol><li> Nemlendiriciler olarak 250 ml&#39;lik şişe kullanın. Damıtılmış su 100 ml nemlendiriciler doldurun. </li><li> Koku şişeleri hazırlayın. <ol><li> Saf kokular, etil asetat, etil bütirat, izopentil asetat ve çözücü, madeni yağ içinde 2,3-bütandion 500 ul 10 -3 dilüsyonları hazırlayın. </li><li> Koku şişe başına iki toplu çek valfleri takın. Vanalar tek yönlü hava akımı sadece izin verdiği çek unutmayın. Bu nedenle, hava, bir tarafta şişeye girmesini ve diğer tarafta bırakın şekilde çek valfleri bağlayın. </li><li> 200 ul PCR reaksiyonu, tüpün kapağını çıkarın. Ayrı bir reaksiyon tüpüne, her koku seyreltme 100 ul pipet ve ayrı bir koku viyaller içinde tüpleri. Ayrıca sadece çözücü mineral OI içeren tek koku şişe hazırlamakl. </li><li> Sıkıca paslanmaz çelik fişleri ve lastik contalar kullanarak onları kapatarak koku şişeleri mühür. </li><li> Koku verme sistemi (madeni yağ ihtiva eden 4 ihtiva eden kokular ve 1) 5 koku şişeleri bağlayın. Doğru akım yönünde onları bağlamak için emin olun. Yanlış bağlantı sadece planlanmış deney taviz vermeyecek, aynı zamanda dağıtım sistemi kirletebilir. </li></ol></li><li> Uyarıcı cihazın karıştırma odasının çıkışını mühürleme suretiyle sızıntı olup olmadığını kontrol edin. Uyarıcı cihazına önce tüm hava akımları artık giderek sıfıra düşmesi ki emin olun. Değilse, şimdi sistemin çıkan havanın tıslama sesi ile tespit edilebilir sızıntı olup olmadığını kontrol edin. </li><li> Dikkatle gelen adaptörleri kullanarak her iki taraftan bir aspiratör ve yakın cam tüpler kullanılarak 15 ayrı cam tüpler 15 ayrı sinekler aktarın. Not: Sistem hermetik başarılı deneyler için mühürlü gerektiğinden, adaptörler sıkıca cam tüpler uygun olmasını sağlamakve cam tüpler bu adımı sırasında kırılabilir unutmayın. Koruyucu eldiven ve gözlük takarak yaralanmaları önlemek için dikkat edin. </li><li> Flywalk kurulum cam tüpler bağlayın ve burada andan itibaren, sinekler yeni ortama alışmakta izin deney başlamadan önce en az 15 dakika bekleyin. </li><li> Cam tüpler taktıktan sonra: cam tüpler sonra 16 hava akımları sistemine girmeden hava akımı kadar eklerseniz bilgisayarda 1 aşağı dijital akış metre okuma kontrol edin. Nem% 60 ile% 80 arasında ise Ayrıca, bilgisayarda 1 kontrol edin. </li><li> Sinekler sunulan koku uyaranlara sırasını ve zamanlamasını kontrol Tasarım uyaran protokolü. 40 kez her anda açıklanan veriler, mevcut 4 koku ve tek başına kontrol (madeni yağ) ve tüm olası üçlü ve dörtlü kokular karışımları gibi edinin. 90 saniyelik bir interstimulus aralıklarla 500 msn darbe süresi ayarlayın ve uyarıcı dizisi rastgele. </li><li> Li açınght kaynağı (LED-küme, λ = 630). Cam tüpler içindeki sıcaklığı artırmadan verimli izleme için yeterli ışık sağlamak için emin olun. </li><li> 15 cam tüpler dahil bir şekilde izlenecek ve tüplerin kenarlarından yaklaşık 5 mm dışlanan alan boyunca bir çerçeve sürükleyerek izleme sisteminin ilgi bir bölge ayarlayın. </li><li> Bireyi korumak için gelen komut kendi Y-pozisyonlarını değiştirerek izleme sistemi bireysel tüpler arasındaki 14 paralel ayırma çizgileri kurmak deney boyunca tanımlanabilir uçar. Sadece bir sinek iki satır herhangi bir set arasında takip edilecektir, çünkü böyle iki ayırıcı hatları arasında tek cam tüp orada her zaman böyle bir şekilde onları konumlandırmak için emin olun. </li><li> Güvenilir cam tüpler boyunca izlenir sinekler şekilde kamera parametrelerini ayarlamak için emin olun. Sinekler ilgi bölgenin kenarlarında kayıp ise, izleme s parlaklığını veya kazancı artırmakoftware. Takip sistemi mekanik titreşimleri kaçının. Üreticinin protokolüne göre, ticari bir yazılım kullanılarak takip edin. </li><li> Uyarıcı protokolü başlayarak deney başlayın. Tutanak 20 fps (saniyede kare) de XY koordinatları flies&#39; ve metin dosyaları koku valf durumu ile birlikte oturum açın. </li></ol> 3. Veri Analizi NOT: Bu adımlar analizi yine de bir adım-adım bir şekilde sunulacaktır anlamlı sonuçlar elde etmek için çok önemli olduğu için veri analizi aşağıdaki adımlar R. programlanmış özel olarak yazılmış rutinleri kullanılarak otomatize edilir. Analiz için ham veriler, bir koku stimülasyon döngüsü için ortak bir zaman ekseni üzerinde cm koku vana durumu, nabız sayısında deneyde 15 sinek x pozisyonları senkronize bilgileri içeren .csv-dosyalarıdır. Veri analizi için özel kod istek üzerine temin edilebilir. <ol><li> Açık .csv dosyası, bir cha tarafından anlamına valf açılma zamanı noktasını bulmakValf durumunu temsil eden sütun nge. </li><li> Formun koku pozisyonunun doğrusal fonksiyonunu hesaplayın f (t) s * t = i + t stimülasyon döngüsü zaman olduğu, s rüzgar hızı (burada 20 cm / sn) ve ben koku pozisyonu 0 (vana açma artı gecikme) tüpler girdiği zaman noktası kullanılarak hesaplanabilir kesmek olduğunu. </li><li> Bu koku da zaman noktasını bulun ve her sinek ve 0 Not bu zaman noktası ayarlayın x-pozisyon kesiştiği noktaları: sinek pozisyonları her individual&#39;s hizalanmış Bu şekilde koku ile karşılaşıyoruz. </li><li> Ilgi bölgenin çok kenarlarında oturan sinekler hariç. </li><li> Her stimülasyon çevrimi için bir zaman aralığı (100 milisaniye) ve yineleme prosedürü ile X ekseni boyunca yer değiştirme bölünmesiyle X-pozisyonlarından hız hesaplayın. </li><li> Şekil 2E&#39;de gösterildiği gibi her sinek ve koku için ve belirli bir koku için bu süre ortalama ders itibaren ortalama hızı zaman kurs hesaplamak hız zaman kurslar elde etmek. </li><li> Şekil 3C gösterildiği gibi net deplasman elde etmek için her izleme olay için koku darbe ve sonrasında sinek ve koku başına ortalama net deplasman sonra 4 saniye içinde net deplasman hesaplamak. </li></ol> 4. Temizleme Prosedürü <ol><li> Temiz Cam Tüpler <ol><li> Cam tüpler gelen sinek ve adaptörleri çıkarın ve deterjan, cam tüpler ıslatın. </li><li> Çalışan damıtılmış su altında cam tüpler durulayın ve basınçlı hava ile kurutun. </li><li> 8 saat boyunca 200 ° C&#39;de ısı cam borular. </li></ol></li><li> Temiz Koku Dağıtım Sistemi <ol><li> Merkezi karıştırma odasından tüm koku şişeleri ve tüpünü çıkarın. </li><li> Karıştırma odasından boru bağdaştırıcıları çıkarın. </li><li> Laboratuar temizleme solüsyonu ve çözücüler (örneğin, etanol, aseton) ile durulayarak temizleyin karıştırma odası. Laboratuar kaputun altında bu adımları uygulayın. </li><li> Kuru karıştırma odası 8 saat 200 ° C &#39;de bu basınçlı hava ile ve ısıtın. </li></ol></li><li> Temiz Koku Şişeler ve Çek Vanalar <ol><li> Çelik fişini (ıskarta kauçuk conta) çıkartın ve koku şişeleri gelen çek valfler ve laboratuvar temizleme solüsyonu tüm bileşenleri ıslatın. </li><li> Bir ultrason banyosunda sonikasyon bileşenler ve damıtılmış su ile yıkayın. </li><li> Etanol ve aseton ile kontrol valfleri dışındaki tüm bileşenleri temizleyin. Laboratuar kaputun altında bu adımları uygulayın. </li><li> Ve basınçlı hava ile kuru bileşenler 8 saat süreyle 200 ° C sıcaklıkta tekrar ısıtın. </li><li> Etanol ve bir şırınga kullanarak aseton ile yıkanarak iç temizliğini valfler (akış yönünü düşünün). Laboratuvar gözlüğü takan laboratuar başlık altında şu adımları uygulayın. Aseton basınçlı hava ile yıkama hemen lastik parçaları, kuru çek valfleri saldırır çünkü. </li><li> Birkaç gün onay valfler havayı darbe ile kalıntı kokuları çıkarın. Bu temizleme adım için rejim kapalı / 1 sn hava 60 ° C&#39;de bir inkübatör ve 1 sn hava kullanın. </li></ol&gt; </li></ol>

<ol>
	<li>Murlis, J., Elkinton, J. S., Card&#233;, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+plumes+and+how+insects+use+them.">Odor plumes and how insects use them.</a> Annu. Rev. Entomol. 37, 505-532 (1992).</li><li>Kennedy, J. S., Marsh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pheromone-regulated+anemotaxis+in+flying+moths.">Pheromone-regulated anemotaxis in flying moths.</a> Science. 184 (4140), 999-1001 (1974).</li><li>Budick, S. A., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free-flight+responses+of+Drosophila+melanogaster+to+attractive+odors.">Free-flight responses of Drosophila melanogaster to attractive odors.</a> J. Exp. Biol. 209 (15), 3001-3017 (2006).</li><li>Buehlmann, C., Graham, P., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Desert+ants+locate+food+by+combining+high+sensitivity+to+food+odors+with+extensive+crosswind+runs.">Desert ants locate food by combining high sensitivity to food odors with extensive crosswind runs.</a> Curr. Biol. 24 (9), 960-964 (2014).</li><li>Van Breugel, F., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plume-tracking+behavior+of+flying+Drosophila+emerges+from+a+set+of+distinct+sensory-motor+reflexes.">Plume-tracking behavior of flying Drosophila emerges from a set of distinct sensory-motor reflexes.</a> Curr. Biol. 24 (3), 274-286 (2014).</li><li>Schuckel, J., Meisner, S., Torkkeli, P. H., French, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+properties+of+Drosophila+olfactory+electroantennograms.">Dynamic properties of Drosophila olfactory electroantennograms.</a> J. Comp. Physiol. A. 194 (5), 483-489 (2008).</li><li>Geffen, M. N., Broome, B. M., Laurent, G., Meister, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+encoding+of+rapidly+fluctuating+odors.">Neural encoding of rapidly fluctuating odors.</a> Neuron. 61 (4), 570-586 (2009).</li><li>Nagel, K. I., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biophysical+mechanisms+underlying+olfactory+receptor+neuron+dynamics.">Biophysical mechanisms underlying olfactory receptor neuron dynamics.</a> Nat. Neurosci. 14 (2), 208-216 (2011).</li><li>Martelli, C., Carlson, J. R., Emonet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensity+invariant+dynamics+and+odor-specific+latencies+in+olfactory+receptor+neuron+response.">Intensity invariant dynamics and odor-specific latencies in olfactory receptor neuron response.</a> J. Neurosci. 33 (15), 6285-6297 (2013).</li><li>Szyszka, P., Gerkin, R. C., Galizia, C. G., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+odor+transduction+and+pulse+tracking+by+insect+olfactory+receptor+neurons.">High-speed odor transduction and pulse tracking by insect olfactory receptor neurons.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 111 (47), 16925-16930 (2014).</li><li>Nagel, K. I., Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+and+circuit+mechanisms+promoting+broadband+transmission+of+olfactory+stimulus+dynamics.">Synaptic and circuit mechanisms promoting broadband transmission of olfactory stimulus dynamics.</a> Nat. Neurosci. 18 (1), 56-65 (2014).</li><li>Larsson, M. C., Domingos, A. I., Jones, W. D., Chiappe, M. E., Amrein, H., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Or83b+encodes+a+broadly+expressed+odorant+receptor+essential+for+Drosophila+olfaction.">Or83b encodes a broadly expressed odorant receptor essential for Drosophila olfaction.</a> Neuron. 43 (5), 703-714 (2004).</li><li>Knaden, M., Strutz, A., Ahsan, J., Sachse, S., Hansson, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+representation+of+odorant+valence+in+an+insect+brain.">Spatial representation of odorant valence in an insect brain.</a> Cell Rep. 1 (4), 392-399 (2012).</li><li>Zaninovich, O. A., Kim, S. M., Root, C. R., Green, D. S., Ko, K. I., Wang, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single-fly+assay+for+foraging+behavior+in+Drosophila.">A single-fly assay for foraging behavior in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. (81), e50801 (2013).</li><li>Farhan, A., Gulati, J., Gro&#946;e-Wilde, E., Vogel, H., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+CCHamide+1+receptor+modulates+sensory+perception+and+olfactory+behavior+in+starved+Drosophila.">The CCHamide 1 receptor modulates sensory perception and olfactory behavior in starved Drosophila.</a> Sci. Rep. 3 (2765), 1-6 (2013).</li><li>Fl&#252;gge, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Geruchliche+Raumorientierung+von+Drosophila+melanogaster.">Geruchliche Raumorientierung von Drosophila melanogaster.</a> Z. Vgl. Physiol. 20 (4), 462-500 (1934).</li><li>Borst, A., Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osmotropotaxis+in+Drosophila+melanogaster.">Osmotropotaxis in Drosophila melanogaster.</a> J. Comp. Physiol. A. 147 (4), 479-484 (1982).</li><li>Louis, M., Huber, T., Benton, R., Sakmar, T. P., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+olfactory+sensory+input+enhances+chemotaxis+behavior.">Bilateral olfactory sensory input enhances chemotaxis behavior.</a> Nat. Neurosci. 11 (2), 187-199 (2008).</li><li>Gomez-Marin, A., Stephens, G. J., Louis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+sampling+and+decision+making+in+Drosophila+chemotaxis.">Active sampling and decision making in Drosophila chemotaxis.</a> Nat. Commun. 2 (441), 1-10 (2011).</li><li>Gaudry, Q., Hong, E. J., Kain, J., de Bivort, B. L., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+neurotransmitter+release+enables+rapid+odour+lateralization+in+Drosophila.">Asymmetric neurotransmitter release enables rapid odour lateralization in Drosophila.</a> Nature. 493 (7432), 42442-42448 (2013).</li><li>Quinn, W. G., Harris, W. A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+behavior+in+Drosophila+melanogaster.">Conditioned behavior in Drosophila melanogaster.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 71 (3), 708-712 (1974).</li><li>Ramdya, P., Lichocki, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanosensory+interactions+drive+collective+behaviour+in+Drosophila.">Mechanosensory interactions drive collective behaviour in Drosophila.</a> Nature. 519 (7542), 233-236 (2014).</li><li>Bhandawat, V., Maimon, G., Dickinson, M. H., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+modulation+of+flight+in+Drosophila+is+sensitive,+selective+and+rapid.">Olfactory modulation of flight in Drosophila is sensitive, selective and rapid.</a> J. Exp. Biol. 213 (21), 3625-3635 (2010).</li><li>Duistermars, B. J., Chow, D. M., Frye, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flies+require+bilateral+sensory+input+to+track+odor+gradients+in+flight.">Flies require bilateral sensory input to track odor gradients in flight.</a> Curr. Biol. 19 (15), 1301-1307 (2009).</li><li>Claridge-Chang, A., Roorda, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Writing+memories+with+light-addressable+reinforcement+circuitry.">Writing memories with light-addressable reinforcement circuitry.</a> Cell. 139 (2), 405-415 (2009).</li><li>Steck, K., Veit, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+behavioral+paradigm+for+Drosophila+olfaction+-+The+Flywalk.">A high-throughput behavioral paradigm for Drosophila olfaction - The Flywalk.</a> Sci. Rep. 2 (361), 1-9 (2012).</li><li>Lewis, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+standard+food+medium.">A new standard food medium.</a> Drosoph. Inf. Serv. 34, 117-118 (1960).</li><li>Lebestky, T., Chang, J. S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+different+forms+of+arousal+in+Drosophila+are+oppositely+regulated+by+the+dopamine+D1+receptor+ortholog+DopR+via+distinct+neural+circuits.">Two different forms of arousal in Drosophila are oppositely regulated by the dopamine D1 receptor ortholog DopR via distinct neural circuits.</a> Neuron. 64, 522-536 (2009).</li><li>Thoma, M., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compound+valence+is+conserved+in+binary+odor+mixtures+in+Drosophila+melanogaster.">Compound valence is conserved in binary odor mixtures in Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 217 (20), 3645-3655 (2014).</li><li>Olsson, S. B., Kuebler, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+multicomponent+stimulus+device+for+use+in+olfactory+experiments.">A novel multicomponent stimulus device for use in olfactory experiments.</a> J. Neurosci. Meth. 195 (1), 1-9 (2011).</li></ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarını var olduğunu beyan ederiz.

Flywalk sistemi ilk bakışta oldukça sofistike görünse de, bir kez kurmak ve onu çalıştıran kullanımı kolay ve çok sağlam sonuçlar üretir. Biyo-deney ile üretilen sonuçların tutarlılığını stres için burada gösterilen temsili sonuçlar neredeyse 2 yıl, yeni bir takip yazılımı ve ışık kaynağı kullanılarak modifiye kurulum ile bir önceki çalışmada 29 de gösterilen bazı sonuçları sonra elde edildi söylenebilir. Bununla birlikte, çekici cevaplardır - Daha önce kendi di...

Herhangi neuroethological araştırmanın herkesin ortak hedefi tek nöronlar veya nöronal devrelerin faaliyet devletler ve bir organizmanın davranışı arasında nedensel bir ilişki kurmaktır. Bu amaç nöronal aktivitenin elde etmek ve davranışları aynı uyarıcı koşullarında izlenmeli ve bu uyarıcı koşulları ideal olanların mantıklı gelişti inceleme altına sinir sistemi benzer olmalıdır. Davranışsal biyoanalizlere gelince, özellikle bu gereklilikler tarihsel Drosophila oldukça zorlu kanıtlanmıştır koku neuroethology melanogaster. Kaynağından çıkan kez koku tüyleri hızla hava hareketi koku dağılımı 1 temel belirleyicisi olmaktan kaynaklanan çalkantılı difüzyon ince filamentler içine break up. Bunun bir sonucu olarak, bir koku kaynağına doğru seyreden bir böcek temiz hava değişken aralıklarla serpiştirilmiş koku paketleri ile kesikli uyarımı karşılaşır. Her ikisiyürüyüş ve böcekler uçan - Drosophila dahil - 5 - kokuların 2 yokluğunda çapraz rüzgar hareketli ağırlıklı tüy karşılaşma üzerine rüzgâra karşı kabaran tarafından navigasyon için bu aralıklı stimülasyon rejimi yararlanmaya gösterilmiştir. Bu tuzak analizi olarak Drosophila neuroethology kullanılan 11, birçok davranış biyoanalizlerin - ve fizyolojik deneyler için stimülasyon prosedürleri ise, büyük ölçüde, bir böcek, temiz hava veya dinamik stimülasyon dizilerinin 6 uzun süre serpiştirilmiş kokuların da sağlayarak, tek nefes çekme tarafından doğal ortamda yaşayabilir taklit 15 - açık alan arenalar veya T-labirent koku geçişlerini 12 güveniyor. Tanımı gereği koku geçişlerini koku kaynağından mesafeye bağlı konsantrasyonda değişken olduğundan, ancak belli bir davranış, bu paradigmalar kullanarak kesin bir koku konsantrasyonu isnat edilemez. Buna ek olarak, eğimiBir koku degrade eleştirel odorant fizikokimyasal özelliklerine bağlıdır. Bir zorluğa yol açabilir 20 - Bir çok uçucu bileşiğin bir degrade daha az uçucu bileşiğin tarafından oluşturulan ve bu nedenle de zor navigasyon 16 tek yolu olarak uzayda konsantrasyon farklılıkları ölçmek güvenerek bir organizma için izlemek için daha sığ olacaktır Özellikle seçim analizlerde koku tercihler. Uzayda her noktada farklı karışım bileşeni oranlarına yol açar ve bu nedenle tekrar fizyoloji ve davranış arasında açık bir ilişki engellemektedir, çünkü koku karışımları yönelik davranışlarını araştıran Bu etki aynı zamanda son derece zararlıdır. Sirke sinekleri meyve fermente üzerine agrega eğiliminde olsa da, gıda kaynakları ve ovipozisyon siteleri karşı navigasyon yalnız vardır. Bununla birlikte, bireysel hayvanları test ziyade birçok davranışsal paradigmalar Drosophila neuroetholo kullanılangy sineklerin kohortlarda kokusu eşliğinde davranışları incelemek ve cazibe bir kontrol uyaran üzerinde koku seçiminde sinekler kesir olarak puanlanır. Bu kohort deneyleri sinek neuroethology anlaşılmasına büyük katkıları olmuştur ve bunları kullanarak yapılan gözlemlerin birçoğu tek sinek deneylerinde teyit edilebilir. Ancak, her other&#39;s kararını 21 etkileyebilir ve aşırı durumlarda bir koku değerlendirilmesi nüfus yoğunluğuna bağlı olarak 22 kaçınmaya ilgisizlik geçebilirsiniz uçar olduğu gözlenmiştir. Ayrıca, deney bu türlü sonuçlar genellikle nöronal aktivite ile davranış arasında ilişki çalışırken arzu olurdu doğrusu bunu yapıyor iken sinek ne yaptığını gözlemleyerek daha davranışsal kararlar, bir dizinin sadece son nokta sağlamaktadır. Bunlar oldukça düşük çözünürlüklü kohort deneyleri gibi izin gergin uçuş arenalar ve koşu bandı gibi yüksek çözünürlüklü tek sinek yöntemleri ile tezatzaman davranışsal tepkilerin doğrudan gözlem için uyaran 20,23,24 sunulmuştur. Onlar çok verimli ve-arası bireysel ve inter-deneme değişkenlik kısmen uzun süre boyunca nüfusun gözlem ortalaması alınır çünkü sağlam hatta nispeten sonuçları düşük örnek boyutları sağlar, çünkü Ancak, kohort deneyleri, hala popüler. Gergin uçuş ve koşu bandı muhtemelen uyaran sunum ve temporal çözünürlük konusunda altın standart sağlarken, kullanılan arenalar tek hayvanlar için tasarlanmış ve bu nedenle zaman alıcı örnek bir istatistiksel analiz için gerekli boyutları elde etmektir edilir. Çeşitli diğer yaklaşımlar son iyi tanımlanmış bir teşvik rejimi ile kombinasyon halinde, yüksek çözünürlüklü davranış verilerinin etkin bir şekilde alınmasını sağlayacak geliştirilmiştir. Bu koku tüy 5 doğru bir 3D-model ile kombinasyon halinde bir Projede, rüzgar tünelinde birden sirke sineklerinin denetimsiz 3D-izleme dahil </sup&gt;, her iki tarafta 25 ve Flywalk paradigma 26&#39;dan airstreams ile birlikte seçim odalarında çoklu bireysel sineklerin izleme. Flywalk olarak, 15 ayrı sinekler, küçük cam tüplerde bulunmaktadır ve sürekli kırmızı ışık koşulları altında bir havai kamera tarafından izlenen. Kokular 20 cm / sn arasında sürekli bir hava akımı, bir ilave edildi ve sabit bir hızda cam tüpler boyunca yol. Hava akımı koku teslim sistemine girmeden önce distile su (nemlendiriciler) ihtiva eden 250 ml&#39;lik şişeler içinden geçirilerek nemlendirilir. Flies&#39; pozisyonları sinekler daha yukarı taşımak veya edemez ilgi (ROI) bir kare bölge koku tüplerin uzunluğu en kapsayan (ancak tüpleri (her tarafı yaklaşık 5 mm dış kenarlarını hariç) içinde kaydedilir downwind) koku sunumu (Şekil 1A, B) sefer. Fly kimlikleri izleme sistemi t sabit tutulmasıonların Y-pozisyonlarına (yani kendi cam tüp limitleri) bazında deney hroughout. Koku uyarılması kadar 8 tek koku ve 26,29 (Şekil 1B), bunun bütün olası karışımları sunum sağlar çok bileşenli bir uyarıcı cihaz kullanılarak elde edilir. Bir deney ders bilgisayar koku verme sistemini düzenleyen ve sıcaklık ve nem bilgi toplama (bilgisayar 1, Şekil 1C) tarafından kontrol edilir. Bu bilgisayar, aynı zamanda sürekli olarak saniyede 20 kare (bilgisayar 2) sinek pozisyonlarını izler ikinci bir bilgisayara bir datalogger (kayıt başlat / durdur) kontrol eder. Koku stimülasyon döngüleri etrafında, koku vana durumunu (vana açıklığının yani zaman-noktası), koku kimliğini, sıcaklık ve nem pozisyonları Fly koku bilgisayara 2. Bu şekilde bilgileri kaydedilir ve pozisyonları .csv dosyaları olarak eşitlenir ve ihraç uçmak hangi daha da işlenir ve özel olarak yazılmış analiz rutinleri kullanarak analiz edilebilir. ÇünküTüm sistem bilgisayar kontrollü, hiçbir insan müdahalesi deneysel oturumu sırasında gereklidir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="866">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Flywalk setup</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:207px;">details available upon request</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">stimulus device</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>details available upon request</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LED cluster</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>details available upon request</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HD Pro Webcam C920</td>
			<td style="width:325px;">Logitech, Lausanne, Switzerland</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">2 Computers</td>
			<td style="width:325px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:216px;">Flywalk Reloaded v1.0 software</td>
			<td style="width:325px;">Electricidade Em P&#243; (electricidadeempo.net)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Labview 11.0 software</td>
			<td style="width:325px;">National Instruments, Austin, TX</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Standard fly food</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:216px;">Standard fly vials</td>
			<td style="width:325px;">Greiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Standard fly vials</td>
			<td style="width:325px;">Greiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">aspirator</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">mineral oil</td>
			<td style="width:325px;">Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">odors</td>
			<td style="width:325px;">Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:216px;">200 &#181;l PCR reaction tubes</td>
			<td style="width:325px;">Biozym Scientific GmbH, Oldendorf, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-resolution quantification of odor-guided behavior in drosophila melanogaster using the flywalk paradigm

Kendi doğal ortamında, sirke gibi böcekler kimyasal olarak farklı koku büyük miktarda ile bombardıman edilir Drosophila melanogaster uçmak. Hatta daha da karmaşıklaştıran, böcek sinir sistemi tarafından tespit edilen kokular genellikle kimin kompozisyon ve konsantrasyon oranları değişebilir tek bileşikler ancak bunların karışımları değildir. Bu sinir sistemi tarafından değerlendirilmesi gerekir farklı koku uyaranlara neredeyse sonsuz miktarda yol açar. Bir koku uyarıcı yönleri sinek tarafından değerlendirmesini belirleyen anlamak için, verimli birçok koku ve koku karışımları doğru koku güdümlü davranışlarını incelemek için arzu edilen bir durumdur. Doğrudan nöronal aktivitenin davranışı ilişkilendirmek için, davranış karşılaştırılabilir bir zaman dilimi içinde ve nörofizyolojik deneylerde olduğu gibi aynı uyarıcı koşullarında sayısal olmalıdır. Bununla birlikte, Drosophila neuroethology çok anda kullanılan koku biyo-specia yerine vardırverimlilik doğru veya çözünürlük doğru ya lized. Flywalk, otomatik koku teslimat ve izleme sistemi, verimlilik ve çözünürlük arasında köprüdür. Bu koku, paket serbest yürüme sinek uyarılmış ve Hayvanların dinamik davranış etkilerini belirlemek için tam olarak ne zaman belirlenmesini sağlar.

Sinekler sabit bir hızda cam tüpler yoluyla koku bakliyat ve koku darbe seyahatleri arasında kendi cam tüpler içinde serbestçe dağıtmak için izin Çünkü sinekler stimülasyon sırasında x-pozisyonuna bağlı farklı zamanlarda koku karşılaşıyoruz. Bunun bir sonucu olarak, etil asetat çekici 10 -3 seyreltme 500 milisaniye darbe uyandırdığı rüzgara karşı yörüngelerin başlangıç ​​ve bitiş noktalarının yakın oturmuş sinekler kişilerce kıyasla cam tüpler rüzgaraltı ucunda...

Watch this Scientific Journal Video about High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm at JoVE.com

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

Otomatik izleme sistemi Flywalk Drosophila melanogaster koku güdümlü davranış yüksek çözünürlüklü ölçümü için kullanılır.

Koku kılavuzluğunda Davranış Yüksek çözünürlüklü Niceleme<em&gt; Drosophila melanogaster</emKullanma&gt;<em&gt; Flywalk</em&gt; Paradigma

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

high-resolution-quantification-odor-guided-behavior-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

9.2K Görüntüleme.  Max Planck Institute for Chemical Ecology.  Otomatik izleme sistemi Flywalk Drosophila melanogaster koku güdümlü davranış yüksek çözünürlüklü ölçümü için kullanılır. 

Video: High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed in sensory hairs called sensilla, which cover the surface of olfactory organs. The surface of each sensillum is covered with tiny pores, through which odorants pass and dissolve in a fluid called sensillum lymph, which bathes the sensory dendrites of the OSNs housed in a given sensillum. The OSN dendrites express odorant receptor (OR) proteins, which in insects function as odor-gated ion channels4, 5. The interaction of odorants with ORs either increases or decreases the basal firing rate of the OSN. This neuronal activity in the form of action potentials embodies the first representation of the quality, intensity, and temporal characteristics of the odorant6, 7.
Given the easy access to these sensory hairs, it is possible to perform extracellular recordings from single OSNs by introducing a recording electrode into the sensillum lymph, while the reference electrode is placed in the lymph of the eye or body of the insect. In Drosophila, sensilla house between one and four OSNs, but each OSN typically displays a characteristic spike amplitude. Spike sorting techniques make it possible to assign spiking responses to individual OSNs. This single sensillum recording (SSR) technique monitors the difference in potential between the sensillum lymph and the reference electrode as electrical spikes that are generated by the receptor activity on OSNs1, 2, 8. Changes in the number of spikes in response to the odorant represent the cellular basis of odor coding in insects. Here, we describe the preparation method currently used in our lab to perform SSR on Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae, and show representative traces induced by the odorants in a sensillum-specific manner.

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

Electrophysiological responses of olfactory sensory neurons to odorants can be measured in insects using single sensillum recordings. In this video article we will demonstrate how to perform single sensillum recordings in the antennae of the vinegar fly (Drosophila melanogaster) and the maxillary palps of the malaria mosquito (Anopheles gambiae).

Böcekler Tek Sensillum Kayıtlar Drosophila melanogaster Ve Anofel gambiae</em

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed ...

Nörobilim

Simultaneous Recording of Calcium Signals from Identified Neurons and Feeding Behavior of Drosophila melanogaster

To study neuronal networks in terms of their function in behavior, we must analyze how neurons operate when each behavioral pattern is generated. Thus, simultaneous recordings of neuronal activity and behavior are essential to correlate brain activity to behavior. For such behavioral analyses, the fruit fly, Drosophila melanogaster, allows us to incorporate genetically encoded calcium indicators such as GCaMP1, to monitor neuronal activity, and to use sophisticated genetic manipulations for optogenetic or thermogenetic techniques to specifically activate identified neurons2-5. Use of a thermogenetic technique has led us to find critical neurons for feeding behavior (Flood et al., under revision). As a main part of feeding behavior, a Drosophila adult extends its proboscis for feeding6 (proboscis extension response; PER), responding to a sweet stimulus from sensory cells on its proboscis or tarsi. Combining the protocol for PER7 with a calcium imaging technique8 using GCaMP3.01, 9, I have established an experimental system, where we can monitor activity of neurons in the feeding center &#x2013; the suboesophageal ganglion (SOG), simultaneously with behavioral observation of the proboscis. I have designed an apparatus ("Fly brain Live Imaging and Electrophysiology Stage": "FLIES") to accommodate a Drosophila adult, allowing its proboscis to freely move while its brain is exposed to the bath for Ca2+ imaging through a water immersion lens. The FLIES is also appropriate for many types of live experiments on fly brains such as electrophysiological recording or time lapse imaging of synaptic morphology. Because the results from live imaging can be directly correlated with the simultaneous PER behavior, this methodology can provide an excellent experimental system to study information processing of neuronal networks, and how this cellular activity is coupled to plastic processes and memory.

Simultaneous Recording of Calcium Signals from Identified Neurons and Feeding Behavior of Drosophila melanogaster

The fruit fly, Drosophila melanogaster, extends its proboscis for feeding, responding to a sugar stimulus from its proboscis or tarsus. I have combined observations of the proboscis extension response (PER) with a calcium imaging technique, allowing us to monitor the activity of neurons in the brain, simultaneously with behavioral observation.

Belirlenen Nöronlar ve Beslenme Davranışı Kalsiyum sinyaller aynı anda kayıt Drosophila melanogaster</em

To study neuronal networks in terms of their function in behavior, we must analyze how neurons operate when each behavioral pattern is generated.  Thus, ...

High-resolution Live Imaging of Cell Behavior in the Developing Neuroepithelium

The embryonic spinal cord consists of cycling neural progenitor cells that give rise to a large percentage of the neuronal and glial cells of the central nervous system (CNS). Although much is known about the molecular mechanisms that pattern the spinal cord and elicit neuronal differentiation1, 2, we lack a deep understanding of these early events at the level of cell behavior. It is thus critical to study the behavior of neural progenitors in real time as they undergo neurogenesis.
In the past, real-time imaging of early embryonic tissue has been limited by cell/tissue viability in culture as well as the phototoxic effects of fluorescent imaging. Here we present a novel assay for imaging such tissue for long periods of time, utilizing a novel ex vivo slice culture protocol and wide-field fluorescence microscopy (Fig. 1). This approach achieves long-term time-lapse monitoring of chick embryonic spinal cord progenitor cells with high spatial and temporal resolution.
This assay may be modified to image a range of embryonic tissues3, 4 In addition to the observation of cellular and sub-cellular behaviors, the development of novel and highly sensitive reporters for gene activity (for example, Notch signaling5) makes this assay a powerful tool with which to understand how signaling regulates cell behavior during embryonic development.

Imaging embryonic tissue in real-time is challenging over long periods of time. Here we present an assay for monitoring cellular and sub-cellular changes in chick spinal cord for long periods with high spatial and temporal resolution. This technique can be adapted for other regions of the nervous system and developing embryo.

Gelişmekte Neuroepithelium Hücre Davranış Yüksek çözünürlüklü Canlı Görüntüleme

The embryonic spinal cord consists of cycling neural progenitor cells that give rise to a large percentage of the neuronal and glial cells of the central ...

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

A growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive manipulation of the neural activity of specific neurons in Drosophila melanogaster1. Chief among these are optogenetic tools, which enable the activation or silencing of specific neurons in the intact and freely moving animal using bright light. Channelrhodopsin (ChR2) is a light-activated cation channel that, when activated by blue light, causes depolarization of neurons that express it. ChR2 has been effective for identifying neurons critical for specific behaviors, such as CO2 avoidance, proboscis extension and giant-fiber mediated startle response2-4. However, as the intense light sources used to stimulate ChR2 also stimulate photoreceptors, these optogenetic techniques have not previously been used in the visual system. Here, we combine an optogenetic approach with a mutation that impairs phototransduction to demonstrate that activation of a cluster of loom-sensitive neurons in the fly's optic lobe, Foma-1 neurons, can drive an escape behavior used to avoid collision. We used a null allele of a critical component of the phototransduction cascade, phospholipase C-&beta;, encoded by the norpA gene, to render the flies blind and also use the Gal4-UAS transcriptional activator system to drive expression of ChR2 in the Foma-1 neurons. Individual flies are placed on a small platform surrounded by blue LEDs. When the LEDs are illuminated, the flies quickly take-off into flight, in a manner similar to visually driven loom-escape behavior. We believe that this technique can be easily adapted to examine other behaviors in freely moving flies.

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

Genetically encoded optogenetic tools enable noninvasive manipulation of specific neurons in the Drosophila brain. Such tools can identify neurons whose activation is sufficient to elicit or suppress particular behaviors. Here we present a method for activating Channelrhodopsin2 that is expressed in targeted neurons in freely walking flies.

Yılında Escape Davranış Optogenetic Uyarım<em&gt; Drosophila melanogaster</em

A  growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive  manipulation of the neural activity of specific neurons in ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

Sosyal Kaçınma Niceleme için Basit Testi<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

Kullanımı Ödül arayan davranış değişiklikleri Tedbir Basit Yolu<em&gt; Drosophila melanogaster</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

Kılcal Besleyici Testi Gıda Alımını içinde Tedbirler<em&gt; Drosophila melanogaster</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

Quantification of Drosophila Grooming Behavior

Drosophila grooming behavior is a complex multi-step locomotor program that requires coordinated movement of both forelegs and hindlegs. Here we present a grooming assay protocol and novel chamber design that is cost-efficient and scalable for either small or large-scale studies of Drosophila grooming. Flies are dusted all over their body with Brilliant Yellow dye and given time to remove the dye from their bodies within the chamber. Flies are then deposited in a set volume of ethanol to solubilize the dye. The relative spectral absorbance of dye-ethanol samples for groomed versus ungroomed animals are measured and recorded. The protocol yields quantitative data of dye accumulation for individual flies, which can be easily averaged and compared across samples. This allows experimental designs to easily evaluate grooming ability for mutant animal studies or circuit manipulations. This efficient procedure is both versatile and scalable. We show work-flow of the protocol and comparative data between WT animals and mutant animals for the Drosophila type I Dopamine Receptor (DopR).

This protocol describes a scalable individual grooming assay technique in Drosophila that yields robust, quantitative data to measure grooming behavior. The method is based on comparing the difference in dye accumulation on the bodies of un-groomed versus groomed animals over a set period of time.

Drosophila Bakım Davranışının Nicelleştirilmesi

Drosophila grooming behavior is a complex multi-step locomotor program that requires coordinated movement of both forelegs and hindlegs. Here we present a ...

Monitoring Cell-to-cell Transmission of Prion-like Protein Aggregates in Drosophila Melanogaster

Protein aggregation is a central feature of most neurodegenerative diseases, including Alzheimer&#39;s disease (AD), Parkinson&#39;s disease (PD), Huntington&#39;s disease (HD), and amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Protein aggregates are closely associated with neuropathology in these diseases, although the exact mechanism by which aberrant protein aggregation disrupts normal cellular homeostasis is not known. Emerging data provide strong support for the hypothesis that pathogenic aggregates in AD, PD, HD, and ALS have many similarities to prions, which are protein-only infectious agents responsible for the transmissible spongiform encephalopathies. Prions self-replicate by templating the conversion of natively-folded versions of the same protein, causing spread of the aggregation phenotype. How prions and prion-like proteins in AD, PD, HD, and ALS move from one cell to another is currently an area of intense investigation. Here, a Drosophila melanogaster model that permits monitoring of prion-like, cell-to-cell transmission of mutant huntingtin (Htt) aggregates associated with HD is described. This model takes advantage of powerful tools for manipulating transgene expression in many different Drosophila tissues and utilizes a fluorescently-tagged cytoplasmic protein to directly report prion-like transfer of mutant Htt aggregates. Importantly, the approach we describe here can be used to identify novel genes and pathways that mediate spreading of protein aggregates between diverse cell types in vivo. Information gained from these studies will expand the limited understanding of the pathogenic mechanisms that underlie neurodegenerative diseases and reveal new opportunities for therapeutic intervention.

Monitoring Cell-to-cell Transmission of Prion-like Protein Aggregates in Drosophila Melanogaster

Accumulating evidence supports the idea that pathogenic protein aggregates associated with neurodegenerative diseases spread between cells with prion-like properties. Here, we describe a method that enables visualization of cell-to-cell spreading of prion-like aggregates in the model organism, Drosophila melanogaster.